蛋白激酶C信息通道在缺氧性肺动脉高压发病机制中的作用

蛋白激酶Ｃ信息通道是细胞膜后重要的信息传递途径，近年来有关越来越多的研究表明该通道在缺氧性肺动脉高压发病机制的多个环节中起着重要作用：蛋白激酶Ｃ激活后可显增强缺氧性肺血管收缩反应，抑制肺血管内皮依赖性舒张反应，增强肺血管对收缩介质的反应性，促进肺血管平滑增生，加速肺血管改建、最终促进肺动脉高压形成。     

银杏叶制剂对缺氧性肺动脉高压的影响及其与蛋白激酶C …

OBJECTIVE: To elucidate whether the mechanism of relieving hypoxic hypertension by ginkgo biloba involves attenuation of the function of protein kinase C(PKC) signal channel. METHODS: 1. Wistar rats were randomly divided into control(C), hypoxic(H) and ginkgo biloba treatment(GB + H) (200 mg.kg-1.d-1, orally) groups (n = 7). Each rat was first measured mean pulmonary arterial pressure (mPAP), mean systemic arterial pressure (mSAP) and the ratio of the weight of right ventricle to that of left ventricle plus septum [RV/(LV + S)], than two main pulmonary artery rings were isolated to exposed to PDBu(a specific activator of PKC) to observe the time-response curve and the dose-response curve in response to 500 nmol/L PDBu and 10-11,000 nmol/L PDBu respectively to evaluate the function of protein kinase C signal channel. 2. Intrapulmonary artery rings of human(IARH) from pneumolobectomy were randomly divided into PDBu, RO318220 (inhibitor of PKC) + PDBu and ginkgolide B(BN52021) + PDBu groups(n = 6), the IARH of three groups were exposed to 1-25 nmol/L PDBu to achieve dose-response curves respectively. RESULTS: (1) mPAP, RV/(LV + S) of the H group were greater than those of C and GB + H groups respectively (P < 0.05). mPAP of GB + H group was greater than that of C group (P < 0.05). In PA experiments, the function of protein kinase C of H group was higher than those of C and GB + H groups respectively(P < 0.05). (2) In IARH experiments, the function of protein kinase C of PDBu group was higher than those of RO318220 + PDBu and BN52021 + PDBu groups respectively(P < 0.05). CONCLUSIONS: Ginkgo biloba can reduce chronic hypoxic pulmonary hypertension and relieve the hypertrophy of right ventricle, which is partly related to attenuation of the function of PKC signal channel.     

蛋白激酶C与低氧性肺动脉高压

蛋白激酶C（PKC）是细胞膜后住处转导通路之一，在细胞的生长、增殖、代谢等各方面发挥重要作用。了解CK信息通道在低氧性肺动脉高压发病中的作用，有助于探索低氧性肺动脉高压新的防治方法。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉血管内皮损伤的研究

近年来,血管内皮细胞(ＶＥＣ)在肺动脉高压发病中的作用逐渐引起重视,而循环内皮细胞(ＣＥＣ)被确认为是反映血管内皮损伤的特异性指标。本实验通过观察血ＣＥＣ数量、形态变化和血浆一氧化氮(ＮＯ)、丙二醛(ＭＤＡ)变化及电镜下血管内皮的变化,观察缺氧性肺动脉高压时血管内皮损伤的变化。一、材料与方法1动物模型的复制与分组:雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠30只,体重200～250ｇ,随机分成3组,正常组、缺氧2周组和缺氧4周组,每组10只,缺氧模型的复制参照薛全福法复制[1]。2方法:(1)血流动力学测定采用孙波等方法。(2)血ＣＥＣ测定参照杨映波和王正国…     

钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压

钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压肖欣荣陈文彬近年来，人们认识到，在影响血管张力的各种综合因素中，来自血管平滑肌细胞（ＳＭＣｓ）内在的电生理活动发挥着十分重要的作用。如钾通道的开放，促使细胞膜电位增加，细胞膜超极化，从而使血管平滑肌兴奋性下降，血管张力...     

