侧脑室注射p75~(NTR-ECD)对AD小鼠海马DCX表达与认知功能的影响

目的研究侧脑室注射p75NTR胞外段(extracellular domain of p75NTR,p75NTR-ECD)阻断内源性p75NTR对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠海马神经发生和认知功能的影响。方法选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,实验组连续7d侧脑室注射p75NTR-ECD(1μg/d),对照组向侧脑室注射等量生理盐水,空白对照组未予处置,Morris水迷宫检测其认知功能,免疫组化检测海马齿回Doublecortin(DCX)的表达变化。结果与生理盐水对照组及空白对照组相比,侧脑室注射p75NTR-ECD组小鼠海马齿回DCX阳性细胞数显著增加(P0.01),行为学检测显示逃逸潜伏期缩短、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率增加(P0.05),生理盐水注射组和空白对照组DCX阳性细胞数及行为学检测显示差异无统计学意义(P0.05)。结论 p75NTR-ECD可促进AD小鼠海马神经发生并改善AD小鼠认知功能。     

老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞的增殖与分化

目的 观察老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞(NSCs)的增殖与分化,探讨脑出血后NSCs的变化规律.方法 制作老年大鼠脑出血模型,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)腹腔注射标记增殖细胞,用免疫组化法检测大鼠海马齿状回BrdU、神经元核抗原(NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数的变化.结果 正常组和假手术组老年大鼠海马齿状回均有少量BrdU阳性细胞,脑出血后大鼠各时间段的BrdU阳性细胞数目均较正常组和假手术组明显增加,7d组达到峰值后逐渐下降,28d组仍高于正常组和假手术组.正常老年大鼠海马齿状回可见少量BrdU/NeuN和BrdU/GFAP双标阳性细胞,脑出血后双标阳性细胞数较正常组明显增加.结论 脑出血后老年大鼠海马齿状回NSCs增殖明显,且可以向神经元和神经胶质细胞分化.     

侧脑室注射Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响

目的观察侧脑室给予Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响。方法选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,实验组连续7d侧脑室注射Noggin,对照组向侧脑室注射等量生理盐水,Morris水迷宫检测其认知功能,免疫荧光检测海马齿回BrdU的表达。结果和生理盐水对照组相比,侧脑室注射Noggin组小鼠海马齿回BrdU阳性细胞数显著增加(P0.01),行为学检测显示逃逸潜伏期缩短、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率增加(P0.05)。结论侧脑室注射Noggin可促进AD小鼠海马神经发生并改善其学习记忆能力。     

复智散对阿尔茨海默病大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响

目的观察复智散（FZS）对Alzheimer病（AD）模型大鼠海马齿状回内源性神经干细胞增殖的影响。方法采用β淀粉样蛋白25—35（Aβ25—35）侧脑室注射制作AD大鼠模型。采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,免疫荧光检测大鼠海马5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）阳性细胞表达,免疫组化检测海马增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞表达,并对海马齿状回下颗粒层、海马门、分子层分别进行BrdU、PCNA阳性细胞计数。结果与模型组比较,健康对照组、假手术组和FZS治疗组大鼠水迷宫实验中的平均逃避潜伏期缩短（P〈0．05）,齿状回颗粒细胞下层BrdU、PCNA阳性细胞数量明显增加（P〈0．05）,但后三组之间比较差异无统计学意义。结论FZS可促进AD模型大鼠海马齿状回内源性神经干细胞增殖。     

