人脊髓GFAP阳性细胞和NF阳性神经元的关系

目的观察脊髓GFAP和NF阳性细胞的发育关系,为中枢移植供体胎龄的选择提供依据。方法意外死亡胎儿脊髓19例,用GFAP、NF多克隆抗体SP免疫组织化学染色,并行图像分析。结果NF阳性神经元染色强度渐增强;GFAP阳性细胞染色强度渐下降。NF阳性神经元密度在胚胎早期升高,晚期呈下降趋势,32周时下降明显;GFAP阳性细胞分布不均,白质内密度增加缓慢;灰质内密度增加迅速,32周时增加明显,后趋平缓。结论人胚脊髓发育过程中,神经细胞与星形胶质细胞的染色强度、密度的变化呈负相关。人中枢神经移植时以16周胎龄脊髓作供体较为适宜。     

糖尿病大鼠脊髓nNOS免疫阳性神经元的变化

目的：观察糖尿病大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数量的变化，探讨NO在糖尿病发生和发展中的作用机制。方法：用链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型，ABC免疫细胞化学法显示nNOS免疫阳性神经元。结果：大鼠脊髓内nNOS阳性神经元主要分布于中央管周围灰质和中间带等区域。中间带外侧核可见nNOS免疫阳性神经元较集中，细胞突起呈束状伸向中央管周围灰质方向；定量分析显示，糖尿病大鼠脊髓中央管周围灰质和中间外侧核在7w、12w时nNOS免疫阳性神经元数量明显增多。结论：糖尿病时伤害性刺激的传人增多，增多的nNC)S免疫阳性神经元可能与痛觉过敏等糖尿病周围神经病变有关。     

脊髓半横断损伤后大鼠皮神经元细胞骨架蛋白基因表达的变化

目的 探讨神经再生过程中细胞骨架蛋白的作用机制,了解中枢和外周神经系统神经元应答神经损伤和再生的差异。方法 用原位分子杂交方法观察了大鼠T10－11脊髓半横断损伤后1、3、5、7、10、14、21、28、56d皮层感觉运动区皮层神经元中α－管蛋白和3个神经丝蛋白亚基mRNA的表达变化。结果 脊髓半横断损伤后损伤侧皮层感觉运动区皮层神经元中α-管蛋白、神经丝－L、－M、－H mRNA表达明显下调。α－管蛋白mRNA表达水平在损伤后1d降低,而神经丝亚基mRNA表达水平直到下一个时间点（损伤后3d）才下调,至损伤后56d均无恢复趋势。结论 皮层神经元损伤后α－管蛋白mRNA的表达被抑制,提示皮层神经元和外周神经元应答损伤的信号不同。     

儿茶酚胺能神经元在雏鸡脊髓内的分布

用ＰＡＰ免疫组织化学方法对１０只白菜享雏鸡脊髓酷氨羟化酶阳性神经元的分布进行了研究。结果表明，脊髓内儿茶酚胺类，除来自脑的儿茶酚胺类神经元的下行纤维外；并有ＴＨ免疫反应阳性的神经元分布于脊髓的颈，胸和腰段。根据细胞形态和分布区域可将神经元分为３种：１．无绕中央管腹侧呈放射状分布的神经元；在腰髓的胞体为双极的圆形，其轴突细长；在胸髓的胞体为梭形，其突起粗短，两处细胞的突起均行于室管膜细胞之间，末端呈     

胚胎神经干细胞分化为神经丝蛋白阳性神经元的实验

神经干细胞(neural stem cell,NSC)可以为神经退行性疾病提供取之不尽、用之不竭的细胞供体,在不同的环境条件下可以分化为神经元及神经胶质细胞并表达不同的标志蛋白。神经丝蛋白(neurofilament protein,NFIP)特异性地分布于神经元胞体及突起中,是轴突成熟的标志之一。但是,WFP蛋白在胚胎神经干细胞分化过程中的表达还不清楚。     

