犀黄丸治疗恶性肿瘤的临床和实验研究进展

犀黄丸是清代名医王洪绪的家传秘方，出白《外科证治全生集·卷四》，由麝香、牛黄、炙乳香、炙没药组成，其主要功能为消坚化结、解毒散痈、消肿止痛，为治疗“乳岩”、“瘰疠”、“痰核”、“肺痈”之名方，现代主要用于各种恶性肿瘤等疾病的治疗，取得了较好的治疗效果，临床报道较多并有部分实验研究，现综述如下。     

野菊花注射液对人肿瘤细胞SMMC7721、PC3、HL60增殖的影响

目的:探讨野菊花抗肿瘤作用.方法:采用直接将药物加入培养液的方式,以MTT法观察野菊花注射液在不同浓度下对人肿瘤细胞SMMC7721、PC3、HL60增殖的影响.结果:野菊花注射剂在32μl/ml浓度下对人肿瘤细胞株PC3、HL60增殖有明显抑制的作用,但对人肝癌细胞株SMMC7721增殖作用无明显影响.结论:体外实验表明野菊花注射液可抑制人肿瘤细胞株PC3、HL60增殖,提示野菊花注射液具有一定的抑瘤作用.     

复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞生长及其周期影响的实验研究

目的：探讨中药复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞系（bel-7402)生长及其细胞周期分布的影响。方法：应用MTT比色法检测肿瘤细胞活性。流式细胞仪分析细胞周期时相分布。结果：中药复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞系（bel-7402)有抑制作用。其抑制率与含药血清浓度呈直线相关;FAM结果显示含药血清处理24h,S期细胞比例增加,G2/M期细胞减少;处理48h后,G0/1期细胞增多,S期细胞减少。结论：中药复方犀黄丸含药血清可抑制人肝癌细胞系（bel-7402)细胞生长,并可干扰其细胞周期。     

犀黄丸诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究

观察犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步的探讨,目的:研究犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步探讨.方法:犀黄丸含药血清对肝癌细胞生长的影响,检测对肿瘤Bel-7402杀伤率.在用不同浓度犀黄丸含药血清作用Bel-7402细胞不同时间后,用TUNEL法检测凋亡,用SASB法检测细胞bcl-2、c-myc、p53蛋白表达.结果:犀黄丸含药血清能明显抑制Bel-7402细胞生长,其肿瘤细胞Bel-7402杀伤率最高达75%,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01).TUNEL法显示,细胞凋亡率明显提高,与对照组比较有显著性差异;Bel-7402细胞的bcl-2、c-myc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强.     

克瘤丸体外对人肺癌细胞株A549的抑制作用研究

目的 研究中药复方克瘤丸3种提取方法的提取物体外对人肺癌细胞株A549抑制作用,探讨克瘤丸剂型改革的方向.方法 采用MTT法测定克瘤丸3种提取方法的提取物对人肺癌细胞株A549增殖的抑制作用.结果 克瘤丸组合提取法取得的提取物抑制率明显高于其他两种提取方法;当药物浓度为5 mg/ml时,对肺癌细胞有明显的抑制作用;克瘤丸对肺癌细胞0株增殖的抑制呈一定的时间和浓度的依赖性,随着时间和浓度的增加逐渐增强.结论 克瘤丸体外具有显著抑制人肺癌细胞株A549的作用,组合提取法有望成为今后剂型改革的研究方向.     

四妙勇安汤合犀黄丸加减治疗溃疡型胃癌及对MTDH蛋白的影响简

目的:观察四妙勇安汤合犀黄丸加减联合西药治疗溃疡型胃癌的临床疗效及对患者人异粘蛋白(MTDH)表达的影响。方法:将溃疡型胃癌患者76例随机分为对照组与观察组,各38例。对照组采用常规西药治疗,观察组在对照组的基础上加用四妙勇安汤合犀黄丸加减方治疗,观察患者症状及体征的改善情况,比较2组治疗效果,并检测治疗前后患者MTDH蛋白表达水平。结果:总有效率观察组为89.47%,对照组为63.16%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组患者胃脘痛、五心烦热、痞满、便干色黑症状积分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组上述各项积分下降较对照组更显著(P<0.05)。治疗后MTDH过度表达率观察组为13.16%,对照组为36.84%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗期间均未见严重不良反应。结论:采用中药四妙勇安汤合犀黄丸加减联合西药常规方案治疗溃疡型胃癌,可提高临床疗效,降低MTDH过度表达,安全性较高。     

