基于钙激活氯离子通道的Piezo1通道调节剂高通量筛选模型的构建

目的构建基于钙激活氯离子通道蛋白1(ANO1)的Piezo1调节剂高通量筛选模型。方法 RT-PCR和Western印迹法分别检测Fischer大鼠甲状腺上皮(FRT)细胞Piezo1 mRNA和蛋白表达。构建共表达增强型绿色荧光蛋白标记的ANO1(ANO1-EGFP)和黄色荧光蛋白双突变体(YFP-H148Q/I152L)的FRT细胞株(简称FRT模型细胞),倒置荧光显微镜检测ANO1-EGFP和YFP-H148Q/I152L在FRT模型细胞中的表达,加入ANO1激活剂离子霉素10μmol·L^-1,应用荧光淬灭动力学实验检测并计算FRT模型细胞相对荧光强度变化值。加入Piezo1调节剂Jedi1(200μmol·L^-1),Jedi2(150μmol·L^-1),Yoda1(20μmol·L^-1)和Gd³⁺(20μmol·L^-1),应用荧光淬灭动力学实验检测并计算FRT模型细胞相对荧光强度变化值。加入Piezo1激活剂Jedi1,Jedi2和Yoda1,按0...     

机械敏感性离子通道Piezo2的研究进展

Piezo2是将小核糖核酸干扰技术应用于小鼠Neuro2A细胞系而发现的一种新型机械力敏感非选择性阳离子通道。其对阳离子的渗透率为Ca²⁺>K⁺>Na⁺>Mg²⁺。它能够感受机械刺激并将其转化为电信号,参与轻触觉、本体感觉、机械性痛觉超敏、肿瘤血管生成等多种病理生理过程。该文现就Piezo2的结构、调节、功能等进行综述。     

电压门控钙离子通道药物研究进展

电压门控钙离子通道家族（VGCC）是细胞表面一类重要的信号转换器,它能够将膜电势转变成局部胞内钙离子瞬时变化,从而启动许多重要的生理活动,例如肌肉收缩、激素分泌、神经传递和基因表达。VGCC表达和功能的异常与高血压、心绞痛、心律失常、疼痛、癫痫和帕金森病等疾病的发生有很大关系。近年来,以VGCC为靶点的药物在临床上表现出良好的治疗效果和较小的不良反应,具有较好的应用前景。综述VGCC的结构、功能以及相关药物研究进展,以期为与VGCC相关的药物开发提供参考。     

双孔钾通道TREK-1中枢神经系统药理学研究进展

双孔钾离子通道(two-pore domain potassium channels, K₂P)是20世纪90年代发现的一类钾离子通道亚家族,其中TREK-1是研究最为广泛的一种K₂P亚型。TREK-1广泛存在于机体内,特别是在中枢神经系统中高表达,它的主要作用是控制细胞兴奋性并维持膜电位低于去极化阈值,因此参与调节多种生理和病理过程。TREK-1也是多种疾病潜在的药物作用靶标,很多已上市药物可影响TREK-1的功能,但目前缺少特异性的TREK-1调节剂和以TREK-1为靶点的药物。本文在介绍TREK-1的结构、分布以及调控的基础上,重点介绍近年来TREK-1在神经保护、癫痫、抑郁以及麻醉等方面的药理学研究进展和相关的TREK-1调节剂的研究现状。     

ATP敏感性钾通道的阻断剂与开放剂研究进展

ATP敏感性钾通道是高血压、心绞痛、糖尿病及缺血性脑损伤等多种疾病的治疗靶点之一。通过对调节KATP通道药物的选择性、可逆性、作用位点以及相互调节的研究，可以对一些临床用药进行重新评估，并指导开发高选择性的KATP通道阻断剂和开放剂。     

血管平滑肌ATP敏感性钾通道研究进展

ATP敏感性钾通道 (KATP)广泛存在于各类细胞和组织中 ,是药物作用的重要靶点。KATP是由内向整流钾通道Kir和磺酰脲类受体SUR亚基组成。与血管舒缩特性密切相关的是SUR2B/Kir6 1,电导值小 ,对ATP的抑制作用不敏感 ,需要有NDP才能被开放 ,故这类血管平滑肌KATP又被称为NDP依赖性钾通道。内源性和外源性的很多因子引起的血管舒缩反应与血管平滑肌上的KATP有关 ,此信号途径与PKA、PKC等磷酸化激酶有密切联系。不同血管对钾通道开放剂(potassiumchannelopeners,KCO)的反应有差异 ,KCO对血管的选择性作用机制仍不明确。本文就血管平滑肌KATP的分子结构、电生理、药理学特征、信号转导途径和KCO对血管的选择性作用进行综述     

