大豆磷脂脂质体对四氯化碳致培养肝细胞损害的保护作用

目的　观察不同浓度大豆磷脂脂质体对四氯化碳(CCl4)导致肝细胞损伤的保护作用。方法　采用终浓度为8mmol/L四氯化碳作用于培养的小鼠肝细胞3h ,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)以及细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果　大豆磷脂脂质体可使由四氯化碳导致损伤的肝细胞培养液中的LDH释放明显减少(P <0 . 0 1) ,肝细胞中SOD含量明显升高(P <0 .0 1) ,MDA含量明显减少(P <0 . 0 1)。结论　大豆磷脂脂质体对四氯化碳致肝细胞损伤具有明显的保护作用。     

松花粉水提取物对四氯化碳诱导肝细胞损伤的保护作用

目的 探讨松花粉水提取物在体外对人正常肝细胞氧化损伤的保护作用.方法 应用体系终浓度为40 mmol/L四氯化碳(CCl4)条件培养液制备体外人肝细胞系L-02氧化损伤模型,同时加入不同浓度的松花粉提取物共培养,通过水溶性四氮唑(WST-1)法检测肝细胞增殖活性,全自动生化分析仪检测肝细胞上清液转氨酶活性,病理切片观察肝细胞形态变化.结果 CCl4对肝细胞增殖活性、功能及形态均有明显毒性作用,可使肝细胞增殖活性降低29.8％～38.4％,天冬氨酸氨基转移酶(AST)增高22.3％,丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高99.2％;正常肝细胞形态发生明显变化,胞核胞浆固缩,细胞生长排列混乱.松花粉提取物干预对上述细胞的增殖活性保护作用不显著,但可使CCl4损伤肝细胞的AST降低14.8％～27.3％,ALT降低39.8％～70.1％,差异有统计学意义(P＜0.05);并对肝细胞胞浆胞核固缩现象有明显改善,高浓度松花粉(400 mg/L)干预组细胞形态接近正常,ALT明显降低(P＜0.05).结论 松花粉提取物对CCl4损伤L-02细胞的增殖活性保护作用不明显,但对肝细胞形态和功能损伤具有有效保护作用.     

氧化苦参碱对四氯化碳损伤大鼠肝细胞的保护作用

目的 :研究氧化苦参碱对肝细胞的保护作用。方法 :采用原代肝细胞培养的方法 ,选用CCl430mmol/L制备肝损伤模型 ,同时加以不同浓度的氧化苦参碱以保护肝细胞 ,培养 12h后以MTT法测细胞存活率 ,并测定培养基中AST、ALT、LDH。结果 :氧化苦参碱对肝细胞的保护呈剂量依赖性 ,氧化苦参碱组细胞存活率明显高于CCl4损伤组 (98.3% /3.2 % ,P <0 .0 5 ) ;其AST、ALT、LDH较CCl4损伤组明显降低 (依次为 6 .13± 0 .4 4 /896 .87±13.2 3、2 1.5± 0 .76 /15 0 2 .13± 35 .80、19.5± 0 .6 8/2 87.38± 5 .79,均P <0 .0 5 )。结论 :氧化苦参碱对CCl4损伤的肝细胞具较好的保护作用 ,存在最佳剂量性关系。     

大豆磷脂对羟自由基引起培养心肌细胞损伤的保护作用

目的　观察大豆磷脂脂质体浓度的累积对羟自由基引起心肌细胞损伤的保护作用。方法　采用FeSO4/Cysteine体系产生羟自由基作用于培养的乳鼠心肌细胞 12h ,测定培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)的含量 ,采用MTT法测定心肌细胞存活率和线粒体内的琥珀酸脱氢酶 (SDH)含量。结果　大豆磷脂脂质体可使氧化损伤心肌细胞培养液中的LDH释放明显减少 (P <0 0 1) ,SDH含量明显升高 ,细胞死亡率也明显减少 (P <0 0 1)。结论　大豆磷脂脂质体对外源性羟自由基引起的心肌细胞损伤具有明显的保护作用。     

甘薯黄酮对CCl4所致肝细胞损伤的保护作用

目的研究甘薯黄酮对CCl4所致肝细胞损伤的保护作用及其初步作用机制。方法体外培养人正常肝细胞株HL7702,MTT法测定甘薯黄酮对HL7702细胞活性的影响;建立CCl4损伤肝细胞模型,测定甘薯黄酮对CCl4损伤肝细胞增殖活性、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化;琼脂糖凝胶电泳法检测甘薯黄酮对CCl4损伤肝细胞凋亡的影响。结果甘薯黄酮在一定剂量范围(1～1 000μg/ml)内对肝细胞无毒性,超过一定剂量(3 000μg/ml)时,具有细胞毒性;甘薯黄酮可以抑制CCl4所致肝细胞活性降低,能明显抑制CCl4损伤后ALT、AST、MDA水平的升高和SOD活性的减弱;400μg/ml甘薯黄酮能减轻CCl4所致的肝细胞凋亡。结论甘薯黄酮对体外培养正常人肝细胞株的安全剂量范围是1～1 000μg/ml。甘薯黄酮在安全剂量范围内能保护CCl4诱导的HL7702细胞损伤,减轻CCl4所致细胞凋亡。     

