智脑胶囊调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路诱导阿尔茨海默病模型细胞增殖的研究

目的:探讨智脑胶囊(Zhinao Capsule,ZNC)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)体外细胞模型增殖的影响及其作用机制。方法:采用全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)+冈田酸(okadaic acid,OA)刺激人神经母细胞瘤细胞(human neuroblastoma cell,SK-N-SH)建立AD体外模型,CCK8法筛选ZNC含药血清最佳作用浓度和时间;流式细胞术、RT-qPCR和Western blot法检测最佳浓度ZNC含药血清作用最佳时间后,对SK-N-SH细胞周期、凋亡及PI3K、AKT、GSK-3β mRNA、总蛋白和磷酸化蛋白表达的影响。结果:ATRA＋OA刺激后,SK-N-SH细胞活力降低,细胞凋亡增加,p-PI3K、p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达显著降低,GSK-3β mRNA和总蛋白表达明显升高;给予ZNC干预后,不仅可明显促进SK-N-SH细胞增殖,抑制其凋亡,还可显著升高p-PI3K、p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达,降低GSK-3β mRNA和总蛋白表达。结论:智脑胶囊可促进AD模型细胞增殖,其机制可能与调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路有关。     

中医药调控PI3K/AKT信号通路防治慢性心力衰竭研究状况

慢性心力衰竭(CHF)是各种心血管疾病的终末期表现,是各种心脏结构或功能疾病所造成的心室充盈和(或)射血分数受损的一组综合征。该病的发病机制复杂多样,大多与细胞凋亡的活性增强有关。磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路参与CHF的发生、发展和病理形成。相关研究表明,PI3K/AKT通路是中药治疗CHF的关键靶通路。本文对近年来中药调控PI3K/AKT通路干预CHF的机制和作用进行分析和总结,发现中药提取物、中成药及中药复方均可改善CHF的心肌细胞损伤,其作用机制与细胞凋亡、炎症因子、氧化应激和心室重构密切相关。同时创造性地总结了PI3K/AKT通路在防治CHF中存在的对立性争议,并分析了产生争议原因,以期为CHF的治疗和新药研发提供新思路。     

小红参乙酸乙酯提取物调控PI3K/AKT/GSK3-β通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠雌激素的影响

目的 研究小红参乙酸乙酯提取物通过调控磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-OH kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合成酶激酶3-β(glycogen synthase kinase 3-β,GSK3-β)通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠雌激素的影响。方法 选取SPF级SD雌性大鼠50只,空白组10只,建模中死亡10只,随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组10只。对照组不做任何处理,模型组、低剂量组、高剂量组进行心肌缺血再灌注损伤模型建模,建模成功后模型组不做任何处理,低剂量组、高剂量组分别给予小红参乙酸乙酯提取物灌胃,其剂量分别为56.7 mg/kg、280 mg/kg。观察大鼠心肌损伤[肌钙蛋白I(CTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、氧化应激[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)]、一氧化氮(NO)、内皮-氧化氮合酶(eNOS)含量、性激素、PI3K/AKT/GSK3-β信号通路表达量情况。结果 与空白组比较,模型组、低剂量组、高剂量组cTnI、CK-...     

基于PI3K/Akt信号通路探讨姜黄素诱导A549细胞凋亡的机制

目的 观察并探讨姜黄素对非小细胞肺癌A549细胞的作用及其机制。方法 将A549细胞分为空白组(正常培养)和低、高剂量实验组(分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)及激动药+低、高剂量实验组(先用50μmol·L^-1 Recilisib Sodium干预24 h后,再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)、抑制药+低、高剂量实验组(先用25μmol·L^-1 PI3K-IN-1干预24 h后,再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)。用MTT法测定细胞增值率;用流式细胞术测定细胞凋亡情况;用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)mRNA的相对表达水平;用蛋白质印迹法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果 空白组、低剂量实验组、高剂量实验组、激动药+低剂量实验组、抑制药+低剂量实验组、激动药+高剂量实验组、抑制药+高剂量实验组的细胞活力分别为(100...     

