原发性胆囊癌CD44v6、Survivin的表达与临床病理的相关性

目的 探讨CD44v6和Survivin蛋白在原发性胆囊癌组织中的表达与癌组织类型、病理分级和转移状况的关系,以及CD44v6与Survivin表达之间的相关性.方法 应用免疫组化方法检测52例胆囊腺癌、20例胆囊腺瘤和20例慢性胆囊炎组织中CD44v6和Survivin表达水平.结果 胆囊癌组织中CD44v6和Survivin阳性表达率分别为80.8%(42/52)和67.3%(35/52),均明显高于胆囊腺瘤(分别为45.0%和30.0%,P<0.05),并随着胆囊癌的分化程度减低、病理分级增高和转移而明显增高(P<0.05).同时,CD44v6表达与Survivin表达呈明显正相关(X2=5.19,P<0.05).结论 CD44v6和Survivin均是胆囊癌高度恶化和预后不良的重要指标.胆囊癌CD44v6表达与Survivin表达可能具有协同作用.     

胆囊癌组织中环氧合酶-2的表达及其临床意义

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)在胆囊癌组织中的表达及其临床意义.方法 :应用免疫组织化学方法分别检测41例胆囊癌、10例正常胆囊组织中COX-2的表达.结果 :胆囊癌组织中COX-2阳性表达率为65.9%(27/41),显著高于正常胆囊组织(30%,3/10),P=0.039.C0X-2主要表达于肿瘤细胞,癌周基质中的成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞也有表达,其阳性表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移相关(p<0.05).结论 :COX-2的高表达参与胆囊癌的发生与发展.     

Survivin在原发性肝癌组织中的表达及与MVD的关系

目的 研究原发性肝癌组织中Survivin的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,探讨它们之间及其与原发性肝癌临床病理特征的相互关系. 方法 用ABC免疫组化法测定56例原发性肝癌组织及癌旁组织中Survivin的表达水平及MVD. 结果 56例原发性肝癌组织中Survivin的阳性表达率(62.5%)和MVD计数均值[(55.43±6.72)个/HP],明显高于癌旁组织中Survivin的阳性表达率(14.3%)及MVD计数均值[(21.04±3.26)个/HP](P值均<0.05);Survivin的表达情况及MVD与原发性肝癌组织的分化程度、肿瘤有无转移、肿块直径、门静脉、肝静脉癌栓关系密切(P<0.05);原发性肝癌组织中Survivin表达评分与MVD之间存在正相关关系(P<0.01). 结论 Survivin和MVD的表达可能与原发性肝癌的发生、发展及血管生成密切相关.     

增殖细胞核抗原蛋白和mRNA在胆管癌中的表达及其意义

目的 检测胆管癌和癌旁0.5cm胆管组织及手术切缘的正常胆管组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白及mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)检测42例胆管癌组织及20例正常组织中PCNA蛋白的表达,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测42例术中所取的新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中的PCNA mRNA表达,并与临床资料进行相关分析.结果 正常胆管组织、癌旁组织、胆管癌组织中PCNA mRNA相对表达量分别0.5605±0.0331,0.5692±0.0408,0.6303±0.0773,PCNA mRNA在3组之间表达呈上升趋势(P<0.05),PCNA蛋白表达趋势同其相对应的基因表达趋势一致,即PCNA mRNA在胆管癌组织中高表达(P<0.05).结论 PC-NA基因转录和蛋白可能参与了胆管癌的发生发展过程.     

