藤茶抑制N-亚硝胺的生成及诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡作用

目的研究藤茶提取物及其主要活性物质二氢杨梅素的抗肿瘤作用。方法采用体外体系,研究藤茶对致癌物亚硝酸盐的清除作用和对N-亚硝胺的生成抑制作用,并结合细胞实验评价藤茶对PC-3前列腺癌细胞增殖的抑制用。结果藤茶提取物和二氢杨梅素在能够有效清除亚硝酸盐,半抑制浓度分别为12.2、11.1μg/m L,同时也能抑制亚硝胺的生成,半抑制浓度分别为48.6、15.1μg/m L。细胞实验中,藤茶提取物及其主要活性物质二氢杨梅素可以抑制PC-3前列腺癌细胞的增殖,呈剂量依赖关系。细胞周期实验结果表明,藤茶提取物及二氢杨梅素能够将细胞周期阻滞于S期和G2/M。结论藤茶提取物和二氢杨梅素可以清除亚硝酸盐,抑制N-亚硝胺的生成,诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡。     

二氢杨梅素药理及药物相互作用研究进展

二氢杨梅素(dihydromyricetin)是藤茶中广泛存在的一种黄酮类化合物,具有抗炎、抑菌、抗肿瘤、调血脂、降血糖、保肝护肝等多种药理活性。近期研究发现二氢杨梅素具有神经保护作用,可改善多种神经系统病变,包括阿尔茨海默病、帕金森病、成瘾和抑郁症等。综述近10年二氢杨梅素药理作用研究进展,并从药物代谢和药效学方面阐述二氢杨梅素在神经药物和化疗药物联合应用方面的基础和前景,为二氢杨梅素的深入研究以及药物开发利用提供科学依据。     

二氢杨梅素—锌配合物的合成及其体外抗肿瘤作用

目的:合成二氢杨梅素金属锌配合物,并对其体外抗肿瘤活性进行初步研究。方法:以二氢杨梅素为配体合成其金属配合物,利用紫外光谱﹑红外光谱对配合物进行表征,采用MTT,RT-PCR方法对其体外抗肿瘤活性进行考察。结果:二氢杨梅素金属锌配合物成功合成;MTT显示细胞凋亡率,随配合物作用时间,浓度增加而增加;RT-PCR显示caspase-3随配合物浓度增加而上调,bcl-2基因表达随配合物浓度增加而下调。结论:配合物显示了较强的抗肿瘤活性,有关配合物的研究有待进一步深入。     

苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用研究进展

苦参碱和氧化苦参碱具有多方面药理活性。目前国内外关于苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究表明,二者通过抑制肿瘤细胞DNA的合成、影响肿瘤细胞的正常周期来抑制肿瘤细胞的增殖;通过影响与肿瘤细胞相关基因的表达、抑制相关酶的活性等诱导肿瘤细胞发生凋亡。因此,苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究受到了极大的关注。就近年来对苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究进行简要概述,综述其对各种癌细胞的抗肿瘤作用机制。     

枳椇子乙酸乙酯部位抗肿瘤活性成分筛选

目的:研究筛选枳椇子Hovenia acerba Lindl.乙酸乙酯部位中具有抗肿瘤活性的化合物。方法:利用乙酸乙酯萃取枳椇子60%乙醇水提取物,并采用300～400目硅胶与制备级HPLC对其萃取物进行分离纯化,最终得到4个化合物,通过MTT法筛选发现其中ZJZ-Z2具有最优的活性,通过ESI-MS、~1H-NMR和~(13)C-NMR检测,并通过与相关文献对比,初步推测该化合物为二氢杨梅素(dihydromyricelin),体内实验证明ZJZ-Z2具有体内抗肿瘤活性。结果:通过MTT法分别对枳椇子乙酸乙酯部位硅胶分离得到的12个组分进行测定,发现其中第4组分对肿瘤细胞Huh-7、OS-RC-2的半数抑制率(IC_(50))分别为70.4、69.8μg·mL~(-1);进一步分离纯化得到的ZJZ-Z2对肿瘤细胞OS-RC-2、Huh-7、HCT-116、CFPAC-1的IC_(50)分别为33.8、63.9、46.8、55.1μg·mL~(-1),且对H22荷瘤小鼠模型表现出一定的抑瘤作用。结论:枳椇子乙酸乙酯部位具有抗肿瘤活性,其主要的抗肿瘤活性成分为二氢杨梅素。     

