缝隙连接Cx43在右美托咪定预防缺血-再灌注离体兔心复灌性心律失常中的作用

目的观察右美托咪定对离体家兔心缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤后心肌复极不均一性及Cx43表达的影响,探讨Cx43在右美托咪定抑制IR损伤心肌复极不均一性中的作用。方法健康成年家兔18只,体重(2.0±0.5)kg,成功制备Langendorff离体心脏灌注模型,KH液平衡灌流15min后随机均分为三组,每组6只。空白对照组(C组):持续平衡灌注37℃K-H液150min;IR组:K-H液继续灌流15 min后停灌,注射4℃Thomas液10 ml/kg使心脏停搏60min,心脏周围用4℃Thomas液保护,30min半量复灌4℃Thomas液5ml/kg,60min时复灌K-H液;右美托咪定组(DEX组):于K-H液及Thomas液中加入右美托咪定25ng/ml,余同IR组。记录平衡灌流15min(T_0)、继续灌流15min(平衡30min,T_1)、复灌30min(平衡120min,T_2)、复灌60min(平衡150min,T_3)的HR及三层心肌(内膜、中膜、外膜)90%单相动作电位时程(MAPD90)并以此计算跨室壁复极离散度(transmural dispersion of repolarization,TDR),观察心脏复灌时心律失常发生情况、复跳时间,T_3时取左心室组织采用Western blot法、免疫组化法检测左室心肌组织Cx43的表达及分布。结果 DEX组复跳时间明显短于IR组(P0.05);与T_0时比较,T_2、T_3时IR组、DEX组HR明显减慢,TDR明显增大(P0.05);与IR组比较,T_1~T_3时DEX组HR明显减慢,T_2、T_3时DEX组TDR明显减小(P0.05)。与C组比较,IR组、DEX组Cx43表达明显减少(P0.05)且分布不均,且DEX组明显多于IR组(P0.05)。结论右美托咪定抑制IR损伤后心肌复极不均一性,从而起到稳定IR损伤心肌心电传导,降低复灌性心律失常发生率的作用,其机制可能与右美托咪定抑制缝隙连接失偶联、抑制Cx43表达减少及分布紊乱有关。     

七氟醚对大鼠离体心脏全心缺血-再灌注心律失常及电生理的影响

目的观察七氟醚对大鼠离体心脏全心缺血-再灌注心律失常及电生理的影响。方法健康成年雄性SD大鼠,体重280～320g,取成功制备Langendorff心脏灌注模型24个,K-H液灌注15min后,随机分为三组,每组8只。对照组(C组):K-H液继续灌注105min;全心缺血-再灌注组(IR组):K-H液继续灌注15min后,注射Thomas液(4℃,20ml/kg)使心脏停跳60min,在心脏周围用低温(4℃)Thomas液保护,30min时半量复灌Thomas液(4℃,10ml/kg),停灌60min时再灌注K-H液30min;七氟醚组(Sev组):K-H液含饱和1.0MAC的七氟醚,余同IR组。记录再灌注期间心律失常发生情况、心脏复跳时间及心律失常持续时间;记录平衡灌注15min(T_0)、继续灌注15min(T_1)、再灌注15min/继续灌注105min(T_2)、再灌注30min/继续灌注120min(T_3)的HR及左心室前壁外膜层和内膜层心肌单相动作电位;计算单相动作电位复极50%及90%的时程(MAPD_(50)和MAPD_(90))、跨室壁复极离散度(TDR)。结果与T_0时比较,T_2、T_3时IR组HR明显减慢(P0.05);与T_1时比较,T_2、T_3时IR组HR均明显减慢(P0.05);与IR组比较,T_2、T_3时Sev组HR明显增快(P0.05);与IR组比较,T_2、T_3时Sev组MAPD_(90)明显缩短,TDR明显减小(P0.05);与IR组比较,Sev组心脏复跳时间和心律失常持续时间均明显缩短(P0.05)。结论七氟醚可缩短全心缺血-再灌注心脏MAPD_(90)、减小TDR,从而降低再灌注心律失常的发生风险、缩短心脏复跳和心律失常持续时间。     

不同浓度右美托咪定对离体兔心室肌电生理学特性的影响

目的观察右美托咪定对离体兔心室肌单相动作电位的影响。方法成年家兔18只,体重2.0~2.5kg,制备Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15min后随机分为三组:正常对照组(C组)继续灌注37℃K-H液60min;低浓度右美托咪定组(L组)灌注含25ng/ml右美托咪定的K-H液60min;高浓度右美托咪定组(H组)灌注含50ng/ml右美托咪定的K-H液60min,每组6只。观察记录平衡灌注15min(T0)、继续灌注15min(T1)、30min(T2)、60min(T3)时的HR、左心室前壁三层心肌单相动作电位,计算单相动作电位复极50%和90%的时程(MAPD50和MAPD90)。记录早期后除极、延迟后除极及心律失常的发生情况。结果与T0时比较,T1~T3时H组HR明显减慢(P0.01),MAPD50、MAPD90明显延长(P0.05)。C组和L组HR明显快于H组,MAPD50、MAPD90明显短于H组(P0.05)。结论 50ng/ml右美托咪定可延长MAPD50和MAPD90,其对心肌的电生理特性影响可能是减慢心率的机制。     

