11C-乙酸盐在肺癌模型小鼠体内的生物分布和PET显像

目的 研究"C-乙酸盐(11C-AC)在荷肺腺癌小鼠体内的生物分布并PET显像,并评价"C-AC在肺部肿瘤诊断中的作用.方法 将30只荷肺腺癌T739小鼠根据不同示踪剂和注药后的时相随机分为5组(每组6只).实验组经小鼠尾静脉注入"C-AC后5、10、20、30 min分别用井型探测仪测量小鼠"C-AC的生物分布,并行PET显像.对照组小鼠在注入18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)后60 min测量生物分布并行PET显像.结果 在"C-AC的生物分布研究中,可发现肿瘤部位有相当高的放射性摄取,肾、肝和脾亦有较高放射性摄取,而肿瘤/血、肿瘤/肌肉及肿瘤/肺的T/NT比值均大于2.应用11C-AC的肿瘤PET显像与18F-FDG一样,均非常清晰.肿瘤11C-AC标准化摄取值(SUV)为2.8±0.8,低于18F-FDG suv(5.3±1.6).结论 11C-AC可应用于肺部肿瘤的PET显像,最佳显像时间为20 min,有望成为18F-FDG显像不满意时的一个重要补充.     

18F-FMISO在肺癌模型小鼠体内的生物分布及PET显像研究

目的 评价乏氧显像剂18F-硝基咪唑丙醇(18F-FMISO)在肺腺癌动物模型中的诊断价值.方法 荷肺腺癌T739小鼠经尾静脉注入18F-FMISO后不同时间(30、60、90、120 min)处死,测量18F-FMISO的生物分布,并行PET显像.对照组小鼠在注入18F-氟脱氧葡萄糖(18F-FDG)后行PET显像.结果 荷瘤鼠肿瘤PET显像清晰.生物分布研究表明肿瘤有明显的放射性摄取.在肾脏和肝脏有较高的放射性分布.肿瘤对血和肌肉的T/NT比值均大于2.结论 肺部恶性肿瘤组织中18F-FMISO摄取高于正常组织,可通过PET清晰显像,为进一步临床应用于肿瘤的乏氧诊断提供了依据.     

18F-FLT在小鼠肺癌和炎症模型中的生物分布及PET显像研究

目的 研究3'-脱氧-3'-18F-氟代胸苷(18F-FLT)在肺癌模型和炎症模型的生物分布和PET显像,以评价18F-FLT 作为一种新的PET示踪剂在肺部恶性肿瘤诊断中的作用.方法 16只荷肺腺癌T739小鼠和12只T739炎症模型小鼠均根据不同示踪剂[18F-FLT和18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)]被随机分为两组,在经尾静脉注药后60 min用井型探测仪测量小鼠18F-FLT和18F-FDG的生物分布,并行PET显像.结果 在肺癌模型18F-FLT的生物分布研究中,发现肿瘤部位有较高的放射性摄取,肿瘤对血、肌肉及肺的T/NT比值均大于2.应用18F-FLT和18F-FDG的肿瘤PET显像均非常清晰.在炎症模型的研究中,18F-FDG组炎性组织对肌肉的放射性比值(2.25±0.39)明显高于18F-FLT组(1.26±0.19)(P＜0.01).炎性组织摄取18F-FDG而不摄取 18F-FLT.结论 肺部恶性肿瘤组织中18F-FLT摄取高于正常组织.炎性组织在18F-FLT PET扫描中未见显像,表明18F-FLT在两种疾病模型的鉴别中有特异性.     

