益气活血中药复方对CVB_3大鼠心肌细胞感染模型核糖体蛋白L27a表达的影响

目的:研究益气活血中药复方对CVB3大鼠心肌细胞感染模型核糖体蛋白L27a(ribosomal protein L27a)表达的作用机制,进一步证实益气活血中药复方是治疗CVB3病毒性心肌炎的有效方剂。方法:本实验用新生2～3天大鼠心肌细胞建立柯萨奇病毒B3(CVB3)感染模型,通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆了受CVB3攻击的宿主细胞中被中药(益气活血中药复方)调控的基因。结果:核糖体蛋白L27a在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论:益气活血中药复方能够影响受CVB3攻击的宿主细胞核糖体蛋白L27a的表达,有效保护心肌、阻断病程进度,实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方对CVB_3大鼠心肌细胞感染模型细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ表达的影响

目的:研究益气活血中药复方调控CVB3大鼠心肌细胞感染模型细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochromeC oxidase subunitⅠ)及细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(cytochrome C oxidase subunitⅡ)表达的作用机制。方法:本实验用Wistar大鼠心肌细胞建立柯萨奇病毒B3(CVB3)感染模型,通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆受CVB3攻击的宿主细胞中被中药(益气活血中药复方)调控的基因。结果:细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论:益气活血中药复方能够影响受CVB3攻击的宿主细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ的表达,有效保护心肌,阻断病程进度,实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方影响CVB_3病毒性心肌炎模型乳鼠心肌细胞MCP-1、Rps4基因表达的实验研究

目的:观察益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞small inducible cytokine A2(MCP-1/CCL2)、ribosomal protein S4基因表达的影响,以期从基因水平揭示益气活血中药复方治疗CVB3心肌炎的作用机制,进一步证实益气活血中药复方是治疗CVB3病毒性心肌炎的有效方剂。方法:通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆了受CVB3攻击的宿主细胞中被中药调控的基因,并通过荧光rt-PCR对上述结果进行验证。结果:益气活血中药复方能够上调CVB3病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞small inducible cytokine A2(MCP-1/CCL2)、ribosomal protein S4基因的表达。结论:益气活血中药复方可能通过调节small inducible cytokine A2(MCP-1/CCL2)、ribosomal protein S4基因的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞actin、Cx43表达及GJIC功能的影响

目的观察益气活血中药复方对柯萨奇病毒B组3型(Coxsackie virus B3,CVB3)病毒性心肌炎心肌细胞间缝隙连接结构及通讯功能的影响。方法以免疫组化法检测正常组、病毒组、益气活血中药复方组心肌细胞肌动蛋白(actin)及连接蛋白(connexin43,Cx43)表达;,并以激光扫描共聚焦显微镜法检测各组心肌细胞荧光漂白恢复率。结果益气活血中药复方能上调CVB3病毒性心肌炎心肌细胞actin及Cx43表达,能显著改善细胞间缝隙连接通讯(GJIC)功能。结论益气活血中药复方具有对抗CVB3致心肌细胞骨架蛋白损伤,修复CVB3病毒性心肌炎心肌细胞间缝隙连接通道结构,改善CVB3攻击后心肌细胞GJIC功能的作用。     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型NADH脱氢酶亚基1和2表达的影响

目的:研究益气活血中药复方对CVB乳鼠心肌细胞感染模型NADH脱氢酶亚基1和2表达的影响,以期从基因水平揭示益气活血中药复方治疗CVB3心肌炎的作用机制,进一步证实益气活血中药复方是治疗CVB3病毒性心肌炎的有效方剂。方法:通过改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离大鼠心肌细胞病毒组和益气活血中药复方给药组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证。结果:SSH结果显示中药组中NADH脱氢酶亚基1和NADH脱氢酶亚基2基因的表达均比病毒组中低,这一结果通过荧光RT-PCR得到验证。结论:益气活血法能够通过调节NADH脱氢酶亚基1和2的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的。     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51表达的影响

目的 研究益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51(mitochondrial ribosomal protein L51,MRPL51)表达的影响,以期从基因水平揭示CVB3心肌炎的发病机制及益气活血中药复方治疗病毒性心肌炎的作用机制,并进一步证实益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的有效性.方法 通过乳鼠心肌细胞培养,建立病毒组和益气活血中药复方组心肌细胞模型,以改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离两组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证.结果 SSH结果显示,MRPL51基因在益气活血中药复方组为低表达,而在病毒组则呈高表达状态,荧光RT-PCR结果显示益气活血中药复方组中MRRPL51基因达到阈值的循环数(Ct)明显多于病毒组,提示MRPL51在病毒组中的表达较中药组中高.结论 MRPL5基因表达上调可能是CVB3致病毒性心肌炎机制之一;益气活血中药复方通过下调MRPL5基因的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的 .     