西黄丸及乳香、没药、乳没药对对多种人恶性肿瘤细胞株体外增殖影响的比较研究

目的:比较西黄丸及乳香、没药、乳没药对对人恶性肿瘤细胞株体外增殖的影响,探讨西黄丸的抑瘤特点和主要组分。方法:将不同浓度西黄丸、乳香、没药、乳没药对浸提液,直接加入含肿瘤细胞培养板中,采用MTT法测定其对人恶性肿瘤细胞株(人乳腺癌细胞株MCF-7、人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人肺癌细胞株NCI-H446)体外增殖的影响。结果:乳香在2mg/ml、4mg/ml剂量下对NCI-H460细胞的增殖表现出明显的抑制作用;没药在1mg/ml~4mg/ml剂量下对NCI-H460细胞的增殖表现出明显的抑制作用,乳没药对及西黄丸在0.5mg/ml~4mg/ml剂量下对NCI-H460细胞增殖表现出明显的抑制作用;乳香、没药、乳没药对、西黄丸在0.25mg/ml~4mg/ml剂量下对MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖均表现出明显的抑制作用。结论:西黄丸、乳香、没药、乳没药对均有一定的抗肿瘤作用,且对乳腺癌细胞株具有一定的特异性,乳没药对可能为西黄丸的主要抑瘤成分。     

犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响

[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。     

陈皮多甲氧基黄酮类成分对人肝癌SMMC-7721、HepG2细胞株增殖的影响

目的:研究陈皮多甲氧基黄酮类成分(CM)对人肝癌株增殖的影响。方法:采用MTT法观察CM对人肝癌株SMMC-7721、HepG2的生长抑制作用;采用Wright-Giemsa染色观察CM作用于SMMC-7721、HepG2细胞株的形态变化。结果:CM20 mg/L、40 mg/L作用于SMMC-7721细胞株48 h,细胞抑制率分别为21.84%、44.83%,72 h细胞抑制率分别为40.00%、60.00%;CM20 mg/L、40 mg/LHepG2细胞株48 h,细胞抑制率分别为38.54%、51.04%,72 h细胞抑制率分别为43.40%、55.67%;CM与SMMC-7721、HepG2细胞株共同作用48 h,大部分细胞出现明显凋亡特征。结论:CM可以抑制人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2的生长并对两株细胞的增殖呈现时间、浓度依赖性。     

黄芩苷对人肝癌细胞系SMMC7721抑瘤作用的实验研究

目的 研究黄芩苷对人肝癌细胞系SMMC7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT法检测黄芩苷对人肝癌SMMC7721细胞株增殖的抑制作用,并采用流式细胞技术检测其对SMMC7721细胞周期的影响.结果 ①4～0.005 312 5 ms/ml黄芩苷组对SMMC 7721肿瘤细胞生长均具有明显抑制作用,与细胞组对照比差异有显著性(P<0.05或P<0.01).0.5～0.062 5 ms/ml黄芩苷组肿瘤生长抑制率与其他浓度组比差异有显著性(P<0.01),与顺铂对照组比较,差异无显著性(P>0.05).当黄芩苷浓度为0.5 ms/ml时,其对肿瘤细胞的生长抑制率最高,为63.8%;②0.5 mg/ml黄芩苷对SMMC7721肿瘤细胞形态的损害作用最明显,可见60%～70%的细胞呈碎片样,少数细胞呈悬浮生长;③0.5 ms/ml黄芩苷能够使细胞组滞于G0/G1期(G0/G1期细胞为72.19%).结论 黄芩苷对SMMC 7721细胞生长具有明显抑制作用,且可影响其细胞增殖周期.     