不同浓度七氟醚对缺血-再灌注心肌单相动作电位影响

目的观察不同浓度七氟醚对大鼠离体心脏缺血-再灌注时心肌单相动作电位(MAP)的影响。方法健康成年雄性SD大鼠32只,体重280～320g,成功制备langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15min后,随机分为四组,每组8只:缺血-再灌注组(IR组):K-H液继续灌注15min后停止,注射Thomas液(4℃,20 ml/kg)使心脏停搏60 min,心脏周围用低温(4℃)Thomas液保护,30min时半量复灌Thomas液(4℃,10ml/kg),60min时再灌注K-H液30min;0.5 MAC七氟醚组(Sev0.5组):K-H液为含饱和0.5 MAC七氟醚液体,余同IR组;1.0 MAC七氟醚组(Sev1.0组):K-H液为含饱和1.0 MAC七氟醚液体,余同IR组;2.0 MAC七氟醚组(Sev2.0组):K-H液为含饱和2.0MAC七氟醚液体,余同IR组。记录平衡灌注15min(T_0)、继续灌注15min(T_1)、再灌注15min(T_2)、再灌注30min(T_3)的HR及左心室前壁外膜层、中层和内膜层心肌MAP,计算MAP复极50%及90%的时程(MAPD_(50)、MAPD_(90))。并记录心律失常发生情况。结果与T_0和T_1时比较,T_2、T_3时IR组、Sev1.0组、Sev2.0组HR明显减慢(P0.05);与IR组比较,T_2、T_3时Sev0.5组、Sev1.0组HR明显增快,Sev2.0组HR明显减慢(P0.05)。与IR组比较,T_3时Sev0.5组MAPD_(50),Sev0.5组、Sev1.0组、Sev2.0组MAPD_(90)明显缩短(P0.05)。心脏复跳时IR组有6例,Sev0.5组有1例,Sev1.0组有2例,Sev2.0组有1例发生心律失常,与IR组比较,Sev0.5组、Sev1.0组和Sev2.0组心律失常发生率明显降低(P0.05)。结论不同浓度七氟醚均可缩短缺血-再灌注心肌单相动作电位MAPD_(90),且这一作用在0.5~2.0 MAC的七氟醚浓度范围内无剂量依赖性,这可能是其减少缺血-再灌注心律失常发生风险的机制。     

ZP123可预防右美托咪定延长心肌复极时程所致的负性变频效应

目的探讨缝隙连接改造剂ZP123对右美托咪定诱发鼠离体心脏复极时程延长所致的负性变频效应。方法健康成年SD大鼠18只,雌雄不拘,体重(300±30)g,制备Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15min后,随机分为三组,每组6只:空白对照组(C组)继续灌注37℃K-H液30min;右美托咪定组(D组)灌注含50ng/ml右美托咪定的K-H液30min,右美托咪定+ZP123组(ZD组)灌注含50ng/ml右美托咪定+80nmol/L ZP123的K-H液30 min。于平衡灌注15 min(T_o)、继续灌注15 min(T_1)、30 min(T_2)时记录HR和左心室心肌单相动作电位(MAP),计算MAP复极50%、90%的时程(MAPD50、MAPD90)、单相动电位振幅(MAPA)和最大去极化速度(Vmax)。结果与T_0时比较,T_1、T_2时D组HR明显减慢(P0.05),T_1、T_2时D组HR明显慢于C组和ZD组(P0.05)。与T_0时比较,T_1、T_2时D组心肌MAPD50、MAPD90明显延长(P0.05);T_1、T_2时D组心肌MAPD50、MAPD90明显长于C组和ZD组(P0.05)。三组心肌内外两层膜MAPA和Vmax组间组内差异均无统计学意义。结论缝隙连接改造剂ZP123通过缩短心肌单相动作电位复极的时程从而拮抗右美托咪定诱发的鼠离体心脏的负性变频效应。     

