滴金免疫法检测丙型肝炎病毒抗体

用自行制备的直径１５ｍｍ的胶体金标记ＳＰＡ，建立了检测血清丙型肝炎病毒抗体的滴金免疫测定法。Ａｂｂｏｔｔ抗－ＨＣＶ ＥＩＡ试剂盒对比检测临床标本，符合为９５％。该法简便、快速，整个检测过程只需５分钟，阳性结果在膜上出现红色斑点，易于用肉眼判断。     

伽师县乡甲、乙、丙型肝炎病毒流行状况调查

病毒性肝炎是一类严重危害人类健康的传染病。目前已知的肝炎病毒按病原学可分为甲型、乙型、丙型、丁型、戊型五种。庚型肝炎病毒(GBV—C／HGV)，TTV、SEV可能与非甲非戊型肝炎有关。己型肝炎病毒尚未得到确认。本研究针对甲、乙、丙型肝炎病毒血清学标志物进行检测，现报告如下。     

流式荧光免疫法检测多种肿瘤标志物的方法学评价

流式荧光免疫法可同时对多种肿瘤标志物进行检测,为了解本法是否能在临床常规检测中应用,我们进行了方法学考核,并以AFP、CA125、CEA、CA19-9、PSA 5种肿瘤标志物为例,与Roche公司2010电化学发光仪测定结果进行了相关性分析。报告如下。1材料和方法1.1仪器Lum inexTM-100多功能     

流式荧光免疫法检测多肿瘤标志物的方法学评价

目的评价流式荧光免疫法在多肿瘤标志物定量测定中的可靠性。方法用流式荧光免疫法对试剂盒精密度、线性、携带污染率、抗干扰性等指标进行评价,同时将Luminex^TM-100与Bio-Ekon SerozymeⅠ的结果进行比较。结果本方法化学性能的评价表明,批内变异系数（CV）均〈10%,批间CV均〈14%。线性良好（r〉0.99）。携带污染率均〈0.5%。血红蛋白（Hb）、胆红素（Bil）、三酰甘油（TG）对测定结果无显著干扰（P〉0.05）。与Bio-Ekon SerozymeⅠ内分泌定量分析仪及配套试剂相关性良好（r〉0.975）。对506名年龄在24-84岁健康体检人员标本用本方法进行多肿瘤标志物测定,正常参考值分别为甲胎蛋白（AFP）〈15 ng/mL、糖类抗原125（CA125）〈35 U/mL、癌胚抗原（CEA）〈5 ng/mL、糖类抗原199（CA199）〈35 U/mL、前列腺特异抗原（PSA）〈4 ng/mL。结论本方法测定结果准确、可靠且操作简便、快速,适宜于临床检测推广。     

流式荧光免疫法检测多肿瘤标志物的方法学评价

目的评价流式荧光免疫法在多肿瘤标志物定量测定中的可靠性。方法用流式荧光免疫法对试剂盒精密度、线性、携带污染率、抗干扰性等指标进行评价,同时将LuminexTM-100与Bio-Ekon SerozymeⅠ的结果进行比较。结果本方法化学性能的评价表明,批内变异系数(CV)均<10%,批间CV均<14%。线性良好(r>0.99)。携带污染率均<0.5%。血红蛋白(Hb)、胆红素(Bil)、三酰甘油(TG)对测定结果无显著干扰(P>0.05)。与Bio-Ekon SerozymeⅠ内分泌定量分析仪及配套试剂相关性良好(r>0.975)。对506名年龄在24~84岁健康体检人员标本用本方法进行多肿瘤标志物测定,正常参考值分别为甲胎蛋白(AFP)<15 ng/mL、糖类抗原125(CA125)<35 U/mL、癌胚抗原(CEA)<5 ng/mL、糖类抗原199(CA199)<35 U/mL、前列腺特异抗原(PSA)<4 ng/mL。结论本方法测定结果准确、可靠且操作简便、快速,适宜于临床检测推广。     

时间分辨荧光免疫分析技术检测乙型肝炎病毒血清学标志物评价

目的时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测乙型肝炎病毒感染者血清标志物的准确性、灵敏度及其临床应用价值。方法用TRFIA和酶联免疫吸附法(ELISA)对300例临床血清学标本进行检测,并对结果进行分析。结果 TRFIA对乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体的阳性率分别为26%、8%、52%、29%、35%,ELISA阳性率分别为25%、7%、46%、24%、28%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TRFIA检测乙型肝炎病毒血清标志物具有稳定性好、线性范围宽、不污染环境、操作简便等优点,其敏感性和特异性均达到放射免疫法和ELISA水平,可作为临床检测乙型肝炎病毒血清标志物的重要手段。     

