非小细胞肺癌体外药敏试验研究

目的通过体外药敏试验,检测目前常用化疗药物对体外培养的非小细胞肺癌细胞的敏感性,为临床对化疗药物的选择提供参考,从而减少临床对化疗药物选择的盲目性,更好地实行个体化治疗。方法通过改良四氮唑盐（tetrazolium salt,MTT）比色法进行肺癌细胞体外药敏试验,对41例肺癌患者的新鲜肿瘤标本进行体外培养和化疗药物敏感性检测,并对其结果进行比较。结果 PTX、NVB、DDP、L-OHP的敏感率均在40%以上,提示非小细胞肺癌对以上药物敏感,而CPT-11、VCR、THP、ADM、EPI、IFO、CBP的敏感率均低于30%,提示在非小细胞肺癌化疗过程中应用以上药物可能存在耐药,非小细胞肺癌中腺癌和鳞癌对16种化疗药物的敏感性也有一定的差异性。结论术后肺腺癌的辅助化疗中应首选PTX、5-FU、DDP、L-OHP、CPT、VP-16、Docetaxel;肺鳞癌的辅助化疗中应首选PTX、DDP、L-OHP、NVB,VCR、THP、ADM均100%耐药,临床应用中应注意避免应用这些药物。     

非小细胞肺癌体外化疗药物敏感性与GRP94表达的相关性

[目的]探讨非小细胞肺癌(NSCLC)对8种化疗药物的体外敏感性与GRP94表达的相关性。[方法]用四噻唑蓝(MTT)法检测52例手术切除新鲜NSCLC组织8种化疗药物体外敏感性;免疫组织化学方法检测肺癌组织GRP94表达。采用Spearman法进行相关性分析。[结果]NSCLC52例对紫杉醇(PTX)、阿霉素(ADM)、卡铂(CBP)、拓扑替康(TPT)、长春瑞滨(NVB)、长春新碱(VCR)、顺铂(DDP)和鬼臼乙叉苷(VP-16)8种化疗药物的耐药率分别为42.31%、57.69%、63.46%、65.38%、67.31%、73.08%、78.85%和90.38%。其中,14例表现为完全耐药;且其高表达与肺癌细胞对VP-16的耐药明显相关(P<0.05)。[结论]检测GRP94表达对推测NSCLC对VP-16的耐药性具有参考意义。     

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术在治疗非小细胞肺癌胸水中的临床应用

目的：研究三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗中的应用,为临床治疗方案的选择提供依据。方法：选择52例伴有胸水的NSCLC患者,根据患者及家属治疗意愿分为经验治疗组和药敏治疗组。经验治疗组20例患者根据经验给予(紫杉醇联合卡铂,PTX+CBP)标准方案全身化疗;药敏治疗组32例患者对胸水标本分别进行顺铂(DDP) 、诺维本(NVB) 、紫杉醇(PTX) 、卡铂(CBP) 、健择(GEM)、PTX+CBP、NVB+CBP、GEM + DDP体外药敏检测,根据体外药敏检测结果选用化疗方案,比较2组患者治疗有效率。结果:体外药敏试验,单一用药中NVB和PTX对 NSCLC的体外敏感率最高,均为28.1 % ;GEM的体外敏感率次之,为25%;CBP的体外敏感率为21.9%;DDP的体外敏感率最低,为17.6%。联合用药方案显示较好的治疗效果,其中GEM + DDP 的体外敏感率最高,达55.9%;PTX+CBP的体外敏感率次之,达50%; NVB+CBP的体外敏感率最低,为40.6%。药敏治疗组患者有效率为65.6%,经验治疗组有效率为40.0%,两组有效率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：不同化疗药物对NSCLC的体外敏感率不同;根据药敏试验结果选择化疗方案可取得更
好的临床治疗效果。     

