组织工程动脉血管平滑肌种子细胞的构建

目的：为组织工程动脉提供种子细胞。从而构建出组织工程化动脉。方法：实验于2004—03／05在首都医科大学宣武医院外科实验室完成。采用组织贴块法培养成年狗主动脉平滑肌细胞，并进行细胞传代、鉴定及形态学观察。结果：通过严格取材即可获得高纯度培养的平滑肌细胞。其形态学特征明显，但随培养代次的增加，其增殖能力及形态出现改变。结论：成年狗主动脉平滑肌细胞可作为动脉组织工程的种子细胞，其增殖能力有待于进一步加强。     

组织工程动脉血管血管平滑肌种子细胞的构建

目的为组织工程动脉提供种子细胞 ,从而构建出组织工程化动脉. 方法实验于 2004- 03/05在首都医科大学宣武医院外科实验室完成.采用组织贴块法培养成年狗主动脉平滑肌细胞,并进行细胞传代、鉴定及形态学观察. 结果通过严格取材即可获得高纯度培养的平滑肌细胞,其形态学特征明显,但随培养代次的增加,其增殖能力及形态出现改变. 结论成年狗主动脉平滑肌细胞可作为动脉组织工程的种子细胞,其增殖能力有待于进一步加强.     

组织工程血管种子细胞的培养

目的：为构建组织工程血管提供种子细胞。方法：全麻下取兔的主动脉，分别采用酶消化法和组织块贴壁法培养血管内皮细胞和平滑肌细胞，并传代，免疫组化鉴定及倒置显微镜下形态学观察。结果：成功地培养出血管内皮细胞和平滑肌细胞并传代，倒置显微镜下血管内皮细胞呈“鹅卵石”形态，平滑肌细胞呈典型的“峰—谷”状。免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子（ ），平滑肌细胞α—肌动蛋白( )。结论：所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为研究组织工程血管提供了细胞来源。     

体外修复血管平滑肌细胞的方法学研究

目的：采用不同方法体外培养人脐动脉平滑肌细胞，选择以获得体外修复受损平滑肌细胞的最佳方法。方法：实验于2004—12／2005—10在哈尔滨医科大学附属第一医院实验中心卫生部细胞移植重点实验室进行。①取新生儿脐带约5cm长（家属志愿提供）原代分离血管平滑肌细胞；分别用贴块法和胰酶／胶原酶酶解法分离、培养血管平滑肌细胞。②贴块法：将血管平滑肌细胞组织块20％M199完全培养基（200mL/L胎牛血清＋10mL／L双抗＋5mL/L-谷氨酰胺）贴壁24h后，补足完全培养基培养；胰酶／胶原酶酶解法：第1步胰酶消化：将脐动脉剪成1mm&;#215;1mm大小。装入含2．5g／L胰酶培养瓶中，消化15-30min，加入20％M199完全培养基终止消化。第2步胶原酶消化：将上述处理过的组织块放入含1g／LⅠ型胶原酶的无血清M199培养基中，过夜，离心，收集细胞，以1&;#215;10^4个细胞／cm^2密度接种培养皿中，补足20％M199完全培养基培养。③对两种方法培养的细胞生长形态、数量及平滑肌α-肌动蛋白表达情况进行观察和检测。结果：①贴块法：组织块种植后2周时，多数细胞已贴壁伸展。4～6周细胞达80％融合时，镜下成“峰与谷”样，可传代培养，传代间隔期一般是两三周；胰酶／胶原酶酶解法：细胞多为伴有胞质突起的多角形大细胞，达到生长融合时细胞密度低。2周左右细胞融合，可传代培养。传代间隔期一般是一两周。②贴块法获得的细胞初期生长速度慢，但达到融合前细胞数量多，细胞得率高；胰酶／胶原酶酶解法获得的细胞初期生长速度快，群体倍增时间短，但达到融合前细胞数量少于贴块法，细胞得率低。（曼）胰酶／胶原酶法α-肌动蛋白阳性细胞率高于贴块法（93．1％．71．4％，x^2=4．626，P〈0．05）。结论：两种方法均可成功培养人血管平滑肌细胞；贴块法合成表型细胞比例大，胰酶／胶原酶酶解法收缩表型细胞比例大，后者所获得的细胞更适合用作修复血管平滑肌细胞的种子细胞。     

