愤怒郁怒诱发经前期综合征猕猴模型不同脑区γ-氨基丁酸含量分析

目的:检测经前期综合征(PMS)猕猴模型不同脑区γ-氨基丁酸(GABA)含量,探索愤怒、郁怒诱发PMS病证的脑中枢微观机制。方法:应用社会层级压力应激法并配合择时挤压使猕猴出现PMS病证表现,然后依据雌性实验猕猴情绪评价量表进行评分,最后检测不同脑区γ-氨基丁酸(GABA)的含量,进行分析论证。结果:PMS肝气逆、肝气郁证组猕猴愤怒因子积分均显著高于对照组(P0.01,P0.05),PMS肝气逆证组又显著高于PMS肝气郁证组(P0.01),PMS肝气郁证组猕猴抑郁因子积分显著高于对照组和PMS肝气逆证组(P0.01);相较于对照组,PMS肝气逆证组各脑区GABA的含量明显下降(P0.01,P0.05),PMS肝气郁证组各脑区GABA的含量则明显上升(P0.01,P0.05)。结论:应用社会层级压力应激配合择时挤压造模法制备猕猴模型病证发生与中枢GABA含量变化密切相关。     

白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠血清抗焦虑样作用机制研究

目的 以经前烦躁障碍症(premenstrual dysphoric disorder,PMDD)肝气逆证模型大鼠为载体探索白香丹胶囊对模型大鼠焦虑样行为的影响,并初步探究其血清作用机制。方法 以居住入侵法制备PMDD肝气逆证模型大鼠并进行药物干预,给药后通过攻击行为测试、旷场实验、高架十字迷宫实验对PMDD肝气逆证模型大鼠焦虑样行为进行检测;腹主动脉取血并制备血清,使用ELISA法检测大鼠血清中孕酮(P)、四氢孕酮(ALLO)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠攻击行为明显增加(P＜0.01);旷场实验,总路程增加而在中央区停留的总时间减少(P＜0.01);高架试验,进入开放臂的次数百分比和时间百分比均明显减少(P＜0.01);血清中P水平、ALLO含量、GABA水平均显著下降(P＜0.05)。与模型组比较,氟西汀组和白香丹组大鼠的攻击行为均明显减小(P＜0.01);旷场实验,总路程减少而在中央区停留的总时间均明显增加(P＜0.01);高架试验,进入开放臂的次数百分比和时间百分比均明显增加(P＜0.01);血清中P水平、ALLO水平、GABA水平均显著上升(P＜0.05)。结论 白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠有明显的抗焦虑样作用,并明显增加模型大鼠血清中的P、ALLO、GABA水平,据此推测该病证作用机制可能与调节体内P、ALLO、GABA的含量有关。     

基于UPLC-Q-TOF的经前期综合征肝气逆证大鼠模型代谢表征研究

目的研究经前期综合征（PMS）肝气逆证大鼠代谢指纹差异,以期为PMS肝气逆证在代谢层次上的发病机制寻找证据。方法用电刺激法复制经前期综合征肝气逆证大鼠模型,UPLC-TOF-MS法检测各组大鼠尿液的代谢指纹变化。结果对照组、造模组在主成分分析中得到了较好的区分,给予白香丹胶囊后代谢网络有修复趋势。结论利用代谢组学能够较好地区分PMS肝气逆证模型大鼠代谢模式及药物调控趋势,该方法可为情志病证发病机制及模型评价研究提供新手段,显示出代谢组学在中医证候研究中的可行性。     

经前期综合征肝气逆证模型大鼠海马γ-氨基丁酸A受体β2亚基mRNA表达

目的探讨大鼠海马γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)β2亚基mRNA表达的变化与经前期综合征肝气逆证的关系。方法采用半定量RT-PCR基因扩增技术对正常组、经前期综合征肝气逆证模型组和白香丹胶囊给药组大鼠海马中GABAA受体β2亚基的表达变化进行检测。结果与正常组大鼠相比,模型组大鼠海马GABAA受体β2亚基mRNA表达显著升高(P<0.05),调肝方药白香丹胶囊干预能改变该受体表达水平异常升高的状态。结论经前期综合征肝气逆证的发病机制与海马GABAA受体β2亚基有关。     

