肺大细胞癌中p53蛋白表达和p53基因突变及其与临床病理的关系

通过对肺大细胞癌（ＰＬＣＣ）ｐ５３蛋白表达及ｐ５３基因突变的检测，探讨其与ＰＬＣＣ的临床病理及预后的关系。应用免疫组织化学及原位分子杂交技术，通过观察６０例肺大细胞癌中ｐ５３蛋白表达及其基因突变的情况，显示：ｐ５３蛋白表达率４０％，原位杂交检测ｐ５３基因突变率为５３．３％（二者符合率７３．３％）。ｐ５３基因突变及蛋白表达与性别、年龄、吸烟史、组织类型、肿瘤大小及淋巴结转移无关，而与核分裂指数有关。原位杂交结果显示，ｐ５３基因突变阳性组患者预后较差。ｐ５３基因突变与肺大细胞癌的生长快速有关。ｐ５３基因突变可能是肺大细胞癌患者预后差的因素之一。     

RB患者及家庭成员Rb基因突变和患病风险的基因诊断及遗传咨询

目的建立Ｒｂ基因突变的基因诊断方法，正确估计视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者的预后及其家庭成员的患病风险。方法综合利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交、ＳＳＣＰ分析、直接ＤＮＡ序列测定等多种分子生物学技术作染色体单体型分析及Ｒｂ基因点突变的直接检测。结果７９个有Ｒｂ基因突变的ＲＢ家系中２５例先证者仅查出体细胞起源的Ｒｂ基因突变，其余５４例存在生殖细胞起源的Ｒｂ基因突变，其中３６例突变是新产生的，１５例突变由亲代遗传而来，此外，尚有３例Ｒｂ基因突变嵌合体。结论直接检测Ｒｂ基因点突变可不依赖于患者家庭成员ＲＢ发病情况的遗传背景资料诊断患者是否属于遗传型，正确估计患者的预后；并能在肿瘤发生前甚至产前检出Ｒｂ基因突变携带者，正确估计患病风险     

Marfan综合征FBN1基因突变研究进展

Marfan综合征是一种常染色体显性单基因遗传性结缔组织病，原纤蛋白基因突变是Marfan综合征的致病原因，本文将从蛋白、基因突变、基因突变与临床表型的关系及突变检测方法四方面概述Marfan综合征的分子生物学研究进展。     

分析5种结核杆菌耐药基因突变与耐药水平的关系

目的：分析5种结核杆菌（M.tb)耐药基因突变的情况，了解基因突变和耐药水平的关系。方法：134例临床分离株均做传统梯度药敏试验和聚合酶链反应－单链构象多态性I（PCR－SSCP）试验。结果：耐PZA(pncA),SM(rpsL),REP(rpoB),INH(katG),EMB(embB)基因突变率分别为42．7％、72％、78％、69％和43．9％，其中，上述高耐株基因突变率分别为70％、87．2％、93．4％、80％、43．9％。低耐株分别为12．5％、28．5％、45．4％、18．7％，EMB在低耐区无基因突变，结论：M.tb耐药基因变与耐药水平联系密切，多数M.tb耐药基因突变易发生在高耐药区，也有少数菌基因突变易发生在低耐药区。     

RB患者及家庭成员Rb基因突变和患病风险的基因诊断及遗传诊断

目的 建立Ｒｂ基因突变的基因诊断方法，正确估计视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者的预后及其家庭成员的患病风险，方法 综合利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交ＳＳＣＰ分析，直接ＤＮＡ序列测定等多种分子生物学技术染色体单体型分析及Ｒｂ基因点突变的直接检测。结果 ７９个有Ｒｂ基因突变的ＲＢ家系中２５例先证者双查出体细胞起源Ｒｂ基因突变，其余５４例存在生殖原Ｒｂ基因突变，其中３６例突变是新生物的，１５例突变由亲代遗传     

基因突变分析技术综述

基因突变分析是确定某一未知基因与某遗传病之间关系的关键步骤，也是临床上对病人进行基因诊断的重要手段，本对１９种基因突变分析技术进行了分类综述，特别地近几年发展起来的几种新技术进行了详细介绍，并讨论了毛细管电泳在基因突变检测中的应用。     