低温缺血-再灌注对心房肌电稳定性的影响

目的观察低温缺血-再灌注对离体大鼠心房肌电稳定性的影响,以此探讨电稳定性在低温缺血-再灌注促进房性心律失常中的作用。方法将制备成功的Langendorff离体大鼠心脏灌注模型,随机分为对照组(C组)和缺血-再灌注组(IR组),每组8例。C组K-H液(37℃)平衡灌注120 min。IR组K-H液(37℃)平衡灌注30 min后停止,注射Thomas液(4℃,20 ml/kg)使心脏停搏60 min,心脏周围用低温(4℃)Thomas液保护,停搏30 min时半量复灌Thomas液(4℃,10 ml/kg),停搏60 min时再次灌注K-H液(37℃)30 min。记录平衡灌注30 min(T_0)、C组平衡灌注105 min/IR组再灌注15 min(T_1)和C组平衡灌注120 min/IR组再灌注30 min(T_2)时右心房单相动作电位复极90%时程(MAPD_(90))。记录T_2时右心房有效不应期(ERP)、ERP与MAPD_(90)比值(ERP/MAPD_(90))、诱发房颤的最大起搏周长(AF-PCL _(max))和房颤诱发率。记录C组平衡灌注90 min/IR组再灌注即刻后房性早搏、房性心动过速、心房颤动等房性心律失常发生情况。结果与T_0时比较,T_1—T_2时IR组MAPD_(90)明显延长(P0.05)。T_1—T_2时IR组MAPD_(90)明显长于C组(P0.05)。T_2时IR组ERP、AF-PCL_(max)明显长于C组(P0.05),ERP/MAPD_(90)明显小于C组(P0.05),房颤诱发率明显高于C组(P0.05)。在C组平衡灌注90 min/IR组再灌注即刻后,IR组房性心律失常发生率明显高于C组(P0.05)。结论低温缺血-再灌注通过增加心房肌单相动作电位复极90%时程、有效不应期和诱发房颤的最大起搏周长,降低有效不应期与单相动作电位复极90%时程的比值,使心房肌电稳定性降低,从而增加房性心律失常的发生风险。     

七氟醚对低温全心缺血-再灌注心律失常心肌组织Kir2.1蛋白表达的影响

目的观察七氟醚对低温全心缺血-再灌注心律失常心肌组织Kir2.1蛋白表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠,体重280～320 g,制备Langendorff离体心脏灌注模型24只,K-H液平衡灌流15 min后,随机分为三组:对照组(C组)、低温全心缺血-再灌注组(IR组)和七氟醚组(Sev组),每组8只。C组持续平衡灌流37℃K-H液105 min。IR组K-H液继续灌流15 min后,采用4℃Thomas液20 ml/kg使心脏停跳60 min,心脏周围用4℃的Thomas液进行保护,在心脏停跳30 min时追加注射4℃Thomas液10 ml/kg,在心脏停跳60 min时再灌注K-H液30 min。Sev组灌注液为饱含1 MAC七氟醚的K-H液,其余同IR组。观察并记录再灌注期间心律失常发生情况、心脏复跳时间和心律失常持续时间;记录平衡灌注15 min(T_0)、继续灌注15 min/平衡30 min(T_1)、再灌注15 min/平衡105 min(T_2)、再灌注30 min/平衡120 min(T_3)的左心室前壁外膜层和内膜层心肌单相动作电位(MAP),计算50%和90%单相动作电位时程(MAPD_(50)、MAPD_(90));Western blot法和免疫组织化学法检测心肌组织Kir2.1蛋白相对含量和分布。结果灌注心脏复跳时IR组有6例发生心律失常,2 min内有1例恢复正常节律;Sev组有2例发生心律失常,2 min内有均恢复正常节律;IR组心脏复跳时间、心律失常持续时间明显长于Sev组(P0.05);与T_0和T_1时比较,T_2—T_3时IR组外膜层和内膜层MAPD_(90)明显延长(P0.05);Sev组外膜层MAPD_(90)明显延长(P0.05)。T_2—T_3时Sev组和IR组外膜层和内膜层MAPD_(90)明显长于C组(P0.05),Sev组内膜层和外膜层MAPD_(90)明显短于IR组(P0.05)。IR组Kir2.1蛋白相对含量明显低于C组(P0.05),Sev组Kir2.1蛋白相对含量明显高于IR组(P0.05);C组Kir2.1蛋白呈强阳性表达,且具有规则的分布;IR组Kir2.1蛋白的表达点状分散分布且无规律;Sev组Kir2.1蛋白呈强阳性表达,且具有规则的分布。结论七氟醚降低低温全心缺血-再灌注心律失常的发生,其分子机制可能与Kir2.1蛋白的表达与分布改善有关。     

