慢性肾衰中医不同证型舌苔中相关蛋白研究

目的:研究通过比较慢性肾功能衰竭(CRF,简称慢性肾衰)中医不同证型组患者及正常对照组人群舌苔上清液中蛋白质谱峰的差异,初步探讨慢性肾衰舌苔上清液中相关蛋白变化与慢性肾衰中医不同证型的相关性。方法:临床收集慢性肾衰患者舌苔样本并辨证分型出5个不同证型,其中脾肾气虚组21例、脾肾阳虚组14例、阴阳两虚组18例、脾肾气阴两虚组11例、肝肾阴虚组3例,另有正常对照组38例,对所有样本采用1500r/min的离心转速,离心2min后取上清液,选用NP20蛋白芯片点样,经SELDI-TOF-MS技术测定得到蛋白质谱图,通过Biomarker Wizard软件分析慢性肾衰中医不同证型组及正常对照组之间蛋白质谱图的变化,并利用层次聚类算法进行层次聚类分析和主成分分析(PCA)来比较各组之间蛋白质谱图的差异。结果:(1)应用SELDI-TOF-MS技术筛选出慢性肾衰中医各证型组及正常对照组舌苔样本中有7个差异蛋白质谱峰有统计学意义(P<0.01)。其中,质荷比M/Z1090.66和M/Z1092.68两个差异质谱峰在各证型组均呈高表达;M/Z13302.5一个差异质谱峰在各证型组均呈低表达;M/Z10241.4和M/Z10464.8两个差异质谱峰在脾肾气阴两虚组、肝肾阴虚组高表达,在脾肾气虚组、脾肾阳虚组、阴阳两虚组呈低表达;M/Z3742.33一个差异质谱峰在脾肾气虚组、脾肾气阴两虚组、肝肾阴虚组呈高表达,在脾肾阳虚组、阴阳两虚组呈低表达;M/Z 10867.6一个差异质谱峰在脾肾气阴两虚组呈高表达,在脾肾气虚组、脾肾阳虚组、阴阳两虚组、肝肾阴虚组呈低表达。(2)利用层次聚类算法进行层次聚类分析和主成分分析(PCA),慢性肾衰各证型组之间及与正常对照组舌苔样本之间都有一定的区分度,但均存在部分重叠。结论:该研究从生物学理论的角度初步探讨慢性肾衰舌苔上清液中相关蛋白变化与慢性肾衰中医不同证型的相关性,为中医证候研究提供客观依据。     

基于蛋白芯片的慢性肾衰舌苔上清液中蛋白研究

目的：通过比较慢性肾衰（CRF）患者与正常对照组人群舌苔上清液中蛋白表达谱的差异,筛选慢性肾衰舌苔蛋白标志物并建立预测模型,探讨其在慢性肾衰诊断中的意义。方法：对67例慢性肾衰患者和38 例正常对照组人群舌苔上清液样本,运用SELDI-TOF-MS 蛋白芯片技术筛选慢性肾衰舌苔蛋白标志物,经生物信息学分析建立预测模型并进行验证。结果：淤慢性肾衰组67 例和正常对照组38 例舌苔样本经SELDI-TOF-MS 技术测定,质荷比1000耀20000 范围内共检测到242个蛋白峰,经生物信息学统计分析,有13 个差异质谱峰有统计学意义（P<0.01）,其中m/z 1092.68、m/z 1508.26 等7 个差异质谱峰在慢性肾衰组中呈高表达;m/z 13302.5、m/z 14330.7 等6 个差异质谱峰在慢性肾衰组中呈低表达。于利用层次聚类算法进行层次聚类分析和主成分分析（PCA）,结果显示,慢性肾衰组与正常对照组样本之间区分较明显,但均存在部分重叠。盂经生物信息学分析建立慢性肾衰预测模型,最终得到m/z 1049.61、m/z 1076.94、m/z 15295.7 等7 个差异质谱峰组成的生物标记物可以将慢性肾衰组和正常对照组样品较好的分类（最终预测模型的灵敏度为61.4%,特异度为57.3%,预测正确率为64.4%）。结论：该研究运用SELDI-TOF-MS 蛋白芯片技术,初步筛选出了慢性肾衰舌苔蛋白标志物并建立了预测模型,为慢性肾衰的诊断研究提供客观依据。     

