硝酸盐还原酶试验检测结核分枝杆菌耐药性的研究

目的 探讨一种快速、廉价、方便的结核分枝杆菌耐药性分析方法，缩短结核分枝杆菌药敏试验时间。方法 采用硝酸盐还原酶试验(Nitrate Reductase Assay，NRA)与绝对浓度法对照，验证新方法的灵敏度和特异性。结果 两种试验方法可比性好，与绝对浓度法相比较，硝酸盐还原酶试验敏感性为91．7％，特异性为100．0％，NRA法比传统绝对浓度法平均缩短时间2～3周。结论 硝酸盐还原酶试验优于传统绝对浓度法。     

Genetic Diversity and Drug Susceptibility of Mycobacterium tuberculosis Isolates in a Remote Mountain Area of China

Objective

We determined the genetic diversity of Mycobacterium tuberculosis (MTB) in a remote mountainous area of southwest China and evaluated the resolving ability of single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping combined with variable number tandem repeat (VNTR) genotyping for Beijing family strains in association with drug resistance status.

延安地区结核杆菌耐药性监测分析

目的 了解初治和复治肺结核病人对抗结核化学药物的敏感性.方法 收集2006-01～2008-01痰菌阳性标本,用改良罗氏培养基绝对浓度法试验,最终获取培养阳性标本144份,对全部培养阳性标本进行5种抗结核药物异烟肼(INH),利福平(RFP),链霉素(SM),乙胺丁醇(EMB),对氨基酸钠(PAS)的耐药性测定.结果 总耐药率为42.36%(61/144);初始耐药率为14.29%(9/63),初始耐多药率为9.52%(6/63);获得性耐药率为64.20%(52/81),获得性耐多药率为38.27%(31/81).对抗结核药物的耐受,主要是耐受RFP(36.11%,52/144)和INH(33.33%,48/144).结论 获得性耐药率高于初始耐药率,应进一步加强对结核杆菌药物敏感性监测.     

噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌药敏检测中的应用

目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%。同时检出耐多药菌株26株,占11.1%。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。     

含药血清作用巨噬细胞感染模型对抗结核药物活性的评价

目的: 建立含药血清作用结核杆菌感染巨噬细胞模型的抗结核杆菌药物活性检测方法,探讨该方法在评价抗结核杆菌药物活性中的应用。方法: 以结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞,加入低剂量或高剂量异烟肼给药小鼠的含药血清共同培养数天后,破碎巨噬细胞释放可能仍存活的细菌,体外培养后检查形成的菌落数,评价异烟肼的抗结核活性,并与传统最低抑菌浓度试验进行比较。结果: 培养数天后,低剂量和高剂量异烟肼含药血清组菌落生成数均低于空白对照组(P<0.05~P<0.01)。结论: 应用含药血清及感染巨噬细胞模型可对抗结核药物活性作出较客观的评价结果。     

Molecular Characteristics and Drug Susceptibility of Mycobacterium tuberculosis Isolates from Patients Co-infected with Human Immunodeficiency Virus in Beijing,China

70 clinical Mycobacterium tuberculosis strains isolated from AIDS patients in two HIV/AIDS referral hospitals in Beijing were used in this study.M.tuberculosis and non-tuberculosis mycobacterium(NTM)were identified by using multi-locus PCR.M.tuberculosis was genotyped by using 15-locus MIRU-VNTR technique and spoligotyping afterwards.Meanwhile,the drug susceptibilities of the strains to the four first-line anti TB drugs(rifampin,isoniazid,     

80株结核分枝杆菌临床分离株耐药性特点

目的 分析结核分枝杆菌临床分离株对5种抗结核药物的药物敏感性。方法用改良罗氏培养法测定结核分枝杆菌临床分离株的耐药性（MIC）、耐药率。结果80株结核分枝杆菌临床分离株对INH、RFP、EMB、SM和LVFX的平均MIC分别为9．7μg／mL、30．1μg／mL、16．4μg／mL、38．7μg／mL和0．9μg／mL;耐药率分别是67．2％、35．0％、53．8％、63．8％和16．3％。总耐药率为83．75％;耐单药率为17．5％;耐多药率为66.3％;耐多药株占总耐药株的79．1％。结论80株结核分枝杆菌临床分离株耐药率和耐多药率都较高,结核病的防治将面临更大的困难。     