经前期综合征肝气逆、郁两证大鼠模型血清及不同脑区单胺类神经递质含量分析

目的 借助前期研制成功PMS肝气逆、郁两证大鼠模型检测其血清与不同脑区单胺类神经递质含量,探索"肝失疏泄"微观机制并对模型与中医证型关系进行初步分析. 方法 挑出动情周期非接受期大鼠40只,随机分为5组:正常对照组、PMS肝气逆证造模组、PMS肝气郁证造模组、PMS肝气逆证造模给药组、PMS肝气郁证造模给药组,肝气逆证大鼠模型以情志刺激为主多因素复合造模法制备,肝气郁证大鼠模型以慢性束缚应激法制备,模型复制成功后肝气逆大鼠模型用经前平颗粒干预,肝气郁证大鼠模型用经前舒颗粒干预.HPLC测定血清及中枢NE、DA、5-HT含量,比较各组差异并进行分析. 结果 旷场实验中,相较正常对照组大鼠造模后逆模组水平得分、垂直得分及可旷场实验总分均显著增加(P<0.05),而郁模组大鼠则显著减少(P<0.05),用药后这一趋势得到明显纠正(P<0.05).肝气逆证模型大鼠不同脑区NE、DA、5-HT含量均有上升趋势;肝气郁证模型大鼠不同脑区DA含量呈下降趋势,5-HT含量显著上升.外周单胺类神经介质变化趋势多与中枢相反. 结论 肝疏泄太过所致烦躁易怒等表现可能与边缘叶DA水平上升,下丘脑DA、边缘叶5-HT水平下降密切相关;肝气疏泄不及呈现抑郁萎靡等症状可能与下丘脑NE水平上升,下丘脑、边缘叶DA水平下降,5-HT水平上升有密切关系.据此推测,肝主疏泄可能通过调节机体该类活性物质含量而呈现作用;其功能定位为脑中枢,尤其是下丘脑.     

肝气逆证模型大鼠下丘脑中单胺类神经递质变化研究

目的:探讨肝气逆证模型大鼠微观机制。方法:采用电刺激及噪音干扰作为情志刺激造模方法制作肝气逆证模型大鼠,采用反相离子高效液相色谱测定法(RP-IP-HPLC)测定造模前后大鼠下丘脑中单胺类神经递质,分析其变化情况。结果:肝气逆证模型大鼠下丘脑中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(Da)显著升高,5羟色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)无显著性变化。结论:肝气逆证模型大鼠下丘脑中NE、E、Da显著升高,5-HT、HVA无显著性变化,可以部分解释肝气逆证形成原因,说明肝气逆证与下丘脑中NE等升高关系密切。     

经前期综合征(PMS)肝气逆证大鼠下丘脑蛋白差异表达

目的 研究PMS肝气逆证大鼠下丘脑蛋白质差异表达,以期为PMS肝气逆证在蛋白质水平上的发病机制寻找证据.方法 采用蛋白质双向电泳技术(2-DE)对PMS肝气逆证大鼠模型下丘脑进行蛋白质图谱分析,以MALDI-TOF-MS技术进行蛋白质鉴定.结果 下丘脑组织中模型组跟正常组比较:泛素羧端水解酶、清蛋白、醛缩酶蛋白表达下调;M2丙酮酸激酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、钙结合蛋白表达上调,这些蛋白质与泛素通路、中间代谢酶、代偿作用等功能有关.结论 PMS肝气逆证与泛素通路、中间代谢酶、代偿作用等蛋白功能有关,提示以上6种蛋白质与PMS肝气逆证中枢发病机制关系密切.     

