慢性间歇低氧对小鼠心肌低氧诱导因子-2α和β3肾上腺素能受体表达及心功能的影响

目的:观察慢性间歇低氧(CIH)下,ApoE~(-/-)小鼠心肌组织中低氧诱导因子2α(HIF-2α)与β3肾上腺素能受体(β3 AR)的表达及小鼠心功能的变化,探讨CIH影响心功能的机制。方法:将24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为对照组(n=8)、高脂组(n=8)和高脂+低氧组(n=8),以高脂饲料喂养小鼠构建肥胖模型,用电脑程序控制低氧舱内氧气浓度在5%～21%内循环以给予小鼠CIH刺激,利用多普勒超声评估小鼠左心室结构与功能,免疫组织化学法检测心肌HIF-2α的表达,免疫印迹法检测心肌β3 AR的表达量。结果:与对照组和高脂组相比,高脂+低氧组小鼠左心室内径、左心室后壁厚度均明显增加(均P0.05),LVEF和短轴缩短分数均明显减少(均P0.05);高脂+低氧组小鼠心肌组织中HIF-2α表达上调(P0.05);高脂+低氧组小鼠心肌组织β3 AR数量增加(P0.05)。结论:CIH通过上调心肌组织中HIF-2α和β3 AR的表达,诱导左心室扩张、心功能减低,HIF-2α和β3 AR有望成为预防肥胖合并睡眠呼吸暂停患者发生心力衰竭的重要靶点。     

鸢尾素改善载脂蛋白E基因敲除糖尿病小鼠动脉粥样硬化

目的:探索鸢尾素(Irisin)对动脉粥样硬化的作用及其可能机制。方法:建立载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠糖尿病模型(n=20)并分为鸢尾素组(n=10)、糖尿病对照组(n=10),同时设立空白对照组(n=10),分别静脉注射鸢尾素或等量生理盐水。鸢尾素干预4周后,测定血管内皮依赖性舒张功能。干预12周后,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白、白细胞介素-6(IL-6)及氧化低密度脂蛋白等炎性因子水平;油红O及苏木素伊红(HE)染色分析主动脉粥样斑块表面积及横断面积;抗CD68和抗CD90免疫组化染色测定斑块巨噬细胞及T淋巴细胞浸润;实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉壁IL-6、白细胞介素-10、TNF-α等炎性因子信使核糖核酸(m RNA)转录水平。结果:鸢尾素组与糖尿病对照组相比,小鼠内皮依赖性舒张功能改善,血中炎性因子水平降低,粥样斑块表面积[(22.57±2.17)%vs(35.09±2.38)%,P0.05]及横断面积[(19.36±1.85)%vs(25.53±7.87)%,P0.05]减小,斑块巨噬细胞[(30.5±2.79)%vs(41.34±9.13)%]、T淋巴细胞[(28.11±4.24)%vs(35.79±9.11)%]浸润减少,主动脉壁炎性因子m RNA转录水平下降[IL-6:1.76±0.50 vs 3.78±1.15;TNF-α:1.05±0.30 vs 2.11±0.48;细胞内黏附分子-1:1.96±0.69 vs 2.71±0.72;血管细胞黏附分子-1:0.87±0.21 vs 1.45±0.25;单核细胞趋化蛋白-1:1.34±0.34 vs 1.77±0.55],差异有统计学意义(P0.05)。结论:鸢尾素可改善Apo E-/-糖尿病小鼠动脉粥样硬化,内皮保护及抗炎反应是其保护血管的重要机制。鸢尾素具有潜在的防治动脉粥样硬化的临床价值。     