超滤亲和液质联用技术筛选显齿蛇葡萄叶中酪氨酸酶抑制剂

目的 采用超滤亲和-液质联用技术（ultra-filtration affinity-liquid chromatography-mass spectrometry,UF-LC-MS）结合体外酶活性实验,筛选药茶两用植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata叶（藤茶）中的酪氨酸酶抑制剂。方法 通过体外酶活实验发现藤茶具有很好的酪氨酸酶抑制活性,采用UF-LC-MS筛选并鉴定藤茶中1个主要组分对酪氨酸酶的活性具有抑制作用,并鉴定为二氢杨梅素。进一步通过体外荧光光谱、圆二色谱和分子对接技术研究了二氢杨梅素对酪氨酸酶的分子作用机制。结果 发现二氢杨梅素对酪氨酸酶具有较高的抑制作用,对单酚酶及双酚酶的半数抑制浓度（median inhibition concentration,IC₅₀）分别为37.73、18.87 μg/mL。分子模拟结果显示,二氢杨梅素可以进入酪氨酸酶的活性中心,与氨基酸残基形成4个氢键,改变酶活性中心的构象,从而导致酪氨酸酶催化活性下降。此外,二氢杨梅素能明显抑制B16黑色瘤细胞的增殖,并且显著降低黑色素合成。结论 为利用UF-LC-MS和分子对接技术筛选药用植物中酪氨酸酶抑制剂提供了参考,也为后续研究和开发藤茶及二氢杨梅素用于治疗皮肤色素沉着性疾病提供理论基础。     

二氢杨梅素抗血栓形成的作用研究

目的:探讨二氢杨梅素的抗血栓作用。方法:采用大鼠静脉血栓形成造模法,颈总动脉-颈外静脉血流旁路法,小鼠静脉注射胶原蛋白-肾上腺素造成血栓形成等模型。结果:二氢杨梅素能明显减轻静脉血栓湿重和干重,抑制大鼠颈总动脉-颈外静脉血流旁路血栓形成,提高胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠瘫痪的恢复率。结论:二氢杨梅素具有明显的抗血栓作用。     

南蛇藤抗肿瘤作用的研究进展

国内外研究表明,南蛇藤具有较好的抗肿瘤活性,其主要作用为抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿痛血管生成、逆转肿瘤多药耐药等.对其抗肿瘤药效学物质基础和抗瘤机制的深入研究具有重要意义.     

南蛇藤抗肿瘤作用的研究进展

国内外研究表明,南蛇藤具有较好的抗肿瘤活性,其主要作用为抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿痛血管生成、逆转肿瘤多药耐药等.对其抗肿瘤药效学物质基础和抗瘤机制的深入研究具有重要意义.     

五环三萜类化合物抗肿瘤活性及其机制研究进展

五环三萜类化合物是一类广泛存在于天然植物中的三萜类化合物,大多具有抗肿瘤活性.其抗肿瘤作用机制主要为抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,抗血管生成和抗侵袭.本文将主要从五环三萜类化合物的抗肿瘤活性和抗肿瘤作用机制方面的研究进展作一综述.     

四君子汤对荷瘤小鼠抑瘤和诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨四君子汤对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 ,阐明该方抑瘤作用的可能机制。方法 :建立荷瘤小鼠(SRS- 82瘤株 )动物模型 ,用四君子汤煎剂灌胃。连续处理 15 d后 ,剥离瘤块称重并计算抑瘤率 ,在电镜下观察肿瘤细胞形态 ,并提取肿瘤细胞 DNA做琼脂糖凝胶电泳。结果 :四君子汤组与空白对照组比较 ,瘤重显著减轻 (P<0 .0 1)。电镜观察 ,四君子汤组的肿瘤切片大部分呈现坏死细胞的改变 ,未见有大量细胞发生凋亡特征性改变。琼脂糖凝胶电泳 ,四君子汤组电泳带未见到细胞发生凋亡的特征性 DNA梯状条带。结论 :四君子汤可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 ,证明有明显的抑瘤作用。该方在体内没有诱导肿瘤细胞凋亡的作用 ,可能通过间接作用而发挥治疗肿瘤的效果     

显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量测定

目的 :测定显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量。方法 :分光光度法测定总黄酮含量 ,薄层扫描法测定二氢杨梅素含量。结果 :总黄酮含量 43.4%～44.0 % ,RSD1.56 %～ 2.62% ;二氢杨梅素含量37.4%～38.5 % ,RSD1.85%～2.65%。结论 :显齿蛇葡萄总黄酮和二氢杨梅素的含量极高 ,具有重要的开发利用价值。     