MGIT 960和比例法对结核分枝杆菌药物敏感性试验的对比研究

目的评价BACTEC MGIT960检测8种抗结核药物耐药性的效果。方法用MGIT960对结核杆分枝杆菌临床分离菌株进行抗结核药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果用MGIT960法与L-J比例法对118株结核分枝杆菌临床分离株进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺的耐药性检测,两种方法的符合率分别为97.5%(115/118)、92.4%(109/118)、96.6%(114/118)、84.7%(100/118)、94.9%(112/118)、94.1%(111/118)、97.5%(115/118)、85.6%(101/118)。MGIT960完成一线/二线药物药敏试验的时间平均为8.9和8.3天,L-J法则分别为26.7天和26.1天,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病人的早期诊断和治疗。     

440例耐多药肺结核病人的结核分枝杆菌药物敏感性试验结果

目的研究连续5年同期内耐多药肺结核病人的结核分枝杆菌耐药情况,探讨其在耐多药肺结核诊治中的价值。方法应用MGIT960液体快速培养及绝对浓度法,测定耐多药肺结核病人结核分枝杆菌的药物敏感性。结果通过回顾性分析2013年1月～2017年6月同期440例耐多药肺结核病人的结核分枝杆菌药物敏感性试验结果,发现耐多药肺结核病人趋于年轻化;临床常规用药均以低浓度耐药为主,其中利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)和利福布汀(RFB)高浓度耐药比例均超过50%;交叉耐药显示,同时对RFP+INH+SM耐药的比例最高,耐药率为26. 36%(116/440),而RFP+INH+SM+左氧氟沙星(LVF)、RFP+INH+SM+乙胺丁醇(EMB)、RFP+INH+SM+EMB+LVF同时耐药比例均超过10%。结论分析发现,很大比例耐多药肺结核病人的结核分枝杆菌对于临床常规用药已经产生了抗性,提示临床医生需制定合理的化疗方案和指导临床耐多药病人合理用药,以便控制难治性结核病大范围的蔓延。     

间接比例法检测结核杆菌药物敏感性试验影响因素探讨

目的:探讨间接比例法检测结核杆菌药物敏感性试验的影响因素。方法:通过对我室2009、2010年两次参加国家结核病参比室组织的结核杆菌药物敏感试验室间质评的结果进行比较与分析,找出影响实验成败的关键因素包括含药培养基配制的质量控制、实验过程的规范化、环境温度的实时监测、结果观察及判断等等,为以后的实验提供技术支持。结果:2010年与国家结核病参比室的药敏结果符合率比2009年有较大的提高。结论:培养基的质量、培养的温度和操作人员的技术娴熟程度均会影响药敏试验结果。     

安徽地区结核分枝杆菌对一线抗结核药物耐药情况分析

目的了解结核分枝杆菌分离株对一线抗结核药物的耐药情况。方法统计2007年至2011年间4 248株结核分枝杆分离株药物耐受性结果。结果 4 248株结核分枝杆菌中耐药1 919株,耐药率45.17%;耐多药结核(MDR-TB)1 044株,MDR-TB发生率24.58%。从2007年到2011年耐药率、MDR率逐年降低,但耐药株数、MDR-TB株数逐年增加。1 919株耐药株中有1 362株来源于复治患者,557株来源于初治患者。复治患者耐药率及MDR率分别32.06%、19.97%,均高于初治患者的13.10%、4.61%。结论结核分枝杆菌耐药情况在复治患者中更严重。需要加强初治患者的结核控制,以减少由于结核病反复治疗及不规范使用抗结核药物产生的耐药株。     

初、复治患者结核分枝杆菌临床分离株对抗结核药物耐药性的分析

目的 了解专科医院初复治患者的结核分枝杆菌耐药率及耐药谱。方法 研究随机选取了来自首都医科大学附属北京胸科医院的500株涂片阳性的初复治肺结核患者痰标本,分离培养后对15种抗结核药物包括利福平异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（Sm）、乙胺丁醇（EMB）、括吡嗪酰胺（PZA）、阿米卡星（Am）、卡那霉素（Km）、卷曲霉素（Cm）、氧氟沙星（Ofx）、左氧氟沙星（Lfx）、莫西沙星（Mfx）、对氨基水杨酸（PAS）、丙硫异烟胺（Pto）、利奈唑胺（Lzd）、乙硫异烟胺（Eto）通过MEGIT 960进行药物敏感试验。结果 实验纳入的500例结核分枝杆菌样本,菌种鉴定结果显示71株为NTM,另外有12株培养污染。其余417例菌株进行4种一线抗结核药物（包括INH、RFP、Sm、EMB）的耐药表型实验,耐药率为47.2%（95% CI：42.5%~52.0%）,MDR耐药率为28.2%（95% CI：24.4%~33.1%）。复治病例的总耐药率和MDR耐药率的病例发生率均显著高于初治患者（P=0.000）。417株结核分枝杆菌在完成4种一线抗结核耐药表型实验后,采用数字表法按照一定比例筛选了全敏感和耐药株共150例,进行后续11种抗结核药物（包括PZA、Am、Km、Cm、Ofx、Lfx、Mfx、PAS、Pto、Lzd、Eto）的耐药表型实验,5例发生污染,剩余145例结核分枝杆菌对PZA、Am、Km、Cm、Ofx、Lfx、Mfx的复治患者耐药率均显著高于初治患者（P < 0.05）,对于PAS、Pto、Lzd、Eto 4种药物,初复治患者间差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 本研究发现初复治患者结核分枝杆菌耐药率较高,应进一步加强结核病患者管理。     