大肠癌K-ras和p53基因序列分析

目的 研究大肠癌变与K－ras和p53基因突变的关系。方法 采用PCR－DNA双链四色荧光单道测序方法对31例大肠癌组织、13例大肠息肉伴不典型增生、11例大肠癌术后并发的腹水标本进行K－ras基因外显子1、2和p53基因外显子5、6、7、8测序分析。结果 31例大肠癌组织中发现K－ras基因突变7例，p53基因突变11例，阳性率分别为22.58%和35．48％;13例大肠息肉伴不典型增生组织中发现p53基因突变2例；11例术后腹水标本中发现K-ras基因突变1例和p53基因突变2例，且突变与患者原包埋组织结果一致。但未发现这两个基因同时突变的病例。结论 大肠组织癌变与这两个基因突变密切相关，K－ras和p53基因突变可能为大肠癌变的早期事件；DNA测序方法是研究癌基因突变的最精确可靠的方法。     

胃癌及胃液中p53、ras基因突变与临床病理的关系

目的：探讨胃良性病变向恶性转化过程中p53、ras基因突变的规律，并分析胃癌无损伤基因检测的可行性。方法：应用PCR－SSCP及免疫组织化学方法对比研究。结果：异型增生p53基因突变率10％（3／30）、ras基因突变率10％（3／30）、ras基因突变率16．7％（5／30）（二者总突变率26．7％）；早期胃癌p53基因突变率35％（7／20）、ras基因突变率60％（12／20）（二者总突变率85％，其中2例重复突变）； 中晚期胃癌p53基因突变率60％（18／30）、ras基因突变率43．3％（13／30）（二者总突变率90％，其中4例重复突变）；胃息肉ras基因突变仅1／10。30例胃溃疡边缘正常黏膜均未发现p53、ras基因突变。p53基因突变的25例胃癌的胃液中其相应的突变率32％（8／25）。19例胃癌患者的胃液中9例有ras基因突变47．1％（9／19）。异型增生p53蛋白过度表达阳性率13．3％（4／30),p^21ras蛋白阳性率16．7％（5／30）。胃癌p53蛋白阳性率56％（28／50），p^21ras蛋白阳性率60％（30／50）。正常胃黏膜上皮、溃疡边缘正常黏膜及胃息肉均呈p53及ras蛋白阴性表达。结论：胃癌的发生发展与癌基因ras与抑癌基因p53的突变有关，且两种基因同时检测，可覆盖绝大多数胃癌病例，提高了本项技术的可靠性，提供了胃癌无损伤基因检测的可行性的实验证据。     

基因突变分析技术综述

基因突变分析是确定某一未知基因与某遗传病之间关系的关键步骤，也是临床上对病人进行基因诊断的重要手段，本文对１９种基因突变分析技术进行了分类综述，特别对近几年发展起来的几种新技术进行了详细介绍，并讨论了毛细管电泳在基因突变检测中的应用     

p53基因突变与食管贲门多源癌的相关性

目的 探讨食管贲门双源癌组织p53基因突变的特征及其与p53蛋白表达的关系。方法 采用显微切割、PCR、DNA测序和免疫组化ABC法，分析4例食管贲门多源癌p53基因突变和蛋白表达状况。结果 4例食管贲门双源癌中，1例食管鳞癌和贲门腺癌同时发生p53基因突变，并均发生第7外显子231、232密码子的点突变和225、232～233、234密码子的缺失/插入改变。食管鳞癌p53基因突变率为50％(2／4)，贲门腺癌为75％(3／4)。所有检测到的突变均发生在第7和8外显子。食管癌和贲门癌分别有1例p53蛋白阴性表达的患者检测到p53基因突变，食管癌中1例p53蛋白阳性表达患者未检测到基因突变。结论 同一个体食管鳞癌和贲门腺癌组织同时发生相似位点的p53基因突变，提示二者具有相似的发病因素和分子机制，为进一步揭示林州地区相似的食管／贲门癌区域分布特征提供了重要的理论依据和线索。     

单纯型大疱性表皮松解症分子遗传学研究进展

单纯型大疱性表皮松解症是一种常染色体遗传病，主要由角蛋白5和14基因突变所致。分子生物学技术的不断发展，使人们能对基因突变后表皮细胞角蛋白中间丝结构与功能的改变，以及基因型与表型关系的研究不断深入，此外在伴肌营养不良型患发现网蛋白基因突变，证实和此病有关。建立小鼠动物模型不仅有助于对发病机制的研究，更对基因治疗具有指导意义。     

人巨细胞病毒感染的霍奇金淋巴瘤中p53基因突变分析

目的：检测人巨细胞病毒（HCMV）感染的霍奇金淋巴瘤（HL）中是否存在p53基因突变热点区的基因突变。方法：从经原位杂交、免疫组化、显微切割等方法证实存在人巨细胞病毒感染的霍奇金淋巴瘤石蜡标本中提取DNA，采用PCR－SSCP和核酸测序方法对p53基因突变热点区的外显子进行基因突变检测。结果：应用p53外显子5、6、7、8的相应引物，对10例HCMV阳性的HL组织中DNA进行PCR扩增，产物经电泳检测，分别扩增出特异的条带，SSCP分析未见异常的迁移带，ex-on-8外显子核酸测序未见有碱基突变。结论：p53基因热点突变区的基因突变在HCMV阳性的HL中可能是不常见的。     