缺氧性肺动脉高压时肺动脉胶原变化的研究进展

缺氧性肺动脉高压是临床众多疾病发生、发展过程中重要病理生理环节。缺氧性肺血管结构重建作为慢性缺氧性肺动脉高压形成中重要的病理机制,其主要特征是肺动脉平滑肌细胞增生、肥厚,中膜增厚,外周小血管肌化,以及细胞外基质的增多。细胞外基质在缺氧性肺血管结构重建中的作用已受到越来越多的重视,其主要成分是胶原蛋白和弹性蛋白,其中胶原蛋白的堆积已成为近年来人们广泛探讨的热点课题。 一、胶原在正常肺动脉的分布 胶原在维持血管的完整性方面有重要作用。研     

洛沙坦对大鼠缺氧性肺动脉高压的治疗效应

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)可引起肺血管收缩和肺血管重建而参与肺动脉高压的形成，应用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂能阻断AngⅡ的合成或作用的发挥，可减轻和延缓肺动脉高压及右室肥厚。洛沙坦(商品名：科素亚)是一种AngⅡ受体拮抗剂，我们采用缺氧复制肺动脉高压模型，以洛沙坦对缺氧大鼠进行治疗，     

氯血红素对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用

肺动脉平滑肌细胞增殖引起的肺血管重构是造成慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)缺氧性肺动脉高压的病理形态学基础。诱导型血红素氧合酶 (ＨＯ 1)在缺氧状态下表达增多 ,分解血红素产生的ＣＯ可抑制肺动脉平滑肌细胞 (ＰＡＳＭＣ)增殖。我们检测了血红素氧合酶促进剂—氯血红素 (Ｈｅｍｉｎ)对慢性缺氧大鼠肺组织中ＨＯ 1基因表达及肺动脉压的影响。材料与方法　按薛全福方法[1] 复制动物模型。雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 72只 ,体重 2 0 0～ 30 0ｇ,随机分为下列 3组 ,每组各 8只。Ｈｅｍｉｎ干预组 :即每次缺氧前 0 5ｈ腹腔注射Ｈｅｍｉｎ15ｍｇ/…     

外源性一氧化碳在大鼠缺氧性肺动脉高压中的作用

缺氧性肺动脉高压是慢性阻塞性肺疾病的病理生理学基础。近年来 ,血红蛋白氧合酶 (ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ,ＨＯ)和一氧化碳 (ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅ ,ＣＯ)在缺氧性肺动脉高压中的作用受到重视[1] 。ＨＯ是血红蛋白降解酶 ,能使血红蛋白生成胆红素和ＣＯ ,而ＣＯ是一类新的血管舒张因子 ,我们通过建立常压缺氧肺动脉高压大鼠模型 ,探讨ＨＯ ＣＯ系统在缺氧性肺动脉高压中的作用。材料与方法　 (1)选择健康成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 0只 ,体重 (2 0 0± 2 5 )ｇ ,随机分为 5组 ,每组 12只。正常对照组 :放在室温下依常规方法…     

丝裂原活化蛋白激酶调节缺氧诱导因子1α对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达变化在缺氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C组)和低氧3、7、14、21d组(H3、H7、H14、H21组),每组8只,低氧组复制HPH大鼠模型。测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;Westernblot或免疫组化检测磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)、磷酸化cJUN氨基端蛋白激酶(pJNK)、磷酸化P38(pP38);原位杂交和免疫组化检测HIF1α的表达。结果(1)H7组大鼠mPAP、管壁厚度与血管外径比值及管壁面积与血管面积比值分别为(23.5±1.8)mmHg、(45.5±3.1)%和(54.7±3.2)%,与C组[(16.2±2.0)mmHg、(36.8±2.5)%和(63.2±2.5)%]比较差异均有统计学意义(P均<0.05),H14组稳定于高水平;H14组RVHI为(26.5±2.9)%,与C组[(22.9±2.2)%]比较差异也有统计学意义(P<0.05);(2)pERK蛋白在C组表达不明显,在H3组表达上升,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),且在H3、H7、H14、H21组肺小动脉内膜、中膜表达均为阳性。而pJNK、pP38蛋白在C组与H组表达均不明显;(3)C组HIF1α蛋白表达不明显,H3、H7、H14、H21组肺血管内膜均为阳性,肺血管中膜在H3组表达开始升高(0.209±0.009),与C组比较差异有统计学意     

Erythrocyte membrane phosphorylation in rats with spontaneous hypertension as affected by protein kinase C activator

A study of orthophosphate incorporation into erythrocyte membrane proteins and lipids of spontaneously-hypertensive rats (SHR) at incubation of erythrocytes with 32PO4 and that of erythrocyte ghosts with 32P-gamma-ATP showed basal phosphorylation of proteins as well as polyphosphoinositides of erythrocyte ghosts to be essentially increased in SHRs as compared to normotensive animals, the differences being eliminated by the addition of protein kinase C activator (4 beta-phorbol-12 beta-myristate-13 alpha-acetate, PMA). After PMA-stimulated protein phosphorylation most of the label was incorporated into proteins of Band 4.1. There was no difference in basal phosphorylation of membrane proteins in case of intact erythrocytes. Under PMA stimulation, most of the label was incorporated into proteins of band 4.1 similarly to labelling of erythrocyte ghosts and a significant increment of radioactivity could only be seen in the control animals.     

