慢性丙型肝炎和丙型肝炎肝硬化患者外周血Treg和Th17水平变化临床意义探讨

目的探讨外周血Treg和Th17细胞比率检测在评估HCV感染患者发生肝硬化的临床意义。方法 2017年3月～2019年1月我院收治的丙型肝炎肝硬化患者35例、慢性丙型肝炎(CHC)患者31例和同期接受健康体检者66名,采用ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17和转化生长因子-β(TGF-β)水平,使用流式细胞仪检测外周血Treg和Th 17细胞比率。绘制ROC曲线观察各指标预测肝硬化的发生。结果丙型肝炎肝硬化患者血清IL-6、IL-17和TGF-β水平分别为(8.08±2.71) ng/L、(17.01±4.55) ng/L和(5.20±1.35) ng/L,显著高于健康人[分别为(6.64±2.33) ng/L、(12.76±3.46) ng/L和(4.19±1.07) ng/L,P0.05]或CHC患者[分别为(7.20±2.49) ng/L、(14.12±3.87) ng/L和(4.41±1.20) ng/L,P0.05],血清高水平的TGF-β能预测肝硬化的发生(AUC=0.963,P=0.000);肝硬化患者外周血Treg细胞比率为(6.27±1.02)%,显著高于CHC患者或健康人[分别为(5.75±0.84)%和(5.37±0.99)%,P0.05],而Th 17/Treg比值为(0.19±0.05),显著低于CHC患者或健康人[分别为(0.23±0.06)和(0.22±0.05),P0.05];ROC曲线分析显示外周血Treg细胞比率或Th17/Treg细胞比值可有效预测肝硬化[AUC=0.820和AUC=0.607,P=0.000,P=0.041],而TH17细胞对肝硬化无预测价值。结论丙型肝炎肝硬化患者血清TGF-β水平和外周血Treg细胞比率有明显的变化,监测它们的变化可能有助于在慢性丙型肝炎病毒感染者中早期发现肝硬化,做到早诊断、早治疗,对改善预后有重要的临床意义。     

慢性丙型肝炎和肝硬化患者外周血Th17和Treg细胞及其相关细胞因子水平变化*

目的 调查慢性丙型肝炎（CHC）和丙型肝炎肝硬化（LC）患者外周血辅助性T淋巴细胞17（Th17）、调节性T淋巴细胞（Treg）及其相关细胞因子水平的变化。方法 2014年10月~2016年10月本院收治的CHC患者33例,丙型肝炎肝硬化患者27例和健康体检者30例。给予CHC患者α-干扰素联合利巴韦林(PR)方案治疗12 m。采用ELISA法检测白介素-6 （IL-6）、IL-10、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）,使用流式细胞仪检测外周血Th17和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数。结果 LC和CHC患者外周血Th17和Treg细胞比率和Th17/Treg比值分别为（4.6±0.7）%、（2.7±0.5）%和（1.6±0.4）,和（5.8±0.9）%、（3.1±0.6）%和（1.9±0.5）,均显著高于健康人[（2.3±0.4）%、（1.7±0.4）%和（1.4±0.2）,P<0.05],LC患者外周血Th17和Treg细胞比率和Th17/Treg比值显著高于CHC患者 （P<0.05）;LC和CHC患者血清IL-6、IL-10、IL-17和TGF-β水平分别为（9.9±2.5）ng/L、（18.0±3.2） ng/L、（15.3±2.8） ng/L和（5.5±0.8） ng/L,和（14.1±3.0） ng/L、（21.4±4.0） ng/L、（23.3±3.9）ng/L和（7.2±1.2）ng/L,显著高于健康人[（6.7±1.1） ng/L、（14.2±2.9） ng/L、（5.3±0.6） ng/L和（4.3±1.0） ng/L,P<0.05],LC患者血清IL-6、IL-10、IL-17和TGF-β水平显著高于CHC患者（P<0.05）;CHC患者治疗后外周血Th17和Treg细胞比率及血清TGF-β、IL-10和IL-17水平分别为（3.4±0.6）%、（1.9±0.4）%、（4.7±0.6） ng/L、（15.1±2.5） ng/L和（11.5±2.1） ng/L,均显著低于治疗前,差异有统计学意义（t=7.477、t=7.177、t=4.596、t=4.102、t=6.237,P<0.05）。结论 CHC和丙型肝炎肝硬化患者外周血Th17和Treg细胞比率增高,相关细胞因子水平也升高,可能参与了丙型肝炎病毒感染的发病过程,在抗病毒治疗后血清细胞因子水平降低,可能有助于对疗效的观察。     