新型自身抗体联合检测斑点免疫金渗滤法的建立及应用评价

目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA).方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo-1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点.结果:DIGFA检测185份经欧蒙ENA酶斑点法检测为不同自身免疫痛患者血清和50份正常人血清,阳性符合率分别为抗SmD1 91.2%,抗SSA92.8%,抗SSB 96.9%,抗Jo-1 92.6%,阴性符合率为100%(50/50).与欧蒙ENA酶斑点法对比检测的总符合率为93.0%(172/185),差异无显著性(P>0.05).结论:DIGFA法简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的联合诊断.     

乙型肝炎病毒生物标志物检测的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染对人类健康构成了巨大威胁,是全球公共卫生主要问题之一。应用HBV生物标志物检测,对于HBV的诊断、防治至关重要。我国人口流动性加大、疫苗防治与药物治疗增加、高效免疫球蛋白的大量应用等均可能导致HBV的突变与变异加剧,因此了解HBV生物标志物检测的最新进展就显得更为重要。本文将逐一介绍乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体和乙肝核心抗体、抗HBc-IgM、乙肝核心抗原、乙肝核心相关性抗原、前S1抗原、前S2抗原、前前S、HBV-DNA、共价闭合环状DNA,以供同道参考。     

丙型肝炎病毒核酸扩增及微流芯片检测方法的建立

目的建立稳定、可靠的核酸扩增和微流芯片分析法,用于血液中丙型肝炎病毒的检测。方法分别选取经2种酶联免疫吸附试验验证的丙型肝炎阴性（60份）和阳性（200份）血液标本;提取核酸后采用巢式PCR法进行扩增,最后用微流芯片法分析扩增产物。结果经过核酸扩增的丙型肝炎阳性血液经分析后皆出现预期大小片段的特异性条带,而阴性血液缺少相应的条带。结论本次建立的特异性巢式PCR扩增和微流芯片法检测结果可靠,可用于血液筛查。     

病毒性乙型肝炎感染组合分析

对 16 92例乙型肝炎感染者 (两对半中任一项阳性 )进行乙型肝炎感染组合分析。用随机分层抽样方法。检测两对半。结果表明 ,随年龄增长而由大三阳转化为小三阳的变化过程 ;汉族、彝族的组合较其他三种民族的组合复杂 ,8种以外组合近 7%。结果证明 ,新婚夫妇接种乙肝疫苗是一种重要预防手段 ;其次是新生儿 ;对于 5 0岁以上组可不要求进行乙肝疫苗接种 ;人类基因构成在种族上的不同可能导致了病毒对细胞的亲和力不同     

金标渗透法快速检测血清中丙型肝炎病毒抗体

采用基因工程技术克隆表达了丙型肝炎病毒（HCV）－Core-Ns3-Ns4优势表位嵌合抗原，研制出金标渗透法快速检测丙型肝炎病毒抗体试剂，与抗丙型肝炎病毒抗体酶联免疫检测试剂（HCV－ELISA）和重组免疫印迹分析检测试剂（HCV－RIBA3.0)进行了比较，其特异性、敏感性均达到了ELISA试剂水平。     

血友病A患者血制品治疗后HBV和HCV感染指标分析

目的对血友病A患者替代治疗后血液传播乙型、丙型肝炎病毒(HBV、HCV)的感染指标进行检测。方法对经本院确诊的35例血友病A患者采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗-HCV、HBV六项指标。结果 35例血友病A患者的抗-HCV阳性率为88.6%,输血次数和输注血液制品为主的种类与患者抗-HCV阳性率有相关性(P<0.01)。HBV六项指标检查,其中5例患者抗-HBe阳性(占14.3%),明显低于抗-HCV阳性率。结论血友病A患者替代治疗输血次数越多,感染风险越大,而较少输注以冷沉淀为主的血液制品的患者,其感染风险相对较小,且目前HCV感染率明显高于HBV感染率。     

电化学发光法在检测孕产妇乙型肝炎病毒中的应用

目的了解电化学发光法在检测孕产妇乙型肝炎病毒中的应用价值,从而有助于正确指导乙肝孕产妇产后的喂养方式。方法用ELISA法和电化学发光法平行测定孕产妇血清乙型肝炎病毒表面抗原,并对ELISA法检测为阴性而电化学发光法为低浓度的标本,用荧光定量PCR测定病毒DNA。结果电化学发光法对表面抗原的检出率明显高于ELISA法,ELISA法检测为阴性而电化学发光法为低浓度的标本,病毒DNA为阳性。结论电化学发光法检测血清表面抗原的灵敏度高于ELISA法,可以更好的指导孕产妇产后的喂养方式。     