维生素D依赖性钙结合蛋白-D25K样阳性神经元在人胎儿和新生儿脊髓和背根神经节内的表达和分布

目的：观察24～27w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节(DRG)内维生素D依赖性钙结合蛋白-D28K(CB)样阳性神经元的表达和分布。方法：采用免疫细胞化学ABC法对24～27w人胎儿和新生儿进行观察。结果：(1)CB样阳性产物的表达在胎儿DRG和脊髓灰质的神经元胞体及树突内可观察到。在脊髓各段有不同分布；(2)新生儿脊髓和DRG内CB样阳性胞体的数量、大小及染色强度均有所增加，但在空间分布上无大的变化。结论：人胎儿的脊髓和DRG在发育的24～27w至出生时，CB样阳性神经元的表达在定位分布上无差异，但随年龄增长，CB样阳性神经元的数量、大小和染色强度均有所增加。     

人胎儿脊髓神经肽Y样神经元及其纤维的发育和分布的免疫细胞…

人 流产胎儿标本２３例，孕龄１０－４１周，用免疫组织化学ＡＢＣ法，研究人胎儿脊髓神经肽Ｙ样神经元的发育和分布。结果在胎龄第１０周，发现脊髓后角浅层已有神经肽Ｙ样免疫阳性神经元胞体存在，且阳性神经元总数随胎龄的增加而递增，并向后角深层扩展。神经肽Ｙ样阳性纤维，在胎龄第１０周，不仅出现了脊髓的灰质和白质，而且见于脊髓的被膜。随胎龄的增长，免疫阳性反应纤维相对集中于脊髓的植物性神经中枢的所在部位，提示在     

人胎儿和新生儿脊髓和DRG内nNOS阳性神经元的表达和分布

目的：观察24～27w人胎儿和新生儿的脊髓和背根神经节(DRG)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达和分布。方法：ABC免疫细胞化学方法。结果：(1)24～27w人胎儿胸髓和腰1～3节段的中间带外侧核和前角Ⅷ层和Ⅸ层内可观察到nNOS阳性神经元。颈、胸、腰各段DRG内nNOS免疫阳性神经元占DRG细胞总数的84％～88％。(2)新生儿脊髓和DRG内nNOS免疫阳性神经元的分布情况与上述胎儿相似。但DRG内nNOS免疫阳性神经元的体积有所增加,数量明显减少,约占DRG细胞总数的70％～73％。结论：人胎儿脊髓和DRG在发育的24～27w至出生时,nNOS阳性神经元的表达在定位分布上无差异,但随胚胎发育阳性神经元的数量明显减少。     

脊髓半横断损伤后大鼠皮层神经元细胞骨架蛋白基因表达的变化

目的　探讨神经再生过程中细胞骨架蛋白的作用机制 ,了解中枢和外周神经系统神经元应答神经损伤和再生的差异。　方法　用原位分子杂交方法观察了大鼠T10～ 11脊髓半横断损伤后 1、3、5、7、10、14、2 1、2 8、5 6d皮层感觉运动区皮层神经元中α 管蛋白和 3个神经丝蛋白亚基mRNA的表达变化。　结果　脊髓半横断损伤后损伤侧皮层感觉运动区皮层神经元中α 管蛋白、神经丝 L、 M、 HmRNA表达明显下调。α 管蛋白mRNA表达水平在损伤后 1d降低 ,而神经丝亚基mRNA表达水平直到下一个时间点 (损伤后 3d)才下调 ,至损伤后 5 6d均无恢复趋势。结论　皮层神经元损伤后α 管蛋白mRNA的表达被抑制 ,提示皮层神经元和外周神经元应答损伤的信号不同     

家兔皮质脊髓束投射神经元的分布

将辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）分别注入家兔脊髓单侧颈、胸、腰等不同节段，以显示皮质脊髓束投射神经元的分布。结果表明，大脑皮质的ＨＲＰ标记神经元仅见于颈段注入例，而胸段和腰段注入例未见到皮质标记神经元。标记的皮质脊髓束投射神经元主要分布于注入侧对侧的额叶无颗粒型皮质和顶叶颗粒型皮质，并呈现为３个分隔的标记细胞密集区，分别位于额叶皮质吻侧端的内侧部、邻近前囟的额顶叶皮质、顶叶皮质的外侧部。标记神经元呈柱状     