血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

观察血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠高脂血症及动脉粥样硬化的影响.16只6周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为高脂血症组(n=8)和血脂康组(n=8),相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠为正常对照组(n=8).血脂康组每只灌服血脂康4 mg/d,高脂血症组、正常对照组每只灌服生理盐水0.4 mL/d.连续灌胃14周后下腔静脉取血测血脂,再用10%福尔马林灌注后,取主动脉进行形态学观察及图像分析.结果发现,高脂血症组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于正常对照组(P<0.05),但血脂康组血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平与高脂血症组相比则明显下降(P<0.05).图像分析结果发现,高脂血症组动脉粥样硬化病变显著,与正常对照组相比斑块总面积明显增加(P<0.05);光镜下多为粥样硬化期,管壁厚薄不均,可见由大量泡沫细胞形成的脂纹脂斑期病变和由大量泡沫细胞及胆固醇结晶形成的粥样斑块期病灶;血脂康组病变较高脂血症组明显减轻,血脂康组与高脂血症组相比斑块总面积明显减小(P<0.05),主要为早期粥样硬化,管壁厚薄较均匀,未见明显脂纹脂斑及粥样斑块期病灶;正常对照组为正常动脉壁,厚薄均匀,无动脉粥样硬化病灶.结果提示,血脂康有降低载脂蛋白E基因敲除小鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平及减轻动脉粥样硬化的作用.     

银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的评价银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法选用8周龄雄性ApoE-/-小鼠,给予高脂饮食喂养。将动物分为模型组、银杏内酯B(GB)组和阿司匹林(ASA)组。8周后处死小鼠,进行血脂测定和血浆炎症蛋白ELISA测定,免疫组织化学法分析主动脉斑块。用健康人血小板分析血小板聚集,使用检测血小板聚集仪检测血小板聚集。Western Blotting法分析Akt磷酸化。结果银杏内酯B组小鼠血浆趋化因子RANTES水平下降了47%,阿司匹林组下降了69%,与模型组比较差异有显著性。与模型组比较,血小板第4因子(PF4)水平银杏内酯B组下降了45%(P<0.05),阿司匹林组下降了11%(P>0.05)。主动脉油红O染色显示与模型组比,银杏内酯B组脂质沉积减少40%,阿司匹林组减少31%,差异有统计学意义。巨噬细胞染色表明银杏内酯B组和阿司匹林组主动脉斑块处巨噬细胞浸润比模型组分别减少51%和11%,差异均有统计学意义。斑块局部炎症蛋白分析表明,与模型组比较,血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达在银杏内酯B组减少69%,阿司匹林组减少32%,差异有统计学意义。银杏内酯B组RANT...     

鸢尾素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的研究鸢尾素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将ApoE~(-/-)小鼠随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组、鸢尾素组,每组10只,分别给予普通饮食+生理盐水、高脂饮食+生理盐水、高脂饮食+鸢尾素,饲养至12周后处死,处死前测体重,用化学法测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。采用HE染色和整体油红O染色分析主动脉粥样斑块面积大小,实时荧光定量(qRT-PCR)检测主动脉CD36、NF-κB p65的mRNA表达,Western blot检测主动脉CD36、NF-κB p65、SOD的蛋白表达。结果动脉粥样硬化模型组主动脉斑块面积明显高于正常对照组,内膜明显增厚,而鸢尾素组较动脉粥样硬化模型组斑块面积减少,内膜增厚程度下降。与正常对照组比较,动脉粥样硬化模型组小鼠体重、TC、TG、LDLC、MDA水平升高,NF-κB p65、CD36mRNA和蛋白表达增加,而血清SOD活性、HDLC水平减低(P0.05)。与动脉粥样硬化模型组比较,鸢尾素组小鼠体重、TC、TG、LDLC、MDA水平降低,NF-κB p65、CD36 mRNA和蛋白表达下调,而血清SOD活性、HDLC水平升高(P0.05)。结论鸢尾素能减轻ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的发生发展,这可能与其降低小鼠体重和血脂、抑制炎症反应、抗氧化应激有关。     

