马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内IL-1β的影响

目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内IL-1β的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯（coriaria lactone，CL）激活的星形胶质细胞条件培养液（astrocytic conditioned medium，ACM）注射入正常SD大鼠侧脑室，观察大鼠的行为变化，运用免疫组织化学及放射免疫分析的方法，观察大脑皮质、海马区域内白细胞介素1β（IL-1β）免疫反应的变化及脑组织匀浆、脑脊液内IL-1β含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30min出现癫痫行为，2h恢复正常；免疫组织化学显示：ACM作用后2h，IL-1β免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值明显增加（均P〈O．05），12h恢复正常水平；放射免疫分析显示：ACM作用后2h大脑皮质、海马IL-1β含量均开始增加，4h达高峰（P〈0．05），脑脊液中IL-1β含量则在ACM作用后2h即达到高峰。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可增强大鼠脑内IL-1β的表达，并导致痫性发作。     

杏仁核注射Aβ_(1-42)大鼠脑内星形胶质细胞形态学变化

目的　探讨Aβ1-42 诱导模拟人类Alzheimer’s病 (AD)的大鼠病理模型中星形胶质细胞形态学变化及其在AD中的作用机制。方法　双侧杏仁核内注射 β-淀粉样多肽 1～ 4 2片段 (Aβ1-42 )制作大鼠AD模型 ,注射一周后采用GFAP免疫组化染色分析大鼠海马GFAP的表达。结果　杏仁核内注射Aβ1-42 后海马区出现星形胶质细胞增生、肥大、数目明显多于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　AD模型神经元损伤、死亡与Aβ神经毒性直接相关 ,反应性星形胶质细胞参与Aβ导致神经元细胞毒性损伤作用。     

烟碱对阿尔茨海默病大鼠海马小胶质细胞活性的影响及意义

目的探讨烟碱对β-淀粉样蛋白（AS）所致小胶质细胞活性的影响。方法通过Aβ25-35注射大鼠海马区建立阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）大鼠模型，用免疫组化、ELISA方法观察烟碱AD组和AD组大鼠海马部位小胶质细胞及炎性细胞因子IL-1β、IL-6变化。结果烟碱AD组大鼠在Morris水迷宫试验中显示学习记忆能力比AD组增强。AD组大鼠海马小胶质细胞数及海马组织IL-1β、IL-6的含量较烟碱AD组大鼠明显增多。结论烟碱具有抑制A0所致小胶质细胞炎性反应，改善认知功能作用。     

转化生长因子-β1对新生大鼠星形胶质细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究转化生长因子;GAAB2;β1;(TGF;GAAB2;β1)对新生大鼠大脑皮层星形胶质细胞表达结缔组织生长因子(CTGF) 的影响.方法:体外培养的新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞分为对照组:无血清培养基(FSM) 培养; 实验组:分别用含1 μg /L,2 μg /L,4 μg /L TGF-β1的FSM培养,24 h后,分别用RT-PCR和Western Blot检测2组细胞中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果:对照组CTGF mRNA和蛋白表达均为阴性;实验组CTGF mRNA和蛋白表达皆呈阳性,且随着TGF-β1质量浓度的增加,2者的表达量有增高的趋势(F=80.889和200.300,P均＜0.01).结论:TGF-β1 能上调星形胶质细胞中CTGF的表达.     

Alzheimer病与星形胶质细胞分化及其相关基因研究进展

阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)是中枢神经系统一种常见的退行性疾病 ,是老年前期和老年期痴呆的最主要原因 ,占痴呆综合征的 50 %～ 60 %。以全脑性萎缩、老年斑(ｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅ,ＳＰ)、神经元纤维缠结 (ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔａｎｇｌｅ,ＮＦＴ)、神经元空泡样变和缺失为病理特征。临床表现主要为进行性记忆和认知障碍、言语障碍、精神运动异常等症状 ,查体一般不能发现明确定位体征。自从本世纪初ＡｌｏｉｓＡｉｚｈｅｉ ｍｅｒ首例报道进行性痴呆患者 ,并以Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病命名…     