雄性APP/PS1/Tau三转基因小鼠阿尔茨海默病样病理的年龄相关性变化

目的 用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)方法观察2～15月龄雄性APP/PS1/Tau三转基因小鼠(Triple transgenic mice,3xTg),每两月龄,海马及感觉皮质中阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)相关病理的年龄相关性变化。方法 雄性3xTg-AD三转基因小鼠按2、4、6、8、10、12、15月龄分为7组,每组各3只,作为实验组;雄性C5B7L/6J小鼠(Wild Type,WT)按2、4、6、8、10、12、15月龄分为7组,每组各3只,作为对照组。用免疫组化法方法检测各个小鼠脑组织海马及感觉皮质与阿尔茨海默病密切相关的病理年龄相关性变化:Aβ、磷酸化tau、人tau P301L突变体的转基因产物、星形胶质细胞增生、神经元标记物。结果 与C5B7L/6J小鼠相比,APP/PS1/Tau三转基因小鼠Aβ细胞(6E10)、p-tau(AT8,Ser202/Thr205)、tau(HT7)星形胶质细胞(GFAP)免疫染色强度显著增强,P 0. 0001; 2～15月龄雄性APP/PS1/Tau三转基因小鼠海马及感觉皮质均未出现明显淀粉样斑块沉积,海马CA1区Aβ细胞(6E10) 8月龄开始染色程度逐渐增强,感觉皮质区染色程度保持不变,P 0. 05; CA1区tau(HT7) 2～6月龄染色程度较弱,6～15月龄染色程度保持稳定,感觉皮质区2～4月龄染色程度升高,4～15月龄染色程度保持稳定,P 0. 05; CA1区p-tau(AT8,Ser202/Thr205) 6月龄磷酸化程度开始升高,感觉皮质区12月龄磷酸化程度开始升高,P 0. 05; CA1区及感觉皮质区星形胶质细胞(GFAP) 2～15月龄反应性逐渐增强; CA1区成熟神经元标记物(NEUN)数量2～6月龄逐渐减少,6～15月龄稳定,CA3区NEUN数量2～15月龄逐渐降低,P 0. 05。结论 3xTg-AD小鼠在年龄和表型的发展之间显示出明显的相互作用,这使其成为研究衰老在疾病发病机制中作用的重要工具。     

经元标记物改变等[3]。目前,越来越多种类的转基因鼠模型在AD的研究中做出贡献[4,5],其中APP/PS1/

正模型之一。3xTg-AD小鼠同时表达3种罕见的家族突变基因:人PS1M146V、人APPswe和人tau P301L,在评估共同进化的淀粉样蛋白和tau病理学方面具有重要参考价值[6]。本实验主要探究2～15月龄雄性3xTg-AD小鼠每两个月脑组织AD相关性病理形态学变化。1材料与方法1. 1实验动物我们采用3xTg-AD小鼠共21只,C5B7L/6J(野生型,WT)共21只,均为雄性,体重25～30 g,SPF级; 3xTg-AD小鼠及C57BL/6J小鼠均由美国Jackson Laboratory公司提供。该实验经中国     

学习记忆能力下降大鼠神经细胞增殖的研究

目的　观察学习记忆能力减退老年大鼠海马齿状回神经细胞的增殖。方法　Morris水迷宫筛选出学习记忆能力减退大鼠 (痴呆组 )与正常大鼠 (对照组 )。BrdU标记海马齿状回增殖细胞。TUNEL法标记DNA片段原位检测凋亡细胞。计数海马颗粒细胞层与海马门的BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果　痴呆组与对照组大鼠相比 ,海马颗粒细胞层BrdU阳性细胞显著增加 (P <0 0 1) ,而凋亡细胞数无显著差异 (P >0 0 5 )。海马门BrdU阳性细胞数及凋亡细胞数均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　学习记忆能力减退的老年大鼠海马齿状回神经细胞增殖能力减低。     