慢性丙肝后肝硬化患者T淋巴细胞亚群检测对肝细胞损伤的预测价值

[目的]探析慢性丙肝后肝硬化患者T淋巴细胞亚群检测对肝细胞损伤的预测价值。[方法]选取100例慢性丙型肝炎患者,分为单纯慢性丙型肝炎组(CHC组,n=55)与慢性丙型肝炎后肝硬化组(CHC-LC组,n=45)。另从同期进行体检的健康人群中随机抽取50例作为对照组。检测3组研究对象的肝功能指标,包括谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL);HCV RNA滴度、血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)水平及Thl7细胞与Treg细胞。[结果]3组性别与年龄的差异无统计学意义。CHC-LC组血清AST、ALT、TBIL、HCV RNA滴度高于CHC组与对照组(P0.05),CHC组血清AST、ALT、TBIL、HCV RNA滴度高于对照组(P0.05)。CHC-LC组的Thl7细胞比例、Treg细胞比例、血清IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β水平、Th17/Treg比值分别为(5.95±0.81)%、(15.47±3.01)ng/L、(24.29±2.68)ng/L、(3.12±0.75)%、(21.40±3.38)ng/L、(7.33±1.54)ng/L、(1.91±0.42),高于CHC组与对照组(P0.05);CHC组Thl7细胞比例、Treg细胞比例、血清IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β、Th17/Treg比值水平分别为(4.74±0.72)%、(9.79±2.37)ng/L、(17.02±2.24)ng/L、(2.80±0.72)%、(16.98±2.18)ng/L、(5.32±1.24)ng/L、(1.69±0.37),高于对照组(P0.05)。Th17细胞比例、Treg细胞比例、血清IL-17、血清IL-10、血清TGF-β、Th17/Treg比值预测肝细胞损伤敏感度分别为0.530、0.518、0.665、0.727、0.879,特异度分别0.684、0.669、0.722、0.798、0.822。[结论]Thl7和Treg细胞平衡在慢性丙型肝炎患者的肝硬化发展具有促进作用,且可预测肝细胞损伤。     

慢性丙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞及相关因子检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎肝硬化(CHC-LC)患者外周血Th17/Treg失衡及其相关细胞因子变化的临床意义。方法收集2014年5月-2016年5月于天门市第一人民医院就诊的CHC患者96例,其中CHC患者54例(CHC组)、CHC-LC患者42例(LC组)、健康体检者40例(HC组)。采用流式细胞术检测3组的外周血Th17/Treg细胞表达情况,采用ELISA法检测血清IL-6、IL-10、IL-17及TGFβ,同时检测HCV RNA、AST、ALT、TBil。多组比较采用方差分析,进一步两组间比较采用SNK-q检验;计数资料组间比较采用χ2检验;相关性分析采用Pearson相关性分析法。结果 LC组的外周血Th17细胞比率[(5.97±0.84)%]、Treg细胞比率[(3.14±0.72)%]、Th17/Treg(1.90±0.52)均显著高于HC组[(2.39±0.46)%、(1.72±0.53)%、(1.39±0.12)]和CHC组[(4.75±0.67)%、(2.81±0.87)%、(1.69±0.45)],差异均有统计学意义(F值分别为312.95、47.21、17.34,P值均0.001)。LC组的各细胞因子IL-6、IL-17、IL-10及TGFβ均显著高于HC组和CHC组,差异均有统计学意义(F值分别为160.38、574.11、23.90、36.97,P值均0.001)。Th17细胞比率、Treg细胞比率、Th17/Treg及各细胞因子(IL-17、IL-6、IL-10、TGFβ)与ALT、AST呈显著正相关性(ALT:r值分别为0.633、0.525、0.631、0.931、0.841、0.372、0.343,P值均0.05;AST:r值分别为0.597、0.502、0.564、0.873、0.813、0.365、0.337,P值均0.05),Th17细胞比率、Treg细胞比率、IL-6、IL-17、TGFβ与TBil均呈显著正相关性(r值分别为0.344、0.231、0.401、0.339、0.307,P值均0.05)。结论 Th17/Treg细胞及相关因子可能与CHC及LC的发生发展密切相关,Th17/Treg及其相关细胞因子检测可能对CHC-LC的防治具有重要意义。     