体外修复血管平滑肌细胞的方法学研究

目的:采用不同方法体外培养人脐动脉平滑肌细胞,选择以获得体外修复受损平滑肌细胞的最佳方法。方法:实验于2004-12/2005-10在哈尔滨医科大学附属第一医院实验中心卫生部细胞移植重点实验室进行。①取新生儿脐带约5cm长(家属志愿提供)原代分离血管平滑肌细胞;分别用贴块法和胰酶/胶原酶酶解法分离、培养血管平滑肌细胞。②贴块法:将血管平滑肌细胞组织块20%M199完全培养基(200mL/L胎牛血清 10mL/L双抗 5mL/LL-谷氨酰胺)贴壁24h后,补足完全培养基培养;胰酶/胶原酶酶解法:第1步胰酶消化:将脐动脉剪成1mm×1mm大小。装入含2.5g/L胰酶培养瓶中,消化15～30min,加入20%M199完全培养基终止消化。第2步胶原酶消化:将上述处理过的组织块放入含1g/LⅠ型胶原酶的无血清M199培养基中,过夜,离心,收集细胞,以1×104个细胞/cm2密度接种培养皿中,补足20%M199完全培养基培养。③对两种方法培养的细胞生长形态、数量及平滑肌а-肌动蛋白表达情况进行观察和检测。结果:①贴块法:组织块种植后2周时,多数细胞已贴壁伸展。4～6周细胞达80%融合时,镜下成“峰与谷”样,可传代培养,传代间隔期一般是两三周;胰酶/胶原酶酶解法:细胞多为伴有胞质突起的多角形大细胞,达到生长融合时细胞密度低。2周左右细胞融合,可传代培养。传代间隔期一般是一两周。②贴块法获得的细胞初期生长速度慢,但达到融合前细胞数量多,细胞得率高;胰酶/胶原酶酶解法获得的细胞初期生长速度快,群体倍增时间短,但达到融合前细胞数量少于贴块法,细胞得率低。③胰酶/胶原酶法α-肌动蛋白阳性细胞率高于贴块法(93.1%,71.4%,χ2=4.626,P<0.05)。结论:两种方法均可成功培养人血管平滑肌细胞;贴块法合成表型细胞比例大,胰酶/胶原酶酶解法收缩表型细胞比例大,后者所获得的细胞更适合用作修复血管平滑肌细胞的种子细胞。     

软骨组织工程种子细胞来源的最新研究进展

耳、鼻、喉和气管主要由软骨构成,软骨组织工程技术的进展为这些器官的修复开辟了新的途径。软骨细胞是软骨组织工程修复重建的原动力。在体外培养过程中,随着传代次数的增多,软骨细胞容易失去表型,丧失形成软骨的能力。组织工程软骨形成的重要条件之一是必须获得大量的有功能和活力的种子细胞,因此寻求广泛的种子细胞来源是软骨组织工程修复首先需要解决的关键问题。理想的软骨种子细胞必须具备取材方便、体外有较强的繁殖和定向分化能力等优点。     

软骨组织工程种子细胞来源的最新研究进展

耳、鼻、喉和气管主要由软骨构成，软骨组织工程技术的进展为这些器官的修复开辟了新的途径。软骨细胞是软骨组织工程修复重建的原动力。在体外培养过程中，随着传代次数的增多，软骨细胞容易失去表型，丧失形成软骨的能力。组织工程软骨形成的重要条件之一是必须获得大量的有功能和活力的种子细胞，因此寻求广泛的种子细胞来源是软骨组织工程修复首先需要解决的关键问题。理想的软骨种子细胞必须具备取材方便、体外有较强的繁殖和定向分化能力等优点。     

