健脾清热化瘀药对胃溃疡大鼠表皮生长因子及其受体表达的影响

目的通过观察健脾清热化瘀药对血清和胃黏膜组织表皮生长因子（EGF）含量及其受体（EGFR）表达的影响,探讨不同中药治法对实验性胃溃疡愈合质量的影响及其作用机制。方法采用冰乙酸注射法制备大鼠胃溃疡模型,随机分为模型组、雷尼替丁组（西药组）、健脾中药组（中药A组）、清热中药组（中药B组）、化瘀中药组（中药C组）和健脾清热化瘀中药组（中药D组）,并设立正常对照组（空白组）。在光镜下观察溃疡指数（UI）、再生黏膜厚度及黏膜肌层缺损宽度,应用ELISA法检测血清及胃黏膜EGF含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR的表达。结果健脾、清热、化瘀中药及其合方都能使再生黏膜厚度增加,溃疡指数及黏膜肌层缺损宽度减少,与模型纽比较差异有统计学意义（P〈0．01）,中药D组疗效明显优于西药组（P〈0．05或P〈0．01）。中药各组及西药组血清及胃黏膜EGF含量较模型组及空白组明显升高（P〈0．01）,且可明显增强胃溃疡黏膜EGFR的表达（P〈0．05或P〈0．01）,尤以中药D组疗效最为显著（P〈0．01）。结论健脾、清热、化瘀中药可通过增加EGF和EGFR水平,促进胃黏膜上皮细胞增生及组织黏膜修复,提高溃疡愈合质量。     

表皮生长因子及其受体与胃溃疡愈合关系

表皮生长因子（EGF）在保护胃黏膜免受损伤因子破坏,维持胃肠黏膜完整性方面起着非常重要的作用;表皮生长因子受体（EGFR）在胃黏膜损伤修复中有EGFR的高度表达,对胃黏膜的保护及其损伤的修复有很重要的作用。EGF和EG-FR是评价消化性溃疡愈合质量的重要指标。研究结果证实,中医药通过影响EGF和EGFR的表达,在改善胃溃疡的消化性溃疡愈合质量（QOUH）,防止胃溃疡复发等方面疗效肯定。研究大多以实验为主,而规范的临床观察研究较少,今后应着眼于怎样应用于临床,多开展中医关于EGF、EGFR与胃溃疡愈合关系的临床研究,以期进一步评价其临床应用价值。     

益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的：观察益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响,探讨该法方药抑制血管生成治疗子宫肌瘤的作用机制。方法：通过去势+皮下注射苯甲酸雌二醇建立子宫肌瘤模型,并给予不同剂量益气消癥法中药进行治疗。采用免疫组化法检测子宫组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平;采用RT-PCR 检测子宫组织VEGFR1 mRNA、VEGFR2 mRNA 表达。并对以上指标进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,模型组豚鼠子宫肌组织MVD、VEGF、VEGFR 表达显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,中药各剂量组均有不同程度的降低,其中以高剂量组最为明显,说明益气消癥法高剂量中药组可以显著抑制MVD、VEGF 及其受体的蛋白表达。结论：益气消癥法通过抑制血管生成进而抗肌瘤细胞增殖,这可能是该法治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

益气消瘢法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的：观察益气消瘾法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠血管内皮生长因子及其受体蛋白表达的影响,探讨该法方药抑制血管生成治疗子宫肌瘤的作用机制。方法：通过去势＋皮下注射苯甲酸雌二醇建立子宫肌瘤模型,并给予不同剂量益气消瘸法中药进行治疗。采用免疫组化法检测子宫组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平;采用RT-PCR检测子宫组织VEGFR1 mRNA、VEGFR2 mRNA表达。并对以上指标进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,模型组豚鼠子宫肌组织MVD、VEGF、VEGFR表达显著升高（P〈0．01）;与模型组比较,中药各剂量组均有不同程度的降低,其中以高剂量组最为明显,说明益气消瘸法高剂量中药组可以显著抑制MVD、VEGF及其受体的蛋白表达。结论：益气消瘸法通过抑制血管生成进而抗肌瘤细胞增殖,这可能是该法治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

慢性胃炎患者不同舌象唾液表皮生长因子及其受体变化

慢性胃炎是一种常见病,表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)是目前公认的与胃肠黏膜再生、修复密切相关的生长因子,EGF在颌下腺中合成并分泌到唾液中,通过吞咽及全身的血液循环作用,表达对胃黏膜创伤愈合过程的系统效应。本文对慢性胃炎患者唾液EGF含量及舌苔脱落细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达与不同舌象之间的关系进行研究,以阐明慢性胃炎舌象变化与唾液EGF及舌苔脱落细胞EGFR之间的关系,现报道如下。     

