白细胞粘附分子单克隆抗体对成纤维细胞增殖作用的影响

目的探讨抗白细胞粘附分子即白细胞分化抗原（ＣＤ１１Ｂ，ＣＤ１８，ＣＤ５４）单克隆抗体对成纤维细胞的体外增殖作用的影响。方法采用３Ｈ胸腺嘧啶核苷掺入法（３ＨＴＤＲ）结合双抗夹心酶联免疫实验的方法，测定成纤维细胞的增殖和胶原分泌的水平。结果白细胞粘附分子的单克隆抗体ＣＤ１１Ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ５４能抑制成纤维细胞（Ｌ９２９）的增殖，并且ＣＤ１１Ｂ与ＣＤ５４、ＣＤ１８与ＣＤ５４的单克隆抗体联合抑制作用更明显；其抑制作用分别为ＣＤ１１Ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ５４单独使用的７．９、１．２５、２．１倍。并可减少成纤维细胞株（Ｌ９２９）胶原的分泌，抗体的协同作用分别为ＣＤ１１Ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ５４的３、２．６、２．５倍。结论ＣＤ１１Ｂ、ＣＤ５４、ＣＤ１８的单克隆抗体可抑制成纤维细胞的增殖和胶原的分泌，可能在肺纤维化的治疗中具有潜在的应用价值。     

糜酶介导心脏成纤维细胞增殖中转化生长因子β1的作用

目的 探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响及其与转化生长因子β1(TGF-β1)信号的关系.方法 用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs.采用四氮唑盐(MTT)比色法(A4go值)测定细胞数目,[3H]脱氧胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入法测定CFs的DNA合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1的mRNA表达水平.结果 糜酶以剂量依赖方式增加CFs数目与DNA合成速率.15、30和60 ng/mL糜酶组的A490值分别为0.263±0.033、0.348±0.031和0.387±O.026,均明显高于对照组的A490值(O.201±0.019,P相似文献   

糜酶介导心脏成纤维细胞增殖中转化生长因子β_1的作用

目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响及其与转化生长因子β_1(TGF-β_1)信号的关系。方法用胰酶消化法分离、培养新生 SD 大鼠的 CFs,采用四氮唑盐(MTT)比色法(A_(490)值)测定细胞数目,[~3H]脱氧胸腺嘧啶核苷([~3H]-TdR)掺入法测定 CFs 的 DNA 合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β_1的 mRNA 表达水平。结果糜酶以剂量依赖方式增加 CFs 数目与 DNA 合成速率。15、30和60 ng/mL 糜酶组的 A_(490)值分别为0.263±0.033、0.348±0.031和0.387±0.026,均明显高于对照组的 A_(490)值(0.201±0.019,P<0.01)。15、30和60 ng/mL 糜酶组的[~3H]-TdR 掺入率均显著高于对照组(P<0.01);糜酶抑制剂预处理抑制糜酶引起的 CFs 数量与[~3H]-TdR 掺入率的增加。糜酶以剂量依赖方式增加 CFs 的 TGF-β_1 mRNA 表达水平。其中15和30 ng/mL 糜酶组的 TGF-β_1 mRNA 表达水平分别为0.650±0.040和0.84...     

转化生长因子β_1对心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响

目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对原代培养的乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与胶原合成的影响。方法出生1d~3 d的SD大鼠,用胰蛋白酶消化、差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,用不同浓度的TGF-β_1作用于心肌成纤维细胞,采用四氮唑盐(MTT)法测定CFs增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原分泌,蛋白印迹法(Western Blot)检测心肌成纤维细胞分泌的TGF-β_1蛋白表达。结果与正常对照组比较,10 ng/m L TGF-β_1组心肌成纤维细胞增殖明显(P0.05);心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量明显增加(P0.01),同时TGF-β_1蛋白表达明显增加(P0.05)。结论 TGF-β_1可引起心肌成纤维细胞的增殖,胶原分泌增加,同时可使蛋白TGF-β_1蛋白含量增加。     

