乳腺癌中MMP-7和E-cad表达水平及意义

目的研究基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和钙黏附素-E(E-cad)在乳腺导管原位癌和浸润性导管癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测MMP-7和E-cad在25例乳腺导管原位癌(DCIS)、68例浸润性导管癌(IDC)和17例正常乳腺组织(Control)中的表达,并进行相关分析。结果与对照组比较,MMP-7在乳腺导管原位癌和浸润性导管癌中的表达显著增高(P<0.05);而E-cad的表达明显减低(P<0.05),且MMP-7与E-cad间无相关关系(χ2=0.00,P=1.00);MMP-7及E-cad均与乳腺癌肿瘤分化程度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 MMP-7和E-cad与乳腺导管原位癌和浸润性导管癌的发生发展相关。     

CTEN和E-cad在乳腺浸润性导管癌的表达及临床意义

目的研究CTEN蛋白和E-钙黏蛋白(E-cad)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化检测80例乳腺浸润性导管癌组织(A组)和25例癌旁乳腺组织(B组)中CTEN和E-cad蛋白的表达量,分析其与临床病理特征及预后的关系。结果 A组CTEN蛋白表达阳性率为68.75%,B组无CTEN蛋白表达;A组E-cad蛋白表达阳性率为58.75%,低于B组的92.00%(P<0.05)。A组CTEN和E-cad蛋白的表达与肿瘤大小、组织学分级、有无淋巴结转移、TNM分期和雌激素受体表达密切相关性(P<0.05);乳腺浸润性导管癌组织中CTEN和E-cad的表达呈负相关(r=-0.346,P<0.05);COX回归分析显示,CTEN表达水平可作为乳腺浸润性导管癌预后判断的独立因素(P<0.05)。结论 CTEN和E-cad蛋白可能在乳腺浸润性导管癌的发生和发展中起重要作用,检测CTEN表达对患者預后的判断具有一定的意义。     

半乳凝素3在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究半乳凝素3(Gal-3)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集40例患者胰腺癌组织及其配对的癌旁组织,采用免疫组化、Western blot法和RT-PCR检测Gal-3蛋白和mRNA表达,并分析其与临床病理参数间的关系.结果 胰腺癌组织中Gal-3蛋白阳性表达率和mRNA表达量均高于癌旁组织(92.5％ vs.12.5％和77.52±0.58 vs.12.28±0.67)(P＜0.01).有淋巴结转移和病理分期Ⅱ期胰腺癌组织中Gal-3的阳性表达率高于无淋巴结转移和病理分期Ⅰ期(P＜0.05),且Gal-3的蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和血管侵犯无显著相关(P＞0.05).结论 Gal-3在胰腺癌组织中过表达,且与病理分期和淋巴结转移密切相关.     

微血管密度、抑血管内皮生长因子及其受体表达与乳腺癌临床病理因素的关系

目的评价微血管密度(MVD)和抑血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk-1)在乳腺癌组织中的表达对预后的判断价值。方法用免疫组织化学染色方法检测76例乳腺癌、10例癌旁正常乳腺组织中抑血管内皮生长因子和受体的表达,并在CD34染色切片上检测微血管密度。结果(1)癌组织VEGF和Flk-1阳性表达率分别为59.2%和61.8%,明显高于癌旁组织(P<0.05);(2)乳腺癌MVD均值为(30.49±16.51)个/200倍视野,明显高于癌旁正常组织(P<0.01);(3)乳腺癌MVD与肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴转移及复发转移有关(P<0.01);(4)血管内皮生长因子和受体的表达与腋淋巴转移及复发转移有关(P<0.05);(5)血管内皮生长因子和受体阳性组MVD均值(54.93±13.86)高于阴性组(41.28±11.69),其表达与MVD有关(P<0.01)。结论乳腺癌的VEGF和Flk-1表达阳性率与MVD大于良性乳腺疾病。VEGF和Flk-1与MVD与患者的预后相关,均可作为判断乳癌患者预后的指标之一。VEGF和Flk-1不是影响肿瘤新生血管形成的惟一因素。     