肝素对低氧诱导肺动脉高压大鼠肺血管外膜重塑干预作用的研究

目的 探讨肝素对低氧诱导肺动脉高压(PAH)大鼠肺动脉外膜重塑的干预作用及机制. 方法 将60只健康雄性SD大鼠随机分为A、B、C三组,各20只;A组正常饲养,B组作低氧处理4周,C组作低氧处理4周后给予肝素处理.测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥厚指数[RV/(LV S)]、PaCO2和PaO2.用免疫组化SP法检测肺动脉外膜巨噬细胞及其单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1);用RT-PCR一步法检测肺组织中的MCP-1mRNA. 结果 B组mPAP、RV/(LV S)、PaCO2显著高于A组(P<0.05),C组显著低于B组(P<0.01),而PaO2则相反.肺动脉外膜单视野平均巨噬细胞数目(MAM)、巨噬细胞MCP-1蛋白及肺组织MCP-1 mRNA的表达B组显著高于A组(P<0.05),C组显著低于B组(P<0.01). 结论 MCP-1可能参与了缺氧诱导的肺动脉外膜重塑,促进了PAH的发生、发展.肝素封闭了MCP-1的作用,抑制肺血管结构外膜重建,减轻肺动脉高压.     

大鼠缺氧性肺动脉高压时三种缺氧诱导因子α亚基在肺动脉中的差异表达

目的区分大鼠缺氧性肺动脉高压时肺血管壁3种缺氧诱导因子α(HIFα)亚基(HIF1α、HIF2α、HIF3α)的基因表达特征。方法40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为常氧0d组(H0组)、缺氧3d组(H3组)、7d组(H7组)、14d组(H14组)和21d组(H21组),每组8只。用(10.0±0.5)%的氧浓度每天间断缺氧8h,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、肺动脉管壁面积(WA%)、肺动脉中膜厚度(PAMT)、右室肥厚指数(RVHI%);用原位杂交、免疫印迹和免疫组化法检测HIF1α、HIF2α和HIF3α基因表达。结果H7组mPAP为(18.40±0.40)mmHg(1mmHg=0.133kPa),H0组为(14.40±0.40)mmHg,H14组为(21.20±0.20)mmHg,H7组与H0组、H14组比较差异有统计学意义(P均<0.05);血管形态学显示,H7组WA%、PAMT、RVHI%分别为(47.8±0.8)%、(12.3±0.5)μm、(24.0±1.0)%,H14组分别为(60.3±0.4)%、(15.0±0.3)μm、(25.0±1.8)%,H0组分别为(35.5±1.3)%、(11.9±0.6)μm、(23.6±0.5)%,H21组分别为(65.0±0.7)%、(23.0±0.8)μm、(27.7±1.0)%,WA%H7组与H0组、H14组与H0组、H21组与H14组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。原位杂交显示,H14组HIF1α、HIF2α、HIF3αmRNA水平的吸光度(A)值分别为0.200±0.020、0.080±0.010、0.170±0.010;H7组分别为0.050±0.020、0.160±0.020、0.160±0.020;H0组分别为0.050±0.010、0.140±0.020、0.060±0.010;H14组与H0组三者、H7组与H0组仅HIF3α比较差异有统计学意义(P均<0.05)。免疫组化表明,H3组HIF1α,HIF2α和HIF3α蛋白表达分别为0.200±0.020、0.020±0.010、0.050±0.010;H14组分别为0.160±0.010、0.100±0.020、0.160±0.010;H7组分别为0.220±0.020、0.030±0.010、0.180±0.020;H0组分别为0.050±0.010、0.020±0.010、0.040±0.010,H3组HIF1α蛋白、H14组HIF2α蛋白、H7组、H3组HIF3α蛋白分别与H0组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。H7组免疫印迹显示在肺组织中HIF3α表达较H0组显著减弱,H3组HIF2α、HIF3α蛋白表达较H0组增强,随着缺氧时间延长,H14组较H7组更明显。结论3种HIFα表达差异可能在缺氧性肺动脉高压发病中发挥作用。     