阻断Smad3表达对转化生长因子β1诱导肌成纤维细胞增殖的影响

目的探讨转化生长因子β1及其信号转导分子Smad3在肌成纤维细胞C2C12殖中的作用。方法以转化生长因子β1作用于C2C12细胞,对其信号转导分子Smad3基因进行RNA干扰,用MTT法检测转化生长因子β1诱导的C2C12细胞增殖。结果0、1、5和10μg/L转化生长因子β1作用C2C12细胞24h后,C2C12细胞增殖随转化生长因子β1浓度增加而增加,且呈剂量依赖性(光密度值分别为0.096±0.015、0.177±0.014、0.240±0.028和0.312±0.012,P<0.01);经200pmol/LsiRNA-Smad3转染24h后,再用5μg/L转化生长因子β1作用,其细胞增殖(光密度值0.063±0.011)比内对照组下降(光密度值0.137±0.016,P<0.01)。结论转化生长因子β1通过Smad3信号转导促进C2C12细胞增殖并呈剂量依赖性,siRNA-Smad3可有效阻断其信号转导而降低C2C12细胞增殖。     

转化生长因子β1/Smad通路调控糜酶诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad(线虫Sma分子和果蝇Mad分子的组合)信号通路对糜酶诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响。方法:用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs。采用氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定CFs的DNA合成,Westernblot检测TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3及Smad7的蛋白的表达。结果:①糜酶可以浓度依赖的方式增加CFs的3H-TdR掺入率。15、30和60μg/L组3H-TdR的掺入率分别为(319±29)、(372±43)和(401±47)cpm/孔,均高于对照组[(252±35)cpm/孔,P0.01]。②随着糜酶作用浓度的增加,CFs中TGF-β1蛋白的表达呈递增趋势。15、30和60μg/L组的TGF-β1蛋白的表达水平分别为0.968±0.069、1.782±0.058和2.656±0.085,均较对照组(0.333±0.023)显著升高(P0.05或P0.01)。③糜酶可以浓度依赖的方式上调p-Smad2/3蛋白的表达、下调Smad7蛋白的表达,15、30和60μg/L组的p-Smad2/3蛋白表达的水平均较对照组显著升高(P0.01),Smad7蛋白表达的水平均较对照组明显降低(P0.05或P0.01)。不同浓度的糜酶对Smad2/3蛋白的表达均无明显影响。结论:糜酶具有促进CFs增殖的作用,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。     

转化生长因子－β对人胚肺成纤维细胞胶原表达的影响

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族多功能的细胞因子，具有调节细胞外基质代谢的功能，在肺间质纤维化的形成中具有重要作用。胚原是细胞外基质的主要成分。胶原积聚是肺间质纤维化的一个重要特征。为了进一步探讨肺间质纤维化形成的机制，在体外观察了ＴＧＦ－β对人胚胎肺成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原Ｉ、胶原ＩＩｌｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：ＴＧＦ－β能刺激胶原蛋白的合成，胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ的表达。而对成纤维细胞的增殖影响不明显。因此认为ＴＧＦ－β可能与肺间质纤维化时胶原积聚有关。ＴＧＦ－β胶原合成的调节是通过ｍＲＮＡ水平。     

肝细胞生长因子/转化生长因子-β1对人心房成纤维细胞增殖的作用

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)在体外培养的人心房成纤维细胞增殖中的作用,观察HGF对人心房成纤维细胞TGF-β_1表达的影响。方法入选福建省立医院心血管外科接受换瓣手术的风湿性心脏病(RHD)患者20例,其中窦性心律(SR)者和慢性心房颤动(CAF)者各10例,分别作为SR组和CAF组。记录患者左心房内径(LAD)。换瓣术中无菌条件下取适量右心耳组织,人心房成纤维细胞原代培养。水溶性磷酸化四唑盐-1(WST-1)比色法检测HGF和TGF-β_1在不同浓度(HGF:25,50,100,200 ng/ml;TGF-β_1:0.1,1,10,100 ng/ml)和不同时间(12,24,48,72h)对人心房成纤维细胞增殖的影响。检测HGF/TGF-β_1对人心房成纤维细胞增殖的影响。半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测心房成纤维细胞TGF-β_1 mRNA水平,分为3组:SR组、CAF组和HGF干预组(CAF组中再加入100 ng/ml HGF干预48 h)。采用SPSS 19.0软件进行数据处理。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 CAF组患者的LAD显著高于SR组[(5.76±1.37)vs(4.43±0.77)cm]。HGF和TGF-β_1对人心房成纤维细胞的增殖分别具有抑制和促进作用,且与剂量(r_(HGF)=-0.686;r_(TGF-β_1)=0.655)和时间(r_(HGF)=0.557;r_(TGF-β_1)=0.840)显著相关(P0.05),其中:100 ng/ml HGF作用48 h抑制作用最显著;10 ng/ml TGF-β_1作用48 h促进作用最显著。HGF/TGF-β_1对人心房成纤维细胞增殖具有抑制作用。与CAF组相比(1.78±0.98),SR组(0.92±0.66)和HGF干预组(0.67±0.64)的TGF-β_1 mRNA表达水平均显著减少,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 CAF患者LAD增大,TGF-β_1分泌增多。HGF能够抑制人心房成纤维细胞TGF-β_1的生成,部分拮抗TGF-β_1促增殖作用。     