七氟醚对低温全心缺血-再灌注心脏电传导及Cx43 Ser368磷酸化的影响

目的 观察七氟醚对低温全心缺血-再灌注心室肌电传导及Cx43 Ser368磷酸化的影响。
方法 制备成功的离体灌注工作心脏24只,随机分为三组：对照组（C组）、低温全心缺血-再灌注组（IR组）和1.0 MAC七氟醚处理组（Sev组）,每组8只。C组：37 ℃ K-H液平衡灌注15 min后继续灌注37 ℃ K-H液105 min;IR组：37 ℃ K-H液平衡灌注15 min后继续灌注37 ℃ K-H液15 min,注射Thomas液（4 ℃,20 ml/kg）使心脏停搏60 min,4 ℃ K-H液保护心脏,停搏30 min时半量复灌Thomas液（4 ℃,10 ml/kg）,60 min时使用37 ℃ K-H液再灌注30 min;Sev组：37 ℃ K-H液平衡灌注15 min后继续灌注含饱和1.0 MAC七氟醚的37 ℃ K-H液15 min,注射Thomas液（4 ℃,20 ml/kg）使心脏停搏60 min,4 ℃ K-H液保护心脏,停搏30 min时半量复灌Thomas液（4 ℃,10 ml/kg）,60 min时使用含饱和1.0 MAC七氟醚的37 ℃ K-H液再灌注30 min。于再灌注即刻至灌注结束,记录离体心脏复跳时间（再灌注即刻至心脏首次跳动所需的时间）,室性心律失常（室性早搏、室性心动过速、室性颤动）发生情况和持续时间。采用心脏刺激仪行程控刺激,测定并记录有效不应期（ERP）、传导速度(CV）。采用免疫印迹法检测心室肌组织Cx43和Cx43 Ser368蛋白相对含量。
结果 与C组比较,IR组和Sev组ERP明显延长,CV明显减慢（P＜0.05）;IR组Cx43及Cx43 Ser368蛋白相对含量明显降低（P＜0.05）。与IR组比较,Sev组心脏复跳时间明显缩短,心律失常发生率明显降低,心律失常持续时间明显缩短,ERP明显缩短,CV明显增快,Cx43及Cx43 Ser368蛋白相对含量明显升高（P＜0.05）。
结论 七氟醚可以上调低温全心缺血-再灌注心室肌组织Cx43和Cx43 Ser368的表达,促使心室肌电传导增快、有效不应期缩短,降低再灌注心律失常的发生。     

低温缺血再灌注心律失常大鼠心室肌电传导的变化

目的评价低温缺血再灌注心律失常大鼠心室肌电传导的变化。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠,2～3月龄,体重200～300 g,取成功建立Langendorff灌注模型的离体心脏16个,采用随机数字表法分为2组(n=8),正常对照组(C组):平衡灌注37 ℃ K-H液120 min;低温缺血再灌注组(I/R组):平衡灌注37 ℃ K-H液30 min后,注射4 ℃ Thomas液使心脏停搏后停灌K-H液,心脏周围用低温(4 ℃)Thomas液保护,30 min时半量复灌Thomas液(4 ℃),停灌60 min时再灌注K-H液30 min。将I/R组分为高危亚组(IR-H亚组)和低危亚组(IR-L亚组)。再灌注末通过程控电刺激法测定房室传导2∶1阻滞点(2∶1B)及心室电传导速度(CV)。记录心脏复跳时间和心律失常发生情况。结果与C组比较,IR-L亚组和IR-H亚组CV减慢,2∶1B降低(P<0.05);与IR-L亚组比较,IR-H亚组心脏复跳时间延长,复跳后室颤发生率及心律失常评分升高,CV减慢,2∶1B降低(P<0.05)。结论低温缺血再灌注心律失常大鼠心室肌电传导速度减慢,...     

七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注(IR)时心肌细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠48只,随机分4组(n=12),制备离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注30 min后,C组灌注K-H液120 min;IR组缺血30 min,K-H液再灌注90 min;缺血后处理组(IP组)缺血30 min后行4个循环复灌20 s/缺血20 s,再灌注K-H液;七氟醚后处理组(SP组)缺血30 min后灌注含七氟醚的K-H液5 min,K-H液冲洗10 min,再灌注K-H液.IP组和SP组再灌注总时间90 min.灌注期间测定心功能,灌注结束时取心脏测定心梗面积、Bcl-2、细胞色素C和Caspase-3蛋白表达水平,计算心肌细胞凋亡指数(AI).结果 与C组比较,其余各组左心室最大上升或下降速率(±dp/dt)、左心室发展压(LVDP)、HR降低,左心室舒张末压(LVEDP)和AI升高,Bel-2、细胞色素C和Caspase-3蛋白表达上调(P<0.05);与IR组比较,IP组和SP组±dp/dt、LVDP升高,LVEDP和AI降低,心梗面积减小,Bcl-2表达上调,细胞色素C和Caspase-3蛋白表达下调(P<0.05).结论 七氟醚后处理可减少大鼠离体心脏IR时心肌细胞凋亡,其机制与其下调细胞色素C和Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2表达有关.     