响应面分析法优化藤茶中二氢杨梅素的提取工艺

目的:优选藤茶中二氢杨梅素的提取工艺.方法:以二氢杨梅素提取率为考察指标,在单因素试验基础上,选取乙醇体积分数、料液比、提取时间为自变量,二氢杨梅素提取率为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法优选二氢杨梅素的提取工艺条件.结果:最佳提取工艺条件为17倍量81％乙醇回流提取95 min.在此条件下,二氢杨梅素提取率可达9.58％,与理论值9.72％仅相差0.14％.结论:采用响应面法优选的二氢杨梅素提取工艺是可行的.     

广西藤茶不同提取物中2种黄酮类成分的含量测定

目的:测定藤茶不同提取物中2种主要活性成分双氢杨梅树皮素及杨梅树皮素的含量,为其研究开发提供科学依据。方法:采用反相高效液相色谱法。十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)柱,流动相甲醇-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长0~10 min,291 nm,10~30 min,375 nm。结果:藤茶嫩茎叶提取物中双氢杨梅树皮素含量高于地上部分提取物中的含量;藤茶嫩茎叶经炮制后其提取物中双氢杨梅树皮素的含量有较大提高;但随着煎煮时间延长,提取物中双氢杨梅树皮素的含量减少。结论:炮制及提取时间对藤茶提取物中活性成分的含量有较大影响。     

Anti-tumor activity and relative mechanism of ethanolic extract of Marsdenia tenacissima (Asclepiadaceae) against human hematologic neoplasm in vitro and in vivo

Ethnopharmacological relevance

Marsdenia tenacissima, a traditional Chinese medicinal herb, endemic to Yunnan Province is widely used to treat cough, asthma, expectorant, esophageal cancer, gastric cancer, lung cancer, and hepatocellular carcinoma. The aim of this study was to evaluate in vitro and in vivo anti-hematologic neoplasm potential of the ethanolic extract of this herb (crude ethanolic extract of Marsdenia tenacissima, CME) and by using different assays to elucidate its possible mechanism of action.

Materials and methods

The cytotoxicity of CME on tumor cells and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was evaluated using MTT and apoptosis assays. We also tested the effect of CME on colony formation inhibition and cell cycle distribution of tumor cells. The protein expressions of Cyclin D1, Bax, Bcl-2, caspase-3 and caspase-9 were detected through Western blotting. In vivo anti-tumor effect was evaluated by measuring tumor volume changes, measuring tumor weight, evaluation of tumor microvessel density (MVD) and TUNEL staining by using immunohistochemistry staining in tumor models of nude mice.

Results

Marsdenia tenacissima ethanolic extract exhibited effects of proliferation inhibition and induction of apoptosis on human hematologic neoplasm tumor cells in vitro, as well as hematologic neoplasm growth in vivo.

Conclusion

This study clearly indicated that the ethanolic extract of Marsdenia tenacissima displayed strong anti-tumor effects against hematologic neoplasm cells and could induce tumor cells apoptosis in vitro and in vivo, and also had a significant anti-angiogenic effect in vivo against tumor cell apoptosis. Its multi-mechanism of action might be associated with the cell cycle (G0/G1) arrest, induction of apoptosis through up-regulation protein expressions of Bax, caspase-9 and caspase-3 genes and down-regulation of the expressions of Cyclin D1 and Bcl-2 genes, a decrease in tumor microvessel density and an increase of TUNEL-positive cells in vivo. These findings provided the molecular theoretical basis of clinical application.     

二氢杨梅素的生物活性研究进展

文章利用较多文献资料综述了二氢杨梅素抗氧化、抗菌消炎、护肝、调节血糖血脂及对平滑肌的作用,较为系统地阐述了其生物活性的研究进展。     

灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

[目的]通过实验研究,探讨灵芪胶囊对小鼠肝细胞瘤(S180)荷瘤小鼠的抑瘤作用。[方法]采用体内实验法,于无菌条件下抽取传代7d、生长良好的S180荷瘤小鼠腹水,用无菌生理盐水1∶3稀释(约含瘤细胞2×103/L),按0.2mL/只接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制成肿瘤模型,经口灌胃灵芪胶囊11d后,取瘤体称质量,计算抑瘤率;采用苏木-伊红(HE)染色,于光镜下观察各组肿瘤组织细胞形态学变化。[结果]灵芪胶囊各组与模型组相比肿瘤体积缩小,灵芪胶囊高、中、低剂量对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为22.18%、40.18%、36.40%;实验形态学结果表明,模型组、阳性对照组、灵芪胶囊组之间有一定差异,灵芪胶囊能在一定程度上改善肿瘤组织形态,从而为中药抗癌作用从微观方面提供了有力证据。[结论]灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠有明显抑瘤作用。     