靶向FPR2新型探针99mTc-WRWWWW的制备及其在炎症小鼠模型的初步研究

目的：构建靶向甲酰肽受体2(FPR2)的新型分子探针99mTc-WRWWWW,并评估其在正常昆明小鼠体内的药代动力学特点及在炎症模型鼠中的靶向效能。方法：核素99mTc标记WRWWWW,高效液相色谱法（HPLC）测定标记产物的放射化学纯度及体外稳定性。生物分布实验（30、60、120、240 min时间点）研究探针在正常昆明鼠体内药代动力学特点。构建急性肌肉炎症及结肠炎模型鼠,并进行小动物SPECT/CT显像。HE染色与免疫组化验证炎症组织免疫细胞浸润及FPR2表达水平。结果：成功构建新型探针99mTc-WRWWWW,标记率大于90%,放化纯大于99%,体外稳定性良好。正常昆明小鼠生物分布显示99mTc-WRWWWW主要经肝、肾代谢,60 min时肝、肾摄取值分别为（15.33±0.76）和（4.50±1.50）%ID/g。小动物SPECT/CT显像示实验组小鼠肌肉及结肠炎症病灶处放射性摄取较对照组小鼠明显增高,并能被过量非标记肽所阻断,探针具有较好的灵敏度和特异性。HE染色及免疫组化证实炎症肌肉内见大量免疫细胞浸润,FPR2表达水平升高,进一步验证了体内显像结果。结论：本研究成功制备...     

99Tcm-TP1093的制备及其在健康动物体内的生物分布及动力学特点

目的 制备标记率符合显像要求的99Tcm-TP1093,探讨其在健康动物体内的生物分布及动力学特点.方法 化学合成G(D) AGG-Aba-ATAQSAYG-NH2(TP1093);氯化亚锡还原法99Tcm标记TP1093,纸层析测定标记率,计算比活度;体外稳定性实验、血清蛋白结合实验及脂/水分配实验鉴定99Tcm-TP1093的理化性质;研究标记多肽在健康家兔体内的示踪动力学和正常小鼠体内生物分布;健康家兔99Tcm-TP1093显像,观察体内放射性动态分布变化,利用感兴趣区(region of interest,ROI)技术分析重要组织器官的时间-放射曲线(time-activity curve,TAC).结果 99Tcm-TP1093的标记率为(97.23±0.87)％,比活度为(15.91±0.62) TBq/mmol.标记多肽室温放置4h,其放射化学纯度为(93.34±0.91)％.标记多肽与血清蛋白无明显结合,脂/水分配系数lgP=-(1.68±0.09).标记多肽在健康家兔体内的动力学过程符合权重为1/c的二室模型,t1/2α为(2.689 ±0.541) min,t1/2β为(69.156±20.342) min,总清除率(CL)为(5.029±4.381)mL/kg.小鼠体内分布和健康家兔显像示:血液放射性清除迅速,软组织放射性消退快;胃区呈放射性缺损,甲状腺区未见异常放射性浓聚,脑呈低放射性分布;体内放射性主要经泌尿系统排泄,少量通过肝胆系统分泌.结论 99Tcm-TP1093标记方法简便,标记率与比活度高,可制备成一步法冻干药盒,具有良好的稳定性、体内生物分布及动力学性质.     

^11C-PDT在肺癌动物模型中的生物分布

目的研究11C-PDT示踪剂在荷肺癌小鼠体内的生物分布。方法荷肺癌小鼠随机等分为3组,经尾静脉注入11C-PDT,分别于注入后15min、30min、60min用井型探测仪测量11C-PDT在各脏器及肿瘤组织的生物学分布。结果11C-PDT在肾脏放射性分布最高,在肿瘤部位有较高的放射性摄取,在注药后60min时肿瘤对肌肉组织的T/NT值较高。结论11C-PDT有望作为肺癌PET显像的示踪剂。     

99Tcm-DTPA-DG正常动物分布与显像研究

目的:进行新型葡萄糖类似物99Tcm-DTPA-DG的标记以及正常动物分布与显像研究.方法:用氯化亚锡作还原剂99Tcm标记DTPA-DG.纸层析法鉴定99Tcm-DTPA-DG的放化纯度、标记稳定性,完成了正常小鼠体内生物分布实验及正常家兔显像研究.结果:99Tcm-DTPA-DG放化纯度大于99%,标记物体外稳定.99Tcm-DTPA-DG在正常小鼠和正常家兔体内血液清除快,脑、肺、小肠、肌肉未见明显放射性分布,主要经肾脏通过尿液排出体外.结论:研制的99Tcm-DTPA-DG有望成为一种新型的肿瘤葡萄糖类似物代谢显像剂.     

