壮督方对强直性脊柱炎患者T辅助细胞亚群的影响

目的：探讨T淋巴细胞亚群与强直性脊柱炎(AS)发病的关系以及壮督方对AS患者T辅助细胞亚群的调节作用。方法：采用酶联免疫斑点法(Elispot)对AS患者和健康志愿者外周血中T辅助淋巴细胞进行分析。结果：AS患者外周血中以，Th1型细胞为主，AS患者组外周血中，Th1细胞比正常组明显升高，AS患者外周血中Th1,Th2水平与炎症活动指标ESR、CRP具有一定的相关性。经用壮督方治疗6个月后AS患者外周血中Th1细胞数下降而Th2细胞数上升。结论：经壮督方治疗后，AS患者外周血中Th1细胞有下降趋势、Th2细胞有上升趋势，壮督方对AS患者T辅助细胞亚群有一定的改善作用。     

系统性红斑狼疮380例外周血淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的：探讨 T 淋巴细胞亚群、B 淋巴细胞及 NK 细胞的变化在系统性红斑狼疮(SLE)发生和发展中的作用。方法选取解放军264医院和山西医科大学第二医院诊治的 SLE 380例及健康体检者58例,SLE 患者分为稳定期组157例、轻度活动期组79例、中度活动期组82例、重度活动期组62例。检测各组外周血中 T、B 淋巴细胞、NK细胞、Th、Ts 细胞计数及百分比,并分析 SLE 患者外周血淋巴细胞亚群与 SLE 疾病活动指数(SLEDAI)的相关性。结果活动期 SLE T、Th 及 NK 细胞计数及百分比、Ts 细胞计数低于健康对照组和稳定期组,B 细胞百分比高于健康对照组和稳定期组(P <0．05)。 T、Th、Ts、NK 细胞计数、T 细胞百分比与 SLEDAI 评分呈负相关,B 细胞百分比与 SLE-DAI 评分呈正相关(r =-0.347、-0.311、-0.326、-0.351、-0.318、0.455,P <0．05)。结论外周血淋巴细胞亚群的变化可以为 SLE 患者病情评估及诊治效果提供依据。     

儿童系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞亚群与疾病活动的研究

目的探讨儿童系统性红斑狼疮(SLE)患儿外周血中淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法采用流式细胞术检测59例SLE患儿及52名健康对照组患儿的外周血淋巴细胞亚群T细胞、B细胞、Th细胞、Tc细胞、NK细胞和总淋巴细胞数,并对结果进行比较,同时分析SLE患儿外周血淋巴细胞亚群与SLE疾病活动指数(SLEDAI)的相关性及其与狼疮肾炎、补体的相关关系。结果与健康对照组相比,SLE患儿Th细胞和Th百分比、NK细胞和NK细胞百分比及Th/Tc比值明显降低,而B细胞百分比、Tc细胞百分比增高,差异均有统计学意义(P<0.05);SLE患儿B细胞与SLEDAI评分呈正相关,NK细胞百分比与SLE评分呈负相关(P<0.05);狼疮肾炎组患儿的T细胞、Tc细胞计数和Tc细胞百分比均明显高于无狼疮肾炎的患儿,而狼疮肾炎组患儿Th细胞百分比、Th/Tc比值和NK细胞、NK细胞百分比明显低于无狼疮肾炎的患儿(P<0.05);补体降低组患儿的B细胞和B细胞百分比及SLEDAI评分均明显高于补体正常组(P<0.05)。结论 SLE患儿外周血淋巴细胞亚群存在异常,淋巴细胞亚群与SLEDAI评分、狼疮肾炎和补体之间存在显著的相关性,表明淋巴细胞亚群可能反映SLE患儿病情的严重程度。     