慢性丙型肝炎和丙型肝炎肝硬化患者外周血Treg和Th17水平变化临床意义探讨*

目的 探讨外周血Treg和Th17细胞比率检测在评估HCV感染患者发生肝硬化的临床意义。方法 2017年3月~2019年1月我院收治的丙型肝炎肝硬化患者35例、慢性丙型肝炎（CHC）患者31例和同期接受健康体检者66名,采用ELISA法检测血清白细胞介素-6（IL-6）、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）水平,使用流式细胞仪检测外周血Treg和Th17细胞比率。绘制ROC曲线观察各指标预测肝硬化的发生。结果 丙型肝炎肝硬化患者血清IL-6、IL-17和TGF-β水平分别为（8.08±2.71） ng/L、（17.01±4.55） ng/L和（5.20±1.35） ng/L,显著高于健康人[分别为（6.64±2.33） ng/L、（12.76±3.46） ng/L和（4.19±1.07） ng/L,P<0.05]或CHC 患者[分别为（7.20±2.49） ng/L、（14.12±3.87） ng/L和（4.41±1.20） ng/L,P<0.05],血清高水平的TGF-β能预测肝硬化的发生（AUC=0.963,P=0.000）;肝硬化患者外周血Treg细胞比率为（6.27±1.02）%,显著高于CHC患者或健康人[分别为（5.75±0.84） %和（5.37±0.99） %,P<0.05],而Th17/Treg比值为（0.19±0.05）,显著低于CHC患者或健康人[分别为（0.23±0.06）和（0.22±0.05）,P<0.05];ROC曲线分析显示外周血Treg细胞比率或Th17/Treg细胞比值可有效预测肝硬化[AUC=0.820和AUC=0.607,P=0.000,P=0.041],而TH17细胞对肝硬化无预测价值。结论 丙型肝炎肝硬化患者血清TGF-β水平和外周血Treg细胞比率有明显的变化,监测它们的变化可能有助于在慢性丙型肝炎病毒感染者中早期发现肝硬化,做到早诊断、早治疗,对改善预后有重要的临床意义。     

原发性胆汁性胆管炎患者外周血Treg/Th17细胞相关细胞因子水平变化*

目的 探讨外周血调节性T淋巴细胞(Treg)/辅助性T淋巴细胞17(Th17)相关细胞因子评估原发性胆汁性胆管炎(PBC)显著性肝纤维化的价值。方法 2019年1月～2021年12月我院收治的PBC患者59例和同期健康体检者59例,PBC患者均接受肝穿刺活检,使用流式细胞仪检测外周血Treg/Th17细胞百分比,采用ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-10、IL-6和IL-17水平,应用SPSS 20.0软件绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评估各指标诊断PBC患者显著性肝纤维化的效能。结果 PBC患者外周血Treg细胞比率、Th17细胞比率和Th17/Treg细胞比值分别为(3.1±0.5)%、(5.9±0.9)%和(1.9±0.3),均显著高于健康人【分别为(1.6±0.3)%、(2.3±0.5)%和(1.4±0.1),P＜0.05】;PBC患者血清IL-10、IL-6和IL-17水平分别为(19.5±3.4)ng/L、(10.3±2.2)ng/L和(21.2±3.1)ng/L,均显著高于健康人【分别为(13.9±2.7)ng/L、(6.4±1.5)ng/L和(5.1±0.9)ng/L,P＜0.05】;肝组织病理学检查显示,本组PBC患者存在非显著性肝纤维化20例,显著性肝纤维化组39例;显著性肝纤维化患者外周血Treg细胞比率、Th17细胞比率和Th17/Treg细胞比值均显著高于非显著性肝纤维化患者(P＜0.05);显著性肝纤维化患者血清IL-10、IL-6和IL-17水平均显著高于非显著性肝纤维化患者(P＜0.05);经ROC曲线分析结果显示,联合外周血Treg细胞比率、Th17细胞比率、Treg/Th17比值、血清IL-10、IL-6和IL-17水平等6项指标诊断PBC患者显著性肝纤维化的AUC为0.956,显著高于六项指标的单独评估(分别为0.760、0.746、0.776、0.747、0.736和0.769,P＜0.05)。结论 PBC患者外周血Treg和Th17细胞及其细胞因子水平发生了显著的变化,而这种变化高度提示肝纤维化的存在,其诊断肝纤维化的应用值得进一步研究。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者Treg细胞、Th17细胞表达特点及其与HBV前C区/BCP区变异的相关性