巢蛋白在不同发育阶段人胚胎脊髓中的表达变化

目的:研究人胚胎脊髓生长发育过程中巢蛋白(nestin)的变化趋势。方法:采用免疫组织化学方法对不同发育时期(3周～8个月)的人胚胎脊髓中巢蛋白(nestin)的表达及变化进行了研究。结果:Nestin阳性细胞在神经上皮贯穿整个发育过程,5周基板、翼板形成后即可见到阳性物,而边缘层6周出现。中央管、基板、翼板、边缘层内nestin阳性细胞达高峰的时间分别是6周、7周、8周、9周,而表达明显减少的时间分别是8周、9周、10周、11周。随着脊髓的发育成熟,灰、白质内nestin阳性产物逐渐减少,而中央管的阳性细胞数至3月后较为稳定。结论:在脊髓不同部位神经干细胞出现时间和达到高峰的时间均不同,提示在脊髓的不同部位神经干细胞增殖、分化并不同步。     

大鼠脊髓损伤后植入人发角蛋白的实验研究

目的：研究人发角蛋白（HHK）在脊髓损伤（SCI）修复中诱导和促进神经元和神经纤维的再生以及HHK在脊髓中的降解机理。方法：选用12只成年雌性SD大鼠,采用改制的II型NYU装置,建立SCI组,SCI后植入HHK组,并设正常对照组,分别于术后14d取材,经HE,Mallory's－磷钨酸－苏木素,Loyer'sSterry Thionin等方法染色,观察其光镜结构的变化。结果：与损伤组相比较,植入HHK组损伤节段的萎缩程度明显,然质中部分神经元残存,有髓神经纤维脱髓鞘现象减轻,HHK周边集聚大量巨噬细胞和胶质细胞,植入的HHK毛小皮膨胀松弛,出现与皮质层分离,皮质层内出现皲裂,中央髓质腔增大,结论：植入HHK具有减轻脊髓损伤后的继发性损伤的作用,为进一步研究HHK在SCI修复过程中的作用及机理提供了形态学基础。     

Glia to neuron ratio in the posterior aspect of the human spinal cord at thoracic segments relevant to spinal cord stimulation

Spinal cord stimulation (SCS) applied between T8 and T11 segments has been shown to be effective for the treatment of chronic pain of the lower back and limbs. However, the mechanism of the analgesic effect at these medullary levels remains unclear. Numerous studies relate glial cells with development and maintenance of chronic neuropathic pain. Glial cells are electrically excitable, which makes them a potential therapeutic target using SCS. The aim of this study is to report glia to neuron ratio in thoracic segments relevant to SCS, as well as to characterize the glia cell population at these levels. Dissections from gray and white matter of posterior spinal cord segments (T8, T9, intersection T9/T10, T10 and T11) were obtained from 11 human cadavers for histological analyses. Neuronal bodies and glial cells (microglia, astrocytes and oligodendrocytes) were immunostained, microphotographed and counted using image analysis software. Statistical analyses were carried out to establish significant differences of neuronal and glial populations among the selected segments, between the glial cells in a segment, and glial cells in white and gray matter. Results show that glia to neuron ratio in the posterior gray matter of the human spinal cord within the T8–T11 vertebral region is in the range 11 : 1 to 13 : 1, although not significantly different among vertebral segments. Glia cells are more abundant in gray matter than in white matter, whereas astrocytes and oligodendrocytes are more abundant than microglia (40 : 40 : 20). Interestingly, the population of oligodendrocytes in the T9/T10 intersection is significantly larger than in any other segment. In conclusion, glial cells are the predominant bodies in the posterior gray and white matter of the T8–T11 segments of the human spinal cord. Given the crucial role of glial cells in the development and maintenance of neuropathic pain, and their electrophysiological characteristics, anatomical determination of the ratio of different cell populations in spinal segments commonly exposed to SCS is fundamental to understand fully the biological effects observed with this therapy.     