基于表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术的慢性肾衰竭中医湿证尿液中相关蛋白研究

目的 采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术研究慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)中医湿证患者的尿液蛋白标志物。方法 采集CRF湿证患者90例和非湿证患者60例的尿液,采用H4蛋白芯片技术进行尿液蛋白质组学研究,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析。结果 (1)湿证组与非湿证组尿液样本的蛋白质图谱在质荷比1 000-20 000范围内检测到25个差异蛋白峰(P<0.01)。(2)经生物信息学分析建立CRF中医湿证尿液蛋白预测模型,得到M/Z 8 654.96、M/Z 2 081.65、M/Z 18 667.3和M/Z 2 242.14共4个差异蛋白峰组成的生物标记物可以将湿证组和非湿证组样本较好地分类,其正确率84.7%,灵敏度为92.2%,特异性为73.3%。(3)湿证组与非湿证组尿液中差异蛋白峰经SwissProt数据库鉴定,可能为7种蛋白质。结论 初步筛选出CRF中医湿证的尿液蛋白标志物,建立了CRF中医湿证尿液蛋白预测模型,通过数据库对尿液蛋白标志物进行了鉴定,为CRF中医湿证的临床辨证提供了一定的实验依据。     

应用SELDI技术建立甲状腺癌辨证分型的血清蛋白质组学诊断模型

目的:探讨甲状腺癌不同证型间的血清蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测19例肝郁气滞型和21痰瘀互结型甲状腺癌的血清蛋白质指纹图谱,筛选出两组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法建立诊断模型。结果:在2000~20000Da范围内共检测到86个蛋白质峰,其中22个蛋白质峰在两组之间表达有显著性差异(P0.01),17个蛋白质峰在肝郁气滞组中高表达,5个蛋白质峰在痰瘀互结组中高表达,BPS判别分析选出M/Z为4099.85、9418.17的2个蛋白质峰构建两组间血清差异蛋白决策树分类诊断模型。结论:初步建立了甲状腺癌的中医辨证模式——血清蛋白质指纹图谱,也为中医证候实质的研究探讨新的方法和途径。     

IgA肾病湿热证的血清蛋白质组学研究

目的：应用表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术,对IgA肾病（IgAN）湿热证患者进行血清蛋白质指纹图谱检测,分析探讨该人群中所表达的特异蛋白,试图从蛋白质组层面寻找与IgA肾病湿热证相关的血清标志物。方法：采集IgA肾病患者的血清样本共29例（湿热证14例,非湿热证15例）,同时选择非IgA肾病的湿热证肾病患者血清样本10例和健康人血清样本15例。采用表面增强激光解析离子化蛋白质芯片分析仪实现各组血清蛋白质表达谱的检测,后运用Biomarker WizardTM和Biomarker PatternsTM软件进行数据分析,最终识别IgA肾病湿热证特异表达的蛋白质,并建立证候决策树模型。结果：IgA肾病湿热证组与非湿热证组之间共检出有7个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与非IgA肾病湿热证组之间共检出有4个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与健康对照组之间共检出有5个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;综合以上各组对比结果,并结合统计学分析证实,M/Z（质荷比）为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”可能是IgA肾病湿热证的特异血清蛋白标志物。经筛选以M/Z为1092.71等11个蛋白峰组成的证候决策模型能很好地将IgA肾病湿热证区分出来,该模型的敏感性为92.86%,特异性为87.50%。进一步对此决策模型进行盲法验证,结果其敏感性为90.00%,特异性为86.67%。结论：IgA肾病湿热证的发生发展,可能是以M/Z为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”的差异表达为物质基础的,同时建立了分子生物学证候决策树模型。     

应用SELDI-TOF-MS技术分析不同中医证型肝癌血清标志物的研究

目的:应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测不同中医证型肝癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性相关血清生物学标志物。方法:应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测5种中医证型(气滞证、脾虚证、湿热证、血瘀证、阴虚证)肝癌患者血清,获得CM10蛋白质芯片蛋白表达图谱,用Marker Wizard软件分析差异蛋白并经数据库搜索初步鉴定。结果:应用弱阳离子交换芯片(CM10)在不同中医证型肝癌血清中检测到在不同质荷比(M/Z)差异蛋白质峰,气滞证组M/Z为4182Da、6589Da及湿热证组M/Z为5710Da的血清蛋白质峰下调,脾虚证组M/Z为5816Da、血瘀证组M/Z为4297Da、阴虚证组M/Z为6992Da的血清蛋白质峰上调,上述蛋白质含量差异均有统计学意义(P0.01)。结论:应用SEIDI-T0F-MS可以筛选不同中医证型肝癌患者血清特异性生物标志物,检测到的差异蛋白质可能是鉴别肝癌不同中医证型的血清生物学指标。     