丹参素经PI3K/Akt/Bax信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用

摘要：目的:探讨丹参素经磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）/促凋亡基因（Bax）信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用。方法:100只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、乌司他丁组（20 mg·kg-1）、丹参素低、高剂量组（40,80 mg·kg-1）,每组20只。除假手术组外,其余各组建立脓毒症模型。乌司他丁组、丹参素低、高剂量组给予相应药物灌胃,假手术组及模型组给予等体积的生理盐水,1次/d,持续给药7 d。实验结束后,评估大鼠神经功能,观察大鼠海马神经元病理结构,测定大鼠海马组织PI3K、Akt、Bax mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组Basso-BeattieBresnahan（BBB）评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显降低,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较,乌司他丁组和丹参素低、高剂量组BBB评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显升高,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与乌司他丁组比较,丹参素低剂量组各指标差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组与其作用相似（P>0.05）。结论:丹参素可减轻脓毒症大鼠脑损伤,其机制与丹参素激活PI3K/Akt信号通路进而抑制Bax的表达有关。     

PI3K/Akt信号通路抑制剂对人胃癌细胞增殖及相关基因表达的影响

目的 研究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制剂渥曼青霉素对人胃癌细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响以及相关基因蛋白激酶B(pAkt)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)、S期激酶相关蛋白2(Skp2)及P27kip1蛋白表达的影响.方法 分别用不同浓度渥曼青霉素处理处于对数生长阶段的BGC823细胞12、24、48 h,利用MTT实验检测其对胃癌细胞增殖的影响,胃癌细胞凋亡及细胞周期的检测采用流式细胞术,Western-blotting检测p-Akt、p-AMPK、Skp2及P27kip1蛋白的表达变化.结果 渥曼青霉素可明显抑制BGC823细胞的增殖,在一定范围内具有时间和浓度依赖性.20 mmol/L渥曼青霉素作用细胞24 h时,细胞生长周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率为(44.44±3.17)％;Western blot检测显示,pAkt、pAMPK及Skp2蛋白表达随着药物浓度的增加而减少,P27kip1蛋白表达随着药物浓度增加而增加.结论 PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素能够明显下调胃癌细胞的增殖活性,导致胃癌细胞周期被阻滞于G0/G1期并诱导细胞发生凋亡,进一步研究证实PI3K/Akt信号通路介导的Skp2及P27kip1蛋白调控在凋亡过程中发挥重要作用.     

PI3K/Akt信号通路在肿瘤发展和治疗中的作用

目前发现有多条信号网络通路参与调控肿瘤生成、增殖、凋亡等分子机制,PI3K/Akt是其中比较重要的一条信号传导途径,该通路与肿瘤的发生发展密切相关。该文就PI3K/Akt信号通路的结构组成与调控肿瘤机制进行阐述,并介绍了其在临床中的应用与前景。     

妇科千金片对盆腔炎大鼠TLR4、PI3K、AKT表达的影响

目的 观察妇科千金片对盆腔炎大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和丝/苏氨酸激酶(AKT)信号表达的影响,探讨妇科千金片治疗盆腔炎的可能机制.方法 将SPF级雌性SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、千金片组、西药组,每组10只.通过子宫注射混合菌液的方式建立盆腔炎大鼠模型.运用免疫组化法检测TLR4、PI3K、AK...     

基于PI3K/Akt/GSK3β信号通路的芥子酸抗Aβ1-42致PC12细胞损伤的机制研究

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成激酶3β(GSK3β)信号通路探讨芥子酸(SA)抗β淀粉样蛋白1-42(Aβ_1-42)致PC12细胞损伤的作用机制。方法:将大鼠PC12细胞随机分为对照组、Aβ组(Aβ_1-422μmol/L)、Aβ+SA组(Aβ_1-422μmol/L+SA 100μmol/L)、Aβ+SA+LY组[Aβ_1-422μmol/L+SA 100μmol/L+LY294002(PI3K抑制剂)10μmol/L]、Aβ+LY组(Aβ_1-422μmol/L+LY294002 10μmol/L)、LY组(LY294002 10μmol/L)。除对照组、LY组外,其余各组细胞均以Aβ_1-42复制损伤模型。培养24 h后,使用显微镜观察各组细胞的形态,采用MTT法检测各组细胞的存活率;采用Western blotting法检测各组细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、GSK3β、p-GSK3β蛋白的表达情况...     

丹参酮ⅡA对口腔鳞癌细胞生物学行为及PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探究丹参酮ⅡA对口腔鳞状细胞癌(OSCC)SCC15细胞生物学行为和磷脂酰肌醇3激酶/磷酸化蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 将SCC15细胞分为对照组和实验1、2、3、4组,分别加入DMSO和2.5、5、10、20 mg·L^-1丹参酮ⅡA进行处理。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制率;用克隆形成试验检测细胞克隆形成率;用流式细胞仪及Annexin V/PI染色法分析细胞凋亡率;用Transwell试验分析细胞迁移和侵袭能力;用蛋白质印迹法检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平。结果 对照组和实验1、2、3、4组细胞克隆形成率分别为(167.71±20.73)%、(113.42±14.60)%、(78.57±15.08)%、(49.14±5.33%)和(22.57±4.43)%;细胞凋亡率分别为(8.43±1.28)%、(17.46±1.65)%、(31.92±5.39)%、(49.98±7.47)%和(83.69±5.94)%;迁移细胞数分别为(151.33±15.36)、(118.67±...     