活性氧在脊髓损伤中的作用

脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)治疗的实验性研究在18世纪就已经开始，研究者发现兴奋性毒性、Ca2+超载、神经元凋亡与氧化应激参与了神经损伤病理过程。近期研究中活性氧学说在脊髓损伤中的作用越来越受到研究者的重视，并有研究表明线粒体呼吸链、炎症反应中的呼吸爆发等多种途径参与了SCI后活性氧生成。本文在阐述活性氧生物学作用的同时，并结合近年来以活性氧为靶点的SCI治疗策略做一小结。     

胎脑提取液对坐骨神经损伤大鼠脊髓运动神经元酶活性的影响

目的：研究大鼠坐骨神经损伤后，胎脑提取液对脊髓运动神经元乙酰胆碱酯酶(AChE)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响。方法：Wistar大鼠，随机分为实验组、对照组和正常组，前两组再随机分成术后3个时间组。无菌条件下制作坐骨神经钳夹损伤模型，酶组织化学方法结合显微图像分析，观察各组大鼠脊髓运动神经元AChE和SDH活性的变化。结果：术后1w实验组及对照组均比正常组明显降低；术后2w实验组开始升高，对照组进一步降低；术后3w实验组与正常组相近，对照组开始升高。结论：胎脑提取液对脊髓前角运动神经元的溃变有保护作用，可促进大鼠受损神经元的恢复。     

脊髓压迫性损伤大鼠海马和脊髓内BDNF的表达变化

目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)在脊髓压迫性损伤后的表达变化及作用。方法用自行设计的方法制作脊髓压迫模型,免疫荧光检测BDNF在星形胶质细胞、神经元和上下行轴突的表达;WB检测BDNF在大鼠海马及脊髓的表达。结果随着时间延长,受损部位的BDNF+-GFAP荧光强度逐渐增强;BDNF+-Tuj1荧光强度逐渐减弱;受损部位相邻上下段的BDNF+-NF200比受损部位的明显增强。海马和脊髓受损中心相邻的上、下段的BDNF蛋白表达在损伤后1d达到峰值,然后逐渐下降(P0.05);而脊髓受损中心的BDNF蛋白表达逐渐下降(P0.05)。结论脊髓损伤后,BDNF的表达下调,随伤后时间呈一定规律变化,是引起受损部位神经元表达下降的原因之一。     

Recombinant human erythropoietin prevents motor neuron apoptosis in a rat model of cervical sub-acute spinal cord compression

The objective of the study was to investigate the effects of recombinant human erythropoietin (rhEPO) in a rat model of cervical sub-acute spinal cord compression. 80 Wistar rats were randomly divided into 4 groups. Rats in the sham group (Group A, n = 5) underwent surgical procedures without cervical spinal cord compression; while rats in other groups were subjected to the spinal compression process. In the control group (Group B, n = 25), rats received an i.v. injection of 1 mL saline at day 7 post-surgery. Rats in the low-dose group (Group C, n = 25) and the high-dose group (Group D, n = 25) were treated with rhEPO at 500 units/kg body-weight and 5000 units/kg, respectively, via intravenous injection at day 7 post surgery. Limb motor function was scored by Basso–Beattie–Bresnahan (BBB) standards at 3, 7, 14, 21 and 28 days post-surgery. The distribution and quantities of EPO and its receptor (EPO-R) in the compressed segment of the spinal cord were detected by immunohistochemistry. Motor neuron apoptosis in the spinal cord was evaluated using TUNEL staining and flow cytometry at the indicated time points. Finally, IL-8, TNF-α, IL-6, and IL-1β levels in the compressed cervical spinal cord were determined by ELISA within the lesion epicenter at each time point post-surgery. The data suggest that expression of EPO-R was significantly increased following sub-acute cervical spinal cord compression; Groups C and D exhibited better BBB scores at all observed time points compared with the control group (p < 0.01). Using TUNEL staining and FCM, we observed that rhEPO profoundly inhibited motor neuron apoptosis in the spinal cord at day 21 (p < 0.01). Additionally, treatment with rhEPO halted the elevation of inflammatory cytokines. rhEPO administration decreased motor neuron apoptosis in the cervical spinal cord, improved motor functions and reduced the inflammatory response in a sub-acute cervical spinal cord compression model. Moreover, sustained treatment with low doses of rhEPO revealed a positive therapeutic effect.