Survivin基因在重症急性胰腺炎并发肺损伤大鼠中的表达及作用

目的 研究大鼠重症急性胰腺炎(sever acute pancreatitis,SAP)肺损伤时凋亡抑制因子Survivin表达与肺损伤的关系.方法 40只雄性SD大鼠随机分为四组:对照组(n=10)和SAP 6 h组(n=10)、12 h组(n=10)、24 h组(n=10),采用胰胆管逆行穿刺注射4.5％牛磺胆酸钠建立SAP模型.采用RT-PCR法检测肺组织中Survivin的表达,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的变化.结果 SAP造模后,肺组织细胞6h、12 h、24 h凋亡指数分别为3.97±1.67、9.69±1.01、12.10±1.71,对照组为0.171±0.045(P<0.05);Survivin蛋白mRNA的表达分别为0.512±0.169、0.813±0.201、1.431±0.251,对照组肺组织中未见Survivin蛋白mRNA表达(P<0.05).结论 Survivin基因在SAP大鼠并发肺损伤时肺组织中呈异常高表达,Survivin表达的高低与肺组织损伤的严重程度有关,可能起到减轻肺组织损伤和促进其修复的作用.     

肝癌细胞Survivin的表达及其与化疗药物顺铂敏感性的关系

目的 对临床肝癌标本生存素(Suvivin)基因蛋白的表达进行研究,并分析其与化疗药物敏感性的关系.方法 免疫组化SP法检测肝癌标本Survivin表达.对原代培养的肝癌细胞进行顺铂(cisplation,DDP)化学药物处理后检测细胞活性,建立肝癌细胞Survivin表达与化疗药物敏感性的关系.结果 Survivin在肝癌中阳性表达率达66.7%(14/21),明显高于癌旁肝组织的9.5%(2/21).对原代培养的肝癌细胞经过1.0 mg/L DDP处理,24 h后行MTT检测,Survivin阳性组的细胞存活率为47.6%,明显高于Survivin阴性组22.5%,两组间差异有统计学意义(P=0.0014).结论 肝癌细胞高表达Survivin,且Survivin阳性的癌细胞时DDP有一定耐受性,而Survivin阴性的癌细胞对DDP的敏感性较好.Survivin的检测有可能成为预测肝癌化疗敏感性的重要指标.     

胆囊癌组织CD15和c-erbB-2表达及相关性研究

目的: 研究CD15抗原和c-erbB-2癌基因蛋白产物在胆囊癌组织中的表达与组织类型、病理分级和转移的关系,并探讨CD15与癌基因蛋白表达的相关性。方法: 应用微波-SP免疫组化法,检测45例胆囊腺癌、17例胆囊腺瘤和10例慢性胆囊炎组织中CD15和c-erbB-2的表达水平。结果: 在胆囊癌中CD15和c-erbB--2阳性表达率分别为71.1％和48.9％。其表达阳性率在胆率癌中均明显高于胆囊腺瘤(P<0.05),并与胆囊癌的类型、病理分级和转移密切相关(P<0.05)。CD15表达与c-erbB-2表达呈明显相关联。结论: CD15和c-erbB-2是胆囊癌高度恶性和预后不良重要生物学指标。胆囊癌CD15表达与c-erbB-2蛋白表达具有相互协同作用可能。     

Caspase-3 mRNA在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中Caspase-3的表达水平及其与临床病理学特征之间的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织标本及癌旁肝组织标本中Caspase-3 mRNA的表达.结果 肝癌组织中Caspase-3 mRNA值为(0.028±0.018),癌旁组织中的Caspase-3 mRNA值为(0.049±0.026),肝癌组织中Caspase-3 mRNA明显低于相应的癌旁肝组织中的表达(P<0.01).结论 Caspase-3 mRNA可能成为判断肝癌预后或复发转移的指标之一.     

原位杂交染色法检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达及临床意义

目的: 通过联合检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达,探讨其与肿瘤生物学特性的关联及临床意义.方法: 应用石蜡包块切片组织原位杂交染色法检测42例肝外胆管癌中PTENmRNA,P73mRNA的表达,并以同期20例慢性胆管炎作对照.结果: PTENmRNA阳性表达率为57.1%(24/42),显著低于良性对照组(为100%);P73mRNA表达率为54.8%(23/42),显著高于良性对照组(为0).经统计学分析PTENmRNA,P73mRNA的表达都分别与肝外胆管癌的临床病理分期及预后显著相关(P<0.05);PTENmRNA的表达还与肝外胆管癌的组织学分级显著相关(P<0.05).尚不能认为PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌的表达两者有相关关系.结论: PTEN,P73基因在肝外胆管癌的发生发展过程中可能起重要作用,联合检测PTENmRNA,P73mRNA在肝外胆管癌中的表达,有助于了解其生物学特性,为预后判断提供参考指标.     