^99mTc—谷胱甘肽药盒的制备和实验研究

目的：研制一种新型亲炎症或感染的99mTc标记谷胱甘肽（GSH）。报道其制备、质控及药代动力学。方法：用氯化亚锡作还原剂，制备冷冻干燥99mTc标记GSH一步法药盒，用纸层析法鉴定99mTc-GSH标记率及标记稳定性，测定标记产物99mtc-GSH的理化性质、生物学性质，初步试用于临床。结果：室温下该药盒与99mTcO4混合30分钟后，得标记率大于99％的99mTc-GSH，标记方法简便；标记后24小时测定其标记率仍大于98％，标记产物稳定性好；药盒放置6月后，标记率大于99％。99mTc-CSH生物分布显示血中清除快，主要经肾清除，其余器官浓聚少。松节油和金黄色葡萄球菌实验炎症模型显像，示踪剂定位明确，T／NT值高（3h为4．65）。药盒的各项技术指标符合药典体内诊断试剂的规定。结论：研制的99mTc-GSH药盒适合于临床探测炎症与感染，特别适合于我国国情。     

锝99m标记抗曲霉单克隆抗体的制备及在小鼠体内的分布

目的探讨锝99m(99mTc)标记抗烟曲霉单抗Mab-WF-AF-1的方法,观察标记物体外特性以及在正常小鼠体内生物学分布的特点。方法采用间接标记方法进行标记,薄层层析法检测标记物的标记率和稳定性,体外实验对标记物免疫活性进行鉴定。正常小鼠尾静脉注射3.7 MBq标记物,注射后40 min、2 h、4 h、7 h后取各器官称重后测放射性计数,评价标记物在正常小鼠体内生物分布特性。结果99mTc-WF-AF-1标记率达到95%以上,在磷酸盐缓冲液和血清中稳定性较高。标记物与烟曲霉的结合显著高于金黄色葡萄球菌[(10.32±0.21)%比(1.88±0.45)%,P0.05]和白假丝酵母菌[(10.32±0.21)%比(1.67±0.29)%,P0.05]。加入过量未标记蛋白后,标记物与烟曲霉孢子的结合显著降低。生物分布实验表明,标记物主要分布在肝、脾和肾,40 min和7 h的血池放射活性分别为(2.51±0.23)%ID/g和(0.53±0.13)%ID/g。结论99mTc标记Mab-WF-AF-1制备方法简便,标记率和放化纯度较高,稳定性好,标记物在小鼠体内主要通过肝脏和肾脏代谢,血液清除较快。     

2-18F-氟丙酸在荷乳腺癌小鼠模型中的显像性能和体内分布

目的 研究一种新的正电子显像剂2-18F-氟丙酸在乳腺癌小鼠模型中的显像性能和体内分布情况。方法 于4只乳腺癌小鼠尾静脉注射7.4~11.1 MBq的2-18F-氟丙酸,分别在注射药物后60、120 min用小动物正电子发射断层显像进行动物显像。采用Inveon Research软件将乳腺癌病灶的单位体积放射性(Bq/ml)转化为每克组织注射剂量百分率(%ID/g),分析4只乳腺癌小鼠体内2-18F-氟丙酸的分布情况,并用同样的动物模型与18F-FDG进行对照。结果 注射2-18F-氟丙酸后60、120 min,放射性主要浓聚于小鼠的膀胱、肠道和肝脏。右侧腋下乳腺癌病灶摄取明显,在注射显像剂后60、120 min的生物分布分别为(13.74±1.97)%ID/g和(14.84±1.06)%ID/g,差异无统计学意义(P=0.454);肌肉、背部的棕色脂肪对放射性摄取不明显。注射18F-FDG后60 min,小鼠乳腺癌病灶的生物分布是(10.27±2.34)%ID/g,背部棕色脂肪有明显的放射性浓聚。结论 正电子显像剂2-18F-氟丙酸能够清晰显示乳腺癌,有可能应用于临床乳腺癌的全身无创性检测。     

