乙型肝炎病毒致肝细胞癌发生机制研究进展

肝细胞癌（HCC）的发生与乙型肝炎病毒（HBV）感染密切相关。HBV感染所致的炎症反应、HBV X基因及其产物X蛋白、核心启动子突变、前S2区突变、剪接特异性蛋白等均可能参与HCC的发生发展。     

乙型肝炎病毒X蛋白与肝细胞内质网应激

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染与持续性肝损伤和原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)关系密切.我国是HBV感染的高流行区,给人群带来的健康威胁和损害是关注的热点问题.HBV感染是HCC的主要病原学因素之一,但其诱导肿瘤形成潜在的分子机制依然存在争议.其中HBV的X蛋白(HBV X protein,HBx)在HBV致肝细胞损伤、诱导肝细胞恶性转化、与环境因素暴露协同诱导肝致癌作用等过程中所起的作用都是研究的焦点.HBx作为多功能调控蛋白调控大量细胞信号转导通路,包括内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激反应,值得关注的是近几年已有文献报道HBx表达对肝细胞ER应激的诱导作用,但对调控的分子机制的认识还不明确.因此,本文综述了HBx影响肝细胞ER应激的研究进展,为HBV感染诱导肝损伤和疾病的分子机制提供线索.     

酵母双杂交技术筛选乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白基因

乙型肝炎病毒(HBV )的慢性感染是引发肝细胞癌的主要危险因子,HBV诱导细胞恶性化的发病机制还未完全弄清,已有许多研究提示HBVX蛋白(HBxAg)对多种增强子及启动子有反式激活作用[1,2 ] ,在HBV诱导肝细胞癌的发生中起着重要作用。筛选肝细胞中与HBxAg结合的蛋白对探讨HBV致癌的细胞效应机制提供了重要线索。材料与方法一、材料及主要试剂AH10 9酵母菌株、预转化的cDNA肝文库(Y187)、pGBKT7 BD克隆载体及酵母YPD培养基、SD培养基、X αgal购于Clontech公司。大肠埃希菌DH5α及HBVayw亚型基因全序列质粒载体pCP10为本室保存…     

乙型肝炎病毒前C区和BCP基因突变对肝脏疾病进程的影响

乙型肝炎病毒（HBV）是人类肝脏疾病的主要病原体之一,感染呈世界性流行,目前全球大约有4亿HBV慢性感染者,每年约有50万人死于HBV相关性肝硬化和肝细胞癌;我国属于HBV高流行区。研究发现,HBV比其他DNA病毒更易出现变异,在HBV感染者体内常形成以一个优势株为主的相关突变株病毒群。HBV基因突变给乙型肝炎的诊断、治疗及预后判断带来许多临床问题。现将HBV前C区和BCP突变对肝脏疾病进程度的影响综述如下。     

肝细胞癌肿瘤抑制基因p53过度表达及点突变的研究

目的检测重庆地区肝细胞癌 p53突变发生率,并进一步探讨 p53突变与肝细胞癌临床病理及相关危险因素的关系.方法应用一种敏感的 ARF 免疫组化和 PCR、银染 PCR-SSCP 方法检测本地区38例肝细胞癌(HCC)组织中肿瘤抑制基因p53的过度表达及点突变.结果 16例有P53蛋白过度表达(41.2%),7例有 p53基因249位密码子点突变(18.4%),2例249位密码子外第7外显子点突变.9例 p53基因有突变的肝癌中8例 P53蛋白阳性,两者符合率为88.9%.p53基因蛋白过度表达和点突变与 HCC 分化和转移有关.本组 HCC p53基因突变率与该地区黄曲霉素(AFB1)含量及乙型肝炎病毒(HBV)感染分布一致.结论该结果提示 p53基因突变与 AFB1和 HBV 等环境因素的协同作用有关,其中 AFB1主要与 p53基因249位密码子特异型突变有关,而 HBV 可能在散发型突变中发挥重要作用.     

肝细胞癌和肝硬变组织中突变型P53蛋白的表达及与HBV DNA的关系

应用LSAB免疫组化技术,检测肝内突变型P53蛋白的表达;用地高辛探针原位杂交检测HBV DNA。结果显示,31例肝细胞癌(HCC)及其癌旁组织中突变型P53蛋白阳性率分别为45％和48％,而11例肝硬变中检出4例(36.4％)。HBV DNA阳性率分别为46％和86％。癌旁组织中突变型P53蛋白表达与HBV DNA存在相关关系(P<0.05)。提示P53基因突变与HBV慢性感染有关,可能是诱发肝癌的机制之一。癌旁组织和肝硬变组织中也存在P53蛋白异常表达,表明肝癌形成早期就发生了53基因的突变。     