低温联合七氟醚对兔心肌单相动作电位及跨室壁复极离散度的影响

目的 评价低温联合七氟醚对兔心室肌单相动作电位和跨室壁复极离散度的影响.方法 成年家兔,体重1.5～2.0 kg,雌雄不拘,成功制备Langendorff 离体心脏灌注模型的48个心脏,随机分为6组(n=8),用K-H液平衡灌注后,正常对照组(C组)继续灌注37℃ K-H液30 min;低浓度七氟醚组(S1组)、高浓度七氟醚组(S2组)分别灌注2.4%及4.8%七氟醚饱和的37℃ K-H液30 min;低温组(H组)灌注30℃ K-H液30 min;低温联合低浓度七氟醚组(HS1组)和低温联合高浓度七氟醚组(HS2组)分别灌注2.4%及4.8%七氟醚饱和的30℃K-H液30 min.灌注期间记录左心室前壁外膜层、中层和内膜层心肌单相动作电位.计算单相动作电位复极90%的时程(MAPD90)和跨室壁复极离散度(TDR).记录早期后除极、延迟后除极及心律失常的发生情况.结果 与C组比较,H组三层心肌MAPD90均明显延长,心律失常的发生率升高(P＜0.05);各组间TDR比较差异无统计学意义(P＞0.05).HS1组和HS2组心律失常的发生率低于H组(P＜0.05).七氟醚与低温无交互作用(P＞0.05),仅表现为低温可延长MAPD90(P＜0.05).结论 低温联合七氟醚对兔心肌单相动作电位及跨室壁复极离散度无明显影响,七氟醚可抑制低温诱发心肌复极时间延长,从而降低了低温诱发心律失常的发生机率.     

PI3K、ERK1/2、mito-K_(ATP)通道及mPTP在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、线粒体ATP敏感性钾(mito-K_(ATP))通道及线粒体膜通透性转换孔(mPTP)在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性清洁级SD大鼠,周龄7～10周,体重250～300 g,采用Langendorff法建立大鼠离体心脏灌注模型,取模型制备成功的心脏180个,随机分为12组(n=15),对照组(C组):持续灌注90 min;缺血再灌注组(IR组):停止灌注K-H液30 min,再灌注60 min;IR+LY组、IR+PD组、IR+ATR组、IR+5-HD组和IR+DMSO组:于再灌注即刻分别灌注PI3K特异性抑制剂LY294002(LV)15μmol/L、ERK1/2特异性抑制剂PD98059(PD)20 μmol/L、mPTP开放剂苍术甙(ATR)20 μmol/L、mito-K_(ATP)通道抑制剂5-羟癸酸(5-HD)100 μmol/L和溶剂二甲基亚砜(DMSO)0.02%15 min;七氟醚后处理组(S组):于再灌注即刻灌注经3%七氟醚饱和的K-H液15 min,随后更换正常K-H液再灌注45 min;S+LY组、S+PD组、S+ATR组和S+5-HD组:于再灌注即刻灌注经七氟醚饱和的K-H液同时分别灌注LY 15 μmol/L、PD 20 μmol/L、ATR 20 μmol/L、5-HD 100 μmol/L 15 min,随后更换为正常K-H液再灌注45 min.于平衡灌注20 min、停灌前即刻、再灌注15、30和60 min(T_(0～4))时测定冠状动脉流量(CF),记录心功能指标;C组、IR组和s组分别于T_0和T_4时收集冠状动脉流出液测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和肌钙蛋白I(cTnI)浓度;于T_4时取左心室,测定心肌梗死面积,C组、IR组、IR+ATR组、IR+5.HD组、IR+DMSO组、S组、S+ATR组和S+5-HD组检测细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI),C组、IR组、IR+LY组、IR+PD组、IR+DMSO组、S组、S+LY组和S+PD组测定心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD~+)含量.结果 与C组比较,其余各组再灌注时心功能降低,CF降低,心肌梗死面积增大,IR组、IR+ATR组、IR+5-HD组、IR+DMSO组、S组、S+ATR组和S+5-HD组AI升高,IR组、IR+LY组、IR+PD组、IR+DMSO组、S组、S+LY组和S+PD组NAD~+含量降低,IR组和S组LDH、CK-MB活性和cTnI浓度升高(P<0.05);与IR组比较,S组再灌注时心功能提高,CF升高,心肌梗死面积减小,AI降低,NAD~+含量升高,LDH、CK-MB活性和cTnI浓度降低(P<0.05),其余组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 七氟醚后处理可能通过激活PI3K及ERK1/2、促进mito-K_(ATP)通道开放、抑制mPTP开放,从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.     