^188Re标记丙氧鸟苷白蛋白纳米微球的制备

目的制备188Re标记丙氧鸟苷（GCV）白蛋白纳米微球（^188Re-GCV-BSA-NP）。方法通过蛋白交联固化的方法制备GCV-BSA-NP,并测定GCV-BSA-NP的体外释药特性;采用预锡化直接标记法对GCV-BSA-NP进行188Re标记,同时观察188Re-GCV-BSA-NP体外稳定性。结果GCV-BSA-NP为大小不等的规则性微球,微球直径不等,但多集中在250-290nm。GCV-BSA-NP总的标记率〉90%,放化纯〉95%,放射性比活度1.85×105MBq/μmol。标记物放置于37℃的PBS（pH7.4）溶液中,在24h时放化纯为95%。结论预锡化直接标记法简便快速,能够得到较高的标记物放化纯度,稳定性好,GCV-BSA-NP具有明显的缓释功能。     

~（125）I标记反义肽核酸对SKOV3细胞CerbB-2 mRNA和Her-2蛋白表达的抑制作用

目的探讨利用脂质体转染125I标记的CerbB-2反义肽核酸（asPNA）阻断人卵巢癌细胞株SKOV3中CerbB-2mRNA翻译并抑制Her-2蛋白表达的作用。方法 （1）125I用CH-T法标记CerbB-2-asPNA,测定其标记率和放化纯。（2）分对照组、非标记分子探针组和125I标记反义肽核酸组,运用RT-PCR法检测各组细胞CerbB-2mRNA的翻译。（3）运用流式细胞仪检测各组细胞的Her-2蛋白表达率。结果 （1）125I标记CerbB-2-asPNA的标记率为（56.90±4.38）%,放射化学纯度为（87.00±0.99）%,放射性浓度为3.7MBq/ml,化学浓度为5.00μmol/L。（2）125I标记CerbB-2-asPNA作用SKOV3细胞24h后,SKOV3细胞CerbB-2在mRNA水平上明显下降,与SKOV3细胞对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。（3）125I标记CerbB-2-asPNA作用SKOV3细胞24h后,细胞的Her-2蛋白表达率降低幅度较大,与SKOV3细胞组对比,两者间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 125I-L-CerbB-2-asP-NA对人卵巢癌细胞株SKOV3CerbB-2基因表达在mRNA翻译和蛋白表达水平上均有抑制作用。     

抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体放射免疫测定方法的建立

目的 建立以125I -抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）一硫氧还融合蛋白（MOG融合蛋白）介导的放射免疫分析技术（RIA）作为测定实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠血清抗MOG抗体的新方法.方法 Na125I标记MOG融合蛋白,以MOG融合蛋白免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,将125I -MOG融合蛋白与小鼠血清标本结合,孵育后与兔抗鼠IgG结合,收集沉淀,用γ放射性检测仪测定抗MOG抗体水平.结果 成功制备纯度较高的125I-MOG融合蛋白,当实验条件为Na125I 投料量1mCi,MOG融合蛋白量60μg时,获得较好的标记率48.3631%,最高的比放射性320 043.7 Bq/μg.应用新型放射免疫法测定小鼠血清抗MOG抗体,MOG组血清抗MOG抗体水平与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 成功建立了一种较为敏感的测定血清抗MOG抗体的放射免疫方法.     