PMS肝气逆证模型大鼠中枢5-HT_(1A)R结合活性分析及其药物干预

目的:检测PMS肝气逆证模型大鼠大脑皮层和海马5-HT1AR(5-羟色胺1A受体)结合活性的变化,探讨中药经前平颗粒治疗PMS肝气逆证的作用机制。方法:电刺激复制PMS肝气逆证大鼠模型。放射性配体受体结合实验测定大鼠皮层和海马5-HT1AR结合活性变化。结果:与正常组比较,肝气逆证造模组大鼠大脑皮层5-HT1AR结合活性显著上调(P<0.01),海马5-HT1AR结合活性上调但不显著(P>0.05),经前平颗粒可显著下调肝气逆证模型大鼠上述脑组织内5-HT1AR结合活性。结论:PMS肝气逆证模型大鼠的大脑皮层和海马5-HT1AR结合活性上调。中药经前平颗粒可能通过调节5-HT1AR结合活性发挥治疗PMS肝气逆证的作用。     

酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织Glu及GABA含量的影响

目的 观察酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响.方法 用D-半乳糖致衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠,制作老年阴血亏虚型失眠证候大鼠复合模型,采用高效液相色谱法检测环境对照组、证候模型组和酸枣仁总皂苷大、小剂量组大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量的变化.结果 与环境对照组比较,证候模型组睡眠剥夺48h后,大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量均明显升高,且Glu/GABA比例增高,经酸枣仁总皂苷干预后Glu和GABA均明显下降(P<0.01,P<0.05),且趋于正常范围.结论 酸枣仁总皂苷能减少老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑内兴奋性氨基酸毒性作用,减轻Glu、GABA参与的迟发性神经元损害.     

经前期综合征肝气逆证模型大鼠不同组织器官的指标检测与评价

目的:复制经前期综合征肝气逆证模型大鼠,确认以情志刺激为主的多因素致病造模方法的合理性。方法:在对肝气逆证模型大鼠"病证表现"进行观察总结的基础上,进一步对该模型下丘脑、心、肝、胃、肾上腺中高香草酸(homovanillic acid,HVA)、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)、肾上腺素(epinephrine,E)、多巴胺(dopamine,DA)及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)5种神经递质进行检测,并与正常组各项指标进行对比。结果:经前期综合征肝气逆证模型大鼠HVA含量在心、肝处显著低于正常组(P<0.01),胃HVA含量显著升高(P<0.01);下丘脑中NE含量显著高于正常组(P<0.05),肝脏NE含量明显高于正常组(P<0.01);下丘脑、心中E含量显著上升(P<0.01),肾上腺中E含量明显下降(P<0.01),肝脏、胃中E含量与经前期综合征肝气逆证关系不大;下丘脑、肾上腺中DA含量显著升高(P<0.01);肝脏5-HT含量明显高于正常组(P<0.01)。结论:NE、E与5-HT作为与忿怒密切相关的神经递质与激素,呈现出与肝气逆证大鼠模型情志等改变相应的特点。     

5-HTR1A 基因在经前期综合征肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达

目的 通过研究5-羟色胺受体1A (5-HTR1A)基因在经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达,探讨该证的发病机制及药物作用靶点.方法 束缚法制备PMS肝气郁证模型大鼠,经前舒颗粒干预,获得正常组、造模组、给药组;运用RT-PCR和Western Blotting方法检测大鼠下丘脑区5-HTR1A mRNA及其蛋白表达;应用软件SPSS 16.0,通过单因素方差分析及LSD法统计数据.结果 PMS肝气郁证模型组大鼠与正常组相比,下丘脑5-HTR1A mRNA及蛋白表达均显著降低;经前舒颗粒给药后与造模组相比,表达均显著升高;给药组与正常组相比,表达均无显著差异.结论 肝气郁证模型大鼠与正常大鼠相比,下丘脑5-HTR1A基因表达下降,通过经前舒颗粒干预后,恢复正常;说明5-HTR1A基因可能与PMS肝气郁证相关,并且可以作为经前舒颗粒治疗该证的作用靶点.     

经前期综合征肝气逆证猕猴模型血清与尿中去甲肾上腺素测定分析

目的:研究经前期综合征(PMS)肝气逆证猕猴模型及其用药、复健后血清与尿中去甲肾上腺素(NE)含量变化。方法:运用情志刺激结合挤压造模的方法制备PMS肝气逆证猕猴模型,并用毛细管电泳法对造模组、造模给药组、复健组猕猴血、尿中NE进行检测。结果:在经前期,造模组NE含量升高,造模给药组、复健组较造模组NE含量降低,造模给药前后猕猴宏观表现有很大变化。结论:猕猴造模前后NE含量有显著性差异,经前平颗粒对NE有调节作用,PMS肝气逆证宏观表现与NE的含量升高有关。     