二重RT—PCR同时检测HGV与HCV RNA

庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）具有相近的传播途径与类似的检测方法，本文建立了二重ＲＴ－ＰＣＲ法，用于同时检测ＨＧＶ与ＨＣＶ病毒核酸，其扩增产物分别为６０９ｂｐ与２５７ｂｐ在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的均能安全分离，ＨＧＶ产物经测序显示与报道的核酸序列同源性为８９．２％～９２．６％，该法具较好的批间重复性，二重ＰＣＲ法减轻了实验人员的操作强度，可降低测定费用近５０％，７６例样本检测显示     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCV RNA存在情况及其临床意义。方法 应用套式PCR检测46例急性丙型肝炎(丙型肝炎以下简称丙肝)和42例慢性丙肝患者血清和PBMC中HCV RNA.结果 慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于急性丙肝患者(P<0.001);急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于ALT正常的抗-HCV阳性者(P<0.001);2例患者血清中HCV RNA阴性,PBMC中可测及,12例患者血清抗-HCV阴性,而血清HCV RNA阳性。结论 血清HCV RNA检测有助于抗-HCV阴性丙肝的诊断和早期诊断;丙肝的肝损害可能与HCV RNA血症有关;PBMC中HCV感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用,PBMC中可贮存HCV RNA。     

乙型肝炎及丙型肝炎病毒对肝细胞癌临床病理特征及预后的影响

目的：探讨乙肝病毒及丙肝病毒感染对肝细胞癌的临床病理特征及预后的影响。方法：收集1995—2000年在复旦大学肝癌研究所行手术切除的355例肝细胞癌患者临床病理资料及术后随访资料。其中乙肝相关肝细胞癌163例（HBV组）,丙肝相关肝细胞癌73例（HCV组）,119例非病毒相关肝细胞癌作为对照组（NBNC组）,分析乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒对肝细胞癌的临床病理特征及预后的影响。结果：临床病理特征：乙肝相关肝细胞癌患者年龄轻,男性患者比例高,甲胎蛋白（AFP）均值高;丙肝相关肝细胞癌患者年龄最大,术前丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高伴白蛋白降低者比例高,体检发现的小肝癌居多,肿瘤分期相对较早;NBNC组患者由于无肝病背景,往往缺乏定期体检,多因出现临床症状就诊,故发现时以大肝癌为主,合并血管侵犯,肿瘤突破包膜者比例高。术后生存情况：HBV-HCC组患者中位生存期为15个月,1-,3-,5～7-年生存率分别为：71.0%,34.0%,30.7%和11.53%;HCV-HCC组中位生存期为19个月,1-,3-,5～7-年生存率分别为90.3%,68.2%,41.9%和31.41%。提示丙肝病毒相关肝细胞癌总体预后好于乙肝病毒相关肝细胞癌（χ2=10.92,P〈0.001）。多因素分析提示病毒感染类型是肝细胞癌预后的独立影响因素。相对于无病毒感染肝细胞癌患者而言,乙肝相关肝细胞癌术后死亡的风险是前者的1.5倍（P=0.03）,而丙肝相关肝细胞癌术后死亡的风险是其0.85（P=0.58）。结论：乙肝病毒与丙肝病毒相关肝细胞癌的临床病理特征及预后有显著差异。丙肝相关肝细胞癌总体预后好于乙肝相关肝细胞癌。     

荧光定量PCR检测HBVDNA与血清HBV标志物的关系

目的　探讨荧光定量 PCR检测血清 HBVDNA与血清 HBV标志物的关系。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量 PCR(FQ- PCR)两种方法同时检测 357份肝炎患者血清 ,并对结果进行对比分析。结果　肝硬化组HBVDNA含量明显低于 HBs Ag携带者组 (P<0 .0 5)。血清 HBs Ag、抗 - HBc、HBe Ag阳性组 HBVDNA含量明显高于HBs Ag、抗 - HBc、抗 - HBe和 HBs Ag、抗 - HBc阳性组 (P<0 .0 1 ) ,而后两组 HBVDNA检出率仍较高。结论　 FQ- PCR可真实反映 HBV感染、复制及病程变化 ,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义