右美托咪定联合硝普钠控制性降压在腔内隔绝术中的应用

目的探讨右美托咪定联合硝普钠控制性降压在腔内隔绝术中应用的安全性和有效性。方法选择诊断为DebakeyⅢ型夹层动脉瘤拟行腔内隔绝术的患者40例,男32例,女8例,年龄27~79岁,ASAⅡ或Ⅲ级,随机分为硝普钠组(S组)和右美托咪定联合硝普钠组(SD组),每组20例。SD组全麻诱导前给予右美托咪定1μg/kg,15min内泵注完毕;S组给予等量的生理盐水,两组均在切皮时泵注硝普钠实施控制性降压。记录两组患者入手术室时(T0)、泵注硝普钠后5min(T1)、10min(T2)及停止泵注硝普钠后5 min(T3)、10 min(T4)的SBP、HR;记录达到目标血压(70~90mm Hg)所用的时间、硝普钠的平均用量及手术麻醉过程中不良反应的发生情况。结果与T0时比较,T1~T3时S组、T1~T4时SD组的SBP明显下降,T3时S组、T1~T4时SD组的HR明显减慢(P0.05)。T3、T4时SD组的SBP明显低于S组,T1~T4时的HR明显慢于S组(P0.05)。SD组达到目标血压所用的时间明显短于S组(P0.05),硝普钠的平均用量明显少于S组(P0.05);SD组心动过速和术后躁动的发生率明显低于S组(P0.05)。结论右美托咪定联合硝普钠用于腔内隔绝术中控制性降压更平稳快速、安全有效。     

右美托咪定对大鼠离体肺缺血-再灌注损伤时RIP K3/MLKL介导程序性坏死的影响

目的评价右美托咪定对大鼠离体肺缺血-再灌注损伤(LIRI)时受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)/混合系列蛋白酶样结构域(MLKL)介导的肺组织细胞程序性坏死的影响。方法成年雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法随机分成三组(n=24):缺血-再灌注损伤组(IR组)、右美托咪定组(DEX组)和对照组(C组)。IR组采用IL-2型离体肺灌流系统建立大鼠离体LIRI模型; DEX组在复灌开始时于灌流液中加入右美托咪定10 nmol/L;C组只通气和灌流。测定大鼠肺组织湿/干重比(W/D),光镜下观察肺组织病理学并测定肺泡损伤率(IAR)。测定灌流液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。Western blot法分别检测肺组织中RIPK3和MLKL蛋白含量。结果与C组比较,IR组和DEX组肺组织W/D、IAR和灌流液中MDA含量均明显升高(P0.05),而灌流液中SOD活性均明显降低(P0.05)。与IR组比较,DEX组肺组织W/D、IAR和灌流液中MDA含量均明显降低(P0.05),而灌流液中SOD活性明显升高(P0.05)。光镜显示IR组肺组织形态学结构发生明显损伤,而DEX组则明显减轻。与C组比较,IR组和DEX组肺组织RIPK3和MLKL蛋白含量均明显升高(P0.05);与IR组比较,DEX组肺组织RIPK3和MLKL蛋白含量均明显降低(P0.05)。结论右美托咪定可通过抑制RIPK3/MLKL介导的肺组织细胞程序性坏死来减轻大鼠离体肺缺血-再灌注损伤。     

心肌缺血/再灌注后多巴酚丁胺最佳应用时间探讨

目的 制作大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)模型,比较再灌注后不同时间点给予多巴酚丁胺对心功能和心肌损伤的影响,以探索心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后给予多巴酚丁胺的最佳时间.方法 雄性SD大鼠36只,按完全随机法分为4组(每组9只),各组在Langendorff灌注装置上建立离体心脏I/RI模型.平衡灌注15 min,缺血30 min,再灌注60 min,于再灌注期采取不同处理措施.单纯I/R组(I/R组)再灌注期全程以克-亨氏(Kreb'sHenseleit,K-H)液灌注;多巴酚丁胺一组(D1组)再灌注5 min时给予多巴酚丁胺灌注30 min,其余时间以K-H液灌注;多巴酚丁胺二组(D2组)再灌注15 min时给予多巴酚丁胺灌注30 min,其余时间以K-H液灌注;多巴酚丁胺三组(D3组)再灌注25 min时给予多巴酚丁胺灌注30 min,其余时间以K-H液灌注.其中,多巴酚丁胺输注剂量均为10 μg· kg-1·min-1.记录各组平衡灌注末(T0),再灌注10 min(T1)、20min(T2)、30min(T3)、60 min(T4)时的血流动力学指标:HR、左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)、左室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)、左室内压上升/下降最大速率(the maximum rate of left ventricular pressure change,±dp/dtmax)及冠状动脉流量(coronary flow,CF).留取T0～T4各时点冠状动脉流出液,使用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和肌酸磷酸激酶(creatine kinase,CK)试剂盒测定冠状动脉流出液中LDH和CK的活性.2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法测定心肌梗死面积(myocardial infarct size,MIS).Western blot法检测肌浆网钙泵(sarcoendoplasmic reticulum Ca2+-ATPase,SERCA2a)和兰尼碱受体(ryanodine receptors,RyR2)蛋白表达量. 结果 D1组在给予多巴酚丁胺后,HR、LVEDP、LDH、CK、MIS均比I/R组高,差异有统计学意义(P＜0.05);D2组、D3组在给予多巴酚丁胺后,HR、CF、LVDP、±dp/dtmax均高于I/R组,差异有统计学意义(P＜0.05),而LVEDP、LDH、CK、MIS比较,差异无统计学意义(JP＞0.05).多巴酚丁胺各组SERCA2a蛋白表达量和I/R组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而RyR2蛋白表达量则高于I/R组(P＜0.05).D2组与D3组相比在给予多巴酚丁胺后上述指标比较,差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 大鼠心肌FR 15 min时应用多巴酚丁胺要优于其他时间点.在这一时间点用药可以及时而有效地提高大鼠HR,增加CF,改善心肌收缩功能,且不会加重心肌损伤.     