间歇低氧诱发兔动脉粥样硬化形成中差异基因分析

目的研究间歇低氧诱发动脉粥样硬化形成的重要作用基因。方法构建间歇低氧动脉粥样硬化兔模型,提取兔腹主动脉总RNA,逆转录制备杂交探针,与人的心血管疾病基因列阵Ⅱ(HS-038)芯片杂交后分析差异表达基因,采用逆转录聚合酶链反应验证差异基因。结果共有187条基因表达水平显著改变;涉及凋亡、蛋白质合成、癌基因、抑癌基因、信号传导基因、发育相关基因、炎症等诸多方面,其中环氧合酶2mRNA的差异表达与腹主动脉内膜病理学变化具有显著相关性(P<0.05)。结论间歇低氧诱发动脉粥样硬化的发生发展涉及多个基因的改变,环氧合酶2可能是重要作用基因之一。     

载脂蛋白E基因敲除小鼠不同周龄动脉粥样硬化的病理变化

目的研究载脂蛋白E基因敲除小鼠不同时间段的动脉粥样硬化的病理进展，探讨不同饮食对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展的影响。方法采用6周龄40只载脂蛋白E基因敲除小鼠，20只给予高脂膳食饲料，20只给予普通饮食，分别于15周龄、19周龄、24周龄、28周龄、36周龄5个时间段各取4只麻醉处死做病理检测。结果随着时间进展，载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化程度逐渐加重，经历了从脂质条纹到粥样斑块形成典型的动脉粥样硬化病理过程；高脂饮食组比普通饮食组的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病理改变严重。结论载脂蛋白E基因敲除小鼠是研究动脉粥样硬化的可靠模型，高脂饮食可以加速载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的病理进程。     

载脂蛋白E及其基因敲除小鼠的研究进展

载脂蛋白E是血浆脂蛋白的重要组成成分,在脂质代谢中发挥着重要的作用。它的缺失或者变异都会引起体内的代谢异常或者组织器官的功能障碍,从而导致一系列的疾病和并发症。载脂蛋白E基因敲除小鼠问世以来,它给研究载脂蛋白E的功能及其在各种相关疾病当中的作用提供了广阔的平台。近年来,载脂蛋白E基因小鼠已成为动脉粥样硬化相关研究中最受欢迎的动物模型之一。     

慢性应激动脉粥样硬化载脂蛋白E基因敲除小鼠内脏病理变化

目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(hUVEC)Fractalkine表达的影响并探讨其可能的作用机制。方法采用胰蛋白酶消化法原代培养hUVEC,取2～5代用于实验,培养的hUVEC随机分为:①对照组,DMEM培养基;②ox-LDL不同浓度组,不同剂量的ox-LDL(5、25、50和75mg/L)培养细胞48h;③ox-LDL作用不同时间组,50mg/Lox-LDL作用不同时间(6、12、24、48和72h);④ox-LDL+SB203580组,预先用p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性阻....     

凝血因子V莱顿突变对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的 评价凝血因子V莱顿突变(FvL)对动脉粥样硬化的影响.方法 建立FvL与载脂蛋白E(ApoE)基因复合突变小鼠,并分析其动脉粥样硬化形成和纤维蛋白沉积情况.结果 小鼠52周龄时,FvL纯合子ApoE-/-(FvQ/Q APOE-/-)小鼠动脉粥样硬化范围明显大于野生型ApoE-/-(Fv+/+ApoE-/-),小鼠,FvQ/Q ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(5.0±1.1)%比(2.2±0.4)%,P＜0.005;FvL杂合子ApoE-/-(FvQ/+ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化范围位于FvQ/Q ApoE-/-小鼠和Fv+/+ApoE-/-小鼠之间,与两者的差异均无统计学意义,FvQ/+ApoE-/-比FvQ/QApoE-/-为(2.9±0.6)%比(5.0.±1.1)%,P＞0.05,FvQ/+ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(2.9±0.6)%比(2.2±0.4)%,P＞0.05.FvQ/Q ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块内的纤维蛋白沉积同样明显高于Fv+/+ApoE-/-小鼠,FvQ/Q ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(3.4±0.5)%比(1.8±0.4)%,P＜0.05.结论 FvL纯合子明显增加ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化程度及动脉粥样硬化斑块内的纤维蛋白沉积,提示FvL突变可能是重要的促进动脉粥样硬化形成的因素,临床上患者出现严重的动脉粥样硬化可能合并FvL遗传基因缺陷.     

