多发性骨髓瘤黏附分子CD11 a、CD49d 的表达特点及临床意义

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞黏附分子CD11a、CD49d的表达,并探讨其发病机制.方法用流式细胞仪检测CD11a、CD49d在MM组及对照组2组骨髓标本单个核细胞表达的平均荧光强度和荧光阳性细胞百分率.结果MM患者骨髓单个核细胞CD49d的表达荧光强度较对照组增强(P＜0.05);CD11a的表达阳性细胞百分率及荧光强度均较对照组增强(P＜0.05,P＜0.01);进展期表达较平台期明显增强(P＜0.05,P＜0.01).结论MM单个核细胞表面CD49d的表达增强,导致患者骨髓细胞与细胞及细胞与骨髓基质间的黏附异常,可能参与了MM的病理过程,而CD11a在MM的平稳期表达较低,进展期表达明显增强,表明CD11a在MM增殖中起作用.     

新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞炎症激活与NLRP3炎症体通路相关性研究

目的:探讨新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞激活与NLRP3炎症体通路的相关性。方法:随机选取2013-09-2014-02新疆医科大学第一附属医院高血压科门诊首次就诊且未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压患者30例,年龄(54.2±5.7)岁,选取同期同民族健康体检者30例,年龄(53.7±5.4)岁,两组男女比例均为1∶1。采集两组受试者外周血并分别提取血浆和单个核细胞,采用ELISA法检测血浆白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量;使用荧光定量RT-PCR检测单个核细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA相对表达水平;运用Western blot法检测单个核细胞中NLRP3和Caspase-1蛋白的相对表达量。结果:两组受试者基线资料差异无统计学意义(P0.05);与健康对照组相比,高血压组血浆IL-1β和IL-18水平明显升高(P0.05);外周血单个核细胞层NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA相对表达量均高于对照组(P0.05);NLRP3和Caspase-1蛋白的表达量也较对照组增高(P0.05)。结论:新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞处于一定程度的炎症激活状态,且该炎症反应可能与NLRP3炎症体及其下游相关细胞因子的表达增多有关。     

细粒棘球蚴感染中TGF-β/Smad信号通路对IL-9调控作用的研究

目的检测细粒棘球蚴病患者肝组织中转化生长因子β(TGF-β)、 Smad3、 Smad7、转录因子PU.1和白细胞介素-9 (IL-9) mRNA表达水平,初步探讨TGF-β/Smad信号通路在细粒棘球蚴感染病灶中对Th9细胞的调控作用。方法以新疆医科大学第一附属医院住院手术的30例棘球蚴病患者(CE患者组)和20例肝血管瘤患者(对照组)为研究对象,取手术中切除的肝脏组织,用Percoll法分离肝脏单个核细胞,实时荧光定量PCR分别检测CE患者组和对照组肝脏单个核细胞中TGF-β、 Smad3、 Smad7、 PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平。采用Spearman相关性分析方法分析感染组肝脏单个核细胞中Smad3 mRNA的相对表达水平与PU.1 mRNA的相对表达水平的相关性。在CE患者组肝脏单个核细胞中加入Smad3抑制剂SIS3进行体外干预(SIS3阻断组),另设PBS对照组,加入等量PBS,采用实时荧光定量PCR检测两组肝脏单个核细胞中PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平, ELISA检测细胞培养上清中IL-9水平。结果实时荧光定量PCR结果显示, CE患者组肝组织中单个核细胞的TGF-β、 Smad3、 PU.1和IL-9 mRNA相对表达水平分别为2.55±1.32、 2.26±1.35、 1.71±0.66和1.67±0.75,均高于对照组的1.54±0.76、 1.34±0.51、 1.27±0.62和1.01±0.50 (P 0.01或0.05); Smad7的相对表达水平为0.49±0.37,低于对照组的0.88±0.50 (P 0.01)。Spearman相关性分析结果显示, CE患者组肝脏单个核细胞中Smad3 mRNA的相对表达水平与PU.1 mRNA的相对表达水平呈正相关(r=0.397, P 0.05)。用SIS3阻断TGF-β/Smad信号通路后,肝脏单个核细胞中PU.1和IL-9 mRNA的相对表达水平为1.00±0.57和0.85±0.50,低于PBS对照组的1.46±0.64和1.32±0.72 (P 0.01)。ELISA检测结果显示,细胞培养上清中IL-9水平为(128.45±41.97) pg/ml,低于PBS对照组的(166.64±57.90) pg/ml (P 0.05)。结论细粒棘球蚴病患者肝脏组织中TGF-β、 Smad2、 Smad3、 PU.1和IL-9表达上调, TGF-β/Smad通路可能参与调控细粒棘球蚴感染中IL-9的表达。     