小细胞肺癌的二线化疗进展

小细胞肺癌(SCLC)约占所有肺癌的20％，是一种侵袭性强、死亡率高的肿瘤，广泛期SCLC的中位生存期仅为7～11个月。SCLC对化疗高度敏感，文献报道一线标准方案EP[鬼臼乙叉苷(VP-16) 顺铂(DDP)]和CAV[环磷酰胺(CTX) 阿霉素(ADM) 长春新碱(VCR)]的缓解率为65％～90％，但缓解持续时间短．     

脑胶质瘤化疗药物的体外敏感性试验研究

目的 探讨采用MTT法检测肿瘤化疗药对脑胶质瘤细胞的敏感性.方法 分离临床实体瘤标本(原代脑胶质瘤组织)制备单细胞悬液,包括U87细胞进行体外培养,将临床上常用的8种肿瘤化疗药5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡铂(CBP)、顺铂(DDP)、阿霉素(DOX)、甲氨蝶呤(MTX)、依托泊苷(VP-16)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)配成3种不同的浓度(5-Fu的终浓度为250、500、750 μg/mL,其他肿瘤化疗药终浓度50、100、150 μg/mL),采用MTT法检测,计算各肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的抑制率.结果 8种肿瘤化疗药对原代脑胶质瘤的抑制效率依次为:ADM＞ MMC＞ DDP＞VCR ＞5-Fu＞ VP-16＞ CBP＞ MTX;其中ADM的敏感度最高(抑制率95.54％);其次是MMC和DDP(抑制率＞60％),MTX最不敏感(11.29％).7种化疗药物对U87细胞株的抑制率依次为:ADM＞ VP-16＞ CBP＞ MMC ＞5-Fu＞ DDP＞ MTX:ADM的抑制率最高(91.19％),最不敏感的是MTX,其次是DDP(二者＜30％).DDP对于U87细胞抑制率较低,属于耐受药,但作用于原代脑胶质瘤细胞时细胞毒作用较大,为敏感性化疗药物.结论 MTT法体外药敏试验为指导实体瘤患者的临床化疗方案提供了有效数据,可减少用药的盲目性,提高个体化治疗效果.     

肺癌原代细胞耐药基因的表达和化疗敏感性的研究

目的探讨ATRA与VD3逆转肺癌细胞多药耐药，提高肺癌细胞化疗敏感性的机制。方法应用原代细胞培养、MTT比色、RT—PCR等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及MRP、LRP表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关。结论MRP、LRP在肺癌尤其非小细胞肺癌中高表达，可反应肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD3可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，从而提高肺腺癌的化疗敏感性。     

肺癌致上腔静脉综合征综合治疗分析

[目的]探讨以冲击化疗为主后行放射治疗肺癌所致上腔静脉综合征的综合治疗临床效果。[方法]回顾分析31例肺癌致上腔静脉压迫综合征患者,先联合化疗;小细胞肺癌用CE（CBP;VP-16）或COME（CTX;VCR;MTX;VP-16）方案、非小细胞肺癌用CAP（CTX;ADM;PDD）或MVP（MMC;VDS;PDD）方案,配合消炎、利水、抗凝等综合治疗,症状体征缓解后开始放射治疗,总剂量DT4000～6000CGY,放疗结束3～4周再加强1个周期化疗。[结果]31例肺癌所致上腔静脉压迫综合征患者经上述治疗后完全缓解（CR）15/31（48.3%）,部分缓解（PR）10/31（32.2%）,无变化（NC）4/31（12.9%）,进展（PD）2/31（6.4%）,总有效率（CR＋PR）25/31（80.6%）。[结论]肺癌所致上腔静脉压迫综合征患者首先以冲击化疗为主的综合治疗措施,后行放疗对病情缓解,改善生活质量有利。     