绞股蓝总皂甙对原代培养大鼠肝细胞四氯化碳损伤的影响

采用四氯化碳（ＣＣｌ４）制成原代培养大鼠肝细胞损伤模型，观察了绞股蓝总皂甙（ＧＰＳ）对肝细胞损伤的保护作用。结果表明，预先用ＧＰＳ处理肝细胞１ｈｒ，可明显减轻ＣＣｌ４引起的肝细胞ＤＮＡ合成速率降低，减少肝细胞ＡＬＴ逸出，抑制增减上清液中ＭＤＡ含量的升高和ＳＯＤ／ＭＤＡ比值的缩小，并与ＧＰＳ浓度呈依赖关系。提示ＧＰＳ能减轻ＣＣＬ４能减轻ＣＣｌ４对离体培养的大鼠肝细胞损伤，保护肝细胞ＤＮＡ合成，其作用     

大鼠再生肝细胞对四氯化碳的耐受

本工作采用肝部分切除(PH)后96h 大鼠的离体肝细胞,以细胞存活率、介质中 GPT、GOT 含量作为肝损伤指标,观察其抗四氯化碳损伤作用。在不加四氯化碳条件下,肝细胞温育3h 或5h 后,细胞存活率、漏入介质中GPT、GOT 活性在假手术组和 PH 组间无显著差异。但在有四氯化碳损伤条件下则不同,在温育3h 或5h 后,存活率在假手术组分别降到52.8±5.9%和43.5±5.8%,而 PH 组分别为69.2±5.8%和60.9±3.2%。漏出的 GPT和 GOT 活性在假手术组也明显高于 PH 组(P<0.01)。提示大鼠离体再生肝细胞有明显的抗四氯化碳损伤作用。     

丹参成分对四氯化碳损伤大鼠肝细胞的作用

体外原代培养大鼠肝细胞已日益广泛地应用于药物研究。因其具有耗药量少、灵敏度高和重复性好等优点,尤其适用于药物有效成分的筛选、研究。本实验首先将丹参醇沉水提成乙酸乙酯萃取物（ＥＡＥ）和正丁醇萃取物（ｎＢＥ）。结果表明,正常大鼠肝细胞悬液ＡＬＴ活性为８４...     

绞股蓝总皂甙对原代培养大鼠肝细胞四氯化碳损伤的影响

采用四氯化碳（ＣＣｌ_４）制成原代培养大鼠肝细胞损伤模型，观察了绞股蓝总皂甙（ＧＰＳ）对肝细胞损伤的保护作用。结果表明，预先用ＧＰＳ处理肝细胞１ｈｒ，可明显减轻ＣＣｌ_４引起的肝细胞ＤＮＡ合成速率降低，减少肝细胞ＡＬＴ逸出，抑制培养上清液中ＭＤＡ含量的升高和ＳＯＤ／ＭＤＡ比值的缩小，并与ＧＰＳ浓度呈依赖关系。提示ＧＰＳ能减轻ＣＣＬ_４能减轻ＣＣｌ_４对离体培养的大鼠肝细胞损伤，保护肝细胞ＤＮＡ合成，其作用机理与抗脂质过氧化有关。     

双环醇对实验性肝纤维化的防护作用及分子机制

目的探讨双环醇对四氯化碳引起大鼠实验性肝纤维化的防治作用及作用的分子机制。方法应用大鼠慢性四氯化碳肝纤维化模型,观察双环醇对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)、透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原(PⅢP)含量及白／球蛋白(A／G)的影响,免疫组织化学方法测定肝脏转化生长因子β1(TGFβ1)的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)方法测定血清肿瘤坏死因子α(TNFα)含量;应用小鼠四氯化碳模型,观察双环醇对线粒体膜流动性、线粒体肿胀度、线粒体谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量改变的影响,电泳迁移率变动分析法测定核转录因子[核因子kB(NF—kB)]的活性。结果双环醇100、200mg／kg灌胃可显著抑制慢性四氯化碳肝纤维化大鼠血清ALT、AST、总胆红素、透明质酸和PⅢP、TNFα水平升高,抑制白蛋白含量和A／G下降,明显减轻肝脏炎症浸润、坏死和纤维化,抑制血清TNFα升高和细胞核转录因子核因子KBDNA结合活性增强。双环醇对亚急性四氯化碳损伤引起的小鼠肝线粒体谷胱甘肽含量降低、脂质过氧化产物含量升高、线粒体膜流动性和线粒体抗肿胀能力的降低均有显著的保护作用。结论双环醇对慢性四氯化碳引起的大鼠肝纤维化具有明显的保护作用,其作用机理与抑制肝脏脂质过氧化、影响细胞核转录因子DNA结合活性从而调控炎症因子密切相关。     