乳腺浸润性导管癌组织中血管内皮细胞生长因子与增殖细胞核抗原的表达及临床病理意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)在乳腺浸润性导管癌(IDC)组织中的表达及其与临床病理的相关性。方法应用免疫组化SP法检测43例乳腺浸润性导管癌组织及其癌旁正常乳腺组织中VEGF和PCNA的表达。结果VEGF、PCNA在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率为72.10%和83.72%,癌旁正常乳腺组织中则为23.26%和18.60%,两者在IDC和正常乳腺组织中的阳性表达差异均有显著性(P<0.01);VEGF的阳性表达与乳腺癌病理学分级、淋巴结转移有关(P<0.01,P<0.05),PCNA的阳性表达与淋巴结转移有关(P<0.05),但两者的表达均与病人年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论VEGF、PCNA的同时表达有助于乳腺癌病理诊断;亦可将其作为有无淋巴结转移的生物学标志,对判断预后和术后的治疗有一定的指导意义。     

半乳糖凝集素-3和表皮生长因子受体蛋白表达与老年胃癌转移和预后的关系

目的探讨半乳糖凝集素-3（galectin-3,Gal-3）和表皮生长因子受体（epidemal growth factor receptor,EGFR）蛋白表达与老年胃癌临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组化技术检测60例老年胃癌、30例异型增生和20例癌旁正常胃黏膜组织中Gal-3和EGFR蛋白表达,并结合肿瘤的病理学行为和临床随访资料进行分析。结果在老年胃癌组织中Gal-3和EGFR阳性表达率分别为65.0%和46.7%,均显著高于异型增生和癌旁正常胃黏膜组织（P〈0.05）。Gal-3和EGFR表达与老年胃癌浆膜浸润、淋巴结转移和预后密切相关（P〈0.05）。Gal-3和EGFR蛋白表达呈显著正相关（r=0.30,P〈0.05）。结论 Gal-3和EGFR蛋白表达与老年胃癌发生、转移和患者生存期密切相关,同时检测Gal-3和EGFR蛋白表达可作为判断老年胃癌预后的参考指标。     

COX-2、E-cad的mRNA及蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)、上皮钙黏素(E-cad)的mRNA及蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义.方法 采用原位杂交和免疫组织化学法(SP法)检测30例乳腺纤维腺瘤和70例乳腺浸润性导管癌中COX-2、E-cad的mRNA及蛋白的表达,并进行比较分析.结果 COX-2的mRNA和蛋白在乳腺纤维腺瘤和乳腺浸润性导管癌组织中的阳性率分别为30.0%、74.2%,23.3%、72.8%,二者比较差异均有统计学意义(P＜0.01).E-cad的mRNA和蛋白在乳腺纤维腺瘤和乳腺浸润性导管癌组织中的阳性率分别为93.3%、35.7%,90.0%、32.8%,二者比较差异亦均有统计学意义(P＜0.01).乳腺浸润性导管癌中COX-2的mRNA及蛋白表达均与淋巴结转移有关(P＜0.01,P＜0.05);E-cad的mRNA及蛋白表达均与淋巴结转移和组织学分期有关(P＜0.01,P＜0.05).乳腺浸润性导管癌中COX-2和E-cad的mRNA及蛋白表达的变化趋势均相反,经Spearman相关性检验分析发现两者mRNA及蛋白表达均呈负相关(r=-0.49,P＜0.01;r=-0.26,P＜0.05).结论 COX-2的mRNA及蛋白过表达,E-cad的mRNA及蛋白低表达均可促进癌细胞浸润和转移.     

喉癌中肝细胞再生磷酸酶-3的表达及与微血管密度的相关性

目的:探讨在喉鳞状细胞癌中肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)和微血管密度(MVD)的相关性。方法:采用免疫组化SABC法检测69例喉鳞状细胞癌组织和25例相应癌旁组织中PRL-3的表达情况,并用CD105标记MVD,研究PRL-3的表达及MVD计数与喉鳞癌临床病理特征的关系,采用Spearman等级相关分析PRL-3表达与MVD的相关性。结果:PRL-3在癌组织中的阳性表达率(65.22%)高于癌旁组织(8%),差异有统计学意义(P<0.01)。癌组织中有淋巴结转移患者的PRL-3阳性率和MVD计数明显高于无淋巴结转移患者,病理分期为Ⅲ~Ⅳ期的PRL-3和MVD高于Ⅰ~Ⅱ期,差异均有统计学意义(P<0.05)。PRL-3的表达与MVD计数呈正相关(r=0.811,P<0.01)。结论:PRL-3可能作为一种新的肿瘤标志物来监控喉鳞状细胞癌的发生、浸润和转移。     