唾液蛋白指纹图谱在乳腺癌中医辨证分型中的应用初探

目的：应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测乳腺癌肝郁气滞证和肝肾阴虚证患者唾液蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于区分乳腺癌肝郁气滞证和肝肾阴虚证的唾液蛋白质指纹图谱模型。方法：SELDI-TOF-MS技术测定47例唾液标本（其中乳腺癌肝郁气滞证26例,肝肾阴虚证21例）的蛋白质质谱,建立乳腺癌中医证候诊断模型。结果：样本共检测到243个蛋白质峰,其中33个蛋白质峰在两组间差异有统计学意义。获得M/Z为8087.575和3378.142Da2个蛋白质组成的诊断模型,可将乳腺癌肝郁气滞证和肝肾阴虚证正确区分,26例乳腺癌肝郁气滞证有25例被准确诊断,21例肝肾阴虚证患者被准确排除,灵敏度96.15%（25/26）;特异度为80.95%（17/21）。结论：SELDI-TOF-MS技术建立乳腺癌中医证候唾液蛋白质指纹图谱模型为中医证候的辨别提供了一种特异性强、敏感性高的新方法,值得进一步研究和应用     

甲状腺癌中医辨证唾液蛋白质组诊断模型研究

目的 探讨甲状腺癌不同证型患者的唾液蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型,为甲状腺癌的中医辨证分型提供客观依据.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测23例痰瘀互结型和26例肝郁气滞型甲状腺癌患者的唾液蛋白质指纹图谱,筛选出2组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法 建立诊断模型.结果 通过2组唾液蛋白质指纹图谱数据比较,共获得29个有明显差异的蛋白峰(P＜0.01),其中M/Z 3809.85、3 110.04、4 970.80被选择用于构建最佳决策树模型,该模型的测试组总准确率为85.7%(42/49),灵敏度为84.6%(22/26),特异性为86.9%(20/23).结论 初步建立了甲状腺癌的唾液蛋白质指纹图谱辨证模式,为中医证候实质研究提供了新的方法 和途径.     

基于血清蛋白组学的慢性肾衰中医不同证型的研究

目的:探讨慢性肾功能衰竭中医不同证型的血清蛋白质谱的变化及生物学基础。方法:收集慢性肾功能衰竭患者83例及正常人36例并辨证分型,采用SELDI-TOF蛋白芯片技术对不同证型的血清蛋白质表达谱进行研究。结果:在慢性肾衰中医各证型的整体研究中,17个蛋白峰有显著差异(P0.001),通过层次聚类分析显示中医各证型之间聚类性质差异较小;通过对中医不同证型作两两比较发现,脾肾气虚组与脾肾阳虚组之间得到2个差异蛋白峰(P0.01),脾肾气虚组与阴阳两虚组得到4个差异蛋白峰(P0.01),脾肾气虚组与脾肾气阴两虚组之间得到5个差异蛋白峰(P0.01),脾肾阳虚组与阴阳两虚组之间得到4个差异蛋白峰(P0.01),脾肾阳虚组与脾肾气阴两虚组之间得到4个差异蛋白峰(P0.01),阴阳两虚组与脾肾气阴两虚组之间得到2个差异蛋白峰(P0.01);运用PCA分析显示,各证型组之间的差异蛋白峰能较好把各组相区分。结论:采用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术分析慢性肾功能衰竭中医不同证型血清蛋白质谱变化对探讨中医证型的生物学基础具有一定的意义。     

蛋白指纹图谱在原发性肝癌中医辨证分型应用的初步研究

目的应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）检测肝细胞性肝癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性候选标志物。方法应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测56例肝郁气滞证和55例肝胆湿热证肝癌患者血清,获得弱阳子交换型蛋白质芯片（CM10）蛋白表达图谱,用Marker Wizard软件分析差异蛋白并经数据库搜索初步鉴定。结果应用CM10在肝郁气滞证和肝胆湿热证肝癌血清中检测到在不同质荷比（M/Z）有2个差异蛋白质峰8 576 Da、8 780 Da,其蛋白质含量有显著性差异（P〈0.05）。经蛋白质数据库搜索,与这2种差异蛋白质分子量最接近的蛋白质分别为细胞色素C6和细胞色素C氧化酶合成因子5。结论应用SEIDI-T0F-MS可以筛选不同中医证型肝癌患者血清特异性生物标志物,检测到的2个差异蛋白质可能是鉴别肝郁气滞型与肝胆湿热型的血清生物学指标。     