静息态和活化态星形胶质细胞ASICs亚细胞分布研究

目的:探讨酸敏感离子通道(acid sensitive ion channels,ASICs)在大鼠静息态和活化态星形胶质细胞亚细胞分布变化及调控。方法:取大鼠静息态和活化态星形胶质细胞,通过应用免疫荧光、全细胞膜片钳和Western Blot等技术,观察ASICs在静息态和活化态星形胶质细胞亚细胞分布变化及可能机制。结果:(1)ASICs在静息态和活化态星形胶质细胞分别主要分布于细胞核或胞质/胞膜。以ASIC1为例进行分析,发现ASIC1胞核荧光密度在静息态和活化态星形胶质细胞分别为(54.32±1.29)(n=36)和(22.27±0.96)(n=34),而ASIC1胞质/胞膜荧光密度在这两种星形胶质细胞分别为(6.14±0.39)(n=38)和(37.45±1.31)(n=36),这种分布差异在功能学上表现为ASIC1电流的增加,即ASIC电流由静息态的10%增加到活化态的30%;(2)静息态和活化态星形胶质细胞之间ASICs蛋白表达总量差异无统计学意义;(3)活化态星形胶质细胞炎症指示蛋白诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达较静息态星形胶质细胞显著增多;用小胶质细胞原性炎症因子白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)刺激静息态星形胶质细胞,可使静息态星形胶质细胞ASIC1从胞核转向胞质/胞膜。结论:ASICs在静息态星形胶质细胞主要分布于胞核,而在活化态星形胶质细胞主要分布于胞质/胞膜;IL-1β可能调控星形胶质细胞ASICs由胞核转移至胞质/胞膜。     

星形胶质细胞在AD的发病机制及治疗中的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年痴呆症最常见的病因,也是第五大最常见的死亡原因.病理上表现为β淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)的堆积、神经原纤维缠结形成、广泛的神经炎症、突触毒性、神经变性及脑功能障碍.而星形胶质细胞可调节神经递质、钙稳态,调节突触的形成、成熟,还可通过神经血管单...     

坐骨神经损伤诱导脊髓IL-1 mRNA的表达及其与星形胶质细胞、NOS阳性细胞的关系

目的 观察坐骨神经损伤不同时间脊髓内ＩＬ－１ ｍＲＮＡ表达及其与星形胶质细胞、ＮＯＳ阳性细胞间的关系。方法 采用坐骨神经切断所致大鼠脊髓前角运动神经元损伤模型,应用ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组织化学技术。结果 （１）ＩＬ－１在脊髓内的表达直接与坐骨神经损伤及时程密切相关,损伤３ｄ在受累脊髓节段出现的ＩＬ－１ ｍＲＮＡ的表达,损伤７ｄＩＬ－１表达明显,１４ｄ时表达仍然存在。（２）坐骨神经损伤后,脊髓受累节段     

烟碱对Alzheimer病大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨烟碱对Alzheimer病(AD)的预防治疗作用.方法 将Aβ25-35注射于大鼠海马部位,建立AD动物模型,通过Morris水迷宫实验,观察大鼠学习记忆功能的变化.结果 在定位航行实验中,烟碱AD组的潜伏期随训练天数的增加而逐渐缩短,AD组则无明显的变化.在空间探索实验中,烟碱AD组在平台象限游泳时间百分比和游泳距离百分均较AD组增加,差异显著(P＜0.01).结论 烟碱对Aβ25-35所致学习记忆障碍具有预防和治疗作用,其机制可能与烟碱促使神经递质释放有关.     