miR-27a在老年急性髓系白血病骨髓单个核细胞中表达及与预后的关系

目的探讨miR-27a在老年急性髓系白血病(AMI)患者骨髓单个核细胞中表达及与预后的关系。方法选取初治老年AMI患者95例,以行骨髓标本检查的非白血病老年人35例作为对照组,所有患者采取小剂量MA方案治疗,利用实时荧光定量PCR技术检测骨髓单个核细胞中miR-27a表达。所有患者均随访至2016年4月30日,以miR-27a相对表达量的P25值为界值,将患者分为低表达组(n=24)和高表达组(n=71),利用Kaplan-Meier法对miR-27a相对表达量对患者总体生存时间的影响进行分析。结果老年AMI患者骨髓单个核细胞中miR-27a相对表达量高于对照组,且单核系高于非单核系(P0.05);老年AMI患者骨髓单个核细胞中miR-27a相对表达量与年龄、细胞遗传学、FLT3-ITD基因、NPM1/FLT3-ITD基因、白细胞(WBC)分组、首疗程治疗效果和NCCN预后分组有关(P0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,低表达组患者中位总体生存时间15.6个月,高表达组中位总体生存时间9.3个月,Log Rank检验差异有统计学意义(χ2=14.488,P0.001)。结论 miR-27a在老年AMI患者骨髓单个核细胞中呈高表达,且与年龄、染色体核型、基因位点突变及患者预后有关,有望为老年AMI基因治疗及机制研究提供新的线索。     

老年性皮肤瘙痒T淋巴细胞因子平衡及安肤止痒湿敷方的疗效

目的探讨老年性皮肤瘙痒T淋巴细胞因子变化及相关机制,分析安肤止痒湿敷方的疗效。方法选取老年性皮肤瘙痒患者96例为研究组,另收集同期健康老年人50名为对照组。研究组根据患者住院号的奇偶数分为治疗A组(49例)和治疗B组(47例)。治疗前分离研究组和对照组外周血单个核细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、干扰素(IFN)-γ]水平,RT-PCR和Western印迹分别检测细胞中淋巴细胞功能相关抗原(LFA)-1、细胞间黏附分子(ICAM)-1 mRNA和蛋白表达;并采用改良的瘙痒症状评分表评估瘙痒症状严重程度。治疗A组口服氯雷他定常规治疗,治疗B组在此基础上加用安肤止痒湿敷方,连续治疗1个月后比较两组T淋巴细胞因子水平。结果治疗前研究组外周血单个核细胞中IL-2、IFN-γ水平明显高于对照组,IL-4、IL-10水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);研究组LFA-1、ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。Pearson分析显示,IL-2、IFN-γ与症状评分呈正相关,IL-4与症状评分呈负相关(P0.05)。治疗1个月后,治疗A组和治疗B组IL-2、IFN-γ水平明显低于治疗前,IL-4、IL-10水平明显高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05);且治疗B组改善程度明显优于治疗A组(P0.05)。结论 LFA-1、ICAM-1表达上调可能介导了老年性皮肤瘙痒患者T淋巴细胞因子失衡;而安肤止痒湿敷方可通过纠正T淋巴细胞因子失衡达到治疗目的。     