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠不同脑区γ-氨基丁酸A受体结合活性的影响

目的 通过检测经前期综合征（premenstrual syndrome,PMS）肝气逆证模型大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸A受体（GABA_AR）结合活性变化,探讨中药经前平颗粒对PMS肝气逆证的干预作用。方法 多因素综合刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型。放射性配体受体结合技术测定大鼠皮质和海马GABA_AR的结合活性变化。结果 与正常组相比,肝气逆证造模组大鼠大脑皮质和海马GABA_AR结合活性均明显增加。与模型组相比,经前平颗粒组大鼠皮质和海马GABA_AR活性均明显下降。结论 大鼠皮质和海马GABA_AR结合活性增加可能是PMS肝气逆证的重要机制之一。中药经前平颗粒可对GABA_AR 结合活性含量异常变化起到调节作用。     

麻黄配伍前后对大鼠大脑额叶皮层氨基酸类神经递质含量的影响

目的:研究麻黄配伍前后对大鼠额叶皮层中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)氨基酸类神经递质含量及Glu/GABA比值的影响。方法:采用HPLC法测定四种氨基酸类神经递质的含量。结果:麻黄组与阴性组及空白对照组相比显著升高了大鼠大脑额叶皮质氨基酸类神经递质的量及Glu/GABA比值(P<0.01);麻黄汤组与阴性及空白对照组相比显著升高了Asp、Glu和GABA氨基酸类神经递质含量(P<0.01和P<0.05),而对Gly的含量及Glu/GABA比值的影响均不显著(P>0.05)。麻黄汤组与麻黄组相比,前者显著降低了Glu含量(P<0.05)及Glu/GABA比值(P<0.01),而对Asp、Gly和GABA含量的影响不显著(P>0.05)。结论:麻黄升高了大鼠大脑额叶皮质氨基酸类神经递质的含量及Glu/GABA比值,且配伍成麻黄汤后能影响麻黄的这种作用。     

人参根总甙对大鼠脑内单胺类和氨基酸类神经递质含量的影响

本文报道了人参根总甙对两组不同年龄的雌性大鼠的大脑皮质、下丘脑和脑干的氨基酸类递质和单胺类递质含量的影响。结果表明:人参根总甙显著地降低中年大鼠大脑皮质和脑干的谷氨酸(Glu)含量、脑干的天门冬氨酸(Asp)含量、下丘脑的5—羟色胺(5-HT)含量,增高下丘脑的 r-氨基丁酸(GABA)含量,大脑皮质和脑干的牛磺酸(Tau)含量,下丘脑和脑干的去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的含量。显著降低老年大鼠大脑皮质和脑干的 Glu 含量:大脑皮质的 Asp 含量、大脑皮质和下丘脑的 5-HT 含量。增高大脑皮质的 GABA 含量、下丘脑的 DA 含量,对其他部位无明显作用。人参根总甙的这些作用,可能是其抗衰老作用的一个环节。     

白藜芦醇对慢性癫痫大鼠脑组织中氨基酸类递质含量的影响

目的:测定慢性癫痫大鼠脑组织谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量,分析白藜芦醇抗癫痫作用机制。方法:动物分为生理盐水组(NS组)、癫痫组(KA组)、低剂量白藜芦醇组(L-Res组)和高剂量白藜芦醇组(H-Res组)。利用立体定位技术,在大鼠右侧海马CA3中心区注射海人草酸,建立癫痫大鼠模型,以高、低剂量白藜芦醇干预10 d,利用高效液相色谱法测定慢性癫痫大鼠海马和皮层Glu和GABA含量。结果:与NS组比较,KA组大鼠海马和皮层Glu含量、Glu/GABA比值均明显升高(P<0.05);与KA组比较,L-Res组大鼠海马Glu含量、Glu/GABA比值均明显降低(P<0.05),但皮层Glu含量、Glu/GABA比值却明显高于NS组(P<0.05);H-Res组大鼠海马和皮层Glu含量、Glu/GABA比值均明显高于NS组(P<0.05)。结论:白藜芦醇通过维持海马Glu/GABA平衡达到抗癫痫作用效果。     