健脾化瘀清热药对大鼠胃溃疡愈合质量及其表皮生长因子受体mRNA表达的影响

目的探讨健脾化瘀清热代表药(黄芪、丹参、黄连)对胃溃疡愈合质量(QOUH)的影响及作用机制。方法采用大鼠乙酸胃溃疡模型,观察黄芪、丹参、黄连对该模型QOUH的影响;原位分子杂交法检测表皮生长因子受体(EGFR) mRNA的表达。结果黄芪、丹参、黄连均能改善胃黏膜组织的损伤,黄芪、丹参能增强溃疡周围组织EGFR mRNA的表达。结论健脾化瘀清热药提高QOUH、增强溃疡瘢痕处EGFR mRNA的表达可能是健脾化瘀药的作用机制之一。     

表皮生长因子受体及其信号转导通路与胃粘膜损伤修复研究

表皮生长因子受体(EGFR)属于细胞表面酪氨酸蛋白激酶受体家族,EGFR的上调性表达可见于胃粘膜损伤的修复过程中,并与胃粘膜细胞的分裂增殖和腺体的重建以及溃疡的愈合密切相关。其效应是在特异配体的刺激下,EGFR通过激活IP3/Ca2 和DG/PKC双信号系统以及Ras途径实现的,对EGFR信号转导通路的深入研究将更加充分阐明胃粘膜损伤修复的分子机理,从而为胃粘膜损伤疾病的防治提供新的途径。     

胃粘膜表皮生长因子受体在胃溃疡愈合中的表达

目的 探讨人胃溃疡愈合过程中表皮生长因子受体(EGFR)表达的变化及其作用。方法 采用免疫组化方法，对正常胃粘膜(8例)、胃溃疡活动期(GA组10例)、愈合期(GH组10)例)、瘢痕期(GS组10例)组织的EGFR的表达进行定位观察和图像分析。结果GA组胃粘膜GEFR蛋白质和mRNA的表达均较正常时增加，GH及GS组更加明显。结论 在人胃溃疡愈合过程中，胃粘膜EGFR的表达由弱到强。     

艾灸对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体的影响

目的:观察艾灸对应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)与表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨艾灸修复胃黏膜损伤的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只。束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸组选取"足三里""中脘""脾俞""胃俞"行艾灸预处理8d。酶联免疫法检测胃黏膜组织中EGF、TGF-α的含量,免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜TGF-α的含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:预先艾灸"足三里""中脘""脾俞""胃俞"可上调应激性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜EGF、TGF-α的含量及EGFR表达,可能与其对胃黏膜的保护作用有关。     

普胃丸对慢性胃溃疡大鼠胃组织中EGF和EGFR蛋白表达的影响

目的:考察普胃丸(Puwei Pill,PWP)对慢性胃溃疡(chronic gastric ulcer,CGU)大鼠胃组织中促增生因子表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分为5组,即正常组、假手术组、模型组,PWP组和奥美拉唑肠浴片(OMLZ)组,用醋酸烧灼法建立大鼠CGU模型,通过灌注给药,于16 d后处死大鼠,然后分别采用免疫组化法和Western blot法,观察PWP对胃组织中EGF和EGFR蛋白表达的影响,考察PWP抗CGU的促黏膜增生机制。结果:与模型组比较,PWP与OMLZ组EGF和EGFR的平均阳性密度均显著增加(P<0.01或P<0.05),EGF和EGFR蛋白表达均显著提高(P<0.01或P<0.05),PWP可明显增加胃组织中EGF和EGFR的蛋白表达。结论:PWP通过促进胃组织中EGF和EGFR的蛋白表达来发挥抗CGU的作用。     