厄贝沙坦抑制高胆固醇诱导载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的炎症机制

目的探讨厄贝沙坦对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响及炎症机制。方法载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为普食组、高胆固醇饮食组、高胆固醇饮食 厄贝沙坦组,每组15只,分别予蒸馏水、蒸馏水、厄贝沙坦10 mg/(kg.d)灌胃12周。无创血压系统测小鼠血压;内眦动脉取血检测血清总胆固醇和甘油三酯水平;冰冻切片光镜下定位主动脉根部,油红O染色评估斑块大小;实时定量聚合酶链反应和Western blotting方法检测主动脉肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、单核细胞趋化蛋白1和血管细胞粘附分子1的表达。结果高胆固醇饮食组小鼠血脂水平明显升高(P<0.01),且斑块面积明显高于普食组(P<0.01);厄贝沙坦明显减小斑块面积(P<0.01),同时降低肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、单核细胞趋化蛋白1和血管细胞粘附分子1的表达(P<0.01)。结论血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂厄贝沙坦可以通过降低炎症因子的表达,从而达到抑制动脉粥样硬化发生发展的目的。     

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化的影响.方法 取apoE-/-小鼠18只建立动脉粥样硬化模型,C57BL/6小鼠12只为对照组.apoE-/-小鼠予高脂饲料,C57BL/6小鼠予普通饲料.12周后,随机抽取C57BL/6小鼠和apoE-/-小鼠各6只,判断是否成模.将成模后余下的12只apoE-/-小鼠随机分为模型组和瑞舒伐他汀治疗组(瑞舒伐他汀10 mg·kg-1·d-1灌胃),每组6只.余下的6只C57BL/6小鼠作为对照组.再过12周后处死小鼠,行血脂及主动脉HE、Masson、油红O染色观察动脉斑块,免疫组织化学方法检测主动脉组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、巨噬细胞表面分子-3(Mac-3)表达.结果 模型组小鼠胆固醇、低密度脂蛋白水平均高于对照组(P均＜0.01),甘油三酯水平与对照组比较差异无统计学意义.模型组小鼠主动脉组织内可见明显动脉粥样硬化斑块形成,α-SMA、TGF-β1和Mac-3表达均较高于对照组(P均＜0.01).瑞舒伐他汀治疗组小鼠胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯水平与模型组比较差异无统计学意义,但斑块内脂肪含量少于模型组,胶原含量多于模型组.治疗组α-SMA表达与模型组比较差异无统计学意义,治疗组TGF-β1、Mac-3表达均低于较模型组(P均＜0.01).结论 瑞舒伐他汀可以减轻apoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中的脂质沉积和炎症反应,可以增加其胶原含量,利于斑块的稳定,具有抗动脉粥样硬化的作用,对血脂无影响.

Abstract：

Objective To investigate the effect of rosuvastatin on atherosclerosis in apoE-knockout ( apoE - / - ) mice. Methods Eighteen 6-week-old apoE - / - mice fed with high fat diet were used as atherosclerosis models, twelve 6-week-old C57BL/6 mice fed with normal diet were used as control. After twelve weeks, six apoE -/ - mice were used to observe the formation of atherosclerosis. Another 12 apoE -/- mice were divided into placebo treated group (n =6) and rosuvastatin group (n =6,10 mg· kg-1 ·d -1 per gavage) and treated for 12 weeks. Then, blood was collected for measuring lipid, aorta was prepared for morphologic study (HE, Oil red O, Masson) and immunohistochemical analysis (α-smooth activor protein, transforming growth factor β1, macrophage surface molecule-3 ). Results Serum cholesterol and low density lipoprotein levels were significantly higher in apoE -/- mice fed with high fat diet than in C57/ BL6 mice( all P ＜0. 01 )while triglyceride level was similar between the two groups, these were not affected by rosuvastatin. Similarly, atherosclerotic lesion area in apoE -/ - mice fed with high fat diet was also not significantly reduced by rosuvastatin, while lipid deposition could be significantly reduced and collagen deposition could be significantly increased in the aortic atherosclerotic lesions by treatment with rosuvastatin.Upregulated TGF-β1 and Mac-3 expression in the aortic atherosclerotic lesions in apoE -/- mice fed with high fat diet could also be significantly reduced by rosuvastatin (all P ＜ 0. 01 ), suggesting reduce inflammatory responses in the atherosclerotic lesion and stable atherosclerotic plaque post rosuvastatin treatment. Conclusion Reducing inflammatory responses and stabilizing plaque properties might contribute to the anti-atherosclerosis effects of rosuvastatin in mice high fat diet fed apoE -/- mice.     