PI3K/Akt信号通路与阿尔茨海默病关系的研究进展

神经系统活动的基础是神经元以及它们之间的联系。在生长发育过程中,如果这些结构出现变化就会导致相应的疾病发生,如轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MIC)、阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)、帕金森病(Parkinson disease,PD)等老化疾病。导致这些疾病发生的机制很多,包括基因水平改变、细胞内外部环境变化等。目前认为磷脂酰肌醇-3-激酶/丝/苏氨酸激酶(phosphatidylinositol-3-kinases/serine threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路与细胞生存、细胞代谢以及细胞凋亡等机制密切相关。因     

芍药苷调节PI3K/AKT/NF-κB信号通路对血栓闭塞性脉管炎大鼠的治疗作用研究

目的 探讨芍药苷(PAE)对血栓闭塞性脉管炎(TAO)大鼠的治疗作用及作用机制。方法 通过月桂酸钠注射法建立TAO大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组(腹腔注射适量0.9%NaCl)、模型组(腹腔注射适量0.9%NaCl)、低剂量实验组(腹腔内注射5 mg·kg^-1·d^-1 PAE)、高剂量实验组(腹腔内注射20 mg·kg^-1·d^-1 PAE)、高剂量+激动药剂(腹腔注射20 mg·kg^-1·d^-1 PAE+尾静脉注射10 ng·mL^-1·kg^-1·d^-1 740 Y-P)组。用磁珠凝固法检测凝血酶时间(TT);用酶联免疫吸附测定试剂盒检测白细胞介素(IL)-1β、内皮素1(ET-1)水平;用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子(NF)-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果 假手术组、模型组...     

山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响

目的探究山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响。方法分别以6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖作用于人肝癌细胞株HepG2,CCK8法检测细胞增殖能力,采用Hoechst 33258荧光染色以及流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过免疫印迹法检测增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3以及PI3K/Akt通路相关蛋白水平,并检测Klotho蛋白表达水平。结果与对照组相比,6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞克隆形成数显著下降(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高克隆形成数显著下降;与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞凋亡率显著升高(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高细胞凋亡率逐渐升高(P0.05);与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞中Bax、cleaved-caspase-3、Klotho蛋白表达升高(P0.05),Ki67、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达下降(P0.05),且呈剂量相关性。结论山茱萸多糖可能通过上调Klotho表达抑制PI3K/AKT通路活化,抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡。     

雷公藤多苷抑制 PI3K/AKT信号通路对肺腺癌细胞迁移和血管形成的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TWP)对肺腺癌A549细胞迁移、血管生成及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响.方法 人肺腺癌细胞株A549体外培养,分别用TWP(0、20、40、80μmol/L)处理24、48和72 h,采用CCK-8法、流式细胞仪和Transwell法分别检测A549细胞的增殖、凋亡和迁移情况,Matrigel胶小管形成实验检测血管生成情况,蛋白质印迹法(Western blotting)检测A549细胞中PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达情况.结果 随培养时间延长,20、40、80μmol/L TWP组A549细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.05);20、40、80μmol/L TWP组A549细胞凋亡率[(8.78±0.69)％、(10.36±1.13)％、(21.68±2.11)％]均显著升高(P<0.05),穿膜细胞数[(122.08±30.72)、(83.34±19.75)、(43.58±13.29)个]、p-PI3K/PI3K比值[(0.76±0.13)、(0.55±0.12)、(0.36±0.09)]、p-AKT/AKT比值[(0.53±0.14)、(0.35±0.09)、(0.21±0.05)]均显著降低(P<0.05);0、20、40、80μmol/L TWP组A549细胞诱导静脉内皮细胞(HUVEC)成管数量较对照组均显著升高[(35.85±8.72)、(24.13±6.86)、(15.34±4.66)、(9.15±2.25)个比(6.31±1.49)个,P<0.05],A549细胞诱导HUVEC成管数量均随TWP浓度升高而显著降低(P<0.05).结论 TWP可能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,抑制肺腺癌A549细胞的增殖、迁移、血管生成行为,并诱导细胞凋亡.     