目的探讨HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T淋巴细胞(Th)17细胞表达特点及其与HBV前C区/BCP区变异的相关性。方法选择HBV相关慢加急性肝衰竭和肝衰竭前期患者各41例,采用ELISA检测外周血IL-17、TGF-β1、IFN-γ、IL-1β及IL-21水平,流式细胞术检测Treg和Th17表达水平,直接测序法检测HBV前C区及BCP区基因,统计学处理用t检验。结果肝衰竭患者Treg、Th17、IL-17、TGF-β1、IFN-γ、IL-1β水平、HBV变异位点中A1762T/G1764A双突变、G1896A突变比例分别为(9.28±1.12)%、(0.23±0.05)%、(151.83±35.22)pg/mL、(153.24±34.15)pg/mL、(177.61±29.25)pg/mL、(77.46±13.15)pg/mL、22/19、23/18,均高于肝衰竭前期患者的(7.47±0.74)%、(0.19±0.03)%、(134.02±34.39)pg/mL、(130.76±35.13)pg/mL、(130.68±22.87)pg/mL、(60.12±15.67)pg/mL、13/28、12/29,差异均有统计学意义(t’值分别为8.594、4.609、2.316、2.939、8.094、5.429,χ~2值分别为4.038、6.032,均P0.05);而Treg/Th17比值、IL-21水平在两组中差异无统计学意义(t=0.902,P=0.370;t=0.294,P=0.769)。HBV BCP区A1762T/G1764A双突变和G1896A突变的患者Treg、Th17水平均高于野生型,差异有统计学意义(t=2.932,P=0.004;t=2.339,P=0.022;t=3.232,P=0.002;t’=2.990,P=0.004),而Treg/Th17比值在突变型和野生型中差异均无统计学意义(t=0.030,P=0.976;t’=0.272,P=0.787)。结论 Treg细胞及Th17细胞变化,HBV BCP区A1762T/G1764A双突变、G1896A突变可能与HBV相关慢加急性肝衰竭相关。     

抗病毒治疗对慢性丙型肝炎患者Treg/Th17细胞比例变化的影响

目的 了解抗病毒治疗对慢性丙型肝炎患者调节性T细胞(Treg) /Th17细胞比例变化的影响.方法 32例慢性丙型肝炎患者进行聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗,20例健康人作为对照.在抗病毒治疗前和随访24周时,采用流式细胞仪检测患者外周血Treg和Th17细胞频率,ELISA法检测患者IL-17的水平,观察Treg/Th17细胞比例变化与患者获得持续性病毒学应答(SVR)的关系.统计学处理采用t检验.结果 抗病毒治疗前患者外周血中Th 17、Treg细胞频率和Treg/Th17比例明显高于对照组[(4.58±0.86)％与(2.48±0.60)％,t=2.399,P＜0.05;(8.58±2.20)％与(4.70±1.30)％,t=7.990,P＜0.01;(1.82±0.40)与(1.60±0.35),t=2.088,P＜0.05].抗病毒治疗后Th 17、Treg细胞频率和Treg/Th17比例分别为(5.35±0.79)％、(6.46±1.29)％、(1.25±0.21).获得SVR患者Th17细胞频率为(6.27±1.15)％,明显高于未获得SVR的(4.05±0.82)％(t=10.103,P＜0.01).获得SVR患者Treg细胞频率和Treg/Th17比例为(4.90±1.39)％、(0.80±0.15),明显低于未获得SVR的(7.42±1.95)％、(1.83±0.42)(t=5.718,8.752,P＜0.01).获得SVR患者IL-17水平为(143.5±31.2)pg/mL,明显高于未获得SVR患者组的(121.4±30.1 )pg/mL(t=2.028,P＜0.05).结论 慢性丙型肝炎患者Treg/Th 17细胞比例高于对照组,抗病毒治疗后Treg/Th17细胞比例下降,获得SVR患者下降更为明显.     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.     