星形胶质细胞对脑损伤修复的影响

星形胶质细胞(astrocyte,AS)在中枢神经系统(CNS)中是始终伴随神经元生长发育的。AS在CNS中数量最多,是神经元数量的1 0～5 0倍。研究表明,AS在脑内的分布是很有规律的,有序性的排列有利于它们与神经元建立固定的位置关系和稳定的功能关系[1 ] 。AS与神经元和其他胶质细胞的联系方式是通过紧密连接来实现的,这种连接是细胞间信息和物质交流的关键结构。AS胞膜上含有大部分神经递质和神经肽的受体,这些受体与相应神经递质结合后可介导AS内的信息传递,细胞内的通讯是通过电压和配体门控离子通道完成的。近年来的研究发现星形胶质细胞…     

柴胡皂苷a对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的抑制作用

目的 研究柴胡皂苷a(SSa)对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的干预作用,为癫痫的中医药防治提供实验依据.方法 首先分离剥取SD大鼠(1～3 d)大脑海马.体外培养海马星形胶质细胞,经纯化鉴定后将其分为5组:a组(正常组)、b组(谷氨酸激活组)和c、d、e组(SSa药物干预组,分别为5、2.5、1.25 mg/L),经相应处理后,分别运用MTT法、流式细胞技术、Western-blotting测定星形胶质细胞数量及活性、细胞周期、星形胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达量,并分析比较各组星形胶质细胞激活情况.结果 与b组比较,MTT比色法检测结果显示SSa抑制了谷氨酸激活星形胶质细胞的增殖(P<0.05);流式细胞技术检测结果显示SSa阻滞了谷氨酸激活星形胶质细胞的分裂周期(P<0.05);Western-blotting检测结果显示SSa可抑制谷氨酸激活星形胶质细胞异常增加的GFAP表达量(P<0.05);与a组比较,3种检测结果均显示2.5 mg/L SSa对体外培养星形胶质细胞激活的抑制作用较强,并可维持其在正常范围(P>0.05).结论 SSa具有抑制谷氨酸激活体外培养星形胶质细胞的作用,其可能通过抑制星形胶质细胞的激活来发挥抗癫痫作用.     

Suppressive effects of melatonin on amyloid-beta-induced glial activation in rat hippocampus

BACKGROUND: Growing evidence indicates that activated glia, as a result of chronic inflammation, are associated with amyloid-beta peptide (Abeta) deposits in the brain of Alzheimer's disease (AD) patients. The purpose of the present study was to investigate, in vivo, the effects of melatonin on glia activation, which may contribute to improved learning and memory in amnesic rats induced by amyloid-beta peptide 25-35 (Abeta25-35). METHODS: We examined cognitive function using the Morris water maze test. Expression of interleukin 1alpha (IL-1alpha) or complement 1q (C1q) in rat hippocampal tissue was determined by immunohistochemistry. RESULTS: It was found that Abeta25-35 injected into rat hippocampus induced an impairment in learning and memory and a marked increase of positive glial cells expressing IL-1alpha and C1q in hippocampus, compared with the controls. This suggests that glial activation triggered by Abeta25-35 parallels the dysfunction of learning and memory. Melatonin, at doses of 0.01, 0.1, and 1 mg/kg (i.g. for 10 days), improved learning and memory of rats treated with Abeta25-35. Cells expressing IL-1alpha and C1q were significantly decreased in hippocampus by pretreatment with melatonin at doses of 0.1 mg/kg and 1 mg/kg, but not at the dose of 0.01 mg/kg. CONCLUSIONS: Our data indicate that melatonin inhibited expressions of proinflammatory factors, which may contribute to improvement of learning and memory function in AD.     

抗抑郁药物对抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞的作用

目的：探讨抗抑郁药物对抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞的作用及机制。方法：采用孤养与CUMS联合建立抑郁模型,旷场分析和液体消耗实验进行行为学观察。对抑郁模型进行氟西汀、噻奈普汀、生理盐水灌胃30天,GFAP免疫组化观察星型胶质细胞数量。结果：应激＋氟西汀组、应激＋噻奈普汀组与应激＋生理盐水组比较旷场分析、液体消耗试验及免疫组化图像分析均有显著性差异。结论：抗抑郁药物能促进抑郁模型大鼠海马星形胶质细胞增生,星形胶质细胞可能参与抑郁症的病理生理机制。     

溶血磷脂酸对在体海马星形胶质细胞增殖的影响

目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)对在体海马星形胶质细胞(AST)的影响.方法 在立体定向仪下向大鼠海马CA1区注射50μm LPA,在不同时间点(10 rnin、30 min、60 min、1d、3d、5d、7d、14d、21 d),采用免疫荧光标记法检测注射部位胶原纤维酸性蛋白(GFAP)含量并使用激光共聚焦扫描查看GFAP的分布情况.结果 LPA注射后,GFAP阳性细胞数显著增加,与PBS对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),并随时间延长,GFAP荧光强度逐渐增加,呈时间依赖性,至LPA注射后3周仍可见增加.结论 LPA可以促进大鼠海马AST增殖,时间至少可以持续3周.     

