Ras、c-myc、p~(53)癌基因蛋白在喉癌及癌旁 不同距离组织中表达的研究

研究癌基因及抗癌基因在喉癌及癌旁不同距离处的表达特点及意义。方法：应用ＬＳＡＢ微波 免疫组化法,检测了ｒａｓ,ｃ－ ｍｙｃ及 ｐ５３在 ３０例喉癌、边缘区、癌旁 ０．５ｃｍ、１．０ｃｍ、１．５ｃｍ、２．０ｃｍ处粘膜和４例正 常喉粘膜中的表达。结果;①ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３在喉癌组织中有较高的阳性表达率,分别为８６．７％（２６／３０）、９６．７％ （２９／３０）、６３．３％（１９／３０）,与癌旁及正常组织相比,差异显著（Ｐ＜０．０１）,ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ在正常组织中有低量表达,ｐ５３ 从癌旁１．０ｃｍ处开始出现表达。②两种以上癌基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织为２８例（９３．３％）,其中 ｒａｓ＋ｃ－ｍｙｃ＋ｐ５３者为１７例（５６．７％）。癌旁组织中也存在着复合表达,在正常组织中无一例联合表达。③ｒａｓ、ｃ －ｍｙｃ、ｐ５３的单独及联合表达依正常粘膜→癌旁２．０ｃｍ→１．５ｃｍ→１．０ｃｍ→０．５ｃｍ→边缘区→癌依次增高,多 数在癌旁１．０ｃｍ处与０．５ｃｍ以内处的表达存在有显著差异（Ｐ＜０．０５）。④三种癌基因产物的表达与喉癌的分化 程度无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３基因改变均参与了喉癌?     

c—myc,ras与P53基因蛋白在喉癌中的共同表达

目的：研究癌基因及抗癌基因在喉癌中的联合表达情况。方法：应用ＬＳＡＢ微波免疫组化方法，检测了ｃ－ｍｙｃ、ｒａｓ与Ｐ５３在３０例喉癌及癌帝粘膜，４例下沉喉粘膜中的共同表达。结果：①ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ和Ｐ５３的阳性表达率在癌组织中分别为８６．７％，９６．７％，６３．３％；癌旁粘膜分别为４３．３％，５６．７％，１０．０％；正常喉粘膜中分别为２５．０％，２５．０％，０．０％。癌与癌旁及正常粘膜间差异有显著     

c-myc癌基因蛋白在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达研究

目的：研究ｃ ｍｙｃ癌基因在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达特点及意义。方法：应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化法，检测了ｃ ｍｙｃ癌基因蛋白在３０例喉癌边缘区及癌旁０５、１０、１５、２０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜中的表达。结果：ｃ ｍｙｃ蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为９６７％（２９／３０），与正常组织相比差异显著（Ｐ＜００１），在癌旁１５ｃｍ处１０ｃｍ以内组织的表达存在着显著性差异（Ｐ＜００５）。ｃ ｍｙｃ表达从正常粘膜→癌旁组织→癌呈逐步递增趋势。结论：ｃ ｍｙｃ癌基因过度表达与喉癌的发生有关，且在喉癌发生中可能为一早期事件，距肿瘤１０ｃｍ以内之癌旁组织应视为危险病变。     

p21和c-myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高（Ｐ＜０．０１）。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达均以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步支持ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具相关性的观点。     

喉癌及癌旁组织中P53蛋白的表达

应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化技术，。用Ｐ５３单克隆抗体检测了３０例喉鳞癌，癌旁交界处及癌旁０．１，１．０，１．５，２．０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜和Ｐ５３蛋白的表达。结果显示；１．Ｐ５３在喉癌组织中的阳性表达率为６３．３％；在癌旁交界处，癌旁０，５，１．０，１．５，２．０ｃｍ处的阳性表达率分别为６０％，３６．７％，１０％，０．０％，０．１＾％；４例正常喉粘膜中无阳性表达，其间差异显著。２．Ｐ     

p21和c—myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高，Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具有相关性的观点。     

大肠癌组织中胃泌素与癌基因c-myc、c-fos、ras p21表达和AgNORs计数的关系

目的 探讨大肠癌组织中胃泌素与癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、ｒａｓ ｐ２１表达和核仁组成区嗜银染色（ＡｇＮＯＲｓ）计数的关系及其意义。方法 对４８例大肠癌病人癌组织进行检测,采用免疫组化Ｓ－Ｐ法测胃泌素、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、和ｒａｓ ｐ２１表达,改良银染法测ＡｇＮＯＲｓ计数,并与癌旁３ｃｍ、６ｃｍ粘膜及正常大肠粘膜作对照。结果 癌组织胃泌素、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、ｒａｓ Ｐ２１表达的阳性率和     