钙网蛋白在胆固醇结石患者胆囊中的表达及意义

目的 探讨钙网蛋白(calreticulin,CRT)在胆固醇结石患者胆囊组织和胆汁中表达及临床意义.方法 利用生物质谱技术鉴定胆固醇结石患者与正常对照组胆囊胆汁的差异表达的蛋白质,通过免疫组织化学和Western blotting验证CRT在胆固醇结石患者胆囊组织和胆汁中表达结果.结果 比较蛋白质组学结果显示胆固醇结石患者组CRT表达上调,免疫组织化学和免疫印迹法进一步证实了CRT在胆囊组织及胆汁中高表达.结论 CRT在胆固醇结石患者组的高表达,可能与胆固醇结石的发生、发展及预后有关.     

survivin基因在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的:探讨survivin基因在膀胱癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用RT-PCR方法检测膀胱癌和正常膀胱黏膜中survivin基因的表达情况,分析其表达与膀胱癌的分期、分级及复发的关系。结果:sur-vivin mRNA在膀胱癌中总阳性表达率为78.6%(33/42)。在浸润性膀胱癌中阳性表达率(95.7%)较浅表性膀胱癌中阳性表达率(57.9%)明显升高;在复发性膀胱癌中,survivin mRNA阳性表达率(95.0%)较初发膀胱癌的阳性表达率(63.6%)显著升高(P<0.05);survivin mRNA在正常膀胱黏膜中均无表达。结论:作为敏感性较强的生物瘤标,survivin基因 mRNA表达可用来预测膀胱癌的复发和浸润。     

肾癌患者外周血中survivin mRNA的表达

目的探讨肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA的表达及其临床意义。方法用RT-PCR方法检测30例肾透明细胞癌患者、10例正常健康人外周血中survivin mRNA的表达。结果30例肾透明细胞癌患者中有23例外周血中survivin mRNA表达阳性，阳性率为76．7％，与正常健康人（0％）相比差异有统计学意义（P〈0．001）；survivin mRNA的表达与临床分期密切相关（P〈0．01）；随肿瘤组织分化程度的降低，survivin阳性率有增加的趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA可作为肾透明细胞癌微转移的一个监测指标。     

Evaluation of survivin reverse transcriptase-polymerase chain reaction for noninvasive detection of bladder cancer

PURPOSE: Survivin, a member of the inhibitor of apoptosis gene family, is expressed in most common cancers. We investigated the expression pattern of survivin in the tumors of patients with bladder cancer and assessed the diagnostic potential of RT-PCR detection of survivin mRNA in urine. MATERIALS AND METHODS: RT-PCR was used to analyze mRNA expression of survivin in 161 cases of bladder cancer, including TCC in 97, SCC in 53 and adenocarcinoma in 11, and their matched nontumor tissues. Urine specimens (50 ml) were collected from 84 patients in whom bladder cancer was documented by transurethral resection or biopsy, 41 with nonbladder cancer urological diseases and 42 healthy volunteers. Total RNA was extracted from urine sediments and RT-PCR was performed for survivin. RESULTS: Survivin expression was detected in all bladder cancer tissues. In contrast, survivin was not detectable in normal urothelium specimens. Urinary survivin was detected in urine samples from 51 of 53 patients with TCC, 22 of 25 with SCC and 6 of 6 with adenocarcinoma. Overall sensitivity was 94%. Survivin mRNA was not detected in any healthy volunteers. Positive results were obtained in 2 patients with renal cell carcinoma, 1 with hematuria and 1 with a contracted bladder but in none with other urological diseases. Overall specificity was 95%. CONCLUSIONS: Survivin mRNA detection in urine sediment using RT-PCR shows high sensitivity and specificity for bladder cancer. It may prove useful for the routine screening and monitoring of patients.     