生存素和COX-2在乳腺癌复发及转移癌组织的表达

目的探讨复发、转移乳腺癌癌组织中生存素和环氧化酶2(COX-2)的表达。方法将86例乳腺癌胸壁局部复发或腋窝、锁骨上淋巴结转移灶切除作病理检查,同时进行免疫组化检测,比较首次手术标本和复发、转移乳腺癌癌组织中的生存素和COX-2表达。结果 86例复发、转移的乳腺癌癌组织中的生存素和COX-2阳性表达率分别为90.70%(78/86)和94.19%(81/86),明显高于首次手术后的61.63%(53/86)和63.95%(55/86)(P<0.01)。结论乳腺癌复发、转移后,癌组织中生存素和COX-2阳性表达率均明显上调,提示该类患者预后不良。     

Med19在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的分析中介体19亚基(Med19)表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法用RT-PCR检测Med19基因在6株人乳腺癌细胞ZR-75-30、MDA-MB-231、SK-BR-3、T-47D、HCC-1937及MCF-7中的表达。用免疫组化方法检测Med19蛋白在150例临床乳腺癌组织及癌旁正常组织中的表达并分析其与临床病理特征的关系。结果 Med19基因在人乳腺癌细胞株ZR-75-30、MDA-MB-231、SK-BR-3、T-47D、HCC-1937及MCF-7中均有较高丰度的阳性表达。乳腺癌组织中Med19蛋白阳性表达率为52.0%,明显高于癌旁正常组织的9.3%(P<0.01)。Med19蛋白的阳性表达与乳腺癌病理高分级相关(P<0.01),未发现与患者年龄、肿瘤大小、病理组织类型、TNM分期、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、p53有统计学意义的相关性(P>0.05)。结论 Med19在乳腺癌组织中高表达,可能在乳腺癌的发生发展中起重要的作用。     

KLK7蛋白及E-钙黏蛋白在卵巢癌中的表达及意义

目的：探讨KLK7蛋白和E-钙黏蛋白（E-cad）在卵巢癌中的表达。方法：应用免疫组化法检测40例卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad的表达,将二者的表达情况与临床指标的关系进行统计分析。结果：（1）KLK7蛋白和E-cad在上皮性卵巢癌中的表达与患者年龄、组织类型无关;随着临床分期增高、组织分化降低、患者手术时有淋巴结或大网膜转移和腹腔液中有癌细胞,KLK7蛋白的阳性表达率呈上升趋势（P〈0.05）,而E-cad的阳性表达率呈下降趋势（P〈0.05或P〈0.01）;（2）在卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad表达呈负相关（P〈0.05）。结论：KLK7蛋白在卵巢癌中呈高表达,E-cad则正好相反,二者与卵巢癌的侵袭转移有关,可为评估预后的有效指标;KLK7蛋白和E-cad在卵巢癌组中表达呈负相关,在卵巢癌侵袭转移中可能存在拮抗效应。     

粘着斑激酶在乳腺癌组织中表达的研究

目的　研究粘着斑激酶 (FAK)表达与乳腺癌生物学行为和预后的关系。方法　应用免疫组织化学 S-P方法检测 1 1 5例乳腺癌手术标本中 FAK的表达情况。结果　乳腺癌原发灶 FAK表达阳性率为 81 .74 % ,其中无区域淋巴结转移者阳性率为 6 4 .4 4 % ,有区域淋巴结转移者阳性率为 92 .86 % (P<0 .0 1 ) ,FAK表达水平与乳腺癌大小和 p TNM分期进展呈正相关 (P<0 .0 1 ,P<0 .0 1 )。FAK阳性者术后 3年、 5年生存率分别为 6 5 .96 %、 4 5 .39% ,而阴性者为 76 .1 9%、 6 0 .6 1 % ;两组患者术后 3年、 5年生存率差别均有显著性 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 5 )。结论　乳腺癌组织由于 FAK表达增加 ,导致恶性细胞的发生、增殖、浸润和转移。故检测乳腺癌组织中 FAK表达状况 ,有助于进一步了解乳腺癌生物学行为和对患者预后的判断     

Lymphatic metastasis is related to the epithelial-mesenchymal transition and expressions of VEGF, MMP-9, and COX-2 in breast cancer