阿托伐他汀治疗NAFLD患者对肝脂肪变和外周血Treg/Th17细胞的影响*

目的 探讨阿托伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者对肝脂肪变和外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法 2016年6月～2019年6月我院诊治的NAFLD患者148例,采用随机数字表法将患者分为对照组74例和观察组74例,分别给予常规治疗和在此基础上加用阿托伐他汀治疗24 w。采用ELISA法检测白细胞介素-10(IL-10)、IL-17和IL-18水平,使用流式细胞仪检测外周血Treg和Th17细胞百分比。结果 在治疗24 w末,观察组血清TC、TG、ALT和AST水平分别为(2.0±0.6)mmol/L、(1.2±0.4)mmol/L、(43.8±8.2)U/L和(25.2±7.4)U/L,显著低于对照组【分别为(2.6±0.6)mmol/L、(1.5±0.3)mmol/L、(49.9±8.4)U/L和(29.2±8.1)U/L,P＜0.05】;观察组血清IL-10水平为(31.7±4.4)ng/L,显著高于对照组【(26.3±4.2)ng/L,P＜0.05】,而血清IL-17和IL-18水平分别为(89.5±31.0)pg/mL和(41.8±9.1)pg/mL,显著低于对照组【分别为(104.2±29.5)pg/mL和(52.3±9.2)pg/mL,P＜0.05】;观察组外周血Treg细胞百分比和Treg/Th17细胞比值分别为(1.2±0.2)%和(1.1±0.4),显著低于对照组【分别为(1.3±0.2)%和(1.3±0.5),P＜0.05】,而外周血Th17细胞百分比为(1.1±0.2)%,显著高于对照组【(1.0±0.2)%,P＜0.05】;观察组肝脂肪变改善总有效率为94.6%,显著高于对照组的73.0%(P＜0.05)。结论 应用阿托伐他汀治疗NAFLD患者能显著减轻肝脂肪变,可能与降低了血脂水平,调节了Treg/Th17细胞比例失衡有关。     

急性冠状动脉综合征患者外周血辅助性T细胞和调节性T细胞的检测意义

目的探讨外周血辅助性T细胞(Th17)和调节性T细胞(Treg)平衡在急性冠状动脉综合征(ACS)患者中的变化和意义。方法选择79例冠心病患者分为急性心肌梗死(AMI)组22例、不稳定性心绞痛(UAP)组19例、稳定性心绞痛(SAP)组18例及胸痛综合征(CPS)组20例,用流式细胞术检测外周血中Th17(其占CD3T淋巴细胞比例)及Treg(其占CD4T淋巴细胞比例)的表达,ELISA检测血清Th17及Treg的相关细胞因子白细胞介素(IL)-17和IL-10水平。结果与CPS组和SAP组比较,UAP组及AMI组Th17表达[(2.97±0.62)%和(3.58±1.02)%vs(0.59±0.27)%和(1.37±0.44)%]及血清中IL-17水平显著升高[(41.92±8.89)ng/L和(52.27±9.49)ng/L vs(10.32±2.05)ng/L和(14.73±4.74)ng/L,P0.01],Treg表达及血清中IL-10水平显著降低(P0.01)。SAP组Th17表达及IL-17水平也显著高于CPS组,Treg表达及IL-10水平显著低于CPS组(P0.05,P0.01)。与CPS组和SAP组比较,UAP组和AMI组Th17/Treg比值显著升高(P0.01),SAP组Th17/Treg比值显著高于CPS组(P0.01)。结论 ACS患者外周血中Th17/Treg失衡可能促进了冠状动脉粥样硬化斑块不稳定的进展并进一步诱导ACS的发病。     