Protective effects of biphenyl dimethyl dicarboxylate on damage in isolated rat hepatocytes induced by carbon tetrachloride and D-galactosamine]

The protective effect of DDB on chemically induced damages was studied in primary culture of rat hepatocytes. The experimental results showed that DDB (200 ug/10(6) cells) efficiently protected the hepatocytes against carbon tetrachloride (10 mM) and D-galactosamine (1 mM) induced damages. Membrane lipid peroxidation (malondialdehyde, MDA) formation and Glutamic Pyruvic Transaminase (GPT) released from the hepatocytes were markedly decreased. The damage of the cell surfaces of the hepatocytes were also reduced as seen under a scanning electron microscope (SEM). Pretreatment with DDB (300 mg/kg) orally could ameliorate the reduction of liver glycogen and blood glucose caused by injection of D-gal (800 mg/kg i. p) in mice. When normal rats received 300 mg/kg of DDB once daily for 10 days, free ribosomal protein and RNA in the liver increased significantly. These results indicated that DDB is of beneficial effects on damaged and normal hepatocytes.     

异佛莱心苷抑制四氯化碳致小鼠肝纤维化的初步研究

目的探讨异佛莱心苷对四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)所致小鼠肝纤维化的抑制作用。 方法将24只C57BL6J小鼠随机分为空白对照组、肝纤维化模型组、异佛莱心苷治疗组和水飞蓟素治疗组,每组6只。肝纤维化模型组、异佛莱心苷治疗组和水飞蓟素治疗组通过腹腔注射CCl4建立肝纤维化模型,每周3次,共12周。从第6周起,异佛莱心苷治疗组小鼠每日灌胃异佛莱心苷（10 mmol/L）,水飞蓟素治疗组小鼠每日灌胃水飞蓟素100 mg/kg,连续给药6周。采集各组小鼠静脉血,血清检测丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）;肝组织做HE染色、Masson染色和天狼星红染色;组织免疫荧光检测TGF-β1的表达;ELISA法检测各组血清中TGF-β1、IL-1β、IL-6和TNF-α含量;Western印迹法检测肝脏AKT/Smad2通路变化。 结果肝纤维化模型组血清ALT和AST较空白对照组显著升高(P<0.05),异佛莱心苷治疗组和水飞蓟素治疗组小鼠血清ALT和AST均较肝纤维化模型组显著降低(P<0.05),小鼠肝重和肝重/体重也较肝纤维化模型组显著降低(P<0.05)。两组小鼠肝组织病理学形态较肝纤维化模型组有一定程度的改善。组织免疫荧光显示肝纤维化模型组TGF-β1表达较空白对照组升高;异佛莱心苷和水飞蓟素治疗后肝脏TGF-β1表达降低。异佛莱心苷治疗组和水飞蓟素治疗组炎症指标（TGF-β1、IL-1β、IL-6和TNF-α）较肝纤维化模型组显著降低(P<0.05)。Western印迹法结果显示肝纤维化后p-Smad2、Smad2和p-AKT蛋白表达显著升高(P<0.05),但异佛莱心苷治疗后肝脏组织中AKT/Smad2表达下降(P<0.05),提示该通路异常激活被抑制。 结论异佛莱心苷对小鼠肝纤维化有抑制作用,其作用机制可能与抑制炎症反应和AKT/Smad2通路有关。     

三萜类化合物对化学损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的:研究三萜类化合物对半乳糖胺(D-GalN)和四氯化碳(CCl4)损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用及其机制。方法:两步灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养,评价积雪草酸(asiaticacid,AA)和β-甘草次酸(β-glycyrrhetinicacid,GA)对D-GalN和CCl4损伤原代培养肝细胞的保护作用。光镜评价细胞生长形态,MTT法测定细胞活性,测定细胞上清天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH);并以荧光分光光度法测定细胞中活性氧(ROS),细胞上清活性氮终产物(NOx)和细胞内谷胱甘肽(GSH)含量;用JC-1法测定细胞线粒体膜电位(ΔΨm)。结果:AA和GA均可显著抑制D-GalN所致的AST和LDH升高(P<0.05),AA尚能提高细胞存活率(P<0.05);AA和GA也能显著抑制CCl4所致的LDH释放(P<0.05)。AA和GA均显著减少两种化学损伤细胞ROS生成和NOx释放,明显改善D-GalN所致细胞线粒体ΔΨm的降低;AA尚显著抑制两种化学损伤细胞内GSH降低。结论:三萜类化合物对D-GalN和CCl4致原代培养大鼠肝细胞损伤有保护作用,其机制与抑制细胞ROS、NOx生成和GSH降低相关,对D-GalN损伤尚有改善线粒体膜电位作用。     

