冰冻血小板对系统血液免疫功能影响的实验研究

目的:探讨不同冰冻血小板复温后对血液系统免疫功能的影响.方法:按不同的实验条件将血液反应系统分为4组,自体血小板组(自然体系对照组)、新鲜异体血小板组(自然体系实验组1)、新型血小板冷冻保护剂组(自然体系实验组2)、6%DMSO组(自然体系实验组3),以灭活S180作为激活抗原,采用免疫荧光标记流式细胞仪分析方法,检测血细胞表面相关免疫分子表达影响的变化规律.结果:血小板CD55和白细胞CD25表达水平,自然体系实验组1较自然体系对照组呈明显上调(P＜0.05),自然体系实验组2及组3均较自然体系对照组上调.血小板CD59表达水平,自然体系实验组1较自然体系对照组呈明显上调(P＜0.05),自然体系实验组2及组3较自然体系对照组下调.红细胞CD59表达水平,自然体系实验组3较自然体系对照组呈明显下调(P＜0.05).结论:冰冻血小板对红细胞免疫反应性的抑制作用强于新鲜异体血小板,对血小板、白细胞免疫反应性的激活作用弱于新鲜异体血小板.     

大肠杆菌在体外快速激活系统血液固有免疫反应中红细胞CD59、淋巴细胞CD4、CD8表达量的性质及意义

目的：探讨CD4、CD8以及CD59分子在系统血液快速固有免疫反应中的作用性质与意义。方法：采用大肠杆菌在体外快速激活全血细胞固有免疫反应的研究体系：实验组0.2mL灭活大肠杆菌（3×108/mL）,加0.2mL全血细胞悬液加0.3mL新鲜血浆,对照组用生理盐水0.2mL取代大肠杆菌悬液,2管放37℃水浴1h后,用直接免疫荧光流式细胞仪法测定红细胞CD59,淋巴细胞CD4和CD8分子表达量变化。结果：全血实验组红细胞CD59,淋巴细胞CD4和CD8分子表达量明显高于全血对照组各测定值（P〈0.05）。结论：红细胞CD59与淋巴细胞CD4和CD8分子共同参与了快速固有免疫反应,红细胞CD59,淋巴细胞CD4和CD8分子同属固有免疫分子,此免疫网络关系属于系统免疫学研究范畴,这一新的认识值得深入研究。     

灭活大肠杆菌在体外快速激活与调控淋巴瘤患者血细胞CD55、CD59分子表达与意义

目的：用系统血液快速固有免疫反应体外系统模式数字化实验研究探讨菌苗治疗淋巴瘤的系统免疫学机理。方法：灭活大肠杆菌（3×10^8/mL）0.2mL加0.6mL淋巴瘤患者枸橼酸抗凝新鲜血,对照组用生理盐水0.2mL取代大肠杆菌悬液加0.6mL全血,两管混匀37℃1h后,用流式细胞仪直接荧光免疫法测定实验组与对照组各种血细胞CD55和CD59分子表达量（平均荧光强度）,并算出大肠杆菌对CD55和CD59分子表达的调控率,求出t值。结果：实验组粒细胞CD55分子的调控率为负（35.18±12.17）%,而血细胞（包括红细胞、血小板、粒细胞、淋巴细胞）CD59分子调控率为正值,以及除粒细胞CD55分子外的其它的细胞CD55分子调控率都为正值,与粒细胞CD55分子负调控率差异非常显著（P〈0.05～0.01）。结论：从体外系统模式数字化实验研究证明菌苗可全方位激活系统血液免疫反应,具体机理尚待深入研究。     