231培养液培养成人大隐静脉平滑肌细胞

目的：应用231培养基培养成人大隐静脉平滑肌细胞探讨其有效方法。 方法：实验于2004-11／2005-3在首都医科大学附属北京安贞医院北京心肺血管疾病研究所中心实验室完成。①平滑肌细胞分离：40例冠状动脉旁路移植术患者（年龄43-74岁）术中废弃的大隐静脉，经患者同意无菌取2.0-3.0cm。2．5以胰蛋白酶溶液吹打消化15min，去除内皮细胞，同时松动平滑肌细胞，便于细胞游离出组织块生长。将血管剪成2．0-3．0mm^2的小块贴到培养瓶底，加入完全231培养液3mL，直立放入37℃、体积分数为0．05的CO2、饱和湿度的培养箱中，24h后将培养瓶放平使培养液浸没组织块继续培养。②平滑肌细胞传代：当细胞延组织块周围密集成片生长时，即可传代。③平滑肌细胞形态观察：应用倒置显微镜观察平滑肌细胞生长状况，记录生长曲线，观察各生长时期变化。④平滑肌细胞鉴定：应用透射电镜和免疫组织化学方法鉴定平滑肌细胞。 结果：①大隐静脉平滑肌细胞形态观察结果：大隐静脉平滑肌细胞原代培养沿组织块长出时间为2-14d，经过7d潜伏期细胞进入对散生长期，细胞呈“峰谷”长势。原代细胞培养第（25&;#177;2．1）天传第l代，传代24h后进入对数生长期，细胞传lO代以上仍保持良好的形态结构。培养成功率100％。培养过程中未见杂细胞或微生物污染。②大隐静脉平滑肌细胞鉴定结果：电镜下观察，胞浆内富含肌丝，纵。向平行排列，胞内有密体，具有平滑肌细胞特征；抗α平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色后可见胞浆内染成褐色呈细丝网状，所有细胞均呈阳性染色。证实培养细胞为平滑肌细胞。 结论：利用消化贴块方法分离人大隐静脉平滑肌细胞，应用231培养基进行培养，不仅培养成功率高，并且可产生高纯度及多数量的平滑肌细胞。技术具有操作简便，污染机会少，为心血管疾病研究和组织工程学研究及应用提供可靠的细胞模型。     

脱细胞血管基质与血管平滑肌细胞的体外相容性

目的：酶-化学除垢剂制备脱细胞血管基质，检测其与平滑肌细胞的相容性，探讨其作为组织工程支架材料的可行性。 方法：实验于2003-12／2005-12在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。①脱细胞血管基质制备：在37℃水浴振荡条件下，犬总动脉先后用1g/L胰蛋白酶＋0．2g/L乙二胺四乙酸钠和1．0％Triton X-100进行脱细胞处理24h和176h，充分漂洗，冷冻干燥后备用。②平滑肌细胞的提取：应用组织块贴壁法体外培养扩增犬隐静脉的平滑肌细胞。③四甲基偶氮唑盐法测定脱细胞血管基质浸提液对平滑肌细胞的毒性：设浸提原液、75％、50％和25％浸提液组，阴性对照组（DMEM＋体积分数为0．1的胎牛血清培养液）。以阴性对照组的吸光度作为100％细胞增殖率，增殖百分率（P％）=[实验组A值／阴性对照组A值]&;#215;100％，按ISO和医学生物材料标准评定材料毒性。④急性毒性试验：取成年大鼠8只，将备用脱细胞血管基质研磨成粉末，生理盐水配成2g/L的混悬液，无菌条件下向大鼠腹腔内注入1mL脱细胞血管基质混悬液，观察72h，记录动物有无死亡及不良反应。⑤亚急性毒性试验：取成年大鼠12只，随机分成2组。实验组用脱细胞血管基质混悬液灌胃，剂量为500mg／kg质量，隔日1次，共10次；对照组给等量生理盐水灌胃。实验期间观察记录体质量变化及动物活动情况。21d取血检查血常规。⑥溶血试验：取抗凝兔血8mL，加入生理盐水10mL，稀释备用。取脱细胞血管基质粉末，加生理盐水中，再加入稀释兔血离心后取上清测定545nm处的吸光度。阴性对照为生理盐水10mL加入稀释兔血；阳性对照为蒸馏水加入稀释兔血。溶血率=[（试验材料的吸光度-阴性对照的吸光度）／（阳性对照的吸光度-阴性对照的吸光度）1&;#215;100％。⑦凝血试验：血库健康献血员新鲜血浆，用自动血液凝固测定仪进行凝血酶原凝固试验、测定部分凝血活酶凝固时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原。取血浆2mL加入脱细胞血管基质粉100mg，混合后再测定上述指标。 结果：①酶-化学除垢剂能使犬总动脉细胞几乎完全脱落，使基质纤维的三维结构变得疏松。苏木精-伊红、胶原染色和弹力纤维染色显示脱细胞血管基质无细胞残留，主要成分为胶原和弹力纤维。②动物实验表明材料无急性、亚急性毒性。体外实验脱细胞血管基质的溶血率为1．6％，符合医用生物材料生物性能测试所提出的溶血率〈5％标准。材料混合前后，血浆中凝血酶原凝固试验、部分凝血活酶时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原4项指标检测结果无明显变化，说明材料不引起凝血功能的改变。③四甲基偶氮唑盐显示75％脱细胞血管基质浸提液培养平滑肌细胞1，3和5d后，细胞增殖率均大于95％，材料毒性为0或1级。 结论：Triton X-100和胰蛋白酶制备的脱细胞基质具有良好的生物相容性，能与异体犬平滑肌细胞结合到一起，并在体外生成血管移植物。     

组织工程研究中关于血管平滑肌细胞和血管内皮细胞的培养

血管内皮细胞和平滑肌细胞是执行血管生理功能的必要物质基础.因此,获取足够量的、健康有活力的种子细胞是血管组织工程研究将要解决的关键技术问题.组织块法培养的血管平滑肌细胞获得率高、增殖快、合成表型的细胞比例大,应选择组织块法分离培养的平滑肌细胸作为血管组织工程种子细胞来源.     