系统性红斑狼疮患儿外周血淋巴细胞亚群变化

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患儿外周血淋巴细胞亚群变化特征。方法选择24例SLE病儿和20例健康儿童为研究对象,应用流式细胞术（FCM）检测外周血的淋巴细胞亚群,对比分析两组检测结果。结果SLE患儿外周血CD4＋CD25＋T细胞、自然杀伤（NK）细胞百分率较对照组明显降低（t=2.480,3.773;P＜0.05）,CD8＋T细胞、活化T细胞和B细胞百分率明显升高（t=3.470,4.779,2.480;P＜0.05或P＜0.01）。结论SLE患儿外周血淋巴细胞亚群紊乱,调节性T细胞和NK细胞减少、B细胞增多和T细胞活化增强,在SLE发病机制中可能起重要作用。     

类风湿关节炎患者外周血Th0/Th1/Th2细胞亚群失衡的研究

目的研究类风湿关节炎(RA)患者外周血辅助性T细胞(T-helpercell,Th)亚群的状态,以探讨Th细胞亚群(Th0/Th1/Th2)在RA发病机制中的作用。方法利用流式细胞仪检测技术,采用三色标记法,在外周血单个细胞水平上同时进行细胞膜表面(CD4)和细胞内细胞因子[白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ]的测定,检测33例活动期RA患者和16名正常对照者外周血中T细胞亚群(CD3+/CD4+/CD8+T细胞)及Th细胞亚群的比例;并分析早期RA组(病程≤2年,17例)与非早期RA组(病程>2年,16例),骨侵蚀组(19例)与无骨侵蚀组(14例),类风湿因子(RF)阳性组(23例)与RF阴性组(10例)Th细胞亚群的比例。结果①与正常对照组相比,RA组外周血CD3+CD4+T淋巴细胞升高(P<0.05);Th0、Th1细胞的比例降低(P<0.05);T细胞亚群、Th细胞亚群变化与RA疾病活动相关;②与非早期RA组相比,早期RATh1细胞、Th1/Th2比值升高,Th2降低(P<0.05),早期RA患者Th1细胞比例与血沉、C-反应蛋白、晨僵时间呈正相关;非早期RA患者Th2细胞比例与血沉、晨僵时间呈正相关;③与无骨侵蚀组比较,有骨侵蚀组Th1细胞、Th1/Th2明显降低,Th2细胞升高(P<0.05);④RF阳性组与阴性组间Th细胞亚群及Th1/Th2比值差异均无统计学意义。结论CD4+T细胞在RA的发病机制中起着重要的作用,RA外周血中存在着Th细胞亚群的不平衡,Th细胞失衡的模式在RA的病程中并不是固定的,早期RA外周血以Th1细胞为主,慢性RA则以Th2细胞相对占优势,并与疾病的活动性、骨侵蚀有密切关系。     

T淋巴细胞亚群检测对SLE的临床意义

目的探讨SLE患者T淋巴细胞亚群水平及其对SLE活动评估提供依据。方法采用流式细胞仪检测SLE活动期组患者30例,稳定期组患者30例及正常对照组人群30例外周血T淋巴细胞亚群水平,并对T淋巴细胞亚群的变化情况进行统计分析。结果与正常对照组相比,SLE活动期组及稳定期组患者CD4＋细胞的百分率均明显降低（P〈0.01）,CD8＋细胞的百分率均明显增高（P〈0.01）,CD4＋/CD8＋比值也明显降低（P〈0.01）。SLE活动期组与稳定期组比较,CD4＋细胞的百分率稍低于稳定期组（P〈0.05）,CD8＋细胞的百分率明显高于稳定期组（P〈0.01）,CD4＋/CD8＋明显低于稳定期组（P〈0.01）。结论 SLE患者的T淋巴细胞表达是异常的,而且活动期和稳定期患者的表达水平有所不同,外周血T淋巴细胞亚群水平的检测,对SLE病情判断和临床治疗和观察是有一定价值的参考指标。     

支气管哮喘患者外周血Th1／Th2细胞因子平衡的变化

近年来,研究表明T淋巴细胞亚群的比例失调,即Th1／Th2细胞因子平衡偏移是哮喘多种临床表现的重要启动因子和调控因子。免疫学上一般以-γ干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL4）分别作为Th1和Th2细胞的特征性细胞因子。本研究分析了哮喘患者外周血单核细胞（PBMC）中IL-4、IFN-γ的水平,并与正常对照组比较,探讨哮喘患者外周血Th1／Th2平衡的改变。     