IL-1β对大鼠心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:探讨IL- 1β对心肌间质增殖的调控作用,为高血压左室肥厚的防治提供治疗依据。方法:在无菌条件下取生后1～3d的SD大鼠心脏,用胰酶分散细胞,采用差速贴壁法分离出心脏成纤维细胞(CFs) ,进行培养,实验采用3～4代细胞。实验分组:1IL- 1β对CFs胶原合成的影响,分为对照组和10     

香烟烟雾提取物对人胚肺成纤维细胞增殖及转化生长因子β1、表皮生长因子表达的影响

目的　观察香烟烟雾提取物 (CSE)对人胚肺成纤维细胞 (HELF)增殖及转化生长因子 β1(TGF β1)、表皮生长因子 (EGF)表达的影响。方法　用含不同浓度CSE[分别为 1∶50 (CSE1组 )、1∶2 5(CSE2 组 )和 1∶10 (CSE3 组 )倍稀释 ]的培养基作用于体外培养的HELF ,对照组 (C组 )不含CSE。观察不同浓度的CSE对细胞增殖及增殖细胞核抗原 (PCNA)水平的影响。用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测各组细胞TGF β1mRNA表达量。用免疫组织化学方法检测各组细胞TGF β1和EGF蛋白的表达量。结果　经CSE作用后 ,随着CSE浓度的增高 ,HELF增殖呈逐渐减弱的趋势 ,PCNA表达阳性率在CSE1组为 2 6 94%、CSE2 组为 2 0 0 6%、CSE3 组为 11 0 7% ,均比C组 (3 6 0 5% )明显下降(P <0 0 5)。RT PCR和免疫组织化学染色结果发现 :低浓度的CSE (1∶50和 1∶2 5)使HELF的TGF β1mRNA及蛋白表达明显增强 ,与C组比较差异有显著性意义 (P <0 0 5)。免疫组织化学染色显示 :较高浓度的CSE(1∶2 5和 1∶10 )可引起HELF的EGF蛋白表达减弱 ,与C组比较差异有显著性 (P <0 0 5)。结论　CSE可抑制HELF的增殖 ,其抑制作用可能与TGFβ1及EGF表达的失调有关     

The effect of in vitro fibroblast growth factors on cell proliferation in pancreas from normal and streptozotocin-treated rats

Fibroblast growth factors (FGFs) are potent mitogens for a wide variety of cells. In the present study we examined the potential morphogenic activities of the growth factors FGF1, FGF2 and FGF7, and cellular processes underlying morphogenesis, in pancreatic cells from streptozotocin diabetic newborn rats. The pancreases from control and diabetic newborn rats were microdissected and cultured in the presence of different doses of FGF1, 2 and 7 for 48 h. An additional incubation for 24 h was undertaken in the presence of bromo-deoxyuridine. The effect of the FGFs on bromo-deoxyuridine incorporation was analysed by means of immunocytochemistry. The most prominent stimulatory effect was found after application of FGF2 and 7 at a dose of 100 ng/l in endocrine and exocrine cells of diabetic rats. It is concluded that FGF2 and 7 might act as putative key-signalling molecules in the differentiation of pancreatic cells.     