术中置药并术后胸腔灌注治疗Ⅲa期非小细胞肺癌的疗效观察

目的 探讨Ⅲa期非小细胞肺癌的有效治疗方法.方法 将53例Ⅲa期非小细胞肺癌患者分为观察组(26例)和对照组(27例).观察组术中用吡柔比星(THP)10 mg、环磷酰胺(CTX)200 mg、卡铂(CBP)50 mg置入清扫淋巴结处,以及术后行胸腔灌注吡柔比星50 mg、环磷酰胺600 mg、卡铂水针300 mg、α-干扰素500万U.两组均于手术后第3周采用紫杉醇(PTX)+THP+CBP/顺铂(DDP)或吉西他滨(GEM)+CBP/DDP及PTX+奥沙利铂(L-OHP)或异长春花碱(NVB)+L-OHP等多种方案交替静脉联合化疗,4周为一疗程,共4-6个疗程.随访3年进行疗效比较.结果 观察组1、2、3年生存率分别为88.4%、76.9%和46.1%,对照组依次为77.8%、44.4%和33.3%.结论 Ⅲa期非小细胞肺癌手术并术中置药术后胸腔灌注,辅以早期联合静脉化疗,可提高患者生活质量及生存率. Abstract： Objective To investigate an effective approach for stage Ⅲ a non- small cell lung cancer. Methods The stage Ⅲ a non-small cell lung cancer were divided into observation group (26 cases) and control group(27 cases). The observation were set THP 10 mg, CTX 200 mg, CBP 50 mg on lymph during the operation and were given THP 50 mg, CTX 600 mg, CBP 300 mg, IFN-α thoracic infusion chemotherapy after surgery. All of two groups(53 cases)received alternate intravenous chemotherapy of PTX + THP + CBP/DDP or GEM + CBP/DDP or PTX + L-OHP or NVB + L-OHP regimens in 3weeks after surgery and repeat every 4 weeks. The patients had 4 to 6 therapeutic course. The follow-up survery was compared after the treatment between the two groups. Results 1,2,3 years survival rates were 88.4% ,76. 9% and 46.1% in the observation group as compared with 77.8% ,44.4% and 25.9% in the control grouup respectively. Conclusions Operation set chemicals in surgery and given thoracic infusion chemotherapy after surgery and combined chemotherapy is an effective way for treatment of stage Ⅲ a non -small cell lung cancer. It can improve the life quality and survival rates of the patients.     

长春瑞滨联合卡铂治疗晚期非小细胞肺癌18例

目的:比较长春瑞滨(Vinorelbine,NVB)加卡铂(Carboplatin,CBP)与丝裂霉素(MMC)、氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)两个方案对晚期非小细胞肺癌的疗效。方法:随机将36例患者分为NVB+CBP组(18例)和MFP组(18例),均化疗3个疗程,疗效详按WHO疗效标准,总有效率以CR+PR计算。结果:总有效率NVB+CBP组为50.0%,MFP组为33.3%两者差异有显著性(P<0.05)。结论:对晚期的非小细胞肺癌予NVB+CBP联合化疗,疗效优于MFP方案。     

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的：探讨3-（4,5）-2-噻唑-（2,5）-二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法：应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果：对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论：MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。     

Clusterin在非小细胞肺癌中的表达及意义

[目的]探讨clusterin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达的临床病理意义.[方法]采用免疫组织化学方法(SP法)检测clusterin蛋白在52例NSCLC组织和20例正常肺组织的表达情况,结合临床病理资料进行分析.[结果]Clusterin阳性表达率在52例肺癌中为78.85%,20例正常肺组织中为10%,二者差异有显著性意义 (P<0.05);clusterin表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05),但与肿瘤的病理类型无关(P>0.05).[结论]检测clusterin表达对判断NSCLC的恶性程度、转移潜能及预后有重要的临床意义.     

AP-1、Integrin α_1的表达和肺癌转移的相关性

【目的】研究AP-1、integrin α1、Ⅷ因子在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系。【方法】通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、integrin α1、Ⅷ因子的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图象分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、integrin α1蛋白阳性细胞的平均光密度（AOD）和积分光密度（IOD）。并以Ⅷ因子抗体阳性血管数计算微血管密度（MVD）。【结果】C-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关。Integrin α1与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期显著正相关;integrin α1与AP-1之间均存在显著正相关关系;Integrin α1与MVD间存在显著正相关性。【结论】AP-1信号传导通路通过上调integrin α1的表达,改变细胞粘附特性、促进新生血管建立,从而加速了肺癌的浸润转移。     

