肺纤维化的肺成纤维细胞生物学特征的实验研究

肺纤维化的肺成纤维细胞生物学特征的实验研究赵洪文吕长俊侯显明于润江１．动物模型的复制：体重２００～３００ｇＷｉｓｔａｒ雌性大白鼠５０只，随机分博莱霉素（ＢＬＭ）组（２５只）和对照组（２５只）。（１）ＢＬＭ组：经穿刺向气管内注入０．３ｍｌ含ＢＬＭ的生理...     

肺成纤维细胞在肺纤维化中的作用

肺伦是各种间质性肺疾病的共同结局，而肺纤维化的发生发展与肺成纤维细胞密切相关。本就肺成纤维细胞在肺纤维化过程中的作用作一综述。     

肺成纤维细胞在博来霉素致肺纤维化中的作用机制

目的:探讨肺成纤维细胞(PFC)在博来霉素(BLM)致肺纤维化中的作用机制。方法:采用差时贴壁法培养与纯化PFC,传至第3代备用。分为Control组:细胞用正常的培养基培养;BLM组:依次分为0.01mol/L BLM组、0.03mol/L BLM组、0.1mol/L BLM组、1mol/L BLM组及10mol/L BLM,每组每孔细胞分别加上述浓度的BLM,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时。TGF-β1组:每个孔用2ug/L TGF-β1,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时。免疫细胞化学法鉴定PFC与肺肌成纤维细胞(PMFC)。采用Real-time PCR及Western-blot技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA表达与α-SMA蛋白水平。Brd U法检测细胞增殖。结果:BLM可剂量依赖性地抑制细胞增殖,BLM浓度从0.1mol/L始抑制PFC的增殖较对照组(P<0.05)。0.1mol/L BLM干预24小时后,α-SMA免疫细胞化学染色鉴定呈阳性,α-SMA mRNA的较对照组表达增加(P<0.05);Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达较对照组显著增加(P<0.01);0.1mol/L BLM能明显升高α—SMA的蛋白表达水平。结论:PFC转化成PMFC且显著增加Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,成为BLM诱导肺纤维化中的重要作用机制之一。     

肺成纤维细胞在肺纤维化中的作用

肺纤维化是各种间质性肺疾病的共同结局,而肺纤维化的发生发展与肺成纤维细胞密切相关。本文就肺成纤维细胞在肺纤维化过程中的作用作一综述。     

肺肌成纤维细胞与特发性肺纤维化研究进展

肺纤维化（pulmonary fibrosis，PF）形成过程中涉及细胞外基质（extracellula matrix，ECM）大量沉积，其主要来源于肌成纤维细胞（myofibroblast，MF）。该细胞能表达α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle actin，α—SMA），是造成ECM异常沉积的主要细胞。MF的转化受多种因素调节、有多种信号途径参与，是一个错综复杂的过程。     

成纤维细胞、肌成纤维细胞与肺纤维化

肺纤维化(PF)形成过程中涉及细胞外基质大量沉积,其主要来自于成纤维细胞(FB)。成纤维细胞灶主要由一种特殊成纤维细胞——表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的肌成纤维细胞(MF)构成,是造成细胞外基质异常沉积的主要细胞,FB和MF共同参与了PF形成。FB与MF之间存在一定的联系、区别,其中涉及到FB向MF表型转化,其转化的机制受多种因素调节、多种信号途径参与,是一个错综复杂的过程。     

特发性肺纤维化中肌成纤维细胞来源的研究进展

在特发性肺纤维化发病过程中.肌成纤维细胞是主要效应细胞,具有促进细胞外基质沉积、肺顺应性下降,肺组织结构破坏以及分泌多种炎性细胞因子的功能.因此,研究肌成纤维细胞的来源对于阐明特发性肺纤维化的发病机制以及寻求有效的分子治疗靶点具有非常重要的意义.迄今为止,肌成纤维细胞的来源集中在3个方面:肺内的成纤维细胞、肺组织上皮细胞和骨髓源性细胞或纤维细胞.本文对近年来的相关文献进行整理,加以阐述.     

二丙酸倍氯米松和布地奈德对白细胞介素13激活的肺成纤维细胞的影响

目的观察吸入型糖皮质激素二丙酸倍氯米松（BDP）和布地奈德（BUD）对白细胞介素13（IL-13）激活的肺成纤维细胞的影响。方法IL-13加入培养的肺成纤维细胞，采用噻唑蓝法、免疫组织化学法、免疫印迹法、逆转录聚合酶链反应、ELISA等方法检测细胞增殖、α-肌动蛋白（α-SMA）表达及分泌白细胞介素6（IL-6）、嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）的变化，观察BDP和BUD的作用。结果加入20ng／ml的IL-13后，成纤维细胞分泌IL-6明显增加[（20±2）ng／L和（140±8）ng／L]，eotaxin也明显增加[（64±25）ng／L和（334±51）ng／L]。10^-8mol／L～10^-5mol／L的BDP组和BUD组IL-6表达水平[（112±3）ng／L～（53±2）ng／L和（55±14）ng／L～（32±6）ng／L]比IL-13组明显下降，IL-6 mRNA表达比IL-13组明显减少，细胞上清液中eotaxin水平[（297±59）～（226±43）ng／L和（287±59）～（183±43）ng／L]比IL-13组明显降低。IL-13诱导成纤维细胞表达α-SMA mRNA及蛋白明显增加，并促进成纤维细胞增殖（1．5±0．2）倍。BDP组和BUD组对IL-13诱导的α-SMA mRNA及蛋白的表达无显著影响，并明显具有协同IL-13促进成纤维细胞增殖的作用。结论BDP和BUD对IL-13刺激成纤维细胞的作用具有多重调节效应。BDP和BUD抑制IL-13诱导成纤维细胞合成、释放炎症介质IL-6和eotaxin的作用，有利于改善气道上皮下纤维化，但对于IL-13促进成纤维细胞转化为肌成纤维细胞及其增殖方面起负面影响。     