硝酸甘油静脉滴注治疗高血压急症的疗效及对外周血炎症因子的影响

【摘要】目的:探讨硝酸甘油静脉滴注治疗高血压急症的疗效，并探讨其对患者外周血炎症因子的影响。方法: 选择2016年1月-12月我院收治的80例高血压急症患者，随机分为对照组（n=40）与研究组（n=40），对照组行硝普钠治疗，研究组行硝酸甘油静脉滴注治疗，观察两组患者临床疗效及不良反应，比较分析两组患者治疗前后外周血单个核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA、白介素-8（IL-8）mRNA相对表达量变化及血清TNF-α、IL-8炎症因子水平变化。结果: 研究组患者治疗总有效率为95%，明显高于对照组治疗总有效率85%（P﹤0.05）。 治疗前，两组患者收缩压、舒张压及心率比较无明显差异（P＞0.05）; 治疗60 min末,研究组患者收缩压、舒张压及心率明显优于对照组（P﹤0.05）。治疗前，两组外周血单个核细胞TNF-α mRNA与IL-8 mRNA相对表达量比较无明显差异（P＞0.05）；治疗后，研究组外周血单个核细胞TNF-α mRNA与IL-8 mRNA相对表达量明显低于对照组（P＜0.05）。治疗前，两组患者血清TNF-α与IL-8水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，研究组患者血清TNF-α与IL-8水平均明显低于对照组（P＜0.05）。两组不良反应发生率比较无明显差异（P＞0.05）。结论: 与硝普钠比较，硝酸甘油静脉滴注治疗高血压急症的效果更显著，不良反应更少，可有效降低外周血炎症因子水平，值得应用及推广。     

哮喘患者外周血单个核细胞NOD2 mRNA表达的研究

目的探讨外周单个核细胞NOD2 mRNA表达在哮喘发病机制中的作用以及与气道炎症的关系。方法将60例哮喘患者分为急性发作组和慢性持续期组,每组30人,经治疗症状体征好转后,作为临床缓解期组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测哮喘各组及健康对照组30人外周血单个核细胞核内NOD2 mRNA的表达量及血清IL-6的含量。结果急性发作期哮喘患者的NOD2 mRNA的表达量及IL-6的含量均明显高于慢性持续期哮喘患者(P0.05)。急性发作期和慢性持续期哮喘患者的NOD2 mRNA的及IL-6的表达,均明显高于健康对照组(P0.05)。急性发作期和慢性持续期哮喘患者经治疗后的NOD2 mRNA及IL-6的表达较各自治疗前水平明显降低,且均高于健康对照组水平,具有统计学意义(P0.05)。哮喘患者外周血单个核细胞核内NOD2 mRNA表达随血清IL-6含量呈正相关,相关系数r=0.85,P0.05。结论 NOD2和IL-6都参与了哮喘的气道炎症反应,且与哮喘患者的严度程度呈正相关。     

非小细胞肺癌患者癌组织、外周血中hnRNP A2/B1 mRNA的表达变化

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织与外周血中异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)mR-NA表达变化,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR法检测57例NSCLC患者(肺癌组)癌组织与外周血单个核细胞中的hnRNP A2/B1 mRNA,以30例肺部良性病变患者(良性组)为对照。结果肺癌组癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA分别为(0.82±0.49)、(0.69±0.48)μg/μL,良性组分别为(0.16±0.25)、(0.13±0.20)μg/μL;两组比较,P均<0.05。NSCLC患者TNM分期Ⅰ～Ⅱ期者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA分别为(0.68±0.45)、(0.57±0.47)μg/μL,均低于Ⅲ～Ⅳ期的(0.93±0.49)、(0.78±0.4)μg/μL,P均<0.05。NSCLC患者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA的表达呈正相关(r=0.941,P<0.05)。结论 NSCLC患者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA表达增加,且二者呈正相关关系;外周血单个核细胞hnRNP A2/BmRNA检测有助于NSCLC的诊断及病理分期。     