辅助性T淋巴细胞17在肝囊型包虫病患者外周血中的变化

目的 探讨肝囊型包虫病患者外周血中辅助性T淋巴细胞(Th)17的变化.方法 将56例受试者分为:健康志愿者(HD)组20例,肝囊型包虫病(CE)组18例,肝囊型包虫病合并胆瘘(BF)组18例.流式细胞仪胞内染色分析法检测各组受试者外周血中Th17细胞占CD4+T淋巴细胞比例,ELlSA检测血清Th17细胞相关细胞因子IL-17、IL-23水平.数据行t检验和Pearson相关分析.结果 CE组患者外周血Th17/CD4+T淋巴细胞比例为(0.23±0.11)%,明显低于BF组的(0.76±0.43)%和HD组的(0.52±0.50)%(t=2.225,t=4.077,均P＜0.05),而BF组和HD组间差异无统计学意义(t=1.931,P＞0.05).血清IL-17和IL-23在CE组分别为(12.1±3.7)ng/L和(84.4±46.0)ng/L,明显低于BF组的(15.5±4.1)ng/L和(138.6±37.9)ng/L(t=2.515,t=3.649,均P＜0.05),也低于HD组的(14.8±4.4)ng/L和(138.1±48.7)ng/L(t=2.401,t=3.706,均P＜0.05),而BF组和HD组间差异无统计学意义(t=0.534,P＞0.05).各组血清IL-17水平与IL-23水平呈正相关(r=0.657,P＜0.05).结论 肝囊型包虫病患者外周血中Th17细胞比例明显减少,血清IL-17、IL-23水平显著降低.     

Th17淋巴细胞对甲型H1N1流行性感冒病毒清除作用的探讨

目的 探讨甲型H1N1流行性感冒(流感)患者Th17淋巴细胞表型、比例及其与病毒清除之间的关系.方法 将甲型H1N1流感患者70例、季节性流感患者30例、健康对照者68例分别纳入3组.通过细胞内染色,流式细胞技术测定3组人群外周血Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)淋巴细胞比例;ELISA法测定血浆及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中的IFN-γ、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-6水平;RT-PCR检测鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒载量.统计学方法采用单因素方差分析和线性相关分析.结果 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例为(2.740±0.210)%,较健康对照者的(3.443±0.154)%及季节性流感患者的(3.443±0.277)%显著下降(F=4.242,P＜0.05),而3组间Th1、Th2、Treg淋巴细胞比例无明显差异;甲型H1N1流感患者血浆TGF-β水平为(10±8)ng/mL,较健康者的(43±32)ng/mL及季节性流感患者的(18±10)ng/mL显著下降(F=17.72,P＜0.01);甲型H1N1流感患者PBMC中TGF-β水平为(782±736)pg/mL,较健康者的(1462±315)pg/mL及季节性流感患者的(1481±348)pg/mL显著下降(F=5.730,P＜0.01);Th17淋巴细胞比例与病毒清除时间呈负相关(r=-0.38,P=0.02).结论 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例显著降低,且与TGF-β水平密切相关,其降低可能导致机体延长排毒时间.     

CHB患者Th17-Treg失衡中IL-21的作用及机制

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周Th17/调节性T细胞(Treg)失衡中IL-21的作用及其初步机制。方法流式细胞仪分别检测59例CHB患者和20例健康人外周血细胞中Th17细胞和Treg细胞频数,同时以ELISA法检测血清细胞因子IL-21、IL-17、IL-10、TGF-β水平。体外分别以IL21、IL-2刺激CHB患者外周血单核细胞(PBMC),以实时PCR检测培养细胞转录因子RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平,以ELISA法检测培养上清细胞因子IL-17、IL-10和TGF-β水平。结果与正常人群相比,IL-21、IL1 7、TGF-β水平显著升高(P均0.05),CHB患者外周Th17/Treg比例显著升高(P0.05),IL-21水平与Th1 7/Treg比例呈正相关(P=01.008)。与IL-2相比.IL-21刺激CHB患者PBMC的RORγt mRNA表达水平明显升高(P=0.016)而Foxp3 mRNA表达水平明显降低(P=0.018),相对应的培养上清中,IL-1 7水平显著上升(P=0.049)而IL-10、TGF-β水平明显降低(P=0.017,P=0.004)。结论 C、HB患者中IL-21能通过提高RORγt mRNA表达,同时抑制Foxp3 mRNA表达进而促进Th1 7/Treg失衡。     