慢性乙型病毒性肝炎中医辨证分型与肝功能指标相关性研究

目的:探讨慢性乙型病毒性肝炎其中医辨证分型与西医肝功能检测指标间的相关性。方法:随机抽选235例慢性乙肝患者,根据其临床征象辩证为肝郁脾虚(74例)、湿热中阻(80例)、脾肾阳虚(20例)、肝肾阴虚(25例)以及瘀血阻络(36例)5组,比较5种证型肝功能(ALT、AST、ALT/AST、TBIL、DBIL)等指标的检测差异。结果:湿热中阻、肝郁脾虚两型中ALT(235.77±113.31、197.34±83.39)μ/L、AST(184.53±73.85、135.61±62.17)μ/L指标明显高于其他三型(P<0.05);湿热中阻型患者TBIL(45.77±43.31)μmol/L、DBIL(34.53±33.85)μmol/L显著高于其他4组(P<0.05),其他证型TBIL、DBIL均处于正常范围。结论:不同中医辨证分型,其患者部分肝功能指标亦存在不同程度的差异性,中医证型与肝功能指标二者具有相关性。     

蜂针治疗膝骨性关节炎的临床观察

目的 观察蜂针治疗不同中医证型膝骨性关节炎的临床疗效,分析总结蜂针治疗本病的适宜中医证型.方法 按照中医辨证将膝骨性关节炎分为行痹、痛痹、着痹、热痹4个证型组,用活蜂蛰刺患膝阿是穴、内外膝眼、鹤顶穴、梁丘、血海.每周治疗2次,2周为l疗程.结果 蜂针疗法治疗膝骨性关节炎中,痛痹组及着痹组的总有效率、症状体征评分的改善情况明显优于行痹组及热痹组（P＜0.05）.结论 蜂针疗法更适合痛痹、着痹证型的膝骨性关节炎.     

糖尿病肾病中医证型与C肽、尿微量蛋白、β2微球蛋白的关系研究

目的:探讨糖尿病肾病中医辨证分型与C肽、尿微量蛋白、β2微球蛋白等实验室指标的相关性。方法:对符合纳入标准的120例糖尿病肾病患者按本证(阴虚燥热证、气阴两虚证、脾肾气虚证、阴阳两虚证)、标证(湿证、瘀证、痰瘀互结证)辨证分型,同时检测血糖、C肽、尿微量蛋白,β2微球蛋白等实验室检测指标,分析糖尿病肾病的中医证型分布规律及糖尿病肾病中医辨证分型与实验室指标的相关性。结果:研究发现早期糖尿病肾病患者59例,以阴虚燥热证(62.7%)及气阴两虚证(30.5%)为主,多兼有湿证(78.0%),中期糖尿病肾病患者50例,以脾肾气虚证(72.0%)为主,多兼有瘀证(62.0%),晚期糖尿病肾病患者11例,以阴阳两虚证(81.8%)为主,多为痰瘀互结证(72.7%)。本证中脾肾气虚证及阴阳两虚证的尿微量蛋白、血、尿β2微球蛋白水平高于其他证型,而C肽水平低于其他证,具有统计学意义(P<0.05),标证中痰瘀证、瘀血证的尿微量蛋白、血、尿β2微球蛋白水平高于湿证组,C肽水平低于湿证组,具有统计学意义(P<0.05);糖尿病肾病患者中医证型与血糖、糖化血红蛋白无关(P>0.05)。结论:糖尿病肾病中医证型本证的演变规律为阴虚燥热证-气阴两虚证-脾肾气虚证-阴阳两虚证,标证为湿证-瘀证-痰瘀证。C肽、尿微量蛋白、血、尿β2微球蛋白水平可反映中医证型的动态变化,与中医主证标证之间存在一定的相关性。     