血浆对红细胞CD55分子表达影响的实验研究

目的:用自然与分离实验体系探讨血浆对红细胞CD55分子表达的影响规律。方法:采用免疫荧光标记流式细胞仪分析方法,分别将有抗原和无抗原组、有血浆和无血浆组37℃孵育后,检测红细胞CD55分子平均荧光强度。结果:正常血浆对照组红细胞CD55分子平均荧光强度(6.49±1.03)明显高于无血浆对照组(5.66±1.16)(t=2.408,P=0.010),HBsAg阳性血浆对照组(6.26±0.95)也高于无血浆对照组(t=1.809,P=0.039),但不如正常血浆对照组显著。S180激活无血浆实验组红细胞CD55分子平均荧光强度(6.73±1.39)明显高于无血浆对照组(P<0.01)。结论:正常血浆和S180抗原激活均对红细胞CD55分子表达有明显上调作用,而HBsAg携带者血浆对红细胞CD55分子表达上调作用较弱,血浆的调控机理有待深入研究。     

中药退黄煎剂直肠输注治疗新生儿高胆红素血症疗效观察

目的：用系统血液快速固有免疫反应体外系统模式数字化实验研究探讨菌苗治疗淋巴瘤的系统免疫学机理。方法：灭活大肠杆菌（3×10 8／mL）0．2mL加0．6mL淋巴瘤患者枸橼酸抗凝新鲜血,对照组用生理盐水0．2mL取代大肠杆菌悬液加0．6mL全血,两管混匀37℃1h后,用流式细胞仪直接荧光免疫法测定实验组与对照组各种血细胞CD55和CD59分子表达量（平均荧光强度）,并算出大肠杆菌对CD55和CD59分子表达的调控率,求出t值。结果：实验组粒细胞CD55分子的调控率为负（35．18±12．17）％,而血细胞（包括红细胞、血小板、粒细胞、淋巴细胞）CD59分子调控率为正值,以及除粒细胞CD55分子外的其它细胞的CD55分子调控率都为正值,与粒细胞CD55分子负调控率差异非常显著（P〈0．05～0．01）。结论：从体外系统模式数字化实验研究证明菌苗可全方位激活系统血液免疫反应,具体机理尚待深入研究。     

地榆升白片治疗原发性白细胞减少症的疗效及对细胞免疫功能的调节作用

目的 探讨地榆升白片治疗原发性白细胞减少症的临床疗效及对细胞免疫功能的影响。方法 地榆升白片治疗原发性白细胞减少症44例(治疗组),与鲨肝醇片治疗原发性白细胞减少症40例(对照组)比较,观察疗效;检测治疗组治疗前后红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群,并与健康人对照比较。结果 治疗组总有效率为81.8%,优于对照组的总有效率61.5%(P<0.05);治疗组症状改善快,无明显毒副作用;能使红细胞C3b受体花环率(E-C3b-RR)上调,红细胞免疫复合物花环率(E-IC-R)下调;CD4+ T细胞比例上升,CD8+ T细胞比例下降,CD4/CD8比值趋于正常。结论 地榆升白片是治疗原发性白细胞减少症的安全有效药物,其可能是通过调节患者的细胞免疫功能发挥作用。     

血细胞天然免疫分子CD55、CD59与体液免疫相关性分析

目的探讨血细胞CD55、CD59天然免疫分子与体液免疫的相关性及其意义。方法用流式细胞仪法测定血细胞CD55、CD59,采用全自动蛋白分析仪速率散射比浊法,测定血清C3、C4及IgG、IgA、IgM。结果红细胞CD55与IgA呈正相关性(P<0.05),血小板CD55与IgG、IgM呈正相关性(P<0.05)。红细胞CD59与C3、C4呈负相关性(P<0.05)。结论血细胞CD55、CD59分子参与体液免疫反应调控,具体机理值得深入研究。     