组织工程血管种子细胞的培养

目的:为构建组织工程血管提供种子细胞。方法:全麻下取兔的主动脉,分别采用酶消化法和组织块贴壁法培养血管内皮细胞和平滑肌细胞,并传代、免疫组化鉴定及倒置显微镜下形态学观察。结果:成功地培养出血管内皮细胞和平滑肌细胞并传代。倒置显微镜下血管内皮细胞呈“鹅卵石”形态,平滑肌细胞呈典型的“峰-谷”状。免疫组化鉴定内皮细胞Ⅷ因子(+),平滑肌细胞α-肌动蛋白(+)。结论:所培养的血管内皮细胞和平滑肌细胞为研究组织工程血管提供了细胞来源。     

组织工程研究中关于血管平滑肌细胞和血管内皮细胞的培养

血管内皮细胞和平滑肌细胞是执行血管生理功能的必要物质基础。因此,获取足够量的、健康有活力的种子细胞是血管组织工程研究将要解决的关键技术问题。组织块法培养的血管平滑肌细胞获得率高、增殖快、合成表型的细胞比例大,应选择组织块法分离培养的平滑肌细胞作为血管组织工程种子细胞来源。     

脱细胞血管基质与血管平滑肌细胞的体外相容性

目的:酶-化学除垢剂制备脱细胞血管基质,检测其与平滑肌细胞的相容性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法:实验于2003-12/2005-12在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。①脱细胞血管基质制备:在37℃水浴振荡条件下,犬总动脉先后用1g/L胰蛋白酶 0.2g/L乙二胺四乙酸钠和1.0%TritonX-100进行脱细胞处理24h和176h,充分漂洗,冷冻干燥后备用。②平滑肌细胞的提取:应用组织块贴壁法体外培养扩增犬隐静脉的平滑肌细胞。③四甲基偶氮唑盐法测定脱细胞血管基质浸提液对平滑肌细胞的毒性:设浸提原液、75%、50%和25%浸提液组,阴性对照组(DMEM 体积分数为0.1的胎牛血清培养液)。以阴性对照组的吸光度作为100%细胞增殖率,增殖百分率(P%)=犤实验组A值/阴性对照组A值犦×100%,按ISO和医学生物材料标准评定材料毒性。④急性毒性试验:取成年大鼠8只,将备用脱细胞血管基质研磨成粉末,生理盐水配成2g/L的混悬液,无菌条件下向大鼠腹腔内注入1mL脱细胞血管基质混悬液,观察72h,记录动物有无死亡及不良反应。⑤亚急性毒性试验:取成年大鼠12只,随机分成2组。实验组用脱细胞血管基质混悬液灌胃,剂量为500mg/kg质量,隔日1次,共10次;对照组给等量生理盐水灌胃。实验期间观察记录体质量变化及动物活动情况。21d取血检查血常规。⑥溶血试验:取抗凝兔血8mL,加入生理盐水10mL,稀释备用。取脱细胞血管基质粉末,加生理盐水中,再加入稀释兔血离心后取上清测定545nm处的吸光度。阴性对照为生理盐水10mL加入稀释兔血;阳性对照为蒸馏水加入稀释兔血。溶血率=犤(试验材料的吸光度-阴性对照的吸光度)/(阳性对照的吸光度-阴性对照的吸光度)犦×100%。⑦凝血试验:血库健康献血员新鲜血浆,用自动血液凝固测定仪进行凝血酶原凝固试验、测定部分凝血活酶凝固时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原。取血浆2mL加入脱细胞血管基质粉100mg,混合后再测定上述指标。结果:①酶-化学除垢剂能使犬总动脉细胞几乎完全脱落,使基质纤维的三维结构变得疏松。苏木精-伊红、胶原染色和弹力纤维染色显示脱细胞血管基质无细胞残留,主要成分为胶原和弹力纤维。②动物实验表明材料无急性、亚急性毒性。体外实验脱细胞血管基质的溶血率为1.6%,符合医用生物材料生物性能测试所提出的溶血率<5%标准。材料混合前后,血浆中凝血酶原凝固试验、部分凝血活酶时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原4项指标检测结果无明显变化,说明材料不引起凝血功能的改变。③四甲基偶氮唑盐显示75%脱细胞血管基质浸提液培养平滑肌细胞1,3和5d后,细胞增殖率均大于95%,材料毒性为0或1级。结论:TritonX-100和胰蛋白酶制备的脱细胞基质具有良好的生物相容性,能与异体犬平滑肌细胞结合到一起,并在体外生成血管移植物。     