益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51表达的影响

目的 研究益气活血中药复方对CVB3乳鼠心肌细胞感染模型线粒体核糖体蛋白L51(mitochondrial ribosomal protein L51,MRPL51)表达的影响,以期从基因水平揭示CVB3心肌炎的发病机制及益气活血中药复方治疗病毒性心肌炎的作用机制,并进一步证实益气活血中药复方治疗CVB3病毒性心肌炎的有效性.方法 通过乳鼠心肌细胞培养,建立病毒组和益气活血中药复方组心肌细胞模型,以改良的抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),分离两组差异表达的基因,并通过荧光RT-PCR对上述结果进行验证.结果 SSH结果显示,MRPL51基因在益气活血中药复方组为低表达,而在病毒组则呈高表达状态,荧光RT-PCR结果显示益气活血中药复方组中MRRPL51基因达到阈值的循环数(Ct)明显多于病毒组,提示MRPL51在病毒组中的表达较中药组中高.结论 MRPL5基因表达上调可能是CVB3致病毒性心肌炎机制之一;益气活血中药复方通过下调MRPL5基因的表达而实现治疗病毒性心肌炎的目的 .     

狼疮方调节肾小球系膜细胞趋化因子表达的研究

目的探讨狼疮方调节干扰素-Y(IFN-Y)刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC)趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11表达的影响,分析其可能的调节机制,为中医治疗狼疮性肾炎奠定理论基础。方法随机将组织细胞培养的人肾小球系膜细胞分为空白对照组、IFN-Y刺激组及中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,给予1000U/ml的IFN-Y诱导HMC,采用Real-TimePCR荧光定量法,检测HMC趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11mRNA的表达水平及中药的调节,用酶联免疫吸附实验,检测细胞培养上清液中CXCL9、CXCL10和CXCL11的蛋白表达及中药的干预。结果经过狼疮方干预调节后,中药各组HMC的趋化因子mRNA相对表达量都有不同程度的下降,其中中药中剂量组与IFN-Y刺激组相比下降有显著性(P0.01);中药各组趋化因子的蛋白分泌量都有不同程度的下降,中药中剂量组与IFN-Y刺激组相比下降有显著性差异(P0.01)。结论 IFN-Y刺激HMC,可诱导趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11的表达增高,狼疮方可调节HMC趋化因子CXCL9、CXCL10和CXCL11的表达。     

益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响

目的观察益气活血中药复方对CVB3病毒性心肌炎心肌细胞损伤的影响。方法以体外细胞培养方法,建立CVB3病毒性心肌炎心肌细胞感染模型。将细胞分为正常组、病毒组、中药组。采用荧光探针Hoechst33258染色法检测心肌细胞凋亡;采用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞内钙离子浓度;采用SABC免疫组化法检测心肌细胞心肌肌钙蛋白（cTnI）表达;采用透射电镜检测各组心肌细胞超微结构。结果病毒组与正常组心肌细胞相比,细胞超微结构损伤严重,并可见明显的凋亡细胞核形态,而中药组心肌细胞形态及细胞器结构接近正常组,未见明显的凋亡细胞核形态;正常组心肌细胞cTnI呈阴性表达,病毒组cTnI呈强阳性表达,与正常组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,中药组cTnI呈弱阳性表达,与病毒组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;正常组心肌细胞经中药干预后,钙离子荧光强度无明显变化（P〉0.05）,而病毒组心肌细胞经中药干预后,钙离子平均荧光强度升高（P〈0.01）,与正常组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论益气活血中药复方可抑制CVB3感染后细胞凋亡发生,抑制cTnI蛋白表达,防御并减轻CVB3造成的心肌损伤,具有修复损伤心肌细胞超微结构、改善心肌细胞舒缩功能和血液动力学作用。     