大肠腺癌及腺癌ras,P^53基因点突变的检测

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了２０例正常大肠粘膜、３０例大肠腺瘤、７４例大肠腺癌及７４例癌旁粘膜ｒａｓ、Ｐ＾５３基因点突变。结果显示，正常大肠粘膜及癌旁粘膜未检测到基因突变，大肠腺癌及腺癌ｒａｓ基因突变率分别为２６．７％及４１．９％，且ｒａｓ基因突变率随腺瘤大小及不典型增生程度增高而增高。大肠腺癌及腺癌Ｐ＾５３基因（第２４８位点）突变率分别为１．３％及１４．９％。１例腺瘤、６例腺癌存在ｒａｓ及Ｐ＾５     

人宫颈癌多基因致癌机理的研究

应用核酸分子杂交、ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＡＳＯ杂交等技术，对人宫颈癌中Ｈａ－ｒａｓ等三种癌基因、ＨＰＶ１６病毒基因及Ｐ５３、Ｒｂ抑癌基因等多基因变化及其致癌机理进行了研究。结果表明：①宫颈癌中存在Ｈａ－ｒａｓ第１２位密码子Ｇ→Ｔ点突变，突变率为１８．２％（８／４４），并有Ｈａ－ｒａｓ基因扩增，扩增率为４５％（９／２０）；②ｃ－ｅｒｂＢ２基因在宫颈癌中的扩增率为７３．３％（１１／１５），５例伴有重排；③ｃ－ｍｙｃ基因在宫颈癌中的扩增率为９１．７％（１１／１２）；④ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７为引物的ＰＣＲ检测结果，宫颈癌中的阳性率为８０．５％（３３／４１）；⑤１２例宫颈癌中未发现Ｐ５８、Ｒｂ基因缺失。上述多基因致癌机理的研究表明，人宫颈癌中Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ２经点突变、扩增、重排而被激活，在癌变中起着协同致癌作用。ＨＰＶ１６基因的整合可能启动ｃ－ｍｙｃ，为癌变的起始因素，而Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ２的基因改变可能为中、晚期事件，抑癌基因Ｐ５３、Ｒｂ的作用尚需进一步研究。     

p53、c-myc基因蛋白产物及增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的同步检测

目的为弄清Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因和细胞增殖活性与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展的关系。方法应用免疫组化方法检测了３０例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因蛋白产物以及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果Ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ基因表达率分别为４６．７％和５６７％。ｐ５３在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织的表达率有递增趋势;而ｃ－ｎｌｙＣ基因在三级间的表达率却无明显区别。ｐ５３与ｃ－ｍｙｃ基因的同时表达率为２３３％。ＰＣＮＡ阳性细胞的分布在ＨＣＣ中呈四种类型：散在型、边缘型、镶嵌型和弥漫型。ＰＣＮＡ标记指数与ＨＣＣ的分级相关。ｐ５３阳性的ＨＣＣ中ＰＣＮＡＬＩ为５３．８±２４．３,阴性的为３３．１±１５．７（Ｐ＜０．０５）;ｃ－ｍｐｃ基因表达阳性与阴性的ＰＣＮＡＬＩ分别为３８、７±２２．９、４２．８±２１．６（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因均与ＨＣＣ的发生、发展有关,但两者之间无依存关系;伴有ｐ５３基因突变的ＨＣＣ中癌细胞增生活跃,恶性程度高。     

喉癌及癌旁不同距离组织中ras、c-myc、p53蛋白的复合表达

目的 :研究癌基因 (ras,c myc)及抗癌基因 (p5 3)蛋白在喉癌及癌旁不同距离处的复合表达及意义。方法 :应用LSAB微波免疫组织化学法 ,检测了ras、c myc及p5 3在 30例喉癌组织、边缘区、癌旁 0 .5cm ,1.0cm ,1.5cm ,2 .0cm处粘膜组织和 4例正常喉粘膜组织中的复合表达情况。结果 :① 2种以上基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织中为 2 8例 (93.3 % ) ,其中ras +c myc +p5 3为 17例 (5 6 .7% ) ,癌旁组织中也存在着不同程度的复合表达 ,而正常喉粘膜组织中无一例复合表达 ;②复合表达阳性率依正常粘膜组织→癌旁 2 .0cm→ 1.5cm→ 1.0cm→0 .5cm→边缘区→癌组织递增 ,且癌旁 1.0cm处与 0 .5cm范围内的表达存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;③ 3种癌基因产物的复合表达与喉癌的部位 ,分化程度 ,临床分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :喉癌及癌旁组织中存在着 3种癌基因的复合表达 ,其在喉癌的发生中有协同作用 ;距癌 0 .5cm以内的癌旁组织应视为危险性病变。     