氯胺T法标记B7—2单抗6C8的方法学研究

目的：建立^125I标记B7—2单抗6C8的方法，探讨其最佳标记条件。方法：氯胺T法标记单抗6C8，改变标记条件：抗体的量分别为3μg、6μg、9μg、12μg；^125I的活度分别为0．925MBq、1．85MBq、3．7MBq、7．4MBq、14．8MBq；CH—T的量分别为10μg、20μg、30μg、40μg、50μg；反应时间分别为30s、1min、2min、4min；每次实验均重复3次，根据实验结果调整标记条件。标记好后，找出最佳标记条件，在生理盐水和人血清中分别作不同时间的标记率稳定性测定，以30min、1h、2h、4h、6h、24h为时间点，选出标记率最高的时间点。纸层析法测定标记率及放化纯。结果：抗体量对标记率没有影响；Na^125I3．7MBq时标记率为（74．53±5．12）％，放化纯为（90．40±3．01）％；CH—T20μg时标记率为（81．00±14．75）％，放化纯为（95．17±4．45）％；反应时间30s时标记率为（80．67±13．32）％，放化纯为（88．93±10．16）％。室温下放置3d标记率为（83．12士8．47）％，加入人血清后放置24h标记率为（5．23±0．90）％。结论：上述氯胺T法最佳标记条件为：Na^125I3．7MBq，氯胺-T20μg，6C8抗体6μg，Na2S2O5100μg，反应时间30s。该方法具有较高的标记率和较差的稳定性。     

高效液相色谱法测定百咳静颗粒(儿童型)中黄芩苷的含量

目的 建立高效液相色谱法测定百咳静颗粒(儿童型)中黄芩苷含量的方法.方法 色谱柱为Gimini ODS(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03 mol/L醋酸铵(含0.25%甲酸)(体积比20:80),流速为1.0 ml/min,柱温为40℃,检测波长为316 nm,进样量为20μL.结果 黄芩苷...     

小鼠胰岛密度梯度离心方法的研究

目的探索最优的密度梯度离心方案,提高胰岛的纯度和得率,为胰岛移植相关研究奠定基础。方法采用雄性Balb／c小鼠作为供体分离胰岛,以0.5mg／ml胶原酶Xl灌注和消化胰腺,通过不同的密度梯度离心策略分离纯化胰岛,进行双硫腙（DTZ）特异染色法染色,显微镜下观察胰岛的纯度和得率,并通过吖啶橙（AO）／碘化丙啶（PI）染色检查分离获得的胰岛活性,最终确定最佳的密度梯度离心方法。结果Balb／c小鼠在Ficoll一1．108（4m1）、1．096（2m1）、1．069（2m1）、HBSS（2m1）,加速度1、减速度1、400r／min、4min中转1800r／min、8min离心后胰岛得率为（125±39）IEQ、纯度为（79．6±105）％,经相同条件二次梯度后得率无明显降低但纯度明显提高．达（96．2±14）％。经AO／PI染色鉴定分离胰岛活性良好。结论本研究所采用的小鼠胰岛密度梯度离心方法很有效,能稳定地获得纯度较高且数量可观的胰岛。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4~＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响

目的：观察三氧化二砷（ATO）对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响。方法：免疫磁珠法分选16～18周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常对照小鼠脾脏CD4＋T细胞,PHA-p（20μg/mL）和IL-2（1 000 IU/mL）刺激48 h后分为以下不同药物处理组：①PBS组：空白对照;②ATO组：1μmol/L ATO作用24 h;③ATO＋5-氮杂胞苷（5-AzaC）组：1μmol/L 5-AzaC作用72 h后1μmol/L ATO作用24 h。CD4＋T细胞经过以上处理后抽提基因组DNA,亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增IFN-γ基因启动子,产物凝胶回收,克隆入pMD-19T载体,转化入E.coli DH5α,筛选阳性克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析。结果：①MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子呈低甲基化水平。②1μmol/LATO作用24 h后MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。③1μmol/L ATO作用24 h能使经过5-AzaC干预后的MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。结论：1μmol/L ATO作用24 h能在一定程度上有效逆转活化状态下MRL/lpr小鼠脾脏CD4＋T细胞IFN-γ基因启动子低甲基化。     