survivin蛋白在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系

目的 :探讨新的凋亡基因survivin蛋白在前列腺癌 (PCa)的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。　方法 :采用免疫组化SP法和DNA原位未端标记TUNEL法分别测定 4 2例PCa组织及 10正常前列腺 (NP)组织中survivin蛋白的表达和细胞凋亡。　结果 :survivin蛋白在PCa中的阳性表达为 80 .5 9% ,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,而NP中无阳性表达 ;PCa组织及NP组织中细胞凋亡指数 (AI)分别为 3.0 3± 1.33、1.0 7± 0 .77,其差异有显著意义 (P <0 .0 5 ) ;survivin蛋白的表达与细胞AI呈负相关 (r=- 0 .6 79,P <0 .0 0 1)。　结论 :survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制 ,在PCa的发生、发展中起一定的作用 ;联合检测survivin蛋白和AI,有助于对肿瘤细胞的分化程度作出正确评价 ,以指导临床治疗及估计预后     

结直肠癌中缺氧诱导因子-1α与Survivin表达的关系

目的 探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与Survivin的关系.方法 构建靶向HIF-1α的质粒pSilence-2.1-U6-siRNA并鉴定,采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞,低氧培养24h,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测siRNA对HIF-1α的抑制作用.Western blot检测Survivin蛋白表达.应用免疫组织化学方法检测69例人结直肠腺癌组织中HIF-1α、Survivin蛋白的表达.结果 LS174T细胞转染靶向HIF-1α的siRNA表达载体后,HIF-1α、Survivin表达显著下降.69例结直肠腺癌组织中,HIF-1α、Survivin蛋白的阳性表达率为66.7％ (46/69)和56.5％ (39/69).腺癌组HIF-1α蛋白阳性表达率显著高于腺瘤组(P＜0.01).Ⅲ期腺癌HIF-1α蛋白表达显著高于Ⅰ～Ⅱ患者(P＜0.05).结直肠腺癌中HIF-1α表达与Survivin显著正相关.结论 结直肠腺癌发展过程中HIF-1α与Survivin表达密切相关.     

Survivin反义寡核苷酸对肝门部胆管癌细胞株FRH-0201作用的研究

目的 探讨survivin反义寡核苷酸抑制survivin基因表达对肝门部胆管癌细胞FRH-0201的作用.方法 脂质体介导survivin ASODN转染肝门部胆管癌细胞FRH-0201;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;RT-PCR、Western印迹法检测survivin mRNA及蛋白表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 survivin反义寡核昔酸作用后肝门部胆管癌细胞FRH-0201 survivinmRNA及蛋白表达水平较未转染组显著下降(mRNA:0.51±0.03 vs 0.82±0.02,P<0.05;蛋白:1.82±0.16 vs 3.08±0.27,P<0.05),细胞出现凋亡形态学变化.细胞凋亡率增高(11.50±1.49%vs 0.39±0.08%,P<0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能有效下调survivin基因表达,诱导肝门部胆管癌细胞凋亡.     

Survivin siRNA纳米载体的制备及其对胰腺癌细胞生物学特性的影响

目的：利用纳米技术和基因干扰技术设计并合成携载survivin siRNA的纳米载体,探讨survivins iRNA纳米微粒对人胰腺癌细胞BXPC-3增殖和凋亡的影响。方法：体外培养人胰腺癌BXPC-3细胞,将BXPC-3细胞随机分为4组：生理盐水组、不含基因的纳米微粒组、survivin siRNA组和s urvivins iRNA纳米微粒组。RT-PCR检测survivin mRNA的表达;Wes tern blot法检测s urvivin蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;MTT法检测细胞增殖情况。结果：细胞培养72 h后,survivin siRNA纳米微粒组细胞的survivin mRNA和蛋白表达均低于其他3组（P〈0.05）。survivin siRNA纳米微粒组细胞增殖明显受抑制,生长缓慢,而细胞凋亡率高于其他3组（P〈0.05）。结论：survivin siRNA纳米微粒能够有效减少胰腺癌BXPC-3细胞survivin mRNA和蛋白的表达,提高肿瘤细胞的凋亡,显著抑制BX-PC-3细胞的增殖。     