P53与ras癌基因产物对直肠癌的诊断价值

目的提高直肠癌术前活检的诊断率。方法5年来手术治疗的168例直肠癌病人中,有20例（11．9％）第一次手术前活检不能明确诊断。对其中17例患者的活检组织石蜡标本（实验组）和10例正常肠粘膜活检标本（对照组）进行常规病理、P53与ras癌基因产物检测。结果实验组中P53与ras基因表达阳性率分别为71％与47％,阳性率均高于常规病理,有显著性差异。17例标本中,11例为不典型增生,5例仅有慢性炎症。不典型增生的P53与ras基因表达分别为11例和7例,而慢性炎症则全部为阴性。二者之间,两种基因表达阳性率均有显著差异。实验结果还显示P53与ras基因表达有较好的一致性。对照组的10例正常肠粘膜的活检标本P53与ras基因检测结果均阴性,与实验组比较,P53阳性率有显著差异。结论P53与ras基因表达检测,可以作为常规病理的补充,提高直肠良恶性病变的鉴别力。     

肺癌组织中癌基因ras和c-myc蛋白产物的免疫组织化学研究

目的］探讨肺癌组织中癌基因ｒａｓ和ｃ ｍｙｃ蛋白产物Ｐ２１,Ｐ６２表达特征以及临床病理意义．［方法］应用免疫组织化学方法（Ｓ Ｐ法）检测６９例肺癌组织标本中Ｐ２１和Ｐ６２蛋白表达．［结果］Ｐ２１和Ｐ６２在肺癌中的阳性表达率分别为６８％,７１％;在肺癌癌旁支气管粘膜和腺体中的阳性表达率分别为１８％和２９％,与肿瘤区相比较差异非常显著．Ｐ２１和Ｐ６２蛋白之间的阳性率无统计学差异．６９例肺癌中２１例（３０％）同时有Ｐ２１和Ｐ６２共同表达．肺腺癌Ｐ２１蛋白表达高于肺鳞癌．Ｐ２１和Ｐ６２蛋白表达与肺癌病人性别、年龄、肿瘤分期及肺癌分化程度无关．［结论］ｒａｓ和ｃ ｍｙｃ癌基因突变是肺癌的早期事件,ｒａｓ和ｃ ｍｙｃ癌基因在肺癌发生发展中具有相同重要性     

p53和c-myc在口腔鳞癌中基因扩增和mRNA表达

目的：探讨p53和c-myc基因扩增和mRNA表达在口腔鳞癌(OSCC)形成和发展中的作用。方法：用原位杂交与图像分析相结合的方法，对30例口腔鳞癌和5例正常口腔粘膜中p53和c-myc的基因扩增和mRNA表达状况进行了定性、定位、定量研究。结果：OSCC中p53和c-myc的扩增阳性率分别为40％和63．3％，其mRNA表达率分别是80％和83．3％。p53和c-myc基因扩增量之间具有显著性相关。结论：这两种基因的扩增和mRNA表达在OSCC发生发展中都具有重要作用；在OSCC中导致p53和c-myc扩增的某些因素可能是相同的。     

鼻咽癌的癌基因与抗癌基因癌蛋白表达的研究

应用免疫组化方法检测了58例鼻咽癌和24例鼻咽良性疾患的表皮生长因子受体（EGFR），N—ras，c-myc，c—erbB—2，P53和增殖细胞核抗原（IUNA）的表达情况。结果发现鼻咽癌中EGFR，N—ras，c-myc，P53和c-erbB-2的阳性率分别为29．3％，17．2％，12％，8．6％和12％。鼻咽癌中PCNA的阳性率为17．91％，鼻咽良性疾患为6．67％，两者有极显著的差别（t＝2．47，P＜0．02）。P53阳性的鼻咽癌患者EGFR均为阳性，这些病例的PCNA均在20％以上。     

喉癌及癌旁组织中P53蛋白的表达

应用枸橼酸－LSAB－微波免疫组化技术，用P53单克隆抗体检测了30例喉鳞癌、癌旁交界处及癌旁0．5、1．0、1．5、2．0cm处粘膜和4例正常喉粘膜中P53蛋白的表达。结果显示：①P53在喉癌组织中的阳性表达率为63．3％（19／30）；在癌旁交界处、癌旁0．5、1．0、1．5、2．0cm处的阳性表达率分别为60％（18／30）、36．7％（11／30）、10％（3／30）、0．0％（0／30）、0．0％（0／30）；4例正常喉粘膜中无阳性表达，其间差异显著（P＜0．01）。②P53蛋白阳性表达强度以喉癌组织中最强，随着远离肿瘤距离的增加，表达强度逐渐减弱。③P53蛋白的表达与喉癌部位、临床分期及肿瘤分级无关。结果提示：P53基因突变参与了喉癌的发生，P53过度表达是喉癌发生中的早期事件；距肿离0．5cm以内的癌旁组织，应视为危险区域。