急性冠脉综合征患者血清骨髓相关蛋白水平、外周血单个核细胞Toll样受体4表达情况及其相关性研究

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清骨髓相关蛋白(MRP)水平、外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)表达情况,并分析二者的相关性。方法选取2015年3月—2016年3月河北工程大学附属医院心内科收治的ACS患者50例,其中急性心肌梗死(AMI)25例(AMI组)、不稳定型心绞痛(UAP)25例(UAP组);另选取同期稳定型心绞痛(SAP)患者20例作为SAP组,体检健康者24例作为对照组。比较4组受试者血压、血糖相关指标、血脂指标、血清MRP水平及外周血单个核细胞TLR4阳性率,ACS患者血清MRP水平与外周血单个核细胞TLR4阳性率的相关性分析采用Pearson相关分析。结果 (1)4组受试者舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)比较,差异无统计学意义(P0.05);UAP组和AMI组患者收缩压、TG高于对照组和SAP组(P0.05)。(2)UAP组和AMI组患者血清MRP水平和外周血单个核细胞TLR4阳性率高于对照组和SAP组(P0.05);对照组与SAP组、UAP组与AMI组受试者血清MRP水平和外周血单个核细胞TLR4阳性率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(3)Pearson相关分析结果显示,血清MRP水平与ACS患者外周血单个核细胞TLR4阳性率呈正相关(r=0.796,P0.01)。结论 ACS患者血清MRP水平及外周血单个核细胞TLR4表达升高,且二者呈正相关,推测MRP可能通过激活TLR4而参与ACS的发生、发展。     

多发性骨髓瘤患者PTEN、FAK的表达及其与临床分期、髓外浸润的关系

目的 检测多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓瘤细胞中PTEN及FAK mRNA及其蛋白水平变化,分析两者的关系及与MM临床分期、髓外浸润的关系,以探讨二者在MM发病中的可能作用.方法 收集55例MM患者与20个缺铁性贫血患者骨髓单个核细胞,应用CD138抗体将MM细胞进行纯化.实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测PTEN、FAK mRNA表达,Western印迹法测定其蛋白表达水平.结果 ①55例MM患者PTEN和FAK mRNA表达水平分别为0.723±0.059和1.072±0.626,对照组分别为0.984±0.359和0.433±0.240,二组相比有显著差异(P ＜0.05,P＜0.01).Spearman双变量相关分析结果显示,MM患者中PTEN mRNA与FAK mRNA表达水平呈显著性负相关(r=-0.560,P＜0.01).②按DurieSalmon分期将MM患者分为两组.Ⅰ+Ⅱ期MM患者组15例,PTEN和FAK mRNA表达水平分别为0.909±0.429和0.726±0.317.Ⅲ期MM患者组40例,PTEN和FAK mRNA表达水平分别为0.653 ±0.347和1.224±0.667,二组比较有显著差异(P ＜0.05,P＜0.01).③按是否伴有髓外浸润将所有MM患者分为两组.伴髓外浸润组12例,PTEN mRNA表达水平为0.656±0.296,伴髓外浸润患者共43例,PTEN mRNA表达水平为(0.742±0.407),二组相比差异不显著(P＞0.05).伴有髓外浸润组FAK mRNA表达水平为1.791±0.618,无髓外浸润组为0.878±0.468,二组相比差异显著(P＜0.01).④选择12例Ⅲ期MM患者和6例对照患者行Western印迹检测,其中无髓外浸润MM患者6例,伴髓外浸润患者6例.12例MM患者PTEN蛋白平均表达水平为0.081±0.087,与对照组(0.332±0.119)相比差异显著(P＜0.01);T-FAK蛋白平均表达水平为0.257±0.119,与对照组(0.106±0.090)比较差异显著(0.01 ＜P＜0.05);p-FAK蛋白在6份对照骨髓中均未测出,11例患者均有不同程度的表达,平均水平为0.082±0.040.二组阳性率比较差异显著(x2=14.14,P＜0.01).⑤无髓外浸润的6例MM患者和伴髓外浸润的6例MM患者PTEN蛋白平均表达水平分别为0.093±0.091和0.069±0.089,T-FAK蛋白平均表达水平分别为0.257±0.126和0.257±0.123,p-FAK蛋白的平均表达水平分别为0.053±0.142和0.097±0.038,p-FAK蛋白平均表达水平在两组之间有显著差异(P＜0.05),PTEN和T-FAK在两组之间无明显差异(P＞0.05).结论 PTEN和FAK mRNA以及蛋白表达水平与MM疾病的发生、进展密切相关.PTEN表达减少是引起p-FAK表达增高的关键因素之一.     