POPs活化星形胶质细胞的机制研究进展

持久性有机污染物(POPs)在环境中普遍存在,并通过食物链在生物体内蓄积,给人体造成极大的健康风险.近年来研究证实大部分POPs具有神经毒性.POPs可以影响神经元细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞的功能.星形胶质细胞是中枢神经系统中最丰富的细胞类型,在维持神经系统功能和诱导神经毒性中具有关键作用.该文概述了常见的几种PO...     

大鼠伏核注射甘丙肽对神经病理性痛的镇痛作用及其对星形胶质细胞活化的影响

目的 探讨神经病理性痛大鼠伏核注射甘丙肽的镇痛作用及其对星形胶质细胞活化的影响.方法 左侧坐骨神经结扎构建神经病理性痛大鼠模型,伏核注射甘丙肽,测定伤害性热刺激和压力刺激诱发的后爪缩爪潜伏期(HWL),观察甘丙肽的镇痛作用;Western bolt法检测星形胶质细胞的特异性标志物-胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,观察伏核注射甘丙肽对星形胶质细胞活化的影响.结果左侧坐骨神经结扎引起大鼠双侧HWL缩短,且伏核GFAP的表达增加;神经病理性痛大鼠伏核注射甘丙肽引起双侧HWL延长,GFAP的表达减少.结论伏核微量注射甘丙肽对神经病理性痛的镇痛作用可能通过抑制星形胶质细胞的活化来完成.     

外源性精胺对大鼠离体胸主动脉环的收缩作用

目的 观察外源性精胺对大鼠胸主动脉环张力的影响并初步探讨其可能机制.方法 采用离体血管环灌流方法,分别观察不同浓度外源性精胺对正常孵育以及无Ca2 、去内皮、去甲肾上腺素(NA)或60mmol/L KCl预处理、存在维拉帕米、加入咖啡因等条件下血管张力的影响.结果 内皮完整含Ca2 液中,精胺(50 μmol/L～5 mmol/L)对NA和高钾预处理的血管环,既元舒张作用,也不进一步引起收缩;内皮完整含Ca2 液中,外源性精胺在一定浓度范围内(50～200 μmol/L)呈浓度依赖性使血管收缩;在无Ca2 Krebs液中,精胺(200μmol/L)无缩血管作用;含Ca2 去内皮条件下,精胺(200μmol/L)对正常血管有收缩作用,但明显弱于内皮完整者;含Ca2 Krebs液预先加入维拉帕米,精胺(200μmol/L)对正常血管无作用;加入咖啡因引起血管短暂而快速收缩后,加入200μmol/L精胺缩血管效应降低;内皮完整含钙液加入200μmol/L精胺后,再加入30mmol/L咖啡因后,不进一步引起血管收缩.结论 外源性精胺在一定的浓度范围内呈浓度依赖性收缩血管平滑肌,其作用机制可能主要是与L-型钙通道开放来促进血管平滑肌外钙内流,并进一步诱导内钙释放有关.     