青蒿素对 AECOPD 患者外周血中炎症因子及 Th17/Treg 失衡的调控

目的：通过检测青蒿素干预前后慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血中 Th17细胞,Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例,炎症因子 IL-6、IL-21、转化生长因子β(TGF-β)的含量,初步探讨青蒿素对 COPD 患者外周血中炎症因子和 Th17/Treg 失衡的调控机制。方法随机收集 AECOPD 20例,将其分为1640干预组和青蒿素干预组,收集同一时期肺功能正常健康体检者20例作为对照组,抽取清晨空腹静脉血,采用流式细胞术检测所有实验对象 CD4+ Th17细胞和 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例;采用 ELISA 方法检测所有实验对象血清中炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β的水平。结果①CD4+ Th17细胞/CD4+ T 细胞和 Th17/CD4+ Treg 细胞的比例1640干预组高于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Treg 细胞/CD4+ T 细胞的比例1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。炎症因子 IL-6和 IL-21的水平1640干预组高于青蒿素干预组和对照组;青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。④炎症因子 TGF-β的水平1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。⑤Th17/Treg 细胞的比值与炎症因子 IL-6(r =0.095,P <0.05),IL-21(r =0.051,P <0.05)的水平呈正相关,与 TGF-β(r =-0.002,P <0.05)的水平呈负相关;炎症因子 TGF-β的水平与炎症因子 IL-6(r =-2.075,P <0.05),IL-21(r =-2.869,P <0.05)的水平呈负相关。结论 AECOPD 患者外周血中存在 Th17/Treg 的失衡,炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β与 Th17/Treg 的失衡密切相关,青蒿素可能能够通过下调 IL-6和 IL-21的表达,上调 TGF-β的表达来调节其失衡。     

扩张型心肌病患者Treg/Th17的检测及意义

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者外周血中Treg/Th17的水平及意义.方法:采用流式细胞术和ELISA法检测30例DCM患者和30例健康对照组Treg/Th17的水平.结果:DCM患者较正常组,外周血Treg细胞比例明显降低,而Th17细胞比例明显增高.Treg细胞相关细胞因子(TGF-β1和IL-10)的血浆水平明显降低,而Th17相关细胞因子(IL-17,IL-6,IL-23)水平明显增加.结论:DCM患者体内Treg细胞与Th17细胞平衡发生负向偏倚.     

急性冠状动脉综合征患者Th17细胞检测及意义

目的:探讨急性冠状动脉综合征患者外周血辅助性T细胞(T help,Th)17的水平及意义.方法:将85例患者分为4组:急性心肌梗死(AMI)组26例,不稳定型绞痛(UA)组17例,稳定型心绞痛(SA)组22例和胸痛综合征(CPS)组20例.采用流式细胞分析法,检测各组患者外周血Th17细胞占CD4 T细胞比例.应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测患者外周血血浆Th17相关细胞因子白细胞介素(IL)-17和IL-23的表达.结果:AMI组和UA组患者外周血Th17/CD4 T细胞比例分别为(2.3±1.3)%、(2.1±1.1)%,明显高于SA组(0.5±0.3)%和CPS组的(0.3±0.2)%(P＜0.01).AMI组和UA组患者IL-17和IL-23水平[IL-17:AMI组(72.3±50.2)ng/L、UA组(64.6±38.7)ng/L;IL-23:AMI组(615±254)ng/L,UA组(571±252)ng/L]亦明显高于SA组[IL-17;(24.2±15.3)ng/L,IL-23:(136±67)ng/L]和CPS组[IL-17:(20.8±13.3)ng/L,IL-23:(128±70)ng/L],P＜0.05;而SA组和CPS组间差异无统计学意义(P＞0.05).患者血浆IL-17水平与血浆IL-23水平呈正相关(r＝0.631,P＜0.01).结论:急性冠状动脉综合征患者外周血Th17细胞比例增加,IL-17、IL-23水平升高,Th17细胞可能参与动脉粥样斑块不稳定和急性冠状动脉综合征的发病.     