雷公藤甲素对RA患者T-bet/GATA3及CXCL10/CXCR3表达的影响

[目的] 考察雷公藤甲素（TP）对类风湿关节炎（RA）患者外周血单个核细胞（PBMC）中转录因子T-bet/GATA3和趋化因子（CXCL）10及CXCL受体3（CXCR3）表达的影响。[方法] 使用L929细胞考察TP的细胞毒性,确定实验药物浓度。CCK-8法检测TP对RA患者PBMC细胞增殖活性的影响,流式细胞仪分析TP对PBMC中Th细胞亚群比例及CXCR3受体表达调节,Luminex技术检测RA患者PBMC分泌干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-17/IL-17A、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-4、IL-6、IL-10及CXCL10的表达水平。实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法分析T-bet、GATA3、CXCL10及CXCR3的mRNA表达水平。[结果] 当TP浓度<25 nmol/L,培养时间为48 h时,TP对L929没有显著的细胞毒性（P>0.05）。在此浓度范围内,当TP浓度为5 nmol/L时即表现出对PBMC细胞增殖具有显著抑制作用（P<0.05）。Th、Th1细胞亚群比例以及CXCR3受体表达均受到TP抑制（P<0.05）,但对Th2细胞亚群比例没有显著调节作用（P>0.05）。抗炎因子IL-4、IL-10,促炎因子IFN-γ、IL-6、TNF-α、IL-17/IL-17A,以及CXCL10表达均显著降低（P<0.05）。RT-qPCR结果显示,仅CXCL10表达显著降低,T-bet、GATA3以及CXCR3表达无显著变化（P>0.05）。[结论] TP对Th1细胞增殖及其相关细胞因子具有抑制作用,并且能显著降低CXCL10及CXCR3的表达,但未观察到对T-bet、GATA3表达的调节作用。     

益气活血利水不同配伍对慢性心衰大鼠ATl、ERK2影响的实验研究

目的：通过研究血管紧张素1型受体（ATl）及心肌细胞外信号调节激酶（ERK2）信号通路在慢性心衰中的作用,从分子生物学角度探讨中药对慢性心衰心室重构的影响,并进一步阐明其作用机理。方法：以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,对造模成功大鼠分为模型组、西药组、益气中药组、活血中药组、益气活血中药组和益气活血利水中药组,没有进行左冠脉结扎手术的假手术大鼠为正常组。利用实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法检测慢性心衰大鼠ATl、ERK2的变化情况。结果：慢性心衰动物模型组大鼠心肌ATl、ERK2表达明显升高,与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）;经过治疗,各用药组大鼠心肌组织ATl、ERK2表达明显降低,其中益气活血组、益气活血利水组中药与西药组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,且益气活血利水组疗效明显优于益气活血组（P〈0．01）。结论：证明益气、活血、利水中药复方可通过抑制心肌组织中ATl、ERK2的表达,抑制或逆转心室重构的过程,从而达到治疗慢性心衰的目的。     

膝骨关节炎近10年文献中内服方药功效和中医证型分析

目的：探讨膝骨关节炎近10年文献中内服方药功效和中医证型规律,为临床用药提供参考依据。方法：通过检索近10年中药内服治疗膝骨关节炎的临床文献,整理、归纳和分析膝骨关节炎的内服方剂功效和中医证型规律。结果：491篇有效文献中共有491个方剂,统计的方剂功效共有12个,总使用频次为1965次。所列的中医证型共有18个,总使用频次为2973次。结论：近10年来治疗膝骨关节炎主要是应用补法（补益肝肾、补益脾肾、强筋壮骨）,泻法（通络止痛、活血化瘀、活血行气、散寒除湿、祛风除湿）,补泻兼施法（益气活血、扶正驱邪）。现代膝骨关节炎的潜在中医分型是：虚证（肝肾亏虚型、肾虚髓亏型、脾肾亏虚型）,实证（寒湿痹阻型、气滞血瘀型、湿热壅盛型、筋脉淤滞型、风湿痹阻型）,虚实夹杂证（阳虚寒凝型、气虚湿阻型）。     