APPswe/PS1dE9转基因小鼠的剖腹产净化技术研究

目的 研究感染肠道鞭毛虫转基因小鼠的生物净化技术.剖腹产方法对感染的小鼠进行净化,使其达到SPF级标准,为建立基因工程小鼠肠道鞭毛虫净化技术提供依据.方法 取感染肠道鞭毛虫的APPswe/PS1dE9阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,AD）转基因小鼠（APP小鼠）,在超净工作台内行剖腹产取胎手术,用SPF级帕金森病转基因鼠代乳,术后1、4、7、10月进行微生物和寄生虫检测;PCR技术鉴定剖腹所得APP仔鼠及其繁殖群（F1代）APPswe基因型,计算F1代每窝仔鼠APPswe基因阳性率及平均阳性率,用单样本t检验分析APPswe基因阳性率是否符合孟德尔遗传规律.结果 实施剖腹产手术10例,获仔鼠75只,7日龄仔鼠存活率及离乳存活率分别为90.67%（68/75）和73.33%（55/75）;净化前APP小鼠肠道鞭毛虫感染率均为100%（5/5）,净化后的4次检测,APP小鼠SPF级所要求的病原菌及寄生虫结果均为阴性.净化后的APP仔鼠共繁殖42窝F1代,平均每窝APPswe基因阳性率为48.3%,与孟德尔遗传规律50%的理论阳性值相比无统计学差异（P＞0.05）.结论 剖腹产净化技术可成功去除该APP小鼠的肠道鞭毛虫,且对APPswe基因遗传性状未产生明显影响.     

~(67)镓显像在肺结节病的显像分析及临床应用

目的:探讨 67镓检查在临床中对肺部结节病诊断的价值.方法:回顾性分析疑为结节病的72例患者(66例结节病, 6例非结节病) 67镓显像资料,并对肺部X线、CT检查和病理检查结果等临床资料进行分析.结果: 66例结节病患者中, 67镓检查诊断准确性为83.3%(55/66), X线、 CT为78.8%(52/66),两者无显著性差异(P=0.656 8).临床诊断为结节病的12例患者,曾行病理检查无法明确诊断,行 67镓检查的诊断准确性(91.7%, 11/12)明显高于X线或CT检查诊断的准确性(33.3%, 4/12), P=0.011 4. 4例病理诊断不能与增殖型结核鉴别,X线或CT检查不能明确诊断, 3例 67镓检查明确诊断结节病, 1例 67镓检查未发现有典型的结节病改变,最后诊断为肺结核.结论:67镓检查对难以明确诊断的肺结节病有一定的诊断价值.     

18F-FDGPET（PET／CT）肾癌显像特点分析

目的评价。肾占位全身18F—FDGPET（PET／CT）显像的应用价值。方法对78例肾占位的18F—FDGPET（PET／CT）显像特点进行分析。其中影像学检查发现肾实性占位28例;肾癌术后复查41例;既往有肾癌手术史后发现肺内占位病变9例。按5．55MBq／kg体质量注入18F—FDG后50min,使用SEIMENSEcatexactHR＋或GEDiscoveryVCT进行三维模式采集。PET判读：在观察到的肾病灶部位设感兴趣区（ROI）,以SUVmax≥2．5为阳性（恶性）,SUVmax〈2．5为阴性（良性）。PET／CT判读：PET图像标准同上,结合cT影像及融合图像进行诊断。结果病理证实为肾癌的21例中PET阳性11例;7例良性病变中5例错构瘤及1例囊肿PET显示为阴性;11例肾癌为PET／CT显像,9例阳性;13例转移及术后复发者PET阳性10例。结论18F—FDGPET对肾癌原发灶的诊断价值有限,对转移以及术后局部复发的诊断有较高价值。