哮喘患者外周血单个核细胞TLR4mRNA及NF-_κBmRNA的表达及临床意义

目的检测外周血单个核细胞TLR4mRNA及NF-_κBmRNA在哮喘患者中的表达,探讨其在哮喘发病机制中的作用以及临床意义。方法选取80例确诊哮喘患者,根据哮喘分级标准,分为急性发作组(A组)和慢性持续期组(B组),每组40人,经治疗症状体征好转后,分别作为临床缓解期组,选取同期健康体检者40例作为健康对照组(C组),应用RT-PCR法检测PBMC中TLR4mRNA及NF-_κBmRNA的表达,应用ELISA法检测血清IL-6的表达水平。结果 A组患者的TLR4mRNA及NF-_κBmRNA的水平及IL-6表达均明显高于B组(P0.05)。A组和B组患者的TLR4mRNA及NF-_κBmRNA的水平及IL-6的表达均明显高于C组(P0.05)。A组和B组哮喘患者经治疗后的TLR4mRNA及NF-_κBmRNA的水平及IL-6表达明显低于治疗前,且高于C组(P0.05)。哮喘患者TLR4mRNA、NF-_κBmRNA及IL-6三者的表达相成正相关(P0.05)。结论 TLR4mRNA、NF-_κBmRNA及IL-6共同参与了哮喘的发生和发展,三者可能存在于同一传导通路。     

急性胰腺炎患者单个核细胞中p38MAPK、磷酸化p38MAPK水平变化及意义

目的探讨急性胰腺炎(AP)患者外周血单个核细胞p38MAPK基因表达及其与疾病严重程度的关系。方法采用实时荧光PCR法检测29例轻型胰腺炎(MAP)患者(MAP组)、23例重症胰腺炎(SAP)患者(SAP组)及21例查体健康者(对照组)外周血单个核细胞(PBMC)p38MAPK mRNA表达水平,Western blot法检测PBMCp38MAPK和磷酸化p38MAPK(P-p38MAPK)蛋白表达水平。结果 p38MAPK mRNA表达水平:SAP组明显高于对照组(P<0.05),MAP组与对照组比较无显著差异;p38MAPK总蛋白量SAP组明显高于对照组(P<0.05),MAP组与对照组比较无显著差异;P-p38MAPK水平SAP组明显高于对照组和MAP组(P<0.01、<0.05);MAP组明显高于对照组(P<0.05)。结论 p38MAPK磷酸化水平在AP患者PBMC中显著升高,并与AP严重程度呈正相关。     

B细胞活化因子/增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中的表达特点和临床意义

目的:研究B细胞活化因子(BAFF)和增殖诱导配体(APRIL)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMCs)中mRNA表达特点及血浆中蛋白表达水平,并分析血浆中BAFF和APRIL水平与MM临床肿瘤负荷指标的相关性,初步探讨BAFF和APRIL对MM的发生、发展及预后的意义.方法:收集25例MM患者及10例正常对照的骨髓标本,获取BMMCs,并同步收取血浆.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测BMMCs中BAFF和APRIL mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者血浆中BAFF和A-PRIL的含量;使用相同方法,检测MM细胞株KM3中BAFF及APRIL的基因及蛋白表达特点.结果:①BAFF和APRIL基因和蛋白在MM组中表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);②BAFF和APRIL基因和蛋白在MM初治组及未缓解组中表达升高,与缓解组比较差异有统计学意义(P<0.05),初治组与未缓解组比较差异无统计学意义;③BAFF和APRIL蛋白水平与患者外周血中ALB呈负相关(P<0.05),与外周血中β2微球蛋白(β3-MG)、免疫球蛋白(Ig)浓度及骨髓中浆细胞百分比均呈正相关(均P<0.05),MM血浆中BAFF和APRIL浓度之间呈正相关(P<0.01).结论:MM中BAFF和APRIL的基因及蛋白表达升高,MM组内初治组、未缓解组均高于缓解组,血浆中BAFF和APRIL含量与MM肿瘤负荷呈正相关.BAFF及APRIL的表达特点可能与MM的发生、发展有关,可作为评判MM预后的新指标.     