常压高浓度氧治疗对脑缺血-再灌注大鼠星形胶质细胞活性的影响

目的 观察常压高浓度氧治疗(normobaric hyperoxia, NBO)对脑缺血-再灌注大鼠星形胶质细胞活化的标志物——胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)以及缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)表达的影响,初步探讨其作用机制。方法 将健康成年雄性SD大鼠15只(280~320 g)采用数字表法随机分为假手术组(Sham)、正常氧浓度组(Normoxia)和NBO组,应用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血1.5 h 再灌注24 h。Sham组和Normoxia组术后呼吸普通空气,NBO 组于缺血后5 min至再灌注前呼吸100%常压氧气。采用免疫荧光染色和Western blotting检测方法,研究NBO治疗对脑缺血皮质和基底节区星形胶质细胞GFAP和Cx43表达的影响。结果 免疫荧光结果显示:与Normoxia组相比,NBO组缺血侧皮质GFAP阳性细胞数目明显减少,细胞突起减少、荧光强度减弱。Western blotting法分析结果显示:与Normoxia组相比,NBO组皮质和基底节区GFAP水平均有所降低,其中皮质著降低(P<0.05),表达变化与免疫荧光结果一致;与Sham组相比,Normoxia组缺血侧皮质和基底节区Cx43水平均有所降低,其中缺血侧皮质Cx43表达显著减少(P<0.01);与Normoxia组相比,NBO组缺血皮质Cx43蛋白显著升高(P<0.01),NBO组缺血基底节区Cx43蛋白水平差异无统计学意义。结论 NBO治疗可能通过调节缺血侧皮质缝隙连接蛋白Cx43的表达水平来抑制脑缺血星形胶质细胞过度活化,从而实现脑神经保护作用。     

雌激素对癫痫大鼠海马区胶质细胞增生和突触可塑性变化的影响

目的观察雌激素(ESTROGEN,E2)对戊四氮(PENTYLENETETRAZOL,PTZ)致痫大鼠海马区胶质细胞增生和突触可塑性变化的影响。方法实验动物分成正常对照组、PTZ致痫组、E2 PTZ致痫组和E2 TAMOXIFEN致痫组,采用PTZ慢性癫痫点燃模型,观察各实验分组大鼠行为学表现,并用免疫组化染色和计算机图像分析技术观察胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和突触素(SYNAPTOPHYSIN,P38)表达水平的改变。结果E2 PTZ致痫组大鼠癫痫发作时间较PTZ致痫组早,发作程度普遍较高;致痫各组均观察到突触素阳性染色数目增多和胶质细胞增生,以海马CA2、CA3区和齿状回门区较为明显,与正常对照组比较,有显著差异(P<0.01);E2 PTZ致痫组较PTZ致痫组和TAMOXIFEN干预致痫组亦有显著差异(P<0.01)。结论PTZ点燃的癫痫大鼠海马区发生突触可塑性改变和反应性星形胶质细胞增生,可能与异常放电回路形成,大脑兴奋性放电增加,最终诱发癫痫发作有关;星形胶质细胞衍生性雌激素可能在促进癫痫的发作并使这一改变更加明显中起到一定作用,而雌激素受体拮抗剂能部分抑制这种作用;提示雌激素与癫痫发作时突触形成及胶质细胞的增生间存在着一定的联系。     

严重烧伤对大鼠海马神经细胞自噬和神经胶质细胞反应的诱导作用

目的:观察严重烧伤诱发的大鼠大脑海马体神经细胞的改变,并探讨其可能的作用机制。方法:将20只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只。模型组大鼠用于制备烧伤模型。在造模结束1周内,观察2组大鼠的饮食、饮水等情况;HE和尼氏体染色观察大鼠海马体神经细胞病理组织形态学;免疫组织化学法检测海马神经胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元标志物微管相关蛋白2(MAP-2)、自噬标志物轻链3蛋白(LC3B)和Beclin 1的表达。结果:正常对照组大鼠进食、饮水正常;模型组大鼠烧伤后,短期内进食、饮水减少,萎靡少动。HE和尼氏体染色检测,正常对照组大鼠海马体无明显神经细胞损伤;模型组大鼠海马神经细胞水肿,核固缩,尼氏体溶解、紊乱。免疫组织化学法检测,模型组大鼠海马体神经细胞中GFAP、LC3B和Beclin 1表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),MAP-2的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05)。结论:大鼠严重烧伤可致海马神经细胞损伤,诱发神经胶质细胞反应,并启动神经细胞的过度自噬。