消栓通脉颗粒逆转Th1／Th2亚群失衡治疗大鼠深静脉血栓

目的探讨Th1／Th2亚群失衡在大鼠深静脉血栓形成（DVT）中的作用及中药复方消栓通脉颗粒逆转Th1／Th2亚群失衡治疗DVT的作用机制。方法80只DVT大鼠随机分为消栓通脉颗粒组、DVT组、假手术组、正常组,分离大鼠脾脏单个核细胞,流式细胞术检测各组大鼠Thl亚群（CD4＋TNF—α）、Th2亚群（CD4＋IL-4＋）比例,ELISA法检测大鼠外周血TNF—α、IL-4水平。结果与正常组及假手术组比较,DVT大鼠脾脏Th1亚群比例显著升高（P=0．022）,Th2亚群比例显著降低（P=0．015）;血清TNF-α水平显著升高（P=0．005）;IL-4水平显著降低（P=0．012）。消栓通脉颗粒作用后,大鼠脾脏Thl亚群比例显著降低（P=0．008）,Th2亚群比例显著升高（P=0．011）,血清TNF-α水平降低（P=0．036）,IL-4水平升高（P=0．018）。结论Th1／Th2亚群失衡参与了大鼠DVT发病过程,消栓通脉颗粒诱导T细胞向Th2亚群偏移,抑制炎性因子表达进而减轻炎症反应,保护血管内皮细胞,促进血栓再通。     

系统性红斑狼疮患者P-糖蛋白与淋巴细胞亚群的相关性研究

目的探讨多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)的表达水平与淋巴细胞亚群计数在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的关系及在预测疾病耐药性方面可能的机制。方法选择初发SLE患者20例和健康对照组15名。通过流式细胞术测定外周血淋巴细胞P-gp的表达水平和淋巴细胞亚群的计数。分析SLE患者外周血淋巴细胞P-gp的表达水平与淋巴细胞亚群中CD4+T细胞,CD8+T细胞、自然杀伤细胞、总T细胞和总B细胞等的相关性。采用t检验和χ2检验、Pearson相关性分析进行统计学分析。结果①健康对照组与SLE患者外周血淋巴细胞的相对荧光强度(RFI)平均值分别为2.2±0.7、3.3±2.0,差异有统计学意义(t=18.8,P<0.01)。②SLE患者外周血淋巴细胞P-gp的表达与淋巴细胞亚群中总T细胞,总B细胞,NK细胞的计数均无相关性,但P-gp的表达水平与CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值有相关性(r=0.602,P=0.002;r=0.561,P=0.005)。③根据SLE患者外周血淋巴细胞亚群计数分为增高组和降低组,分别与相应的RFI值比较,发现CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值的增高组与相应P-gp的表达呈正相关(r=0.713,P=0.025;r=0.628,P=0.014)。结论外周血淋巴细胞的P-gp表达是SLE患者多药耐药性的指标,SLE患者药物跨膜转运蛋白P-gp表达水平尚与其存在免疫功能异常亢进淋巴细胞亚群中CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值密切联系,提示P-gp可能是药物治疗疗效的指标,对改善预后和联合治疗减少耐药有重要的意义。     

类风湿关节炎患者外周血Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化的特点

目的研究类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）患者外周血中Th1、Th2和Th17细胞亚群表达比例变化,分析RA免疫学发病机制。方法运用流式细胞术检测RA患者及对照组外周血单个核细胞（PBMCs）中Th1、Th2、Th17细胞表达比例。并用酶联免疫吸附法检测RA患者及对照组血清中IFN-γ、IL-4、IL-17的浓度。结果RA患者CD4＋T细胞明显高于健康对照组（P〈0．05）;活动期RA患者Th1、Th17及其分泌的细胞因子含量明显高于健康对照组（P〈0．05）;非活动期RA患者Th17也明显高于健康对照组（P〈0．05）。结论类风湿关节炎Th1、Th2、Th17平衡改变与其疾病的活动度有关,处于活动期Th1、Th17反应增强,非活动期Th1、Th2、Th17趋于平衡。通过调节Th1、Th2、Th17平衡,有可能为RA的治疗提供一条新思路。     

人骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞活化的影响

目的探讨人骨髓间充质千细胞在体外对再生障碍性贫血患者T细胞活化的影响。方法从人骨髓分离培养间充质干细胞，用尼龙棉柱分离T淋巴细胞，分别以不同数量间充质干细胞加入到植物血凝素刺激的再生障碍性贫血患者T淋巴细胞活化体系中，通过流式细胞仪获取数据，计算CD3^＋CD25^＋和CD3^＋CD38^＋T细胞的表达率。结果当间充质干细胞为1×10^4／孔时，与单独培养的再生障碍性贫血患者T淋巴细胞（对照组）相比，间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T淋巴细胞CD25及CD38的表达呈明显抑制作用，差异有统计学意义（P〈0．01）。当间充质干细胞为1×10^3／孔时，与对照组相比无统计学意义。结论间充质干细胞在体外抑制再生障碍性贫血患者T细胞的活化，且这种抑制作用具有数量依赖性。     

骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群的特征分析

目的:检测和分析骨髓增生异常综合征(M DS)患者T淋巴细胞亚群的分布,评估M DS患者免疫功能状态。方法:采用FC 500流式细胞仪对35例M DS患者和10例正常对照组外周血标本进行T淋巴细胞亚群检测。结果:M DS组的辅助性细胞T细胞(T h),辅助性细胞T细胞/抑制性T细胞(T h/T s)和自然杀伤细胞(NK)的表达均低于正常对照组,T s细胞的表达高于正常对照组;随着M DS疾病的进展,抑制性T细胞(T s)的表达是逐渐增加的,其中只有RA/RA S组与RAEB组之间差异有显著性(P=0.027);M DS患者各组间T h,T h/T s比值和NK细胞的表达均无差异性。结论:T h,T s和NK细胞参与人体重要免疫功能,T淋巴细胞亚群免疫失调,则导致细胞免疫功能紊乱,T h,T s和T h/T s比值成为监测人体免疫功能、反映机体免疫状态的重要指标。     

溶瘤腺病毒修饰间充质干细胞裂解上清对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学特性的影响

目的评价溶瘤腺病毒(rAd)修饰间充质干细胞(MSC)裂解上清对小鼠乳腺癌4T1细胞生物学特性的影响。方法采用携带核心蛋白聚糖(DCN)基因的溶瘤腺病毒rAd.DCN和对照病毒rAd.Null感染MSC,命名为MSC.DCN和MSC.Null。感染后48 h,收集MSC.DCN,MSC.Null和MSC的裂解上清,将其与小鼠乳腺癌细胞4T1共培养,同时设4T1细胞对照组,用实时定量PCR法和Western印迹法检测小鼠乳腺癌4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达;通过Dye670标记,用流式细胞术检测4T1细胞增殖;用FITCAnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测4T1细胞凋亡;通过细胞划痕实验检测4T1细胞的迁移能力。结果 MSC.DCN裂解上清处理后,4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达均高于其余2组(P<0.01)。共培养3 d后,与细胞对照组相比,MSC组4T1细胞增殖指数下降(P<0.01);共培养3和5 d后,与MSC组相比,MSC.Null组和MSC.DCN组4T1细胞增殖指数下降(P<0.05),凋亡比例上升(P<0.05);MSC.Null与MSC...     

香丹注射液对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖作用

目的 研究香丹注射液对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)增殖的影响.方法 肌注香丹注射液和5-溴尿嘧啶核苷(Brdu);体外培养MSC,用四甲基偶氮唑法检测香丹注射液促进大鼠MSC的增殖作用,免疫组化检测MSC细胞的Brdu标记阳性率.结果 3种高浓度的药液对MSC的增殖与对照组比较有显著性差异;停药后3-7 d,香丹组Brdu标记阳性细胞率与生理盐水组比较有显著性差异.结论 香丹注射液有促进MSC增殖的作用.     