231培养液培养成人大隐静脉平滑肌细胞

目的:应用231培养基培养成人大隐静脉平滑肌细胞探讨其有效方法。方法:实验于2004-11/2005-3在首都医科大学附属北京安贞医院北京心肺血管疾病研究所中心实验室完成。①平滑肌细胞分离:40例冠状动脉旁路移植术患者(年龄43～74岁)术中废弃的大隐静脉,经患者同意无菌取2.0～3.0cm。2.5g/L胰蛋白酶溶液吹打消化15min,去除内皮细胞,同时松动平滑肌细胞,便于细胞游离出组织块生长。将血管剪成2.0～3.0mm2的小块贴到培养瓶底,加入完全231培养液3mL,直立放入37℃、体积分数为0.05的CO2、饱和湿度的培养箱中,24h后将培养瓶放平使培养液浸没组织块继续培养。②平滑肌细胞传代:当细胞延组织块周围密集成片生长时,即可传代。③平滑肌细胞形态观察:应用倒置显微镜观察平滑肌细胞生长状况,记录生长曲线,观察各生长时期变化。④平滑肌细胞鉴定:应用透射电镜和免疫组织化学方法鉴定平滑肌细胞。结果:①大隐静脉平滑肌细胞形态观察结果:大隐静脉平滑肌细胞原代培养沿组织块长出时间为2～14d,经过7d潜伏期细胞进入对数生长期,细胞呈“峰谷”长势。原代细胞培养第(25±2.1)天传第1代,传代24h后进入对数生长期,细胞传10代以上仍保持良好的形态结构。培养成功率100%。培养过程中未见杂细胞或微生物污染。②大隐静脉平滑肌细胞鉴定结果:电镜下观察,胞浆内富含肌丝,纵向平行排列,胞内有密体,具有平滑肌细胞特征;抗α平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色后可见胞浆内染成褐色呈细丝网状,所有细胞均呈阳性染色。证实培养细胞为平滑肌细胞。结论:利用消化贴块方法分离人大隐静脉平滑肌细胞,应用231培养基进行培养,不仅培养成功率高,并且可产生高纯度及多数量的平滑肌细胞。技术具有操作简便,污染机会少,为心血管疾病研究和组织工程学研究及应用提供可靠的细胞模型。     

构建组织工程皮肤种子细胞的人血管内皮细胞的培养

目的 探讨如何以简便快捷的方法获得大量生长状态良好的人血管内皮细胞，以作为构建含血管组织工程皮肤的种子细胞。方法 以新生儿脐带静脉作为细胞来源，用消化法获得血管内皮细胞，用本实验室设计的方法对细胞进行纯化培养，倒置显微镜观察细胞形态，结合免疫组化检测(第Ⅷ因子)和透射电留(Weibel-Palade小体)签定细胞来源。结果 用本实验室的纯化方法获得的血管内皮细胞未见成纤维细胞污染，细胞增殖旺盛，处于良好的生长状态。结论 结果表明本实验方法可以获得大量处于良好生长状态的高纯度血管内皮细胞，可以用于含血管组织工程皮肤的构建。     

血管组织工程种子细胞原代培养技术的改良

背景:如何获取高质量的种子细胞是构建组织工程血管的先决问题。目的:改良血管组织工程种子细胞原代培养技术并观察其生物学特性。设计、时间及地点:以细胞为培养对象,观察性实验,于2006-12/2008-03在江西省分子医学重点实验室完成。材料:新西兰家兔,体质量2kg左右,用于血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的原代培养。方法:以胶原酶胰酶序贯消化法获得血管内皮细胞、快捷贴壁法培养血管平滑肌细胞。主要观察指标:免疫细胞化学法对两者进行鉴定;流式细胞术检测第2代和第6代血管内皮细胞的增殖指数。结果:培养的种子细胞符合各自特征,免疫细胞化学鉴定其为血管内皮细胞和血管平滑肌细胞。内皮细胞第2代和第6代细胞增殖指数分别为(20.87±2.05)%和(9.75±1.76)%。结论:胶原酶胰酶序贯消化法和快捷贴壁法可以较稳定地获取血管内皮细胞及血管平滑肌细胞;第2代的内皮细胞较第6代更适用于构建组织工程血管。     