用绝对浓度法检测结核杆菌药物敏感性试验评价及结果分析

目的 评价结核分支杆菌的药物敏感性，了解目前结核分枝杆菌的耐药状况。方法 采用绝对浓度法对安徽285株结核杆菌进行5种临床常用抗结核药物耐药检测，验证结核杆菌对抗结核药物的敏感性。结果 285株结核分支杆菌的耐药发生率为56．8％，其中单一耐药发生率为11．2％，多重耐药(ivlDR)发生率为45．6％。结论 结核分支杆菌具有很高的MDR发生率，应大力推行结核病全程督导化疗，杜绝不规则用药，减少耐药菌的产生。     

减毒结核分枝杆菌H37 Ra感染小鼠模型的实验研究

目的：：研究减毒结核分枝杆菌(M. tb)H37Ra 感染小鼠模型及其病理损伤的机制。方法：将清洁级Balb/c小鼠分为对照组和M. tb模型组,各3只。将H37Ra按照每只小鼠1×106 CFU的剂量,经尾静脉注射感染小鼠,分别于感染7、14和21 d后,无菌操作取小鼠肺和脾脏组织,测量肺和脾脏的脏器系数,匀浆后行活菌培养;肺和脾脏组织冷冻切片,行HE染色观察病理损伤情况。结果：小鼠感染M. tb 14和21 d后,脾脏脏器系数均较感染7 d后显著升高(P<0.01和P<0.05)。感染7 d后,肺和脾脏组织匀浆均可检出活菌,脾脏组织H37Ra活菌量明显高于肺脏,并随感染时间逐渐增加;感染14 d后,肺组织病理观察可见明显感染性病变损伤。结论：M. tb H37Ra 经尾静脉注射感染小鼠模型可造成部分结核病样病理性损伤。     

青蒿琥酯及二氢青蒿素逆转耐药结核分枝杆菌的初步研究

[目的]了解青蒿素类中药单体(二氢青蒿素、青蒿琥酯)单独或联合利福平(RVP)及异烟肼(INH)对耐药结核分枝杆菌的作用,初步研究此类单体是否具有逆转细菌耐药性的作用.[方法]刃天青显色法判断各中药单体是否有抑菌或杀菌作用;MB/BACT系统(生物梅里埃)检测RFP或INH联合中药单体是否有逆转细菌耐药的作用.[结果]单独使用时各单体均不能杀灭结核分枝杆菌;RFP联合青蒿琥酯(200μg/mL)或二氢青蒿素(200μg/mL)可使11株耐RFP菌株中的9或6株变为敏感,敏感率分别为82%或55%;INH联合上述中药单体则亦可使11株耐INH菌株中的10或7株变为敏感,敏感率分别为90%或64%.[结论]青蒿琥酯及二氢青蒿素有较强的协同相应抗结核药或逆转结核菌的耐药性的作用,但青蒿琥酯敏感率较二氢青蒿素更高.     

IFN-γ与TNF联合在小鼠体内抗结核菌能力的研究

目的 :研究IFN -γ和TNF对结核分枝杆菌感染小鼠的疗效及部分作用机制。方法 :小鼠感染结核分枝杆菌后第 5天给予IFN -γ和 /或TNF治疗 ,观察治疗后半数死亡时间、一定时间内的死亡率、脾内活菌数 ,检测Mφ产生NO水平 (用Griess试剂 )。结果 :联用IFN -γ和TNF组与单纯攻毒组比较明显延长感染小鼠半数死亡时间、降低感染小鼠 35天内的死亡率、显著减少感染小鼠脾内活菌数 ,Mφ产生NO水平明显增加。 结论 :IFN -γ和TNF联用对结核分枝杆菌感染小鼠产生保护效应 ,其机制可能与增强Mφ释放NO水平有关。