益气温阳中药干预对腹主动脉缩窄诱导的肾性高血压的影响

目的 观察益气温阳中药干预对腹主动脉缩窄诱导的肾性高血压大鼠的影响.方法 将清洁级雄性Wistar大鼠40只随机分出10只为假手术组,另30只腹主动脉缩窄术后随机分为模型组、中药组、缬沙坦组,每组10只.造模后8周开始药物干预,共干预16周.观察造模后各组大鼠的4、8、12、16、20、24周历时性左前肢血压,以及24周后肾功能情况.结果 （1）腹主动脉缩窄大鼠造模后4、8、12、16、20、24周左前肢动脉血压均明显升高（P＜0.05）;益气温阳中药和缬沙坦均能降低腹主动脉缩窄大鼠的外周血压（P＜0.05,P＜0.05）;益气温阳中药与缬沙坦组之间无明显差异（P＞0.05）.（2）腹主动脉缩窄大鼠造模24周后,左右肾脏质量比值降低（P＜0.05）;益气温阳中药和缬沙坦干预后,均能增加左右肾质比值（P＜ 0.05,P＜0.05）;益气温阳组和缬沙坦组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.（3）腹主动脉缩窄大鼠造模后24周,血清肌酐水平增高（P＜0.05）;益气温阳中药干预能降低模型大鼠的肌酐水平（P＜0.05）;缬沙坦干预不能降低肌酐水平（P＞0.05）;益气温阳组和缬沙坦组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.（4）腹主动脉缩窄大鼠造模24周后各组大鼠血清尿素氮之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 益气温阳中药能显著降低腹主动脉缩窄大鼠的左前肢血压,并改善肾脏损害.     

益气活血法对糖尿病中医证候及糖脂代谢影响的临床研究

目的:观察益气活血法改善糖尿病中医证候及糖脂代谢指标的临床疗效。方法:选取气虚血瘀型糖尿病患者58例,30例运用益气活血法为主中药治疗,28例以阿司匹林治疗作为对照,观察中医证候及糖脂代谢指标治疗前后的变化。结果:中医证候积分总有效率治疗组显著优于对照组(P0.01)。治疗组治疗后气短懒言(P0.05)、健忘(P0.01)和口唇紫暗(P0.05)的有效率均显著优于对照组。治疗组治疗后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均较治疗前显著下降(除TC P0.05,余P0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著上升(P0.01)。结论:益气活血法为主的中药治疗可有效改善气虚血瘀型糖尿病患者的中医证候和糖脂代谢水平。     

益气活血中药肾区离子导入治疗难治慢性肾功能衰竭的临床研究

目的:探讨益气活血中药肾区离子导入治疗难治慢性肾功能衰竭的临床疗效。方法:将62例难治慢性肾功能衰竭患者随机分为治疗组和对照组,对照组予以常规治疗,治疗组在此基础上应用益气活血中药肾区离子导入治疗,比较分析两组的临床疗效。结果:治疗组总有效率为90.3%,对照组总有效率为77.4%,治疗组优于对照组(P0.05);治疗组中医症状积分、Hb、24h upq及ALB以及肾功能指标改善情况均优于对照组(P0.05)。结论:肾区离子导入益气活血中药治疗难治慢性肾功能衰竭疗效显著,不良反应较少。     

高血压病中医证型与心血管危险因素的相关性研究

目的 初步探索上海及周边地区高血压病中医证型与心血管危险因素的相关性.方法 按纳入标准选择原发性高血压病患者213例,充分收集中医四诊信息,对其进行辨证分型,并进行统计分析.结果 （1）高血压各证型分布比例从高到低依次为肝肾阴虚证,肝阳上亢证,阳气虚衰证,气阴两虚证,痰湿壅盛证.（2）高血压不同中医证型与心血管危险因素的比较.①高血压不同中医证型组年龄从高到低依次为阳气虚衰证,肝肾阴虚证,痰湿壅盛证,肝阳上亢证,气阴两虚证,高血压不同中医证型组间在病程、性别中未见明显差异;②高血压不同中医证型组血同型半胱氨酸均值均高于指南界定范围（≥10 mmol/mL）,各组间比较差异无统计学意义;③高血压不同中医证型组空腹血糖水平从高到低依次为气阴两虚证,阳气虚衰证,肝肾阴虚证,肝阳上亢证,痰湿壅盛证;高血压不同中医证型组糖化血红蛋白水平从高到低依次为气阴两虚证,阳气虚衰证,肝肾阴虚证,痰湿壅盛证,肝阳上亢证;各证型组餐后2h血糖差异无统计学意义;④高血压不同中医证型组三酰甘油水平从高到低依次为痰湿壅盛证,气阴两虚证,阳气虚衰证,肝肾阴虚证,肝阳上亢证;高血压不同中医证型组高密度脂蛋白水平从高到低依次为肝肾阴虚证,痰湿壅盛证,肝阳上亢证,阳气虚衰证,气阴两虚证,各证型组其余血脂指标差异无统计学意义.结论 肝肾阴虚证在高血压患者中所占比重最高;阳气虚衰证组患者年龄最大;各证型高血压患者血同型半胱氨酸水平普遍较高;气阴两虚证组患者血糖水平最高;痰湿壅盛证患者甘油三酯最高.     