乙酰肝素酶在白血病细胞中的表达

目的:观察乙酰肝素酶(HPA)在不同类型白血病细胞中的表达。方法:研究组为白血病患者53例,对照组为缺铁性贫血患者20例。采用Western blotting方法检测骨髓单个核细胞HPA蛋白表达,比较研究组与对照组、研究组内急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病、初发急性白血病与慢性白血病HPA蛋白表达差异。结果:研究组患者骨髓中单个核细胞HPA蛋白表达与对照组比较均显著升高(均P0.05)。研究组内比较,急性髓系白血病HPA蛋白表达显著高于急性淋巴细胞白血病(P0.05);初发急性白血病骨髓中单个核细胞HPA蛋白表达显著高于慢性白血病组(P0.05)。结论:白血病细胞HPA蛋白高表达;不同类型白血病表达水平不同,急性白血病,尤其是急性髓系白血病表达更加明显。     

鸟苷酸结合蛋白5基因在老年肺结核患者外周血单个核细胞中的表达

目的探讨鸟苷酸结合蛋白(GBP)5基因在老年肺结核患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义。方法选择浙江金华广福肿瘤医院2015年1月至2016年12月老年初治肺结核患者80例作为肺结核组,健康体检者80例作为对照组。肺结核组给予标准化抗结核方案(2HRZE/4HR)治疗。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定外周血单个核细胞中GBP5表达量。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平。结果肺结核组外周血单个核细胞中GBP5表达量显著高于对照组(P0.05)。肺结核组血清TNF-α、IL-6水平显著高于对照组(P0.05)。外周血单个核细胞中GBP5诊断老年肺结核的受试者工作特征(ROC)曲线下面积AUC为0.886(95%CI:0.778～0.964,P=0.000),灵敏性为67.83%,特异性为92.75%。老年肺结核患者外周血单个核细胞中GBP5与血清TNF-α、IL-6水平均呈正相关(P0.05)。老年肺结核患者治疗后外周血单个核细胞中GBP5表达量明显低于治疗前(P0.05)。结论老年肺结核患者外周血单个核细胞中GBP5表达量升高,与血清炎性细胞因子关系密切,在其诊断及疗效评估中具有重要价值。     

外周血单个核细胞干扰素刺激基因表达水平与慢性乙型肝炎HBV复制的关系

目的研究外周血单个核细胞干扰素刺激基因(STING)表达水平与慢性乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系。方法纳入2016年12月至2018年12月于我院收治的68例慢性乙型肝炎患者为观察组,另选取同期我院收治的54例健康体检者为正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR),检测以上对象STING mRNA及干扰素基因α-干扰素(IFN-α)mRNA、β-干扰素(IFN-β)mRNA相对表达量并进行比较。分析慢性乙型肝炎患者不同乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)载量与STING及上述干扰素基因相对表达量的关系,并观察患者STING mRNA与HBV DNA载量及上述干扰素基因相对表达量的相关性。结果观察组STING mRNA、IFN-αmRNA、IFN-βmRNA相对表达量显著高于正常对照组(P0.05)。慢性乙型肝炎患者HBV DNA载量10~6组、10~5组、10~4组STING mRNA相对表达量均显著高于HBV DNA载量≤10~4组(P0.05)。慢性乙型肝炎患者STING mRNA相对表达量与HBV DNA载量呈弱相关性(r=0.340,P=0.000),与IFN-αmRNA、IFN-βmRNA相对表达量均呈正相关(r=0.517、0.511,P=0.000、0.000)。结论慢性乙型肝炎患者机体内STING表达升高,具有干扰HBV转录复制作用,临床上应引起足够重视。     

uPA和uPAR在老年急性髓系白血病中治疗前后表达的变化

目的 观察老年急性髓系白血病患者治疗前后骨髓单个核细胞尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)及血浆尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)水平表达的变化.方法 应用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测60例老年急性髓细胞白血病患者(包括M1 4例,M2 15例,M3 13例,M4 15例,M5 13例)uPAR(CD87)及uPA表达情况,将治疗前患者定义为治疗前组,治疗后达完全缓解的患者定义为治疗后组,并分析两组表达的差异.结果 老年急性髓系白血病患者血浆中uPA水平和骨髓单个核细胞uPAR水平治疗前高于治疗后(P＜0.05);Pearson相关分析显示治疗前后uPA表达水平及uPAR水平之间存在正相关性(治疗前r1=0.874,治疗后r2=0.943;P ＜0.05).结论 老年急性髓细胞白血病治疗前uPAR(CD87)及uPA表达高于治疗后,并且二者具有协同表达关系,联合检测对于老年急性髓系白血病的病情监控有指导意义.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞趋化因子受体4、5 mRNA的表达