牛膝多糖对四氯化碳所诱导大鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]探讨牛膝多糖(ABP)对四氯化碳(CCl_4)所诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用.[方法]取Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、ABP 100,200 mg/kg组、水飞蓟素组,分别灌胃给予生理盐水、ABP和水飞蓟素7 d,最后1 d腹腔注射给予CCl_4,16 h后检测血清中ALT,AST,ALP水平;行HE染色观察肝脏病理学变化;利用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别检测肝匀浆中SOD,CAT,MDA水平;Western blot法检测肝组织中NF-κB p65蛋白的表达.[结果]与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清中ALT,AST,ALP水平显著升高(P<0.05),肝组织变性坏死累及全小叶.与模型对照组比较,ABP 100,200 mg/kg组血清中ALT,AST,ALP水平显著降低(P<0.05),肝组织病变程度较轻,胞浆中SOD,CAT活性显著升高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05).模型对照组肝组织中NF-κB p65蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.01),而ABP 100,200 mg/kg组NF-κB p65蛋白表达较模型对照组显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性.[结论] ABP对CCl_4所诱导的大鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制认为可能与ABP抗脂质过氧化和抗炎症反应有关系.     

肝康膏对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]研究肝康膏对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用.[方法]用四氯化碳建立小鼠急性肝损伤模型,肝康膏大、中、小剂量组小鼠灌胃给予2.00,1.00,0.50g/kg肝康膏提取物,用比色分析法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]肝康膏大、中、小剂量组血清ALT活性和肝组织MDA含量与模型对照组比较显著降低(P<0.01),肝组织SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.01,P<0.05).[结论]肝康膏对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用.     

莨菪类药物对四氧化碳所致大鼠肝钙积累的作用

以四氯化碳CCl_4 2.5mg/kg灌大鼠胃可导致其肝钙含量明显升高,同时伴有明显肝细胞损伤。在灌四氯化碳前1h和灌四氯化碳后6h各注射阿托品、东莨菪碱和山莨菪碱1次,可明显减轻肝钙积累(P>0.05)并伴有明显的组织学改善。提示大剂量莨菪类药物对肝细胞损伤具有一定的保护作用,这对抗中毒性休克可能有一定意义。     

悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤的保护作用

[目的]探讨悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤的保护作用.[方法]将小鼠随机分为3个组,给予相应药物,8d后处死,取肝,采用油红O染色法和亚铁氰化钾染色法分别观察中性脂肪和琥珀酸脱氢酶活性.[结果]悦肝口服液组与模型组相比较,小鼠肝小叶损伤区域缩小,肝细胞中脂滴减少,琥珀酸脱氢酶活性增强.[结论]悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤具有保护作用.     

4-苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4及D-gal致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察合成的4-苯基卤代黄皮酰胺衍生物对四氯化碳(CCl4)和D-半乳糖(D-gal)致小鼠急性肝损伤的影响。方法4-苯基卤代黄皮酰胺衍生物预防给药后观察其对CCl4和D-gal致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及还原型谷胱甘肽(GSH)水平的影响。结果4-苯基卤代黄皮酰胺衍生物可降低急性肝损伤小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP,还原型谷胱甘肽(GSH)含量升高。结论4-苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4和D-Gal所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

鸡血藤乙醇提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]探讨鸡血藤乙醇提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用.[方法]取昆明系雄性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、鸡血滕乙醇提取物大、中、小剂量(120,60,30mg/kg)组.于腹腔注射给予四氯化碳18h后检测各组血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量,并行肝组织病理学检查.[结果]与模型对照组比较,鸡血藤乙醇提取物中、大剂量组ALT,AST活性明显降低(P<0.05,P<0.01);鸡血滕乙醇提取物大、中、小剂量组肝组织SOD,GSH水平明显增高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.001).HE染色结果显示,鸡血藤乙醇提取物各剂量组肝组织损伤程度较模型对照组轻,且随剂量的增加肝细胞坏死程度呈减轻趋势.[结论]鸡血藤乙醇提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有保护作用.