The invasion and metastasis of breast cancer are supposed to involve several stages in which epithelial-mesenchymal transition (EMT) is regarded as the mechanistic basis for the behavior of cancer cells. A series of factors related to EMT are apparently involved in such process. The current study aimed to investigate the contributions of EMT and related factors in lymph node metastasis of breast cancer. The expressions of E-cadherin (E-Cad), N-cadherin (N-Cad), vascular endothelial cell growth factor (VEGF), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), cyclooxygenase-2 (COX-2), and CD34 were examined in 74 cases of breast cancer, including 39 cases with lymph node metastasis and 35 cases without lymph node metastasis by immunohistochemistry. Multivariable Cox proportional hazards model was used to analyze the patients’ prognosis. The expressions of N-Cad, VEGF, MMP-9, and COX-2 in cases with lymph node metastasis were significantly higher than those without lymph node metastasis (P<0.05), while the E-Cad level was inversely related to status of lymph node metastasis (P<0.05). The metastasis rate of lymph node in the cases with EMT (lower E-Cad expression and higher N-Cad expression) was 78.3%, while that without EMT (higher E-Cad expression and lower N-Cad expression) was 11.1%. There was a statistical difference in the expression of COX-2 protein between histological grade I and grade II or III, respectively (P<0.05). In the cases with higher grade, the expression of E-Cad was decreased, while that of N-Cad was increased. Higher microvascular density (MVD) was also found to be significantly associated with lymphatic metastasis (P<0.05), and the cases with higher MVD had shorter survival time. This study indicates that EMT and expressions of VEGF, MMP-9 and COX-2, and MVD value are strongly correlated with lymph node metastasis in breast cancer.     

肝癌患者中nm23-H_1表达与转移 复发的关系

目的探讨肿瘤转移抑制因子nm23-H1基因在肝癌组织中的表达以及与转移、复发、预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法对36例肝癌组织、30例正常组织进行nm23-H1基因蛋白检测,并追踪随访1年。结果肝癌低分化组中nm23-H1基因蛋白表达阳性率为26%,明显低于高、中分化组及正常组织(P<0.05),nm23-H1基因蛋白表达在肝内转移组明显低于无肝内转移组,两组间差异有统计学意义(P<0.01);nm23-H1基因蛋白表达在术后复发组明显低于术后无复发组。结论nm23-H1基因蛋白与肝癌的转移、复发及预后密切相关。     

p130Cas蛋白在ER阳性乳腺癌中的表达艮相关因素分析

目的研究ER阳性乳腺癌中p130Cas蛋白的表达情况,以探讨其与乳腺癌临床和病理特征的关系及对预后的影响。方法应用免疫组化的方法检测100例ER阳性原发性乳腺癌组织中p130Cas蛋白的表达。结果乳腺癌中p130Cas蛋白阳性表达率为64％,出现复发转移患者的阳性表达要高于无复发转移患者,两者有统计学差异（r=9．125,P=0．003）。p130Cas蛋白表达阳性患者的5年无病生存率要明显低于阴性表达的患者,两者有统计学差异（r=4．194,P=0．041）。在64例出现p130Cas蛋白表达阳性的乳腺癌患者中,p130Cas蛋白表达阳性乳腺癌患者5年无病生存率与患者月经状态（X2=3．977,P=0．046）、组织学分级（X2=10．553,P=0．005）、C—erbB-2蛋白表达（r=8．349,P=0．039）相关,与肿瘤大小（X2=1．804,P=0．406）、TNM分期（r：1．622,P=0．444）、淋巴结转移状况（r=3．310,P=0．191）、年龄（r=2．492,P=0．477）、PR（X2=0．049,P=0．825）无统计学差异（P〉0．05）。结论p130Cas蛋白的表达水平与乳腺癌的恶性程度和侵袭性有关,p130Cas蛋白的表达水平越高肿瘤的恶性程度越高,会增加患者复发、转移的风险。     