电压门控钠通道亚型及相关疾病的研究进展

目的综述近年国内外电压门控钠通道亚型及相关疾病的研究新进展,为今后相关疾病的诊断和治疗提供理论依据。方法通过检索国内外相关文献,从钠通道的类别、亚型及相关疾病等方面进行综述。结果钠通道的主要作用是参与动作电位的形成和信号传导,临床许多疾病的发生和发展与钠离子通道的改变有关。钠通道结构或功能异常通常会导致如心血管系统、神经系统和肌肉等相关疾病的发生。结论不同类型的钠通道在机体生理病理过程中的不同环节发挥着不同的作用,近期研究取得了很大进展,其在相关疾病诊断和治疗方面的应用前景值得期待。     

ATP敏感性钾通道的心肌保护机制研究进展

自心肌细胞膜片钳技术应用以来,Nome 1 983年首先在豚鼠心室肌细胞发现ATP敏感性钾通道(KATP channel)[1],随后证实KATP在缺血再灌注中对心肌细胞具有保护作用,为细胞离子通道的研究开创了崭新的局面,成为临床及基础研究的热点.迄今,对心血管系统ATP敏感性钾通道的调节作用缺乏系统研究,本文就KATP的生理作用、在缺血再灌注及在触发性心律失常中对心室肌细胞的保护机制加以综述,为KATP通道开放的临床应用与基础研究提供理论依据.     

分子药理学研究进展

分子药理学属于一门新兴学科,是分子生物学和药理学的交叉。与传统药理学最大的区别在于,分子药理学是从分子水平和基因水平去阐明药物与机体之间相互作用规律。半个多世纪来,随着生物化学和分子生物学等新理论、新技术的融入,分子药理学得到了迅速发展,受体、酶、离子通道、转运体以及免疫分子的研究取得了可喜的成果,药物作用机制的研究也深入到分子水平,亦为新药设计提供了重要的依据。近年来,现代生物学理论和技术,如各种组学、系统生物学、网络药理学理论和技术等的发展更是促进了分子药理学的进步,而且在自身发展的同时,也促进了其它学科的发展。     

双孔钾通道的结构、功能及药理学研究

双孔钾通道是一大类编码细胞膜背景钾电流的新型钾通道亚型超家族 ,其功能与多种生理和病理改变密切相关。本文简要介绍了 5类双孔钾通道亚型的基因和分子结构、电流特征及其药理学特性等     

神经元ATP敏感钾通道的研究进展

ATP敏感性钾离子通道 (KATP,ATPsensitivepotassi umchannel)广泛存在于包括脑在内的多种组织细胞上。该通道是由磺酰脲受体 (SUR ,sulphonylureareceptor)和内向整流钾通道 (Kir,inwardlyrectifyingpotassiumchannel)亚单位组成的异源四聚体 (SUR/Kir6) 4,其活性可被细胞内ATP调控。脑内的KATP通道在生理状态下可介导中枢糖敏感性及代谢应激过程 ,在脑缺血、帕金森病等急慢性神经疾病中同样发挥重要作用     

HCN通道在中枢神经系统的功能和调节机制研究进展

超极化激活环核苷酸门控(HCN)离子通道分布于机体多种组织中,尤其在兴奋性细胞(如心脏细胞和多种类型的神经元)中表达丰富,在控制心脏节律和维持细胞膜兴奋性等方面发挥重要功能。不同于经典的电压依赖性钠离子通道和钾离子通道,HCN通道在膜电位超极化时激活,诱发向内电流。近来的系列研究发现,HCN通道在神经系统中起着重要的作用,这与其特殊的电生理特性及其对细胞膜兴奋性的调节紧密关联。HCN通道受到细胞内外多种分子机制调节,使其在不同的生理病理条件下功能更加复杂。目前,HCN通道被认为是一个潜在的治疗慢性疼痛和多种脑疾病的新靶标。本文将重点围绕HCN通道在神经系统中的功能及其调节机制进行综述。     