血管性认知障碍小鼠脑内少突胶质细胞再生分化障碍特点研究

目的 观察血管性认知障碍小鼠模型中,缺血性炎性损伤对室管膜下区及海马齿状回少突胶质细胞 再生分化的影响,为血管性认知障碍的缺血性炎症机制提出新的损伤途径。 方法 成年雄性CD1小鼠随机分为模型组和假手术组,每组24只,模型组采用双侧颈动脉反复缺 血再灌注法制备血管性认知障碍小鼠模型。造模后4～6 d连续腹腔注射5 -溴脱氧尿嘧啶核苷 （bromodeoxyuridine,BrdU）（150 mg/kg）标记新生细胞,分别于术后14 d和28 d每组随机取一半小鼠脑 组织进行脑切片免疫组化、免疫荧光双标共聚焦检测,标记脑组织室管膜下区和海马区的少突胶质 细胞、星形胶质细胞及神经元,观察新生少突胶质细胞增殖及分化情况,并观察星形胶质细胞的增 生活化情况。 结果 造模后14 d和28 d室管膜下区新生细胞（BrdU阳性细胞）在模型组较假手术组明显增加（P均 ＜0.001),造模28 d模型组新生神经元（BrdU/NeuN阳性细胞）较假手术组显著增加（P＜0.001)。与假 手术组相比较,术后28 d模型组海马齿状回少突胶质细胞祖细胞显著增多（P＜0.001）;少突胶质细 胞前体细胞显著减少（P =0.006）。造模后28 d模型组海马齿状回新生星形胶质细胞（BrdU/GFAP阳性 细胞）较假手术组显著增加（P =0.015）。 结论 血管性认知障碍小鼠内源性新生细胞增殖区室管膜下区与海马齿状回区均存在新生细胞反 应性增生的情况。新生细胞区分化的主要细胞为星形胶质细胞,而少突胶质细胞分化障碍,可能是血 管性认知障碍患者影像学常见皮层下白质病变的重要原因。     

卡马西平对匹罗卡品诱导成年癫间疒大鼠海马齿状回神经前体细胞增殖的影响

目的研究卡马西平对成年癫大鼠海马齿状回内源性神经前体细胞增殖的影响。方法采用氯化锂和匹罗卡品联合诱导大鼠癫模型,将癫大鼠随机分为癫对照组和癫卡马西平组,正常大鼠随机分为正常对照组和正常卡马西平组。癫对照组和正常对照组给以蒸馏水灌胃,同时癫卡马西平组和正常卡马西平组给予卡马西平灌胃。于灌胃后第6d腹腔注射5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记海马齿状回的内源性神经前体细胞的增殖情况;用免疫组化方法观察各组大鼠在注射BrdU后第1d、第7d齿状回BrdU阳性细胞数量的表达。结果①注射BrdU后第1d,癫对照组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组明显增加(P<0.01),癫卡马西平组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较癫对照组减少(P<0.05);②注射BrdU后第7d,癫对照组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组明显增加(P<0.01),癫卡马西平组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较癫对照组明显减少(P<0.05)。结论卡马西平抑制癫大鼠海马齿状回内源性神经前体细胞增殖。     

APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病模型小鼠早期认知功能研究

目的观察APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病(3×Tg-AD)模型小鼠空间学习和记忆能力、海马CA1区突触可塑性和可溶性β-淀粉样蛋白42(Aβ42)表达变化,探讨3×Tg-AD小鼠早期认知功能障碍发生机制。方法 4月龄雄性3×Tg-AD小鼠和相匹配的129/C57BL/6杂交野生型小鼠各10只,旷场实验和Morris水迷宫实验观察小鼠在新环境中的焦虑程度和自主活动能力,以及空间学习和记忆能力;记录海马CA1区场兴奋性突触后电位和高频强直电刺激诱导的长时程增强;酶联免疫吸附试验检测海马组织可溶性Aβ42表达变化。结果与对照组相比,3×Tg-AD组小鼠旷场实验结果无明显改变(均P0.05),定位航行实验第3~5天逃避潜伏期延长(P=0.001,0.003,0.001),空间探索实验穿越平台区时间百分比降低(P=0.000),海马CA1区高频强直电刺激诱导的长时程增强下降(均P0.01),海马组织可溶性Aβ42表达水平升高(P=0.000)。结论 4月龄3×Tg-AD小鼠海马组织可溶性Aβ42表达上调,导致海马CA1区突触可塑性受损,出现空间学习和记忆能力下降。