207例原发性肝细胞癌患者临床分析

目的分析乙型肝炎病毒感染合并原发性肝细胞癌的临床特点,为原发性肝细胞癌的诊治提供科学依据。方法选择我院2010年1月~2014年1月住院,符合原发性肝细胞癌诊断标准的398例患者中资料全面的207例病历资料进行回顾性分析,根据有无乙型肝炎病毒感染分为HBV标志物阳性组和HBV标志物阴性组。结果 398例原发性肝细胞癌患者中男302例,女96例,男女之比3.15∶1;患者年龄在34~88岁,以41~70岁为多见。207例原发性肝细胞癌患者中检出125例患者乙型肝炎病毒感染,检出率为60.4%;HBV标志物阳性组AST、AFP高于HBV标志物阴性组,而PLT及年龄均低于HBV标志物阴性组。结论乙型肝炎病毒感染是原发性肝细胞癌的主要原因之一,HBV标志物阳性患者较早发生原发性肝细胞癌,随诊中检测AST、AFP及PLT对较早发现肝细胞癌有重要的临床意义,因此,积极防治病毒性乙型肝炎十分必要。     

嗜酒对慢性乙型肝炎促发肝细胞癌危险因素的影响

我国慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是肝癌的首要致病因素,HBV负荷和活跃复制与肝细胞癌（HCC）的发生密切相关[1-2]。近年来嗜酒人群增多,慢性乙型肝炎伴发酒精性肝病的发病率亦呈上升趋势。本文探讨嗜酒、HBV病毒感染对促发肝细胞癌主要危险因素,综合分析其协同作用,为临床提供预防策略。     

肝细胞癌组织中HBV基因型的检测及分析

目的 了解肝细胞癌组织中HBV基因型分布状况及特点.方法 应用型特异性引物分型法和基因测序与生物信息学相结合的分型方法分析肝细胞癌组织中HBV基因型,并与HBV携带者血清中HBV基因型进行比较.结果 在63份肝细胞癌组织标本中,B、C、混合型B C和混合型B D基因型分别占20份(31.8%)、37份(58.7%)、4份(6.3%)和2份(3.2%).与HBV携带者血清相比,两者基因型构成比无显著性差异(P＞0.05).结论 中国南部地区的肝细胞癌组织中存在HBV基因型B、C、混合型B C和混合型B D,以C基因型为主,其次为B基因型.肝细胞癌组织中HBV基因型分布与当地HBV携带者基因型密切相关.     

乙型肝炎病毒增强子ⅡC1653T位点突变与宁夏地区肝细胞癌发生的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)增强子ⅡC1653T位点突变与肝细胞癌的关系。方法收集宁夏地区104例慢性乙肝患者和88例乙肝相关肝细胞癌患者的一般病历资料和血清,自血清抽提HBV DNA,采用巢式PCR扩增含有HBV增强子Ⅱ的目的基因片段(nt1606～2606)并进行基因测序,比较两者的一般资料和HBV增强子ⅡC1653T突变情况;采用多因素Logistic回归分析肝细胞癌发生的危险因素。结果 104例慢性乙肝患者中13例(12.50%)发生HBV增强子ⅡC1653T位点突变,而且13例患者有12例伴有肝硬化,在88例肝细胞癌患者中有31例(35.25%)发生该位点突变,两者比较有统计学意义(P<0.01);多因素Logistic回归分析提示,HBV增强子ⅡC1653T突变与肝细胞癌发生呈正相关(OR=4.686,P=0.001)。结论 HBV增强子ⅡC1653T位点突变是宁夏地区肝细胞癌发生的危险因素。     

乙型肝炎病毒X蛋白反式激活癌基因异常表达与肝细胞癌的研究现状

乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染是我国肝细胞肝癌（HCC）发生的主要原因之一。在HBV感染所致的肝癌中，乙型肝炎病毒 x基因HBxAg起着重要的作用。HBxAg是一种反式激活蛋白，与宿主的许多蛋白相互作用，调节基因的转录、表达，进而影响病毒的复制、宿主细胞信号转导、细胞增殖与分化、细胞凋亡及癌变等。本文通过总结HBxAg与已知癌基因ras、c—myc、c—fns、c—jun、β—catenin，抑癌基因p16、p21、p53的研究进展，以及近年来新发现的一些HBxAg相关癌基因：URG11、URG4、URG7、Human S15a、Sui1、VEGFR3、XTP3、XTP4、XTP6、XTP11与HBxAg的关系对HBxAg反式激活癌基因异常表达与肝细胞癌的研究现状进行综述。     

乙型肝炎病毒X蛋白在原发性肝癌中的作用

乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是一种由HBV X基因编码的多功能蛋白,参与调节基因转录、细胞信号转导、细胞增殖转化、细胞周期和细胞凋亡。目前HBx蛋白被认为在HBV诱发原发性肝癌的过程中发挥重要作用。介绍了HBx蛋白与癌基因、抑癌基因、细胞增殖、细胞凋亡、肝癌侵袭转移和肝癌干细胞的关系,探讨了HBx蛋白在肝癌发生发展中的作用。     