肝硬化大鼠主动脉环收缩功能下降的机制研究

目的:探讨一氧化氮在肝硬化大鼠主动脉环收缩功能下降机制中所起的作用.方法:测定肝硬化或对照大鼠主动脉环在不同条件下对浓度递增之去甲肾上腺素的反应性.结果:去内皮或使用LNNA阻滞一氧化氮合成均能使去甲肾上腺素作用下之肝硬化大鼠主动脉环下降之收缩功能改善.结论:一氧化氮可能与肝硬化大鼠主动脉环对去甲肾上腺素的低反应性有关.     

一氧化氮对肝硬化大鼠肺动脉环收缩反应的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)在肝硬化大鼠离体肺动脉对缩血管物质反应性改变中的作用.方法:采用胆总管结扎大鼠模型(组织学证实肝硬化存在,模型成功),检测给予NO合酶(NOS)抑制剂(L-NAME)前后离休肺动脉环对不同浓度苯肾上腺素(PE)的反应性.结果:肝硬化模型组大鼠离体肺动脉环对PE的收缩反应较对照组明显降低,最大收缩反应(R_(max))分别为131.51±6.95%,161.86%±11.30%,两组差异有显著意义(P<0.05).给予L-NAME预处理后,肝硬化模型组R_(max)上升至175.96±12.33%,与L-NAME处理前比较差异有显著意义(P<0.05);对照组上升至190.42±13.91%,差异无显著性(P>0.05).结论:肝硬化大鼠离体肺动脉对苯肾上腺素的反应性降低可能与NO合成增多有关     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内PTEN蛋白表达的变化

目的 通过观察慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（PTEN）蛋白表达水平的变化,初步探讨PTEN在慢性低氧性肺动脉高压的发生、发展过程中所起的作用.方法 将6周龄健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、低氧1d、3d、7d、14d和21d组,除对照组外,其他各组先建立慢性低氧肺动脉高压大鼠模型,然后检测各组大鼠右心室收缩压（right ventricle systolic pressure,RVSP）和右心室肥厚指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）,采用HE染色观察肺动脉病理学改变,采用Western blot技术检测肺动脉内PTEN蛋白的表达水平.结果 ①与正常对照组（23.76±0.82）mmHg相比,低氧暴露1d、3d、7d、14 d、21d后RVSP均明显上升（P＜0.05）;RVHI低氧3d、7d、14 d、21d组均较正常对照组（100％）明显上升（P＜0.05）;低氧暴露3d、7d和21d组肺动脉中膜明显增厚、管腔明显变小.②PTEN和p-PTEN在正常对照组和低氧各组均有表达.低氧各组肺动脉内PTEN蛋白的表达较对照组下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;而p-PTEN蛋白与PTEN总蛋白表达量的比值随低氧时间的延长有上升趋势,且在慢性低氧21d组（1.71±0.25）较正常对照组（1.00）明显增高（P＜0.05）.结论 PTEN蛋白表达的降低和p-PTEN蛋白表达的增高可能参与了大鼠慢性低氧性肺动脉高压的发生和发展过程.     

低氧肺动脉高压大鼠的肺动脉组织凋亡

目的 研究bcl-2、bax凋亡相关基因在低氧处理大鼠肺动脉中的表达,探讨低氧肺动脉高压的发病机制及防治措施.方法 36只Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常对照组、低氧肺动脉高压组、低浓度一氧化碳(CO)组,每组12只,采用原位细胞凋亡、原位杂交、免疫组化等方法检测肺动脉的凋亡状况.结果 ①原位凋亡检测示,正常对照组、低氧肺动脉高压组、低浓度CO组的凋亡率分别为8.1%,37.6%,76.5%,三者间差异显著;②原位杂交显示,正常对照组bax、bcl-2杂交呈弱阳性表达.低氧肺动脉高压组bax杂交呈弱阳性表达,低浓度CO组呈强阳性表达,但bcl-2杂交可见低氧肺动脉高压组呈强阳性表达,低浓度CO组呈弱阳性表达;③免疫组织化结果表明,低浓度CO组bcl-2、bax蛋白均有升高,以bax为著.低氧肺动脉高压组虽然也有表达,但程度较弱,且bcl-2表达处于优势.结论 低浓度CO可以调节bcl-2、bax凋亡基因的表达,从而促进肺动脉组织的凋亡.