抗表皮生长因子受体的单链抗体ER(Fv)的构建及其抗肿瘤活性研究

 目的 利用大肠杆菌表达抗表皮生长因子受体（EGFR）的单链抗体并对其抗肿瘤活性进行研究。方法 构建含有抗EGFR单链抗体基因片段的重组质粒,IPTG诱导大肠杆菌表达单链抗体ER(Fv),用Ni离子亲和柱纯化单链抗体。ELISA测定ER(Fv)与纯EGFR抗原的结合能力;流式细胞术分析ER(Fv)与肿瘤细胞的结合;MTT法检测ER(Fv)对肿瘤细胞体外增殖的影响;动物试验测定ER(Fv)的体内抑瘤效果。结果 应用基因工程菌表达带有组氨酸标签肽 （His-tag） 的单链抗体ER(Fv),相对分子质量约为27×103,主要以包涵体形式存在,收获量约为10 mg·L-1。ELISA测定ER(Fv)与纯EGFR抗原的亲和常数为4.0×107 L·mol-1。单链抗体能与肿瘤细胞表面的EGFR发生特异性结合,其与3种EGFR高表达肿瘤细胞的解离常数皆为10-7 mol·L-1。细胞增殖实验显示,单链抗体可抑制EGFR高表达肿瘤细胞的增殖。体内抑瘤实验表明,单链抗体对人鳞状上皮癌A431裸鼠移植瘤具有中度的生长抑制作用,5,10和20 mg·kg-1 3个剂量组35 d的抑瘤率分别为43.9%、46.7%和54.8%,与对照组相比存在显著差异。结论 成功地表达了抗EGFR单链抗体ER(Fv),其对肿瘤细胞具有良好的亲和力和一定的生长抑制作用,为研制靶向EGFR的抗体药物提供基础。     

以人表皮生长因子受体2为靶点的强化融合蛋白LDP-Hr-AE的构建及抗肿瘤活性研究

 目的 制备一种以人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2, HER2）为靶点的由抗体重链超变区多肽与力达霉素组成的强化融合蛋白LDP-Hr-AE,并初步探讨其抗肿瘤活性。方法 通过聚合酶链式反应扩增出抗人表皮生长因子受体2抗体C6.5重链CDR3区的20个氨基酸残基基因,将其与力达霉素辅基蛋白基因连接构建出融合蛋白基因ldp-Hr,转化至大肠杆菌中进行诱导表达。融合蛋白LDP-Hr采用HisTrap Ni²⁺亲和色谱柱进行分离纯化,高效液相色谱法检测其纯度。细胞免疫荧光法和基于流式细胞术的亲和实验分析融合蛋白与肿瘤细胞的结合活性。纯化的LDP-Hr蛋白与力达霉素发色团在体外进行组装,构建出强化融合蛋白LDP-Hr-AE。采用MTT法检测强化融合蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性,Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞术的方法检测LDP-Hr-AE蛋白对细胞凋亡的影响。结果 成功构建并表达了融合蛋白LDP-Hr,目的蛋白以可溶形式分泌至大肠杆菌培养液和周质腔中,产量可达每升发酵液40 mg活性蛋白,纯化后的蛋白经高效液相色谱法检测纯度为97.4%。细胞免疫荧光实验和基于流式细胞术的亲和实验检测结果均显示LDP-Hr蛋白与HER2高表达的肿瘤细胞系（如SK-BR-3和SK-OV-3细胞）都有很强的结合活性。LDP-Hr蛋白与力达霉素发色团在体外组装后经高效液相色谱法检测350 nm处出现特定吸收峰,表明强化融合蛋白LDP-Hr-AE构建成功。采用MTT法检测了强化融合蛋白的体外杀伤活性,结果显示,LDP-Hr-AE对肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,且其杀伤活性要高于力达霉素。细胞凋亡检测结果也表明LDP-Hr-AE在极低的浓度下（如0.1 nmol·L^-1）即可强烈的诱导细胞发生凋亡,且凋亡的比率随着蛋白浓度的升高而增加。结论 本实验制备的强化融合蛋白LDP-Hr-AE可以特异的与人表皮生长因子受体2结合,对肿瘤细胞具有强烈的杀伤活性和诱导凋亡能力,具有发展为抗肿瘤靶向药物的潜能。     