ATP敏感性钾通道分子结构和功能的组织特异性研究进展

ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）通过与细胞代谢和生物电活动相偶联,在许多组织发挥着重要的生理和病理生理学功能。ＫＡＴＰ由内向整流钾通道（Ｋｉｒ）和ＡＴＰ结合蛋白两部分组成,前者形成离子通道,后者决定着ＫＡＴＰ的功能。Ｋｉｒ和ＡＴＰ结合蛋白又分多种亚型,两者不同亚型间的相互偶联导致了不同组织ＫＡＴＰ分子结构的多样性,分子结构的不同又决定了不同组织ＫＡＴＰ特性和功能的复杂性。本文对不同组织ＫＡＴＰ的分子结构、生理学功能、病理生理学和药理学特性进行了综述。     

机械敏感离子通道Piezo1通过激活β-catenin诱导心房成纤维细胞衰老北大核心CSCD

目的 衰老心房成纤维细胞中新型机械敏感离子通道Piezo1的基因表达明显升高,观察其是否通过激活β-catenin参与心房成纤维细胞的衰老进程。方法 通过酶消化法分离培养3~4周龄雄性C57BL/6小鼠原代心房成纤维细胞,给予叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激建立衰老模型,检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性。Western blot检测TBHP(100μmol·L^(-1))处理的细胞中Piezo1、β-catenin/p-β-catenin及衰老相关蛋白p53和p21的表达水平。衰老的小鼠心房成纤维细胞(MAFs)分别给予Piezo1通道抑制剂GsMTx4(3、10μmol·L^(-1))或Piezo1 siRNA,以及β-catenin抑制剂XAV939(3、10μmol·L^(-1));年轻的MAFs给予Piezo1特异性激动剂Yoda1(1、10μmol·L^(-1)),观察对细胞中β-catenin和衰老相关蛋白表达和活性的影响。结果 TBHP处理后,MAFs的SA-β-Gal染色阳性率明显增加,提示细胞发生衰老;且细胞中Piezo1、β-catenin/p-β-catenin和p53/p21的蛋白表达明显增加(P<0.05)。分别抑制Piezo1(GsMTx4/Piezo1 siRNA)或β-catenin(XAV939),可明显降低TBHP诱导的MAFs衰老率,以及减少β-catenin/p-β-catenin,p53/p21等蛋白表达和活性的增加(P<0.05)。而Yoda1可促进年轻细胞衰老,且β-catenin活性和衰老相关蛋白表达升高(P<0.05)。结论 机械敏感离子通道Piezo1通过激活β-catenin诱导心房成纤维细胞衰老的病理过程。     

全身麻醉药的离子通道药理学研究进展

离子通道在生命科学研究中占有相当重要的地位,特别是对作用于离子通道药物的研究更是方兴未艾。我们试就全身麻醉药离子通道药理学方面的研究进展作一综述。     

全身麻醉药的离子通道药理学研究进展

离子通道在生命科学研究中占有相当重要的地位,特别是对作用于离子通道药物的研究更是方兴未艾.我们试就全身麻醉药离子通道药理学方面的研究进展作一综述.     

心血管ATP敏感钾通道及其相关药物研发

综述心肌、血管平滑肌及血管内皮中ATP敏感性钾通道的结构、功能和药理学特性,并展望了ATP敏感性钾通道特异性开放剂和阻断剂的应用前景及该类新药的研究方向。ATP敏感性钾通道是由细胞内ATP调节的一种钾离子通道,不同组织中ATP敏感性钾通道的结构、功能和药理学性质有所不同。     

前列腺素E1对豚鼠心室肌细胞ATP敏感K^＋通道的影响

目的　从离子通道水平 ,探讨前列腺素E1(PGE1)对ATP敏感K (KATP)通道的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式。结果　PGE1可诱导KATP通道开放并呈浓度依赖关系。保持电位 - 40mV ,指令电位 2 0mV ,持续时间 1s条件下 ,10 μmol·L-1PGE1使外向K 电流由给药前的 (2 2 7± 0 34 )nA增加到 (5 46± 0 34 )nA(n =6 ,P <0 0 1) ,增加了 (3 18± 0 2 3)nA。并且增加的钾电流可被KATP通道特异阻断剂Glibenclamide(10 μmol·L-1)抑制 ,抑制率是 6 3%± 7% (n =5 ,P <0 0 1)。结论　PGE1可开放豚鼠心室肌细胞KATP通道     

TREK-1双孔钾通道的功能研究进展

双孔钾通道是一类有多个亚型、可在基线水平上调节细胞膜兴奋性的通道超家族。其中一类TREK高表达于人的中枢神经系统，并受到一些物理和化学因素的调节。最近，有关基因敲除动物的实验研究表明，TREK-1可能参与了一些麻醉剂的全麻过程。