柴桂温胆定志汤对抑郁模型大鼠海马神经递质的影响

目的 观察泉桂温胆定志汤对抑郁模型大鼠海马5-HT、GABA及Glu的影响.方法 采用随机分组,用长期轻度不可预见性应激加孤养复制大鼠抑郁症模型,现察大鼠海马5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(Glu)的变化.结果 与正常对照组比较,模型组5-HT及GABA的含量显著降低,Glu含量显著升高:与模型组比较,氟西汀组和柴桂温胆定志汤组5-HT及GABA的含量均有不同程度的提高,Glu含量有不同程度的降低.结论 柴桂温胆定志汤的抗抑郁作用与提高大鼠海马5-HT、GABA的表达,降低Glu的表达,调节海马神经递质系统的平衡有关.     

四种调补方对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量影响的比较

目的 :观察调肝方、健脾方、补肾方及人参总皂苷对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量的影响。方法 :大鼠随机分为正常组、模型组、调肝组、健脾组、补肾组和人参总皂苷组。采用OPA高效液相色谱分析法检测下丘脑、海马氨基酸含量。结果 :人参总皂苷组下丘脑谷氨酸(Glu)明显下降 (P <0 .0 5 ) ,健脾组与人参总皂苷组下丘脑天冬氨酸 (Asp)水平均明显低于模型组和正常对照组 (P <0 .0 1)。模型组海马Glu明显下降 (P <0 .0 5 ) ,补肾组、健脾组和人参总皂苷组海马Glu和Asp均明显升高 (P <0 .0 1)。调肝组、健脾组和人参总皂苷组下丘脑γ 氨基丁酸(GABA)和牛磺氨酸 (Tau)均明显下降 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,补肾组下丘脑GABA明显下降(P <0 .0 1) ,模型组海马Tau明显下降 (P <0 .0 5 ) ,健脾组、补肾组与人参总皂苷组海马GABA和Tau均明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :调肝方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑 ,其作用机制可能与下调氨基酸水平有关 ;而健脾、补肾方药及人参总皂苷的中枢作用部位可能与海马和下丘脑都有密切关系 ,作用机制则与上调氨基酸水平有关     

颞叶癫痫大鼠不同时期海马和皮层氨基酸类递质的变化

目的 探讨颞叶癫痫大鼠不同时期海马和皮层内氨基酸类递质水平的变化与颞叶癫痫发生发展的关系.方法 建立颞叶癫痫大鼠模型,视频监控癫痫发作行为学特征,高效液相色谱法测定脑组织中谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)含量.结果 与对照组相比,在癫痫发作急性期,模型组海马Glu/GABA比值显著升高(P＜0.05),Glu/Gly比值无显著变化,皮层Glu/GABA和Glu/Gly比值亦无显著变化,在癫痫发作静止期,模型组海马和皮层Glu/GABA和Glu/Gly比值均无显著变化;在癫痫发作慢性期,模型组海马和皮层Glu/GABA和Glu/Gly比值均显著性升高(P＜0.05).结论 海马脑区兴奋性和抑制性氨基酸类递质水平比例的失衡可能是导致癫痫发生发展的重要机制之一.     

七氟烷对糖尿病相关认知功能下降老年大鼠海马谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的观察七氟烷吸入麻醉后老年糖尿病大鼠的认知功能变化,并探索其神经递质谷氨酸(Glu)/γ-氨基丁酸(GABA)的变化规律。方法清洁级健康SD老年大鼠63只,高糖高脂饲料复合链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,Morris水迷宫实验选取学习记忆能力下降的大鼠,观察吸入3%七氟烷1,2,3h后记忆能力的变化和海马组织中Glu和GABA的含量改变。结果建立糖尿病模型后,老年大鼠学习、记忆功能均下降,海马Glu降低,GABA升高,Glu/GABA比值降低(P<0.05);吸入七氟烷后学习记忆能力、Glu/GABA比值降低更为明显(P<0.05﹚,吸入3h后的差别更显著。结论长时间吸入高浓度(3%)七氟烷可进一步降低糖尿病相关认知功能降低的老年大鼠的记忆能力,其机制可能与海马中神经递质Glu和GABA失衡有关。