参芪扶正注射液联合化疗治疗血液恶性肿瘤患者的疗效及对造血和免疫的影响

目的:探究参芪扶正注射液联合化疗治疗血液恶性肿瘤的疗效及对患者造血及免疫功能的影响。方法:选取2015年7月至2017年2月无锡市第五人民医院肿瘤科收治的血液恶性肿瘤患者113例,按照随机数字表法随机分为对照组(n=56)和观察组(n=57),2组患者均采用常规化疗方案进行治疗,观察组在对照组的基础上联合参芪扶正注射液治疗,连续治疗1个月。统计2组患者临床疗效;检测并比较治疗前后2组患者造血功能及T淋巴细胞免疫、红细胞免疫功能的变化。结果:观察组缓解率为91.23%,较对照组的76.79%显著升高(P0.05);与治疗前比较,治疗后2组患者外周血白细胞显著降低(P0.05),红细胞、血小板及血红蛋白(Hb)水平显著升高(P0.05),且2组间差异有统计学意义(P0.05);与治疗前比较,治疗后2组CD4+T淋巴细胞比例及CD4+/CD8+均显著降低,但治疗后观察组均显著高于对照组(P0.05);治疗后对照组CD8+T淋巴细胞比例有所升高,观察组有所降低,但治疗前后差异均无统计学意义(P0.05),且观察组CD8+T淋巴细胞比例显著低于对照组(P0.05);与治疗前比较,治疗后观察组红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)及肿瘤细胞花环率(TRR)明显升高(P0.05),免疫复合物花环率(RBC-ICRR)明显降低,且2组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:参芪扶正注射液可有效保护血液恶性肿瘤化疗患者的造血功能及免疫功能,有效提高其临床疗效。     

皮肤病红细胞免疫研究进展

198 1年Siegel[1] 在前人研究的基础上首先提出了“红细胞免疫系统”的新概念 ,现已发现红细胞表达多种天然免疫受体和物质 ,如CD35(CR1)、CR3、CD4 4、CD58、CD59、DAF、SOD酶、趋化因子受体 (ECKR)等 ,具有识别、粘附、浓缩、杀伤抗原 ,清除循环免疫复合物 (CIC)的能力 ,参与机体的免疫调控 ,作为机体血循环含量最多的血细胞 (单位容积血液中超过白细胞三个数量级 ) ,红细胞在机体天然免疫反应中及在T淋巴细胞、B淋巴细胞特异免疫反应中都占有重要地位 ,并有完整的自我调控系统。红细胞上还有β -内啡肽受体 ,肾上腺β受体 ,…     

自体和异体血液在全血分离实验体系中对免疫细胞因子的影响

目的:运用系统血液免疫反应分离实验体系,探讨在抗原激活的情况下异体血细胞对反应体系中细胞因子含量水平影响的变化规律.方法:以S180作为激活抗原,加异体血细胞与自体血细胞对比,37℃孵育1h,取上清液用ELISA法测定IL-8、TNF-α、IFN-γ的分泌量.结果:IL-8的分泌量异体红细胞实验组[(133.92±135.85)%]与自体红细胞对照组[(37.93±27.74)%]相比明显上升(P＜0.05);TNF-α的分泌量异体红细胞实验组[(8.31±3.57)%)]与自体红细胞实验组[(16.55±10.38)%]相比明显下降(P＜0.05);IFN-γ分泌量无明显差异.结论:异体红细胞对自体血液免疫反应细胞因子的分泌具有双向调控作用,提示异体输血对受者的血液免疫反应具有干扰和失平衡的不良影响.     

重型再生障碍性贫血CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的:应用流式细胞术检测SAA患者外周血CD4 CD25 T细胞、CD4 CD25highT细胞的数量。结果:10例初治SAA患者外周血CD4 CD25 T细胞占CD4 T细胞的(6.23±1.82)%,明显低于正常对照组(9.20 2.95)%(P<0.01),CD4 CD25highT细胞比例为(1.02±0.11)%,亦明显低于正常对照组(1.43±0.41)%;10例造血恢复SAA患者CD4 CD25 T细胞和CD4CD25highT细胞比例分别为(8.92±1.22)%和(1.41±0.64)%,与正常对照组无明显差异(P>0.01)。认为 CD4 CD25 、CD4 CD25highT细胞水平与SAA密切相关。     