Macrophages and T lymphocytes infiltrating the rat mammary carcinoma HH9-cl 14 in progressive and regressive tumor growth

Summary Ascites tumor cells (2×10⁶) of a DMBA-induced rat mammary adenocarcinoma (HH9-cl 14) were injected s.c. into tumor-free syngeneic female rats and produced a continuously growing solid tumor in all animals of this group. Inoculation of 2×10⁷ cells induced a first brief period of tumor growth, followed by complete tumor regression from the 2nd until the 5th week after injection. Both the progressive and the regressive tumors were analyzed immunohistologically at different stages with monoclonal antibodies against different T lymphocytes and macrophages. Obviously these cells appear in different quantity and quality, during the hosts immune response. Possible interactions of T lymphocytes and macrophages with tumor cells are discussed.Dedicated to Professor Dietrich Schmähl on the occasion of his 60th birthdaySupported by Ministerium für Wissenschaft und Forschung des Landes Nordrhein-Westfalen, Grant IVB5-FA 9843Fellow of the Alexander von Humboldt-Foundation     

造血生长因子受体对急性髓性白血病细胞增殖的调控作用

应用甲基纤维素体外半固体培养法观察32例原发性急性髓性白血病(AML)和4例慢性粒细胞性白血病—急粒变患者的骨髓或外周血白血病细胞克隆(CFU—L)的体外增殖状态，以及抗粒—巨噬系集落刺激因子受体(GM—CSFR)α链单克隆抗体(MAb)、抗白细胞介素—3受体(IL—3R)α链MAb、二者共同β链MAb对CFU—L体外生长的影响。结果显示：①抗GM—CSFRα抗IL—3R共同β链MAb体外可明显抑制AML患者CFU—L的生长(P＜0．05)；②抗GM—CSFRα链MAb和抗IL—3Rα链MAb对CFU—L生长的抑制作用不明显(P＞0．05)；③各型白血病患者之间对MAb的反应无明显差异(P＞o．05)。认为GM—CSFR、IL—3R的激活在AML白血病细胞增殖中起重要作用。     

Basic fibroblast growth factor counteracts the suppressive effect of transforming growth factor-beta 1 on human myeloid progenitor cells

We have previously shown that basic fibroblast growth factor (bFGF) is mitogenic for human bone marrow stromal cells and enhances myelopoiesis in human long-term bone marrow culture. In the present study, we examined the mechanism by which bFGF enhances granulopoiesis. We observed that bFGF significantly abrogated the inhibitory effect of transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) on granulocyte- macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF)-supported progenitor cell growth (P = .009). The partial reversal of TGF-beta 1-mediated suppression was dependent on the dose of bFGF used. In addition, we noted that the inclusion of neutralizing antibody to TGF-beta 1 significantly augmented the clonogenic response to GM-CSF. We have also shown that 10 ng/mL or 100 ng/mL of bFGF resulted in a 30% to 100% increase in GM-CSF-mediated progenitor cell growth (P = .0001). These data suggest that bFGF may enhance myelopoiesis by modulating the inhibitory response to TGF-beta 1.     

The cell-adhesive effect of basic fibroblast growth factor on pituitary cells in vitro

Both native and recombinant basic fibroblast growth factor (FGF) exerted a marked effect on the morphology of a pituitary clonal somatotroph-like cell line (MtT/S) in vitro. Addition of 10 pg-20 ng bovine basic FGF/ml caused the cells to flatten and spread out over the culture dish, the cells showing strong surface contact. Those in contact with the culture dish were epithelial in appearance, being polygonal, closely apposed and forming a pavement-like monolayer. Basic FGF inhibited cell proliferation in a dose-dependent manner at the higher concentrations tested (0.5-20 ng/ml). This cell-adhesive effect of basic FGF was also observed in normal dispersed pituitary cells. The observed stimulation of pituitary cell adhesion is the first report of a morphological effect of basic FGF on pituitary cells and could explain the physiological significance of basic FGF and its high concentration in the pituitary gland.     

钙拮抗剂对成纤维细胞胶原基因的影响

目的：研究钙拮抗剂汉防己甲素（Tet)、维拉帕米(Ver)和硝苯啶（Nif)对3T3成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ胶原基因表达的影响,旨在探讨其抗肝纤维化的机理。方法：应用标记Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型前胶原cDNA探针与RNA斑点印迹杂交技术,检测Tet,Ver和Nif与3T3成纤维细胞共育前后Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原mRNA水平的变化。结果：Tet,Ver和Nif与3T3成纤维细胞共育后Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原mRNA水平有不同程度降低。结论：钙拮抗剂可以抑制细胞外基质胶原基因的表达。