目标导向液体治疗对腹腔热灌注化疗患者机体氧供需平衡及组织灌注的影响

目的探讨目标导向液体治疗(goal-directed fluid therapy,GDFT)对腹膜癌行腹腔热灌注化疗术患者围术期机体氧供需平衡及组织灌注的影响。方法选择择期全麻下行腹膜癌热灌注化疗的患者80例,男61例,女19例,年龄30~60岁,ASAⅠ~Ⅲ级,随机分为常规液体治疗组(C组)和每搏变异度(SVV)为导向液体治疗组(S组),每组40例。术中应用FloTrac/Vigile系统连续监测血流动力学,记录入手术室后(T0)、气管插管后5 min(T_1)、腹腔热灌注化疗开始前(T_2),热灌注化疗30min(T_3)、热灌注化疗60min(即热灌注结束时,T_4)、热灌注化疗结束后30min(T_5)、手术结束时(T_6)的MAP、HR、CVP、CI、PaO_2、SaO_2、PvO_2、ScvO_2和Lac。根据公式计算氧供(DO2I)及氧耗指数(VO2I)。结果 S组患者输液总量,晶体液量及尿量明显低于C组患者,但胶体液量明显高于C组(P0.05)。与T_1时比较,T_3、T_4时两组患者MAP明显降低,T_4时C组HR明显增快、CI明显降低,T_3~T_6时C组和T_3~T_5时S组CVP明显升高(P0.05);T_3~T_5时S组患者MAP及CI明显高于C组,HR明显慢于C组(P0.05)。与T_1时比较,T_4、T_5时C组DO2I明显降低,T_3~T_6时C组VO_2I,O_2ER及Lac水平明显升高,ScvO_2明显降低(P0.05);与T_1时比较,T_4~T_6时S组VO2I明显升高(P0.05),T_3、T_4时ScvO_2明显降低(P0.05);T_4、T_5时S组DO_2I明显高于C组,T_3~T_6时S组VO2I,O_2ER及Lac水平明显低于C组,ScvO2明显高于C组(P0.05)。结论每搏变异度为导向液体治疗能够有效维持血流动力学稳定,增加机体氧供,降低氧耗,保证组织微循环灌注。     

不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年雌性SD大鼠,体重220～330 g,周龄7周,建立Langendorff离体心脏灌注模型,取模型制备成功的心脏30个,随机分为3组(n=10):缺血再灌注组(IR组)K-H液灌注15 min,停灌20 min,再灌注60 min;低浓度硝酸甘油组(LN组)采用含有2.5 μg/L硝酸甘油的K-H液灌注15 min,停灌20 min,再灌注60 min;高浓度硝酸甘油组(HN组)采用含有25μg/L硝酸甘油的K-H液灌注15 min,停灌20 min,再灌注60 min.于再灌注10、20、30、40、50、60 min时记录心率(HR)、冠状动脉流量(CF)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dt_(max)).于平衡灌注末、再灌注5、30和60 min时收集冠状动脉流出液1.5 ml,测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性;于再灌注60 min时取心脏,测定心肌梗死面积,计数心肌凋亡细胞.结果 与IR组比较,LN组HR、CF、LVDP,+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)升高,LVEDP、CK活性、LDH活性、心肌梗死面积和细胞凋亡率降低(P<0.05),HN组HR、CF、LVDP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)降低,LVEDP、CK活性、LDH活性、心肌梗死面积和细胞凋亡率升高(P<0.05).与LN组比较,HN组HR、CF、LVDP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)降低,LVEDP、CK活性、LDH活性、心肌梗死面积和细胞凋亡率升高(P<0.05).结论 低浓度硝酸甘油(2.5μg/L)可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,而高浓度硝酸甘油(25 μg/L)则可加重心脏缺血再灌注损伤.     