目的探讨趋化因子受体CCR4及CCR5在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,与疾病的相关性.方法收集93例确诊的SLE患者和30名正常对照,通过外周血单个核细胞(PBMC),提取RNA.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象CCR4、CCR5 mRNA表达水平.结果趋化因子受体CCR4 mRNA在SLE患者PBMC中的表达水平,患者组(1.57±0.70)与正常对照组(0.19±0.18)比较,两者差异有显著性(t=3.012,P=0.003);活动期(2.03±1.04)非活动期(0.26±0.19)及对照组比较,两者差异有显著性;非活动期与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).趋化因子受体CCR5 mRNA在PBMC中表达水平,患者组(0.56±0.44)与对照组(0.37±0.14)比较,两者差异有显著性(t=3.262,P=0.002);活动期(0.53±0.51)与非活动期(0.59±0.34)比较,差异无显著性(P＞0.05);活动期与对照组比较(t=2.039,P=0.045)及非活动期与对照组比较(t=3.461,P=0.001),两者差异有显著性.SLE患者组CCR4及CCR5 mRNA水平与疾病活动度评分关系CCR4 mRNA水平与SLEDAI(r=0.376,t=3.851,P=0.000)呈正相关.CCR5 mRNA水平与疾病的活动性(SLEDAI)(r=0.062,t=-0,589,P=0.557)不相关.结论CCR4 mRNA表达水平在患者组比对照组表达增高,活动期比对照组表达水平增高,与疾病的活动性(SLEDAI)呈正相关.CCR5 mRNA表达在患者组比对照组增高,差异有显著性,与SLEDAI不相关.     

中老年冠心病患者病情发展中Notch信号通路与Toll样受体4相互作用

目的 探讨中老年冠心病患者病情发展中Notch信号通路与Toll样受体(TLR)4相互作用。方法 选取中老年冠心病患者128例,根据病情分为心绞痛组86例,心肌梗死组42例;选取55例健康志愿者为正常对照组。分离外周血单个核细胞,CD14磁珠进一步分选CD14⁺单核细胞,使用Notch信号通路抑制剂DAPT、TLR4激动剂CRX-675进行干预培养,实时定量PCR检测Notch2、Notch3、TLR及人内皮抑素(HES)2、HES4 mRNA表达;酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度;Western印迹检测细胞中TIR结构域接头分子(TRIF)、抗髓样分化因子(MyD)88、磷酸化核因子(NF)-κB p65亚基表达水平。结果 心肌梗死组和心绞痛组外周血单个核细胞中Notch2 mRNA表达水平明显高于正常对照组,心肌梗死组明显高于心绞痛组(P<0.05)。心肌梗死组和心绞痛组外周血单个核细胞中TLR2、TLR4 mRNA表达水平明显高于正常对照组,心肌梗死组明显高于心绞痛组(P<0.05)。No...     

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白与多发性骨髓瘤骨病发展的关系

目的:研究糖皮质激素诱发的亮氨酸拉链蛋白(glucocorticoid induced leucine zipper,GILZ)在多发性骨髓瘤(MM)骨病发展中的作用。方法:收集MM患者抗凝血11例,利用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMCs),并将PBMCs分为地塞米松(DEX)干预组及空白对照组,相同条件培养48h。采用逆转录-酶联聚合反应(RT-PCR)法检测各组PBMCs中GILZ mRNA的表达;ELISA检测核因子κB受体激活剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)的表达。结果:在10-7 mol/L DEX刺激下,DEX刺激组MM患者PBMCs的GILZmRNA表达水平高于空白对照组(P<0.05);DEX刺激组OPG的表达量高于对照组(P<0.05),而RANKL的表达量诱导组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖皮质激素可有效上调GILZ基因表达;GILZ的高表达可以调节MM患者RANKL及OPG的平衡,具有改善溶骨性损害的作用。