Impact of different mesenchymal stromal cell types on T-cell activation,proliferation and migration

Mesenchymal stromal cells (MSCs) isolated from different tissue sources may present distinct immunomodulatory profiles. As lymphocyte responses are a combination of several distinct steps, we evaluated and compared the impact of MSCs from different sources on the activation, proliferation and migration of T-cells. We demonstrated that tissue-derived MSCs have important immunomodulatory effects. AT-MSCs induced potent anti-proliferative and anti-inflammatory (IFN-γ downregulation) effects and differentially modulated several T-cell activation markers (CD23, CD26, CD45, and CD69). Among all the MSC types tested, only AT-MSCs induced significant downregulation of CD26 and CD45 expression. Of importance, AT-MSCs maintained a sustained expression of CD69. AT-MSCs, particularly following exposure to an inflammatory environment, promoted the migration of lymphocytes into their surrounding environment. The AT-MSCs may increase recruitment of T lymphocytes by upregulation of IL-8 and CCL5 secretion. Following their migration, T-cells interact with MSCs, which can impair lymphocyte proliferation and activation depending on their origin. Inflammatory T-cells appeared to be progressively suppressed, which may lead to a population of lymphocytes with a regulatory phenotype. These findings are relevant, as they increase our understanding of the different immunomodulatory effect of MSCs as well as their behavior in an inflammatory environment.     

T淋巴细胞上Fas抗原的表达与系统性红斑狼疮活动的相关性研究

目的　观察T淋巴细胞亚群上Fas抗原的表达与系统性红斑狼疮 (SLE)抗体的产生及疾病活动的相关性。方法　通过流式细胞仪 ,采用微量全血直接双标记免疫荧光染色方法 ,对 30例活动期SLE患者及 15名正常人外周血CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 淋巴细胞亚群上Fas抗原进行检测。结果　活动期SLE患者外周血CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 淋巴细胞亚群上Fas抗原的表达较正常人明显上调 (P <0 0 1) ;Fas抗原的表达与SLE的活动性呈正相关 (r =0 815 ,P <0 0 0 1) ;全部患者中有 19例抗dsDNA抗体阳性 ,抗dsDNA抗体 (+)患者组T淋巴细胞上Fas抗原的表达较抗dsDNA抗体 (- )组高 (P <0 0 5 )。结论　SLE患者T淋巴细胞表面Fas抗原表达上调 ,由Fas介导的淋巴细胞凋亡加快 ,刺激机体产生抗dsDNA等多种自身抗体。Fas抗原表达异常是引起SLE免疫功能紊乱的原因之一。Fas抗原的表达与SLE的活动性呈正相关 ,可为判断狼疮的活动提供参考     

Immunoregulatory effects of fraction 5 thymus peptides. I. Thymosin alpha 1 enhances while thymosin beta 4 suppresses the human autologous and allogeneic mixed lymphocyte reaction

Thymosin alpha 1 and thymosin beta 4, two peptides isolated from preparations of calf thymus fraction 5, were tested in the human mixed lymphocyte reaction (MLR). Thymosin alpha 1 was found capable of enhancing both the allogeneic and autologous MLR. On the contrary, thymosin beta 4 suppressed MLR proliferative responses. Study of the responses of the T cell subpopulations revealed that T4+ (helper/inducer) cells but not T8+ (suppressor/cytotoxic) are responsible for the enhanced, proliferative response to allo- and autoantigens in the presence of thymosin alpha 1. Both the autologous and the allogeneic proliferative responses of either T4+ cells or T8+ cells were not influenced by the addition of thymosin beta 4 in the cultures. However, when T4+ and T8+ subsets were cocultured, thymosin beta 4 was capable of activating T8+ cells to suppress the allogeneic and the autologous proliferative response of T4+ cells. These studies show that thymosin fraction 5 peptides exert immunoregulatory effects on the human MLR proliferative responses in vitro.