肝癌组织中多基因甲基化与乙型肝炎病毒感染的关系

目的 评估HBV感染与非HBV感染的肝癌组织中多基因（p14、p15、p16和RB）甲基化状态,探讨HBV感染诱导基因甲基化在肝癌发病机制中的作用.方法 运用甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）方法检测32例HBV感染和12例非HBV感染患者的肝癌组织中p14、p15、p16和RB的甲基化状态,应用实时荧光定量PCR技术检测44例血标本中HBV DNA.结果 44例肝癌组织中p14、p15、p16和RB基因的甲基化检出率分别为34.1％、56.8％、70.5％和27.3％；HBV感染与非HBV感染患者的肝癌组织中p14、p15、p16和RB4种基因的甲基化检出率分别为43.8％和8.3％、68.9％和25.0％、90.6％和16.7％、28.1％和25.0％；HBV感染与p14、p15、p16基因的甲基化明显相关（P=0.048、0.035、0.020）,HBV DNA扩增与p14、p15、p16基因的甲基化明显相关（P均＜0.05）.结论 （1）p14、p15、p16、RB基因甲基化是肝癌发生的频发事件；（2）HBV病毒感染与p14、p15、p16基因的甲基化相关；（3）HBV感染诱导相关基因高甲基化可能是HBV相关性肝癌的发病机制之一.     

HBx及其截短体在乙型肝炎病毒复制中的作用

HBV感染作为引起慢性乙型肝炎、乙肝后肝硬化、原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的起始因素,已成为世界性的健康问题.据统计,目前世界上已有超过5亿人感染HBV,每年有1百万人死于乙肝相关疾病.HBx蛋白作为HBV的一个多功能调节蛋白,已被证实在HCC的发生过程中起了重要作用.近年来,关于乙肝病毒X蛋白(HBV X protein,HBx)影响HBV的复制研究也有了一定的进展.同时,越来越多的HBx截短体在肝病发展过程中的作用也被重视.本文将对HBx及其截短体在HBV复制中的作用作一综述.     

COOH-terminal deletion of HBx gene is a frequent event in HBV-associated hepatocellular carcinoma

AIM：To investigate the hepatitis B virus （HBV） x gene （HBx） state in the tissues of HBV-related hepatocellular carcinoma （HCC） in Chinese patients and whether there were particular HBx mutations. METHODS： HBx gene was amplified and direct sequencing was used in genomic DNA samples from 20 HCC and corresponding non-cancerous liver tissues from HBsAg-positive patients. HBV DNA integration and HBx deleted mutation were validated in 45 HCC patients at different stages by Southern blot analysis and polymerase chain reaction methods.
RESULTS： The frequencies of HBx point mutations were significantly lower in HCC than their corresponding non- cancerous liver tissues （11/19 vs 18/19, P = 0.019）. In contrast, deletions in HBx gene were significantly higher in HCC than their non-cancerous liver tissues （16/19 vs 4/19, P 〈 0.001）. The deletion of HBx COOH-terminal was detected in 14 HCC tissues. A specific integration of HBx at 17p13 locus was also found in 8 of 16 HCC, and all of them also exhibited full-length HBx deletions. Integrated or integrated coexistence with replicated pattern was obtained in 45.5% （20/45） - 56.8% （25/45） tumors and 40.9% （18/45） - 52.3% （23/45） non-tumor tissues.
CONCLUSION： HBx deletion, especially the COOH- terminal deletion of HBx is a frequent event in HBV-associated HCC tissues in China. HBV integration had also taken place in partial HCC tissues. This supporting the hypothesis that deletion and probably integrated forms of the HBx gene may be implicated in liver carcinogenesis.     

X region mutations of hepatitis B virus related to clinical severity

Chronic hepatitis B virus(HBV) infection remains a major health problem, with more than 240 million people chronically infected worldwide and potentially 650000 deaths per year due to advanced liver diseases including liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma(HCC). HBV-X protein(HBx) contributes to the biology and pathogenesis of HBV via stimulating virus replication or altering host gene expression related to HCC. The HBV X region contains only 465 bp encoding the 16.5 k Da HBx protein, which also contains several critical cis-elements such as enhancer Ⅱ, the core promoter and the micro RNA-binding region. Thus, mutations in this region may affect not only the HBx open reading frame but also the overlapped ciselements. Recently, several types of HBx mutations significantly associated with clinical severity have been described, although the functional mechanism in most of these cases remains unsolved. This review article will mainly focus on the HBx mutations proven to be significantly related to clinical severity via epidemiological studies.     

HBVX蛋白与氧化应激的相关性

HBVX蛋白（HBx）是多功能蛋白,能转录激活多种病毒及细胞基因,从而参与病毒复制以及宿主细胞的基因调控、蛋白降解和细胞信号转导等过程。近期研究发现HBx可以定位在线粒体上,干扰线粒体氧化磷酸化等能量代谢过程,促进细胞凋亡。氧化应激是指人体的组织细胞中自南基产生增多,并且由于自由基清除酶的活性下降、数量减少等原凶,使得机体的抗氧化能力下降的现象,反映了体内氧化和抗氧化系统间的失衡。本文从HBx在线粒体的定位以及与HBx结合的蛋白,从相关的分子机制阐明HBx与氧化应激的相关作用。