肌成纤维细胞凋亡与肺纤维化

成纤维细胞受到各种刺激后可发生活化。并进而转化为表达α平滑肌肌动蛋白的肌成纤维细胞。转化生长因子β可抑制成纤维细胞调亡,而羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂等可促进成纤维细胞的凋亡。肌成纤维细胞能诱导肺泡上皮细胞的凋亡,促进肺纤维化的发生。     

博莱霉素致大鼠肺纤维化形成过程中Thy-1表达变化与细胞因子生成之间关系的研究

目的 测定博莱霉素致肺纤维化动物模型支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白介素1(interleukin-1,IL-1)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),研究其与肺成纤维细胞表面Thy-1表达阳性率之间的关系,探讨肺纤维化发病机制.方法 发于不同时间点采用免疫组织化学法测定Thy-1表达阳性率,采用胸腺细胞法测定BALF中IL-1的活性,采用结晶紫法测定TNF-α活性.结果 肺纤维化形成过程中,成纤维细胞表面Thy-1表达阳性率呈进行性下降,与IL-1、TNF-α活性之间无相关性.结论 经 肺纤维化形成与Thy-1表达之间密切相关,Thy-1减少与IL-1、TNF-α无明显相关性,可能是一个综合因素作用的结果 .     

Cellular senescence-like features of lung fibroblasts derived from idiopathic pulmonary fibrosis patients

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is an age-related fatal disease with unknown etiology and no effective treatment. In this study, we show that primary cultures of fibroblasts derived from lung biopsies of IPF patients exhibited (i) accelerated replicative cellular senescence (CS); (ii) high resistance to oxidative-stress-induced cytotoxicity or CS; (iii) a CS-like morphology (even at the proliferative phase); and (iv) rapid accumulation of senescent cells expressing the myofibroblast marker α-SMA. Our findings suggest that CS could serve as a bridge connecting lung aging and its quite frequent outcome -- pulmonary fibrosis, and be an important player in the disease progression. Consequently, targeting senescent cells offers the potential of being a promising therapeutic approach.     

白细胞粘附分子单克隆抗体对成纤细胞增殖作用的影响

目的 探讨抗白细胞粘附分子即白细胞分化抗原（ＣＤ１１ＧＢ，ＣＤ１８，ＣＤ５４）单克隆抗体对成纤维细胞的体外增殖作用的影响。方法 采用＾３Ｈ胸腺嘧啶核苷掺入法（＾３Ｈ－ＴＤＲ）结合双抗夹心酶联免疫实验的方法，测定成纤维细胞的增殖和胶原分泌的水平。结果 白细胞粘附分子的单克隆抗体ＣＤ１１Ｂ，ＣＤ１８，ＣＤ５４能抑制成纤维细胞（Ｌ９２９）的增殖，并且ＣＤ１１Ｂ与ＣＤ５４，ＣＤ１８与ＣＤ５４的单克隆抗体联     

The number of interleukin 1 receptors on lung fibroblasts in patients with idiopathic pulmonary fibrosis.

BACKGROUND: We investigated the expression of the IL-1 receptor on lung fibroblasts in patients with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) the histology of which was diagnosed as usual interstitial pneumonia. METHODS: 125I-labeled IL-1alpha bound to lung fibroblasts in a specific and saturable manner in lung fibroblasts obtained from both IPF patients and control subjects. RESULTS: Scatchard plot analysis revealed a single type of binding site in both groups. In total, 8,600 +/- 1,450 (mean +/-SD) sites/cell with a dissociation constant (Kd) of 1.83 +/- 0.28 (mean +/-SD) nM in patients with IPF and 7,920 +/- 1,470 sites/cell with a Kd of 2.43 +/- 0.49 nM in control subjects were counted. Furthermore, affinity cross-linking experiments revealed that the IL-1 receptor on lung fibroblasts in patients with IPF and control subjects had a molecular size of 80 kD. CONCLUSION: In conclusion, type I receptor was present on human lung fibroblasts, but there were no differences in number or affinity between IPF patients and controls.     

Connective tissue formation by lung fibroblasts in vitro.

Guinea pig lung fibroblasts were grown in monolayer culture after enzymatic disaggregation of lung parenchyma. Light and electron microscopy indicated that the cultures were relatively homogeneous with respect to cell type. Synthesis of matrix glycosaminoglycans and collagen was demonstrated throughout the life of the culture. The properties of the guinea pig cell strains make these a suitable in vitro model system for studying the regulation of connective tissue metabolism of pulmonary tissue.