瑞芬太尼对兔离体心脏窦房结功能及心肌β1肾上腺素能受体表达的影响

目的观察瑞芬太尼对兔离体心脏窦房结功能及心肌β1肾上腺素能受体表达的影响。方法健康家兔24只,体重2.0～2.5kg,随机均分为三组:对照组(C组)、瑞芬太尼4、12ng/ml组(R1、R2组)。心脏取出后,连接于Langendoff离体灌注装置,并用K-H液(95%O2+5%CO2)进行恒温恒压逆行灌注。C组持续灌注正常K-H液40min;R1组、R2组灌注K-H液15min后,分别灌注含瑞芬太尼4、12ng/ml的K-H液25min。于灌注瑞芬太尼(正常K-H液,C组相应时点)前(T0)、灌注25min(T1)时记录HR、窦房传导时间(SACT)、窦房结功能恢复时间(SNRT)、校正SNRT(CS-NRT)。随后取右心房心肌组织,检测心肌β1肾上腺素能受体的表达水平。结果与T0时比较,T1时R1、R2组HR减慢(P<0.05),R2组SACT、SNRT和CSNRT明显延长(P<0.05),C组差异无统计学意义。R1和R2组心肌β1肾上腺素能受体表达均较C组明显降低(P<0.05),但R1和R2组间差异无统计学意义。结论瑞芬太尼可通过抑制窦房结功能和下调心肌β1肾上腺素能受体的表达减慢HR。     

心肌细胞缝隙连接蛋白43在线粒体敏感性钾通道介导七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注中的作用

目的 评价心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)在线粒体敏感性钾(mito-KATP)通道介导七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,采用Langendorff灌注模型进行离体心脏灌注.采用随机数字表法,将心脏随机分为5组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(S组)、七氟醚预处理+5-羟葵酸(5-HD)组(SH组)和5-HD组(H组).采用结扎左冠状动脉前降支(LAD) 30 min,恢复灌注120 min的方法制备心脏缺血再灌注模型.各组平衡灌注10 min;然后C组持续灌注,仅于LAD下穿线而不结扎;I/R组继续灌注30 min后结扎LAD;S组、S+H组和H组结扎LAD前30 min时分别用3％七氟醚预先饱和的K-H液、3％七氟醚预先饱和的K-H液+100 μmol/L 5-HD和K-H液+100 μmol/L 5-HD灌注15 min,然后用K-H液冲洗15 min.分别于给药前(T0)、给药结束即刻(T1)、缺血前即刻(T2)、缺血30 min(T3)和再灌注120 min(T4)时,记录HR、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室最大下降速率(- dp/dtmax).再灌注结束后,取左心室心肌组织,测定心肌梗死体积,采用免疫组化法测定心肌细胞Cx43表达,采用Western Blot法测定心肌细胞Cx43和磷酸化Cx43(p-Cx43)表达.结果 与C组比较,I/R组、S+H组和H组HR、LVSP、+dp/dtmax和- dp/dtmax降低,LVDP升高,心肌细胞Cx43和p-Cx43表达下调(P＜0.05).与I/R组比较,S组HR、LVSP、+dp/dtmax和- dp/dtmax升高,LVDP和心肌梗死体积降低,心肌细胞Cx43和p-Cx43表达上调(P＜0.05),S+H组和H组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 七氟醚预处理可能通过开放mito-KATP通道,促进心肌细胞Cx43磷酸化,减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.     

线粒体ATP敏感性钾通道在利多卡因预先给药减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价线粒体ATP敏感性钾通道在利多卡因预先给药减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 雌性成年Wistar大鼠,体重220～250 g,采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型.取模型制备成功的大鼠心脏24个,随机分为3组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、利多卡因组(L组)和利多卡因+格列苯脲组(LG组).K-H液平衡灌注10 min后,C组、L组和LG组分别灌注K-H液、含2.5 mg/L利多卡因的K-H液、含2.5 mg/L利多卡因+10μmol/L格列苯脲(线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂)的K-H液20 min,然后缺血30 min,再灌注60 min.分别于平衡灌注末(T0)、再灌注15 min(T1)、30 min(T2)、45 min(T3)和60 min(T4)时,记录HR、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax).于T0和T4时,收集冠状动脉流出液,测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性.于T4时取心尖周围心肌组织,测定Na+-K+-ATP酶和SOD的活性、MDA和Ca2+的含量.结果 与IR组比较,L组HR、LVDP、+dp/dtmax和-dp/dtmax升高,CK和LDH的活性降低,心肌Na+-K+-ATP酶和SOD的活性升高,Ca2+和MDA的含量降低(P＜0.05),LG组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05).与L组比较,LG组HR、LVDP、+dp/dtmax和-dp/dmax.降低,CK和LDH的活性升高,心肌Na+-K+-ATP酶和SOD的活性降低,Ca2+和MDA的含量升高(P＜0.05).结论 利多卡因预先给药减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤与促进线粒体ATP敏感性钾通道的开放有关.