CXCR4、MMP-9在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测59例乳腺癌组织、20例癌旁正常乳腺组织中CXCR4、MMP-9的表达及分布,RT-PCR技术检测乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中CXCR4mRNA表达。结果乳腺癌组织中CXCR4、MMP-9阳性表达率分别为66.1%、62.7%,高于癌旁正常乳腺组织的0、15.0%(P<0.05)。CXCR4和MMP-9表达均与肿瘤的淋巴结转移密切相关(P<0.05),且两者表达呈正相关(rs=0.410,P<0.01)。结论 CXCR4、MMP-9在乳腺癌组织中高表达,并与淋巴结转移相关;联合检测乳腺癌组织中CXCR4、MMP-9的表达有助于判断其预后。     

肝素结合细胞因子影响乳腺癌细胞的增殖、侵袭和上皮细胞间质化的功能研究

目的 探讨肝素结合细胞因子(Midkine)的表达对乳腺癌细胞的增殖和侵袭的作用.方法 采用慢病毒介导的shRNA干扰技术在乳腺癌细胞中沉默Midkine的表达,及利用慢病毒高表达Midkine基因在正常乳腺表皮细胞中.利用蛋白质印迹(Western blot)法检测shRNA干扰或高表达后的正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞中Mid-kine蛋白的表达情况.利用流式细胞仪技术、Transwell小室实验、及细胞划痕实验,分析Midkine基因高低表达对正常乳腺表皮细胞和乳腺癌细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响.结果 首先观察了不同乳腺癌细胞中Midkine的表达情况.其中Midkine只有在BT549、MDA-MB157和MDA-MB436间充质乳腺癌细胞(Mesenchymal cell)中表达,而正常细胞和上皮细胞乳腺癌细胞(Epithelial cell)中不表达.BT549细胞中两种不同shRNA降低Mdikine蛋白表达的效率分别达到100%和90%.HMLE正常乳腺上皮细胞中Midkine高表达效率非常高.结晶紫染色法检测细胞增殖实验结果显示,Midkine-shRNAs转染组BT549细胞的生长速度较阴性对照组降低(P<0.01).流式细胞仪检测结果显示,Midkine-shRNAs转染组BT549细胞的增殖指数为(36.06±2.12)%和(32.06±3.46)%,明显低于对照组53.06±3.68%.同时观察到EMT标识物B连环蛋白(β-catenin)、N钙粘蛋白(N-cadherin)在Midkine-shRNAs转染组BT549细胞中表达上调.Transwell小室实验显示两个Midkine-shRNA转染组BT549细胞迁移(Migration)细胞数为零和(7±4.4)个高/倍视野,它们的侵袭(Invasion)细胞数为(38±7)和(46±8)个/高倍视野,明显低于对照组的迁移(Migra-tion)细胞数(178±14)个/高倍视野,侵袭(Invasion)细胞数(232±35)个/高倍视野.同时也观察到高表达Midkine正常乳腺上皮细胞表现出间质化(EMT)的表型,EMT标识物E钙粘蛋白(E-cadherin)、连环蛋白(β-catenin)在Midkine高表达HMLE细胞中表达下调的现象.细胞划痕实验显示Midkine高表达HMLE细胞组的迁移距离明显高于对照组.结论 在BT549细胞中降低Midkine的表达,可抑制BT549细胞的迁移和侵袭,同时可明显上调对上皮细胞间质化标志蛋白β-catenin和N-cadherin表达,提示在Midkine高表达的肿瘤患者中,通过抑制其蛋白表达可能抑制肿瘤的转移和侵袭.     

黄药子配伍甘草对胃癌细胞增殖及侵袭的影响

目的探讨黄药子配伍甘草对人胃癌细胞SGC7901增殖及侵袭的影响。方法体外培养胃癌细胞SGC7901,以黄药子配伍甘草含药血清处理,采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell试验检测细胞侵袭性,实时荧光定量(qRT-PCR)检测上皮间质转化(EMT)相关基因的表达。结果中药含药血清能抑制胃癌细胞SGC 7901增殖,且抑制作用随着药物浓度的增加而加强(P<0.05);中药组Transwell小室穿膜细胞数随着浓度的增加而减少(P<0.05);qRT-PCR结果显示,空白组E钙黏蛋白表达较其他组低,不同浓度中药组E钙黏蛋白表达随着浓度的增加而增加;中药组较空白组N钙黏蛋白和金属基质蛋白酶(MMP)-9的表达均降低,随着中药浓度的增加而显著下降(P<0.05)。结论黄药子配伍甘草能抑制胃癌细胞SGC 7901的增殖,并通过抑制EMT而降低癌细胞的侵袭性。