旨肪肝中医辨证客观化与影像学诊断相关性研究

目的：通过影像学检查（B超、CT）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）进行定性定量诊断分析,探讨NAFLD影像学指标与中医各证型之间的相关性。方法：选取NAFLD患者200例,辨证分为肝郁脾虚、痰湿内阻、湿热内蕴、痰瘀互结、肝肾不足5个中医证型,同时运用B超、CT两种影像学方法对脂肪肝进行分度和定量诊断,分析脂肪肝严重程度与各中医讧型之间的关系。结果：（1）NAFLD中医辨证分型以湿热内蕴最常见（37．00％）,肝肾不足最少（6．00％）。2种检查方法均提示从肝郁脾虚型、痰湿内阻型、湿热内蕴型、痰瘀互结型到肝肾不足型,非酒精性脂肪肝严重程度逐渐加重,经’X^2检验,各中医证型间的脂肪肝程度差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）与正常对照组相比,NAFLD各中医证型肝／脾CT比值均有不同程度的降低（P〈0．05）,各组间比较,从肝郁脾虚型、痰湿内阻型、湿热内蕴型、痰瘀互结型到肝肾不足型,肝／脾CT比值逐渐降低,且差异具有统计学意义。结论：NAFLD各中医证型与影像学指标（B超、CT）之间存在一定的相关性,B超、CT检查可为脂肪肝的中医辨证规范化研究提供参考依据。     

性传播感染的HIV/AIDS患者中医辨证分型研究

目的：探讨性传播感染的HIV/AIDS患者中医症状、体征、证候分布特点。方法：对107例性传播感染的HIV/AIDS患者进行问卷调查,按照中医四诊信息采集表收集患者的四诊信息和中医证型资料。结果：广东地区107例经性传播感染的HIV/AIDS患者最常见症状、体征为乏力（41.12%）、头痛（25.23%）、腰痛（24.30%）、自汗（23.36%）、咳嗽（20.56%）、皮疹（18.69%）、关节痛（18.69%）等;舌象以红舌（53.27%）为主,舌苔以白苔（54.21%）多见;最常见的脉象为细脉（59.81%）、弦脉（55.14%）、沉脉（23.36%）等;最常见证型为气阴两虚肺肾不足型（19.63%）、脾肾亏虚湿邪阻滞型（14.02%）、肝经风火湿毒蕴结型（13.08%）。结论：广东地区107例性传播感染的HIV/AIDS患者中医症状、体征、证候分布有一定规律,病位主要集中在肾、肝、脾（胃）。     

湿疹证候分类及中药用药规律分析

目的：利用文本挖掘探索中医辨治湿疹的证候分类及中药用药规律。方法：采集中医辨治湿疹的相关文献,建立Access数据库,运用SQL对数据进行处理,挖掘中医辨治湿疹的证候分类及用药规律。结果：湿热证、风热证、血瘀证、湿毒证、脾虚湿蕴证是依次排在前5的湿疹证型;湿热证是最常与其他证型相兼的证型;苦参、黄芩、茯苓、土茯苓、白鲜皮、大青叶、龙胆草、连翘、牡丹皮、金银花是依次排在前10治疗湿疹的中草药;苦参、茯苓、土茯苓是最常与其他中草药配伍使用的中草药。结论：文本挖掘获得的中医辨治湿疹的证候分类及用药规律符合临床实际,为湿疹中医辨治的规范标准化提供了客观依据。     

非手术治疗颈性眩晕的临床疗效观察

目的:探讨非手术治疗颈性眩晕的临床疗效。方法:将90例颈源性眩晕病人随机分为3组,每组30例,分别采用中药、西药和手法治疗,并结合应用颈椎颈颌布兜牵引,治疗2周后比较各组的临床疗效。结果:3组病人治疗后症状体征评分均较治疗前降低(中药组:t=39.49,P=0.00;西药组:t=42.42,P=0.00;手法组:t=42.98,P=0.00);治疗后中药组和手法组主要症状体征评分均低于西药组(q=7.73,P=0.00;q=6.76,P=0.00)。中药组与手法组眩晕症状较西药组缓解快(q=12.21,P=0.00;q=13.89,P=0.00);中药组与手法组颈项累痛症状较西药组缓解快(q=10.74,P=0.00;q=12.47,P=0.00)。各组治疗后椎-基底动脉血流速度均较治疗前提高(中药组:t=-15.96,P=0.00;t=-18.93,P=0.00;西药组:t=-9.91,P=0.00;t=-10.37,P=0.00;手法组:t=-23.53,P=0.00;t=-21.79,P=0.00),治疗后中药组与手法组椎动脉血流速度均比西药组快(q=13.82,P=0.00;q=13.76,P=0.00);治疗后中药组与手法组基底动脉血流速度均比西药组快(q=18.43,P=0.00;q=20.61,P=0.00);中药组与手法组的疗效均优于西药组(Z=2.29,P=0.02;Z=-2.10,P=0.04);中药组与手法组的疗效比较,差异无统计学意义(Z=-0.34,P=0.74)。结论:颈椎牵引配合中药或正骨手法治疗颈性眩晕疗效确切,值得在临床推广。