双龙胶囊对哮喘大鼠肺功能的影响及其作用机制

目的：探讨双龙胶囊对哮喘大鼠的肺功能的影响及双龙胶囊治疗支气管哮喘的作用机制。方法：用卵蛋白建立大鼠哮喘模型,实验组给予双龙胶囊,再以卵蛋白作为抗原攻击激发气道高反应性后,测定大鼠肺功能的变化,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞分类计数,并做肺组织病理切片观察,用流式细胞仪测定脾脏CD4⁺及CD8⁺淋巴细胞阳性百分率。结果：双龙胶囊可明显降低哮喘大鼠PEF,Fev 0.2,Fev 0.2/FVC,降低哮喘大鼠BALF中嗜酸性粒细胞含量,肺组织病理切片观察可见双龙胶囊可抑制炎性细胞渗出,双龙胶囊还可降低脾脏中CD4⁺,CD8⁺含量。结论：双龙胶囊可明显抑制哮喘大鼠气道高反应,改善呼吸功能,其作用机制可能与双龙胶囊抑制炎性细胞渗出,减轻气道炎症并参与机体免疫调节有关。     

青蒿琥酯片对狼疮样模型小鼠外周血淋巴细胞表面CD4、CD8、CD54表达的影响

目的:探讨青蒿琥酯片不同剂量对狼疮样小鼠部分免疫调节作用机制。方法:运用不同剂量的青蒿琥酯对8~10周龄的狼疮样小鼠进行干预治疗8 d,观察其对狼疮样小鼠外周血淋巴细胞表面CD4、CD8、CD54表达的影响。结果:青蒿琥酯片对狼疮样小鼠外周血CD4、CD8的表达有升高的作用,对狼疮样小鼠外周血CD54的高表达有抑制作用,以高剂量组最为明显。结论:青蒿琥酯片可调节狼疮样小鼠的细胞免疫功能,抑制狼疮样小鼠的过度免疫反应。     

黄芩苷对T淋巴细胞增殖与活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法:以刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA) 离子霉素(ionomycin,Ion)诱导小鼠淋巴细胞中T细胞增殖,用MTT法测定细胞增殖;利用ConA或PMA诱导T细胞激活,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子与CD25分子表达情况。结果:在ConA或PMA Ion刺激48h后,小鼠淋巴细胞MTT吸光度显著高于对照组(P<0.01)。黄芩苷(10~40uM)显著降低了ConA或PMA Ion引起的MTT吸光度增加(P<0.01)。在ConA或PMA刺激18h后,小鼠T细胞CD69表达率显著提高(P<0.01),ConA或PMA刺激36小时后,T细胞CD25表达率显著提高(P<0.01),黄芩苷(10~40uM)能显著降低活化(P<0.01)。结论:黄芩苷可以显著抑制多克隆刺激剂ConA或佛波醇酯(PMA)介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

辛夷挥发油对过敏性鼻炎豚鼠的作用及机理初探

目的:研究辛夷挥发油(VOMbP)对过敏性鼻炎豚鼠的作用。方法:采用TDI对豚鼠进行造模,观察症状体征以及光镜下鼻粘膜组织形态学变化。同时应用免疫组织化学方法观察鼻粘膜CD54、CD106表达的变化,ELISA法检测血中IL-4水平。结果:VOMbP治疗组鼻痒、喷嚏、清涕,鼻粘膜厚度以及嗜酸性粒细胞浸润明显改善;CD54的表达明显减少,血中IL-4水平降低。结论:VOMbP能缓解局部症状,改善局部粘膜的充血、水肿,减少嗜酸性粒细胞在炎症局部的浸润。其作用机理之一是阻止了CD54在炎症部位血管内皮细胞表面的高表达,从而发挥治疗过敏性鼻炎的作用。     

大蒜素穴位注射对变应性鼻炎大鼠CD4、CD8水平的影响

目的：观察大蒜素穴位注射对变应性鼻炎（AR）大鼠CIM、CD8水平的影响。方法：将36只sD大鼠造模成功后,随机分为大蒜素穴位注射组、大蒜素肌肉注射组、生理盐水穴位注射组、模型组,分别予以相应治疗,观察相关指标并进行分析。结果：经治疗,3个治疗组症状积分均明显低于模型组,且大蒜素穴位注射组最低;3个治疗组鼻黏膜切片CIM、CD8计数明显少于模型组,且大蒜素穴位注射组最少（P〈0．01）。结论：大蒜素穴位注射可以有效改善AR大鼠症状,达到治疗目的,且优于其他两组,其作用机制可能与降低鼻腔局部异常升高的CD4、CD8含量,调整失衡的CIM／CD8有关。     