二氢杨梅素对胶质瘤细胞株U87增值凋亡及PI3K/Akt通路的影响

摘 要 目的：探讨二氢杨梅素（DMY）对胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇 3激酶/丝 苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）信号通路的影响。 方法: 体外培养胶质瘤U87细胞,U87细胞分为4组：空白对照组、DMY低（25 μmol·L-1）、中（50 μmol·L-1）、高（100 μmol·L-1）剂量组。采用MTT法检测U87细胞增殖情况,Hoechst染色法检测U87细胞凋亡,透射电镜下观察自噬体形成,蛋白印迹（WB）法检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤 2（Bcl 2）及其相关蛋白（Bax）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、自噬相关蛋白Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、P62及PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K及其磷酸化激酶（p PI3K）、Akt及其磷酸化蛋白（p Akt）表达。 结果: 与空白对照组相比,DMY处理后U87细胞存活率、P62、Bcl 2、p PI3K及p Akt蛋白表达量均显著降低（P＜0.05）,且高剂量组显著低于低、中剂量组（P＜0.05）;与空白对照组相比,DMY处理后U87细胞凋亡率、自噬体数量、自噬泡/胞质总面积、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值、LC3 Ⅱ、Beclin 1、Bax及cleaved caspase 3蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）,且高剂量组显著高于低、中剂量组（P＜0.05）。 结论: 二氢杨梅素可有效抑制胶质瘤U87细胞增殖,并可诱导自噬发生促使细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

抑制PI3K信号通路的抗肿瘤天然药物研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路是正常细胞生理代谢的重要信号转导途径,也是肿瘤细胞发生和发展的关键信号通路。人类肿瘤基因组学研究表明,PI3K信号通路可将癌基因和多种受体与许多细胞功能联系在一起,该通路也是肿瘤中最常被激活的通路,抑制该信号通路,可抑制肿瘤的生长与转移。概述了PI3K及其信号通路与肿瘤发生、发展和转移的关系以及PI3K信号通路的主要抑制途径,综述近年来抗肿瘤天然药物抑制PI3K信号通路的研究进展。     

温阳解郁汤对肾阳虚型抑郁大鼠PI3K/Akt信号通路及神经递质的影响

目的 探讨温阳解郁汤对肾阳虚抑郁症大鼠磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)信号通路及神经递质的影响。方法 将雄性SD大鼠分为空白组、模型组、氟西汀组（西药阳性对照,4.17 mg/kg）、逍遥散组（中药阳性对照,1.88 g/kg）和温阳解郁汤低、中、高剂量组（1.25、2.50、5.00 g/kg）,每组15只。除空白组外,其余各组均皮下注射皮质酮20 mg/kg以复制肾阳虚型抑郁大鼠模型,并同时灌胃相应药液,每天1次,连续28 d。观察大鼠的一般情况,检测其糖水偏好率、强迫游泳静止不动时间,计算其脏器指数,检测其血清中神经递质水平/含量,检测其海马组织中PI3K/Akt通路相关蛋白的表达量和树突棘数量。结果 与空白组比较,模型组大鼠出现了掉毛、畏冷扎堆、蜷缩等症状,糖水偏好率,肾上腺、胸腺、脾指数,血清环磷酸腺苷（cAMP）、脑源性神经营养因子、γ氨基丁酸水平,cAMP与环磷酸鸟苷比值,去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺含量,PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达量,以及海马组织中树突棘数量均显著降低（P<0.01）;静止不动时间、谷氨酸水平、糖原合成酶激...     

基于PI3K/PKB信号通路研究吡菲尼酮缓解肝纤维化的作用机制

目的基于磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(PKB)信号通路研究吡菲尼酮缓解小鼠肝纤维化程度的作用机制。方法选择65只小鼠,饲养7 d后将其中60只随机均分为模型组、健康组和吡菲尼酮组,每组20只,另留5只不入组。使用四氯化碳诱导模型组和吡菲尼酮组肝纤维化。成功建立肝纤维化模型后,吡菲尼酮组给予吡菲尼酮灌胃,模型组和健康组给予等量生理盐水灌胃。2周后处死小鼠,取肝脏组织进行苏木精-伊红(HE)、胶原纤维(Masson)染色,评估各组肝纤维化程度,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫印迹法测定PI3K和PKB的mRNA及蛋白表达量,检测小鼠血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平。结果模型组与吡菲尼酮组小鼠ALT及AST水平均明显高于健康组(P<0.05);模型组小鼠ALT及AST水平均高于吡菲尼酮组(P<0.05)。模型组小鼠PI3K mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及健康组(P<0.05);吡菲尼酮组PI3K mRNA和蛋白表达量高于健康组(P<0.05);模型组小鼠PKB mRNA和蛋白表达量明显高于吡菲尼酮组及...