构建组织工程皮肤种子细胞的人血管内皮细胞的培养

目的探讨如何以简便快捷的方法获得大量生长状态良好的人血管内皮细胞,以作为构建含血管组织工程皮肤的种子细胞。方法以新生儿脐带静脉作为细胞来源,用消化法获得血管内皮细胞,用本实验室设计的方法对细胞进行纯化培养,倒置显微镜观察细胞形态,结合免疫组化检测(第Ⅷ因子)和透射电镜(Weibel-Palade小体)鉴定细胞来源。结果用本实验室的纯化方法获得的血管内皮细胞未见成纤维细胞污染,细胞增殖旺盛,处于良好的生长状态。结论结果表明本实验方法可以获得大量处于良好生长状态的高纯度血管内皮细胞,可以用于含血管组织工程皮肤的构建。     

组织工程血管的种子细胞

血管移植物数量和功能的不足制约着许多疾病的治疗，因此组织工程血管成为研究的热点。种子细胞作为组织工程血管重要组成部分，如何达到正常血管内皮细胞及平滑肌细胞的生理功能，是人们关注的焦点。干细胞因具备多向分化潜能，被视为理想的种子细胞，然而干细胞种类较多，在组织工程血管的构建过程中，哪种干细胞更适合作为种子细胞，尚无定论。文章对造血干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪干细胞等多种干细胞进行比较，简述各自的特点，试图全面了解干细胞的功能，为进一步实验奠定一定的基础。     

碱性成纤维细胞生长因子影响犬平滑肌细胞增殖的合理剂量

目的：评价碱性成纤维细胞生长因子调控平滑肌细胞增殖的合理剂量，及其对平滑肌细胞在生物可降解材料上生长的影响。方法：实验于2004-05／12在首都医科大学宣武医院外科实验室完成。原代培养的狗主动脉平滑肌细胞，取其第3代作为实验用细胞。①按给予培养的平滑肌细胞的碱性成纤维细胞生长因子的剂量，分为50，25，10，5，3，1μg／L组，正常对照组(普通体积分数为0．2的胎牛血清的DMEM培养液)，空白对照组共8组。分别于作用后24h，48h，4d进行四甲基偶氮唑盐检测，测定光吸收值，计算相对增殖率[相对增殖率=(实验组吸光值-空白对照)／(正常对照组吸光值-空白对照)&;#215;100％]，比较不同剂量碱性成纤维细胞生长因子组之间的平滑肌细胞增殖情况。②用含3μg／L碱性成纤维细胞生长因子的培养液在生物可降解载体上培养平滑肌细胞作为实验组，对照组加入常规培养液，作用后24h，48h，72h进行四甲基偶氮唑盐检测，测定光吸收值，比较两组间平滑肌细胞增殖的情况。结果：①不同剂量碱性成纤维细胞生长因子组之间的平滑肌细胞增殖情况：各组相对增殖率随时间推移而逐渐增加，在低浓度时(&;lt;10μg／L)增殖率于48h达到高峰，以后逐渐降低。②碱性成纤维细胞生长因子的培养液在生物可降解载体上培养平滑肌细胞增殖的情况：应用含3μg／L碱性成纤维细胞生长因子培养液培养的平滑肌细胞在载体上的增殖明显高于对照组(P&;lt;0．05)。结论：碱性成纤维细胞生长因子能够明显刺激平滑肌细胞的增殖，其合理剂量为3μg／L，应用3μg／L碱性成纤维细胞生长因子能明显增加平滑肌细胞在载体上的增殖，在构建组织工程化动脉时可以应用碱性成纤维细胞生长因子进行调控。     

组织工程化血管与种子细胞

血管组织工程学的目的就是在体外构建理想的血管移植物,植入体内后无免疫排异反应,能维持移植血管腔的长期通畅.临床上需要各种口径大小的血管作为手术修补材料或者其他自体或者异体甚至组织工程组织的滋养血管.文章采用了文献搜集和分析的方法,综述了血管组织工程的定义、自体血管壁细胞、胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞和平滑肌祖细胞的选择及其在应用中的优缺点.