活血消瘤汤结合亮丙瑞林治疗子宫肌瘤疗效及对微血管密度的影响

目的评价活血消瘤汤结合亮丙瑞林治疗子宫肌瘤的临床疗效及对微血管密度的影响。方法选择130子宫肌瘤(气滞血瘀症)患者为研究对象,根据Excel随机表格法将患者分为研究组和对照组,每组65例。对照组患者采用醋酸亮丙瑞林微球治疗,研究组在采用醋酸亮丙瑞林微球治疗的基础上,口服活血消瘤汤治疗。两组均治疗3个月。比较两组治疗疗效,治疗前后临床症状积分,治疗前后平均肿瘤体积和子宫体积,治疗前后性激素水平,治疗前后子宫内膜COX-2、VEGF和微血管密度。结果研究结果显示,治疗组治疗总有效率为90.77%高于对照组治疗总有效率的76.92%(P<0.05);研究组治疗后中医症候积分低于对照组(P<0.05);研究组治疗后平均肿瘤体积和平均子宫体积小于对照组(P<0.05);研究组治疗后性激素水平E2、P、FSH和LH水平低于对照组(P<0.05);研究组治疗后子宫内膜COX-2、VEGF和微血管密度表达低于对照组(P<0.05)。结论活血消瘤汤治疗子宫肌瘤疗效确切,能够有效的缓解子宫肌瘤的临床症状,缩小子宫体积和肿瘤体积,降低雌、孕激素,降低子宫内膜COX-2、VEGF和微血管密度表达,和亮丙瑞林联合应用,标本兼职,临床治疗效果得以有效提升。     

桃红消癥散对子宫肌瘤模型大鼠雌、孕激素受体表达的影响

目的:研究桃红消癓散对子宫肌瘤模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤动物模型,通过放免法检测血清雌孕激素水平,观察子宫组织病理改变,免疫组化法观察大鼠子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结果:模型大鼠较正常大鼠子宫明显增大,血清性激素水平升高,子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达明显高于正常大鼠。与模型对照组比较,桃红消癓散可降低血清性激素水平,改善子宫组织结构,抑制平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结论:桃红消癓散有治疗子宫肌瘤的作用,其机制可能与调节血中雌孕激素水平,抑制子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达有关。     

血清表皮生长因子对进展期寻常型银屑病的影响及清热凉血解毒中药对其调控作用

目的 探讨血清表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）对进展期寻常型银屑病病情的影响和清热凉血解毒中药对其调控作用。 方法 选择31例进展期寻常型银屑病患者（治疗组）和17名健康人作为对照组,采用 ELISA法检测血清EGF水平,皮损面积和严重性指数（psoriasis area and severity index, PASI）评定病情严重程度,观察口服清热凉血解毒颗粒10周后患者EGF水平和病情的变化。 结果 治疗组治疗前EGF值为（175.35±179.86）ng/L,显著高于对照组（72.05±63.01） ng/L,差异有统计学意义（t=－2.888, P=0.006),治疗后下降至（121.67±94.74）ng/L,与治疗前及对照组比较差异均有统计学意义（t=2.155,P=0.04;t=－2.146,P =0.037)。治疗前PASI平均为(9.65±5.82)分,较治疗后(5.74±4.69)分差异有统计学意义(t=7.740,P<0.01)。对EGF与PASI进行直线回归分析,两者无相关性（r=0.030,P＝0.872; r=0.050,P=0.793）。结论 清热凉血解毒中药可降低患者EGF水平,这可能是这类中药可改善银屑病病情的作用机制之一。     

中医药治疗表皮生长因子受体抑制剂相关皮疹的系统性评价

目的:评价中医药治疗表皮生长因子受体抑制剂(EGFRIs)相关皮疹的疗效及安全性。方法:在外文Web of Science、PubMed、Cochrane Library和维普数据库(VIP)、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库中检索从创建以来至2018年3月关于中医药治疗EGFRIs相关皮疹的随机对照试验,并手工检索补充相应文献。由研究人员对文献进行筛选和数据提取,并用Rev Man5.3进行异质性检验、敏感性分析和Meta分析。结果:纳入21项研究,共1394例肿瘤患者,Meta分析结果显示中医药治疗EGFRIs相关皮疹的有效率、减轻皮肤瘙痒的有效率、中医症状缓解的有效率明显优于对照组(P<0.01),且中医药观察组的患者生命质量明显改善,极少出现治疗相关的不良反应。实体瘤治疗总有效率与未予中医药观察组相当(P>0.05)。结论:中医药治疗可明显缓解EGFRIs相关皮疹和瘙痒,明显缓解中医证候,提高患者的生命质量,且不影响EGFRI的抗肿瘤疗效。     

益气消癥方治疗子宫肌瘤的验案探析

子宫肌瘤(Uterine leiomyoma,UL)是女性最多发的生殖肿瘤。UL引发的各种临床问题已然成为患者整体生活质量下降的主要原因。作者有幸跟随王新斌老师临诊学习,发现老师擅用中医中药医治UL,屡奏效验,感悟深刻。文章根据门诊真实病例,阐述王新斌老师利用益气消癥方治疗UL的经验,探析具体治疗,以期丰富临床诊治。