枳椇子品质与产地和外观性状相关性分析

应用HPLC和紫外分光光度计测定了26份不同产地的枳椇子Hovenia acerba中二氢杨梅素和总黄酮的含量,并进一步探讨了枳椇子品质指标二氢杨梅素和总黄酮与产地、外观性状的相关性。结果表明,不同来源的枳椇子品质差异较大,二氢杨梅素质量分数为0.41~9.81 mg·g~(-1);总黄酮质量分数为5.52~21.98 mg·g~(-1)。聚类分析表明,枳椇子品质与局部产区来源有相关性,鄂北皖南的江汉平原地区枳椇子质量相对稳定,区域内枳椇子样品质量较优。相关性分析表明,千粒重和红黑籽粒的比例与二氢杨梅素的含量极显著正相关;而总黄酮含量与千粒重以及红黑籽粒比例无相关关系,千粒重和红黑籽粒的比例可做为初步判定枳椇子品质优劣的指标。另外,二氢杨梅素含量与总黄酮含量无相关关系,考察枳椇子品质时应兼顾两者。     

蒲葵子抗肿瘤活性部位筛选及抗血管生成作用

目的：筛选蒲葵子抗肿瘤作用的活性部位,探讨蒲葵子抗血管生成的作用机制。方法：采用MTT法检测蒲葵子醇提物各分离部位对肿瘤细胞株增殖的影响,ELISA法检测对肿瘤细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）水平的影响。以活性部位作用于VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）,RT-PCR和Western Blotting方法分析内皮细胞Flk-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果：蒲葵子醇提物乙酸乙酯部位可选择性抑制结肠癌细胞株HT-29和膀胱癌细胞株T24肿瘤细胞的生长,其抑制率可分别达74.66%和86.52%,并可显著降低各肿瘤细胞株分泌VEGF水平。石油醚部位对HT-29和T24生长也有一定的抑制作用,其最高抑制率分别为43.80%和38.67%,并可降低各肿瘤细胞分泌VEGF水平,但作用强度均不及乙酸乙酯部位。水和正丁醇部位未表现抗肿瘤活性。对VEGF诱导内皮细胞表达FlK mRNA和蛋白,乙酸乙酯部位表现出明显的抑制作用。结论：蒲葵子醇提物乙酸乙酯分离部位有较好的抗肿瘤作用,是抗肿瘤作用的主要活性部位,其作用机制可能与降低肿瘤细胞分泌VEGF,抑制VEGF诱导内皮细胞表达Flk-1 mRNA和蛋白有关。     

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??OBJECTIVE To study the anti-fatigue effect of dihydromyricetin on mice and its anti-fatigue mechanism. METHODS Forty male mice were randomly divided into blank control group and dihydromyricetin dose groups (40, 20, 10 mg??kg^-1), with continual intragastric administration for 28 d. Through the weight loading swimming experiment of mice, the swimming time of mice were recorded. On the twenty-nine day, mice swam 90 min without loading, and then the activities of BUN, BLA in the serum of mice and biochemical indicators of SOD, GSH-Px, MDA and hepatic glycogen etc were respectively determined. The expression of mRNA of PGC-1?? and PPAR?? were detected by real-time PCR. RESULTS Comparing with the blank control group, dihydromyricetin dose group can prolong the loaded-swimming time of mice, increase the reserve of liver glycogen in the body, reduce levels of BLA, BUN and MDA, and significantly increased the activities of SOD and GSH-Px. RT-PCR RESULTS showed that the expression levels of PGC-1?? and PPAR?? mRNA in skeletal muscle of mice in the dihydromyricetin dose group were significantly increased, and all had statistical significance. CONCLUSION Dihydromyricetin can accelerate clearance of free radical, enhance mice antioxidant capacity and improve exercise ability in fatigued mice thus play the anti-fatigue role, exercise-induced fatigue is correlated with PGC-1??.