36例多系统萎缩临床特征及中医证候治疗分析

目的：探讨多系统萎缩（MSA）的证候特征及中医治疗方法。方法：根据Gihnan等提出的MSA诊断标准,对采集的36例住院病例症状及证型、中药处方等特点进行分析。结果：首发症状中以步态不稳、震颤、头晕、二便障碍、性功能障碍等为主;中医证型中以肝肾亏虚、脾肾阳虚、气血亏虚、中气亏虚、气虚血瘀为主;方剂以左归丸、右归丸、地黄饮子、八珍汤、补中益气汤、补阳还五汤为主方对证治疗。结论：治疗MSA应根据临床证型,辨证选方。     

益气温经通络中药在膝骨性关节炎关节镜清理术后的应用

目的：观察益气温经通络中药在膝骨性关节炎关节镜清理术后应用的临床疗效。方法：选择早、中期膝关节骨性关节炎患者141例,随机分为治疗组和玻璃酸钠对照组,进行临床疗效评价和TNF—α、IL-1检测。结果：两组临床疗效比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗组治疗前后比较,TNF-α和IL－1含量变化有统计学意义（P〈0．05）;但治疗后治疗组与对照组间TNF-α和IL－1含量变化比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：膝骨性关节炎关节镜清理术后应用益气温经通络中药有较好的疗效,与玻璃酸钠疗法疗效相当。     

腰椎间盘突出症中医辨证分型与MRI参数的对应分析

目的:探讨腰椎间盘突出症(LIDP)的中医辨证分型与磁共振成像(MRI)参数的对应关系,提高LIDP中医临床辨证分型的准确性。方法:分别对190例LIDP患者进行中医辨证分型和MRI检查,简单对应分析二者的关联性。结果:(1)中医证型与腰椎间盘退变程度的对应关系:气滞血瘀证的点集合最靠近MRI诊断为无椎间盘退变的点集合,风寒湿滞证和湿热痰滞证的点集合与轻度退变的点集合最近,肝肾亏虚证的点集合与重度退变的点集合最近,χ2=88.053,P=0.000。(2)中医证型与腰椎间盘突出部位的对应关系:气滞血瘀证的点集合最靠近外侧型突出的点集合,风寒湿滞的点集合最靠近偏旁型突出的点集合,肝肾亏虚证的点集合最靠近中央型突出的点集合,湿热痰滞证的点集合未显示出与突出部位类型的明显对应关系,χ2=17.056,P=0.009。(3)中医证型与腰椎间盘突出程度的对应关系:气滞血瘀证的点集合投影最接近脱出型的点集合;风寒湿滞证、湿热痰证点集合与突出型点集合的投影位置接近,肝肾亏虚证的点集合最靠近膨凸型的点集合,χ2=15.954,P=0.014。结论:LIDP中医证候分型与MRI影像学参数有一定的对应关系,MRI显示的椎间盘无退变、外侧型脱出多倾向于气滞血瘀证,椎间盘轻度退变、偏旁型突出多见风寒湿滞证或湿热痰滞证,椎间盘重度退变、中央型膨凸者偏重肝肾亏虚证,MRI显示的影像参数可作为LIDP中医辨证施治的量化参考。     

补肾活血合剂对糖尿病阳痿大鼠阴茎平滑肌组织中inos、PDE5表达水平的影响

目的:观察补肾活血合剂对糖尿病(DM)阳痿(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌组织中inos、PDE5等的影响。方法:将实验小鼠用2%链脲佐菌素液(STZ)腹腔注射建立糖尿病模型(60mg.kg-1);然后在每只糖尿病模型大鼠颈项处注射阿朴吗啡(AP0sigma公司)80ug.kg-1,录相记录阴茎勃起次数。筛选DM性ED模型,将造成DM性ED模型随机分为正常组、模型组、中药高、低剂量组、达美康组、达美康+安雄组。除正常组外,其余各组连续给药12周,然后处死测定阴茎海绵体平滑肌组织中inos、PDE5的表达情况。结果:补肾活血合剂对inos、PDE5有改善作用。结论:补肾活血合剂对糖尿病阳痿大鼠阴茎平滑肌组织中inos、PDE5有明显保护效果。