HRM方法检测非小细胞肺癌患者胸水标本癌细胞基因突变的临床意义

[目的]探讨应用HRM方法检测非小细胞肺癌患者胸水标本癌细胞EGFR、KRAS基因突变用于指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂治疗的可行性.[方法]收集36例非小细胞肺癌患者胸水标本,常规提取DNA,HRM方法检测KRAS基因第2外显子、EGFR基因第19和21外显子突变.统计分析胸水标本与前期检测过的非小细胞肺癌组织KRAS、EGFR突变率差异.[结果]胸水标本36例中,2例(5.6％)KRAS突变,10例(27.8％) EGFR突变(其中EGFR第19和21外显子突变各5例).前期检测过的非小细胞肺癌组织KRAS和EGFR突变率分别为5.8％和36.3％.KRAS和EGFR突变率在胸水标本与前期非小细胞肺癌组织中差异均无显著性意义(P＞0.05).[结论]对难以获得肺癌组织标本的非小细胞肺癌患者可应用HRM方法检测胸水标本筛查KRAS、EGFR基因突变,指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂应用.     

培美曲塞联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床分析

[目的]探讨培美曲塞联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应。[方法]应用培美曲塞500 mg/m2联合顺铂75 mg/m2方案治疗34例晚期非小细胞肺癌患者。[结果]总有效率达38.2%,其中初治组有效率为43.7%,复治组有效率为33.3%。主要毒副反应为骨髓抑制、恶心呕吐、便秘及口腔黏膜炎等。[结论]培美曲塞联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌有较好疗效,毒副反应可耐受。     

实时荧光定量 PCR检测野生型p53介导蛋白磷酸酶mRNA 在非小细胞肺癌中的表达

 【目的】 荧光染料Ⅰ(SYBR GreenⅠ)是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其结果具有一定特异性&#65377;本研究的目的是建立检测野生型p53介导蛋白磷酸酶(Wip1)mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR的方法,了解肺癌组织及其远癌正常肺组织中Wip1的表达水平,研究肺癌组织中Wip1的表达水平与各种临床病理特征之间的关系&#65377; 【方法】 利用相对定量的方法检测44例肺癌及相应远癌正常肺组织中Wip1 mRNA相对于β-actin mRNA的表达量,进行相对定量分析&#65377; 【结果】 44例非小细胞肺癌(NSCLC)及相应远癌正常肺组织均有Wip1 mRNA的表达,其中17例非小细胞肺癌中Wip1 mRNA高表达,占38.6%,两者表达差异有统计学意义 (Ratio = 2.1644 ± 1.394,P < 0.05);分化程度低的肺癌组织中Wip1 mRNA表达量显著高于分化程度高者(F = 5.08,P = 0.013)&#65377; 【结论】 SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法可以成功地检测Wip1基因的表达量&#65377;初步检测结果显示Wip1可能是一种肺癌发生发展过程中的致癌因素&#65377;     

CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

【目的】研究非小细胞肺癌外周血CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA的表达及联合检测的临床意义。【方法】采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测59例NSCLC患者、31例肺良性疾病患者及20例健康志愿者外周血CK19mRNA、LUNXmRNA及巢式RT-PCR检测CEAmRNA的表达。【结果】59例NSCLC患者外周血CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA阳性率分别为23.7%（14/59）、33.8%（20/59）、57.6%（34/59）。31例肺良性疾病及20例健康志愿者外周血上述三者的阳性率分别为3.2%（1/31）、12.9%（4/31）、0%（0/31）;0%（0/20）。统计结果显示：LUNXmRNA与临床分期、细胞分化程度有关,CEAmRNA与病理类型有关。【结论】CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标志物。CEAmRNA对判断病理类型有一定临床意义。LUNXmRNA表达阳性率与肺癌TNM分期、细胞分化程度有关。     

紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床分析

[目的]探讨紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应。[方法]应用紫杉醇175 mg/m2联合顺铂75 mg/m2方案治疗36例晚期非小细胞肺癌患者,并观察疗效和副作用。[结果]总有效率达38.9%(14/36),其中初治组有效率为41.2%(7/17),复治组有效率为36.8%(7/19)。主要毒副反应为骨髓抑制、脱发、恶心呕吐及周围神经炎,但患者可耐受。[结论]紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌有较好疗效,毒副反应可耐受。     

非小细胞肺癌患者肺组织白细胞介素-10表达的变化及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺组织中白细胞介素-10(IL-10)表达的变化及其与临床病理参数之间的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCK)、酶联免疫吸附法(ELISA)和放射免疫法.分别检测43例NSCLC患者肺癌组织和正常肺组织中IL-10 mRNA的表达和IL-10、PGE2含量.结果 肺癌组织和正常肺组织中分别有37例和5例检测到IL-10 mRNA表达,阳性表达率分别为86.05%和11.63%;半定量分析肺癌组织中的IL-10 mR.NA平均吸光度显著高于正常肺组织(P<0.001).肺癌组织匀浆中IL-10和PGE2浓度分别为(38.37±11.51)和(56.34±12.23)ug/L,正常组织匀浆中IL-10和PGE2浓度分别为(9.15±2.62)和(9.94±3.40)ug/L,差异均具有显著性(P<0.01).直线相关分析发现肺癌组织中IL-10 mRNA表达和IL-10含量与PGE2浓度之间分别呈显著正相关(r=0.632,0.589,P<0.05).IL-10mRNA表达在不同性别、年龄、组织分型、TNM分期和分化程度之间差异均无显著性(P>0.05).结论 NSCLC患者肺癌组织中IL-10 mRNA和IL-10表达增强,可能在NSCLC的发生和发展中具有重要作用.     

Aurora-A激酶在肺癌中的表达

[目的]探讨Aurora-A基因在不同组织类型肺癌中的表达及其与临床的相关性.[方法]采用RT-PCR、Western-blot与免疫组化方法检测肺癌组织标本行Aurora-A的mRNA与蛋白表达.[结果]肺癌30例标本中RT-PCR检测Aurora-A mRNA的表达,19例(63%)肺癌表达水平高于相应癌旁组织,其中Western blot方法检测20例中,13例(65%)蛋白表达水平高于相应癌旁组织.免疫组化检测48例肺癌中32例高表达(66.67%).肺癌Aurora-A mRNA的表达水平与肺癌患者的性别,吸烟史以及病理特征无明显相关性.肺鳞癌的Aurora-A的蛋白水平高表达程度与肿瘤转移有相关性.[结论]肺癌组织Aurora-A表达明显高于其癌旁组织,提示Aurora-A基因的过表达与肺癌的发生有相关性.     

miRNA-155表达对人肺癌细胞A549增殖的影响

【目的】探讨miRNA-155在正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达及miRNA-155对人肺癌细胞A549增殖的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）技术检测15例非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中miRNA-155的表达;A549细胞分别转染miR-NC和miRNA-155 mimic ,采用Real-time PCR技术检测转染后A549细胞中的miRNA-155表达水平,同时采用MTT 技术和流式细胞技术检测转染后A549细胞增殖情况,Western印迹法检测转染后A549细胞中Akt、p-Akt（Ser473）、p27、bcl-2、bax的表达。【结果】miRNA-155在非小细胞肺癌组织中的表达情况明显高于癌旁组织（ P ＜0．05）;与转染 miR-NC 组相比, A549细胞转染miRNA-155 mimic后miRNA-155表达水平明显增高（ P ＜0．001）,MTT实验和流式细胞技术显示miRNA-155促进A549细胞的增殖;Western印迹法结果显示：转染miRNA-155的A549细胞p-Akt （Ser473）,bcl-2的表达水平增高,p27、bax的表达水平降低。【结论】miRNA-155可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调p-Akt（Ser473）、bcl-2表达,同时抑制p27、bax的表达来促进非小细胞肺癌的发生发展。