膀胱移行细胞癌中Survivin基因的检测及临床意义

目的：探讨Survivin基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法：通过逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例膀胱癌和12例非膀胱癌组织及尿液标本中Survivin基因mRNA的表达,采用免疫组织化学方法（SP法）复检Survivin基因的表达并确定其临床病理分期和分级。结果：40例膀胱癌组织中Survivin基因的阳性表达率为67．5％,mRNA表达结果与免疫组织化学结果一致;在尿液中的阳性表达率为55．5％。12例非膀胱癌组织中Survivin基因的阳性表达率仅为8．3％;尿液中未见Survivin基因表达。显示Survivin基因在膀胱癌中的表达显著高于在非膀胱癌中的表达（P〈0．05）;而组织标本与尿液标本对Survivin基因的检出率无明显差异（P〉0．05）;Survivin的阳性表达与膀胱癌的恶性程度、临床病理分级或是否复发关系密切（P〈0．05）,Survivin基因的阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤的分期无明显相关性。结论：Survivin基因在膀胱癌的恶性程度、肿瘤转移及预后等方面可能有较大的临床意义,而检测尿液中Survivin基因的表达可作为膀胱癌的早期发现、早期诊断、术后复查的新方法。     

PCNA、P21、P53在胃癌中的表达及其意义

目的 :研究PCNA、P2 1、P5 3在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法 :应用免疫组化S P法检测 4 6例胃癌根治术标本中PCNA、P2 1、P5 3的表达情况 ,并与临床病理资料对比研究。结果 :4 6例胃癌PCNA、P2 1、P5 3表达阳性率分别是 80 .4 %、5 6 .5 %、4 5 .7% ,其中进展期胃癌P2 1的表达率 (6 2 .9% )明显高于早期胃癌 (36 .4 % ) ,三者与胃癌的组织学类型及分级无关。PCNA的表达与胃癌浸润深度和转移有关 ;P2 1表达与胃癌淋巴结和远处转移有关 ,而与浸润深度无关 ;P5 3的阳性表达与临床病理指标无明显相关 ;PCNA与P2 1、P5 3的表达有明显的协同性。结论 :PCNA与P2 1、P5 3表达可能与胃癌的发生、发展有关 ,是判断胃癌生物学行为的良好指标     

siRNA沉默survivin基因对肺癌细胞凋亡的影响

目的观察siRNA（Small interference RNA,siRNA）介导survivin基因对肺癌细胞凋亡作用。方法设计、合成针对survivin的siRNA并构建相应载体,转染对数生长期肺癌细胞A549,对比阴性对照组和空白对照组;半定量RT-PCR检测survivin mRNA的表达,MTT法检测细胞生长,流式细胞仪检测肺癌细胞的凋亡。结果转染siRNA组survivin mRNA表达明显低于阴性对照组和空白对照组（P〈0.05）。MTT法检测各组细胞生长曲线阴性对照组与空白对照组相比,转染后24,48,96小时及1周时细胞生长未受影响,siRNA组在转染后24,48小时细胞生长未受明显影响,而96小时及一周时明显抑制。转染siRNA组的细胞的凋亡率与阴性对照组与空白对照组相比显著增加（14.94%±1.60%vs 3.23%±0.46%,4.22%±0.34%,P〈0.05）。结论本实验提示siRNA沉默survivin基因能促进肺癌细胞的凋亡,survivin siRNA基因治疗有可能成为肺癌治疗的新靶点。