补阳还五汤对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用

目的:研究补阳还五汤对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用.方法:大鼠灌胃给予补阳还五汤,腹腔注射异丙肾上腺素制备心肌缺血模型,流式细胞技术检测外周血CIMO的表达,免疫组织化学法观察心肌组织CD40L的表达,并测定血清LDH、CK、AST的活性.结果:心肌缺血模型组大鼠外周血CD40、心肌组织CIMOL的表达及血清LDH、CK、AST的活性明显高于正常对照组(P＜0.01),而补阳还五汤高、中剂量组大鼠外周血CD40、心肌组织CD40L的表达及血清LDH、CK、AST的活性较模型组显著降低(P＜0.01).结论:补阳还五汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血具有保护作用,其作用可能与阻断CD40-CD40L炎症信号途径及降低血清LDH、CK与AST的活性有关.     

败丹黄液鼻腔灌洗对鼻窦炎术后鼻黏膜CD3、CD69的影响

目的观察败丹黄配方颗粒鼻腔灌洗对慢性鼻窦炎鼻内镜手术(FESS)术后的临床疗效及粘膜CD3、CD69的影响。方法对20例Ⅱ型慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者,在鼻内镜手术后,采用鼻腔灌注抽吸装置进行鼻腔灌洗,患者随机分成两组,治疗组用败丹黄灌洗液,对照组用生理盐水,对病变组织进行流式细胞术检测,分别在术中及术后3月进行检测,观察鼻黏膜CD3、CD69水平变化。结果①治疗组有效率90.0%,对照组80.0%;治疗组治愈率60.0%,对照组50.0%。治疗组有效率及治愈率高于对照组,但无统计学差异。②鼻腔灌洗3个月后,治疗组CD3+细胞比例低于对照组;CD3+/CD69+细胞比例差异无统计学意义。③手术前后CD3+细胞、CD3+/CD69+细胞比例与患者症状、体征进行相关性分析,相关系数r绝对值均偏小,无统计学意义。结论①鼻腔灌洗对鼻窦炎围手术期治疗有积极意义,败丹黄灌洗液能提高鼻窦炎手术愈后疗效。②CD3、CD69能够反映患者鼻腔黏膜的炎症状态,患者术后术腔黏膜炎症长期存在,控制黏膜炎症需要一个长期的治疗过程。③手术后3月治疗组CD3+细胞比例下降,可能和败丹黄灌洗液抗炎作用有关。     

康肠宁对DNCB诱导的大鼠实验性溃疡性结肠炎的治疗作用

目的通过2,4-二硝基氯本(DNCB)加乙醇、乙酸复合法建立大鼠UC模型,观察康肠宁对该模型的治疗作用,并探讨相关机制。方法采用DNCB+乙醇+乙酸法复制大鼠模型,模型成功后将大鼠随机分组,同时设立对照组。给药期间观测各组动物的精神、饮食、大便等情况,治疗结束后采血以免疫组化法测CD4、CD8及其比值,处死大鼠取结肠做病理学检查,刮取结肠黏膜以放免法测TNF-α。结果模型组大鼠可见稀便或软便,精神倦怠,活动、饮食明显减少,毛发欠光泽;结肠充血、水肿,溃疡形成,甚至肠壁变厚,肠腔变大;镜下炎性细胞浸润明显,个别可见肉芽肿,伴不同程度的纤维化;外周血CD4、CD8较正常组显著下降(P0.01),组织TNF-α有所下降(P0.05)。给予康肠宁中、高剂量组治疗后稀便渐停,饮食、活动逐渐恢复正常;结肠黏膜充血、水肿基本消失,个别可见愈合期溃疡,镜下炎性细胞明显减少,纤维化程度明显减轻;外周血CD4、CD8较模型组显著升高(P0.05),组织TNF-α有一定程度升高(P0.05)。结论康肠宁对DNCB+乙醇+乙酸法建立的大鼠UC模型有一定的治疗作用,其机制与调节免疫、清除炎症有关。