Treg/Th17细胞在不同时期慢性阻塞性肺疾病患者中的改变及意义探讨

目的 探讨CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg细胞)、Th17细胞特异性分泌因子IL-17在COPD急性加重期(AECOPD)及COPD稳定期中的改变及临床意义.方法 选取住院AECOPD患者26例,随访COPD稳定期患者20例,健康对照患者15例.流式细胞仪检测患者外周血CD4+ CD25+ CD1271.wTreg细胞比例、ELISA检测外周血IL-17浓度.结果 ①AECOPD组患者外周血Treg细胞比例较COPD稳定期组、对照组均明显升高[分别为(10.319±2.154)％,(6.406±1.498)％,(6.307±1.626)％;P＜0.05],COPD稳定期组患者Treg细胞比例高于对照组但差异无统计学意义;②A ECO PD组及COPD稳定期组外周血IL-17水平较对照组明显升高[分别为(0.813±0.233) ng/L,(o.547±0.157) ng/L,(0.408±0.169) ng/L;P＜0.001],AECOPD组IL-17水平高于COPD稳定期组(P＜0.01),COPD稳定期组IL-17水平高于对照组(P=0.046);③各组Treg细胞、IL-17水平与各指标之间未见相关性.结论 Treg细胞、IL-17在AECOPD及COPD稳定期中的水平异常说明在COPD的不同时期存在着不同的炎症,Treg/Th17细胞失衡可能导致COPD的免疫紊乱和慢性炎症持续.     

辅助性T细胞17、辅助性T细胞17/辅助性T细胞1比例在急性冠状动脉综合征的变化及临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血辅助性T细胞(Th)17、Th17/Th1比例及血浆中白细胞介素17(IL-17)和IL-22的变化及意义。方法选择冠心病患者50例,其中急性心肌梗死(AMI)组20例,不稳定型心绞痛(UA)组15例,稳定型心绞痛(SA)组15例;健康查体者15例作为正常对照组。采用流式细胞分析法,检测各组外周血Th17、Th17/Th1细胞占CD4+T细胞比例。采用酶联免疫吸附法检测患者血浆IL-17和IL-22的浓度。结果AMI组和UA组外周血Th17细胞比例[(2.98%±1.01%)和(2.63%±0.61%)]、Th17/Th1细胞比例[(0.71%±0.35%)和(0.66%±0.31%)]均明显高于SA组及正常对照组(均P<0.05)。AMI组血浆IL-17(24.41±7.95 ng/L)和IL-22(34.18±7.04 ng/L)浓度均显著高于SA组和正常对照组(均P<0.05);UA组血浆IL-17浓度(22.86±8.62ng/L)显著高于正常对照组,血浆IL-22浓度(28.98±4.35 ng/L)显著低于AMI组而高于正常对照组。ACS组IL-22浓度与IL-17浓度呈显著正相关(r=0.422,P<0.01),且ACS组Th17细胞与IL-17(r=0.722,P<0.01)、IL-22(r=0.400,P<0.01)浓度均呈显著正相关。结论 Th17细胞可能参与动脉粥样斑块不稳定和ACS的发病。Th17细胞及其相关炎性因子IL-17、IL-22可作为诊断急性心血管事件发生的辅助检测指标。     

不同分期老年COPD患者Th17、Treg细胞比例及炎性因子水平研究

目的探讨不同分期老年慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血Th17、调节T细胞(Treg)细胞及相关炎症因子水平的变化及其与患者肺功能的关系。方法选取2012年1月至2014年1月在本院呼吸内科就诊的68例COPD患者(其中稳定期32例,急性期36例)为研究对象,另选取30例健康体检者为对照组。应用流式细胞仪测定两组外周血CD+4Th17、CD+4CD+25 Treg细胞的比率。应用ELISA法测定两组白细胞介素-6,10,17,21,22(IL-6,10,17,21,22)及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果急性期组患者FEV1、FEV1/FVC水平显著低于稳定期及对照组(P0.05),而稳定期组低于对照组(P0.05)。急性期组CD+4Th17细胞比率高于稳定期及对照组,CD+4CD+25Treg细胞的比率则低于稳定期及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。急性期组IL-6,17,21,22水平高于稳定期及对照组,而IL-10、TGF-β水平低于稳定期及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。FEV1与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关,FEV1/FVC与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关。结论 Th17/Treg比例失衡可导致机体促炎因子生成增多,抑制炎症作用不足,促进气道炎症反应,导致患者呼吸功能障碍,加重COPD病情。