乌梅丸对乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植瘤的作用及其机制研究

目的 探讨乌梅丸对乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植瘤的作用及其可能机制。方法 选择SPF级雌性小鼠为试验动物,建立人乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植模型,随机分为模型组（灌胃口服0.9%氯化钠溶液）、阳性对照组（腹腔注射紫杉醇20 mg/kg）、乌梅丸组（灌胃乌梅丸颗粒剂药液）,每日1次,连续30 d。观察小鼠一般情况,利用荧光成像系统采集肿瘤图像,以系统自带软件计算肿瘤面积;称取小鼠肿瘤质量和肺癌转移灶数;q PCR检测小鼠肿瘤组织中Fas、Fas L mRNA水平;Western blotting检测小鼠肿瘤组织MDA-MB-231细胞中Fas相关死亡域蛋白（FADD）、活性半胱天冬酶8(cleaved caspase-8）、Fas、Fas L蛋白表达。结果 模型组、乌梅丸组和阳性对照组小鼠肿瘤面积持续增大,呈时间依赖性（P<0.05）;与模型组比较,乌梅丸组与阳性对照组小鼠肿瘤面积较小,肿瘤质量较低,肺癌转移灶数量较少（P<0.05）;与乌梅丸组比较,阳性对照组小鼠瘤面积较小,肿瘤质量较低,肺癌转移灶数量较少（P<0.05）。与模型组...     

当归补血口服液含药血清对人肺癌细胞株A549增殖的影响

目的：探讨当归补血口服液荷瘤鼠含药血清对人肺癌细胞A549增殖的影响。方法：应用当归补血口服液灌胃荷瘤WiStar大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549,MTT测细胞活性,流式细胞法测细胞周期、凋亡。结果：当归补血口服液荷瘤鼠含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,且呈剂量、时间依赖性,可阻滞A549细胞的细胞周期,使G2／M期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡。结论：当归补血口服液含药血清体外具有抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过使细胞周期抑制于G2／M期和诱导细胞凋亡而实现。     

加味当归补血汤含药血清对人肺癌细胞株A549增殖的影响

目的:探讨加味当归补血汤荷瘤鼠含药血清对人肺癌细胞A549增殖的影响.方法:应用加味当归补血汤灌胃荷瘤Wistar大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549,MTT测细胞活性,流式细胞法测细胞周期、调亡.结果:加味当归补血汤荷瘤鼠含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,且呈剂量时间依赖性,可阻滞A549细胞的细胞周期,使G2/M期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡.结论:加味当归补血汤含药血清体外具有抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过使细胞周期抑制于G2/M期和诱导细胞凋亡而实现.     

鬼臼毒酮对人白血病细胞株HL-60的增殖凋亡及端粒酶活性的影响

目的：观察鬼臼毒酮对人白血病细胞株HL-60的凋亡作用及bcl-2表达的影响。方法：采用台盼蓝拒染法、MMT法、瑞氏染色法、DNA电泳、观察该药对HL-60增殖抑制和凋亡，RT-PCR检测bcl-2的mRNA。结果：鬼臼毒酮对HL-60有抑制增殖。诱导凋亡和下调bcl-2的作用。结论：鬼臼毒酮体外试验有抗瘤作用，其机制可能是通过抑制增殖和诱导凋亡。     

黄芩苷联合TRAIL对人肺癌细胞株A549增殖、凋亡的影响

目的:观察黄芩苷联合TRAIL对人肺癌细胞株A549增殖、凋亡的影响。方法:采用2mg/L、4mg/L、8mg/L黄芩苷和100ng/mLTRAIL单用或联用处理肺癌细胞株A549。利用MTT法检测各组细胞增殖,倒置荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR法及Western blot法检测Survivin、X连锁凋亡抑制蛋白基因(XIAP)、死亡受体4(DR4)及死亡受体(DR5)mRNA及蛋白相对表达量。结果:相比较于对照组,黄芩苷和TRAIL单用或联用均能呈浓度依赖性抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡(P0.05),而黄芩苷和TRAIL联用比单用时细胞抑制率及凋亡率更高(P0.05)。相比较于对照组,黄芩苷组和TRAIL组A549细胞数明显降低,漂浮细胞数增多,Survivin及XIAP mRNA及蛋白表达量显著降低,DR5mRNA及蛋白表达量显著升高(P均0.05),而DR4mRNA及蛋白表达无明显差异。与黄芩苷组或TRAIL组比较,联用组A549细胞数明显降低,漂浮细胞数增多,Survivin及XIAP mRNA及蛋白表达量显著降低,DR5mRNA及蛋白表达量显著升高(P均0.05),而DR4mRNA及蛋白表达无明显差异。结论:黄芩苷联合TRAIL可协同抑制肺癌细胞株A549增殖,并促进凋亡,其作用机制可能与两者联用能增加死亡受体DR5的表达,进而抑制Survivin和XIAP蛋白表达有关。     

莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的探讨莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法体外培养肺腺癌细胞A549,MTT比色法测定莪术油对A549细胞作用24、48、72 h后抑制率;流式细胞术分析莪术油对A549细胞作用24 h后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测莪术油对A549细胞作用24 h后细胞凋亡与坏死情况。结果莪术油对A549细胞增殖的抑制率随时间延长明显升高,随药物浓度增加抑制作用增强;莪术油对A549细胞作用24 h后,细胞周期停滞在G0/G1期,阻止其进入S期;细胞的早期凋亡、晚期凋亡和坏死比例随着莪术油浓度的增加而增加,且坏死细胞的比例高于凋亡细胞。结论莪术油对A549细胞的增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖,其作用是通过阻滞细胞周期及诱导凋亡和坏死来实现的。     

黄芪甲苷、总多糖、注射液对3种人恶性肿瘤细胞增殖的影响

目的:比较黄芪不同制剂、成分对3种人肿瘤细胞株SMMC7721、PC3、HL60增殖的影响。方法:将不同浓度黄芪甲苷、总多糖、注射液,直接加入肿瘤细胞培养液中,MTT法测定各成分对三种肿瘤细胞的增殖影响。结果:黄芪甲苷、总多糖、注射液上述三种人肿瘤细胞增殖无明显抑制作用,且黄芪甲苷在20mg/ml浓度时对SMMC7721、PC3的增殖有一定促进作用。结论:体外实验结果表明黄芪甲苷、总多糖、注射液对三种人肿瘤细胞株增殖无明显抑制作用。     

红景天提取物对纤维肉瘤细胞T241增殖功能的影响及抑瘤作用的初步研究

目的:通过体内外实验研究红景天提取物对T241肿瘤细胞增殖的影响.方法:检测不同浓度红景天醇提取物对T241肿瘤细胞增殖及细胞存活的影响;C57BL6/J荷瘤小鼠分为红景天组及实验对照组,观察红景天灌胃处理对荷瘤小鼠肿瘤生长的作用,计算两组肿瘤生长抑制率.结果:红景天醇提取物抑制T241细胞增殖呈浓度依赖性,且浓度在在50 μg/ml至250 μg/ml之间时实验组与对照组相比细胞存活率没有显著差异.荷瘤小鼠在红景天灌胃21 d后,与对照组相比,红景天组抑瘤率达到了70.9%.结论:红景天在体内外实验均能有效抑制T241纤维肉瘤细胞的增殖,且未发现明显细胞毒作用.     

扶正抑瘤方醇提物对人肺癌A549细胞增殖和调亡的影响

目的:探讨扶正抑瘤方醇提物对人肺癌A549细胞增殖抑制和诱导调亡的作用。方法:将人肺癌A549细胞在体外加入不同浓度的扶正抑瘤方醇提物72小时后,采用CCK8法检测该方的增殖抑制作用,以Annexin V-EGFP标记法,通过流式细胞术检测该方对人肺癌A549细胞凋亡的影响。结果:扶正抑瘤方醇提物能抑制人肺癌A549细胞的增殖,与浓度相关,与空白对照组比较有明显差异(P0.05);显微镜下可见到明显的凋亡细胞,流式细胞检测结果提示随着浓度的增加,细胞凋亡率增加。结论:扶正抑瘤方醇提物能显著抑制人肺癌A549细胞增殖,可能与诱导细胞凋亡有关。