脂蛋白脂肪酶遗传缺陷的分子生物学基础

脂蛋白脂肪酶缺陷是基因突变导致酶功能异常所致的遗传性疾病。本文综述了该酶的分子特征，基因构成，基因突变对酶结构与功能的影响等方面的研究进展。     

离子通道基因与特发性癫痫

癫痫尤其是特发性癫痫的病因和发病机制到现在尚不是很清楚，近年的研究发现部分特发性癫痫的发病与离子通道的基因突变密切相关。本文主要介绍钙离子通道、钠离子通道和钾离子通道的结构组成、各亚基的分型、基因定位、通道基因突变可导致的疾病，主要介绍各离子通道基因突变与特发性癫痫关系。     

ApoE/LDLR双基因突变小鼠肝脏差异表达蛋白组研究

目的：分析脂代谢相关双基因突变(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠肝脏蛋白质表达特点，研究差异表达蛋白与基因突变小鼠血脂代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。 方法: 应用双向电泳及质谱技术对5周龄双基因突变和野生型小鼠肝组织差异蛋白进行比较研究。结果: 双基因突变和野生型小鼠肝脏中分别检测到（928±15）和（1 017±50）个蛋白点（n=3），两者之间的平均匹配率分别为78.7%和83.2%。双基因突变小鼠有108个蛋白点未能与野生型小鼠匹配，相差5倍以上的上调点和下调点分别为10个和45个，取其中6个点做质谱分析，鉴定为endoplasmin precursor,acidic leucin-rich nuclear phosphoprotein 32 family member A,serotransferrin precursor,stress-70 protein precursor,fibronectin precursor,complement C3 precursor,fibrinogen gamma polypeptide 7种蛋白质。 结论: 双基因突变小鼠与野生型小鼠的肝脏蛋白表达谱有明显差异，推测这些蛋白在脂代谢相关双基因突变引发的小鼠血脂代谢紊乱在动脉粥样硬化的发生发展中可能发挥重要作用。     

聚合酶链反应检测胃癌组织K—ras基因突变60例分析

目的：了解胃癌Ｋ－ｒａｓ基因突变情况及意义。方法；病理确诊的胃癌组织６０例，蛋白酶Ｋ法裂解，ＰＣＲ法扩增Ｋ－ｒａｓ基因密码子１２。结果：胃癌组织Ｋ－ｒａｓ基因突变率８．３３％，但胃上１／３部位的胃癌组织中，Ｋ－ｒａｓ基因突变率（２１．０５％）比胃其余部位显著高（Ｐ＜０．０５）。结论：Ｋ－ｒａｓ基因突变与否对胃癌的诊治、预后未见明显相关，突变率与病灶所处部位相关可能反映癌变的机理不同。     

应用PCR产物直接检测载脂蛋白基因突变

本文介绍了载脂蛋白研究领域的又一进展，应用ＰＣＲ产物直接电泳检测载脂蛋白基因突变，这种方法简便易行，只需扩增特定的染色体ＤＮＡ片段后直接电泳便可检测基因突变，不需使用特异的探针及杂交。     

应用PCR产物直接检测载脂蛋白基因突变

本文介绍了载脂蛋白研究领域的又一进展，应用ＰＣＲ产物直接电泳检测载脂蛋白基因突变，这种方法简便易行，只需扩增特定的染色体ＤＮＡ片段后直接电泳可检测基因突变，不需使用特异的探针及杂交。     

低密度脂蛋白受体基因与家族性高胆固醇血症

低密度脂蛋白受体基因突变可导致家族性高胆固醇血ＦＨ是一种多基因遗传病，并且受环境因素的影响，本文重点讨论ＬＤＬＲ基因突变与家族性高胆固醇血症的关系。     

p53基因突变及其蛋白表达与脑胶质瘤

ｐ５３基因突变是人类肿瘤中最常见的突发之一，胶质瘤约有１／３发生ｐ５３基因突变。通过对胶质瘤ｐ５３基因突变和蛋白表达的研究，提出了多形性胶质母细胞瘤的三种不同起源方式，发现ｐ５３蛋白表达在脑胶质瘤与反应性胶质增生的鉴别诊断中有一定的作用，但多数资料的研究结果提示ｐ５３蛋白表达对脑胶质瘤患者的预后判断无意义。