中西药物对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的干预作用

美国洛克菲勒大学生化遗传与代谢实验室和北卡罗莱那大学病理遗传实验室应用胚胎干细胞基因敲除 ( geneknockout)技术 ,于 1992年培育成功载脂蛋白E (apolipoproteinE ,ApoE)基因敲除小鼠 ,亦称ApoE基因缺陷小鼠或ApoE基因摧毁小鼠(本文中统称为ApoE基因敲除小鼠 )。ApoE是清除乳糜微粒和极低密度脂蛋白的受体的配体 ,因此 ,缺乏ApoE则会导致血液循环中富含胆固醇的物质积累而更加容易引起动脉粥样硬化(atherosclerosis ,AS)病灶形成。ApoE基因敲除小鼠无论正常或高脂饮食均可形成严重的高脂血症及AS病灶[1,2 ] ,成为高脂血症及AS…     

不同程度慢性间歇低氧对大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察不同程度、时限的间歇低氧大鼠神经细胞凋亡情况,探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者神经系统损伤的机制。方法将72只Wistar大鼠均分为3组：5%慢性间歇低氧组（CIH5%组）、10%慢性间歇性低氧组（CIH10%组）和空白对照组（UC组）。TUNEL法观察大鼠神经细胞凋亡情况,HE染色观察神经细胞形态变化。结果与UC组比较,CIH5%组和CIH10%组皮质和海马等部位神经细胞出现损伤,神经细胞凋亡指数升高,6周时达到高峰,CIH5%组较CIH10%组变化明显。结论慢性间歇低氧可引起神经细胞凋亡,其程度与间歇低氧程度有关,但延长间歇低氧时间未加重神经细胞凋亡。     

慢性应激动脉粥样硬化载脂蛋白E基因敲除小鼠内脏若干免疫炎症因子的表达变化

血脂异常为动脉粥样硬化(As)的主要危险因素之一,磷脂转运蛋白(PLTP)在血脂代谢中发挥重要作用,尤其可影响高密度脂蛋白(HDL)的代谢。我们的前期研究发现PLTP缺乏可抑制公认的三个As模型鼠的主动脉斑块形成,其作用机制与减少富有载脂蛋白B的脂蛋白颗粒的合成与分泌,并增强脂蛋白的抗氧化能力等有关。新近的实验发现PLTP缺陷鼠HDL的抗炎作用增强,但因为使用的小鼠模型天生缺乏参与人脂蛋白代谢的重要成分胆固醇酯转运蛋白(CETP),....     

巨细胞病毒感染的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化发生的可能机制

目的研究巨细胞病毒感染引起的免疫损伤导致动脉粥样硬化发生的可能机制。方法载脂蛋白E基因敲除的8周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分成对照组、高脂饮食组、鼠巨细胞病毒感染组和高脂饮食 鼠巨细胞病毒感染组。在不同时间段分别处死小鼠,截取主动脉,利用逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学等方法检测主动脉单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α、Fractalkine和调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子的表达。结果第8周时,巨细胞病毒感染后可显著提高生长相关癌基因α在主动脉的表达,并可诱导Fractalkine、活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子和单核细胞趋化因子1的表达,而在高脂饮食 巨细胞病毒感染的小鼠主动脉组织中,Fractalkine的表达较其它组明显升高。第12周时,高脂饮食 巨细胞病毒感染组中Fractalkine和活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子和单核细胞趋化因子1的表达较其它组更高些。免疫组织化学结果发现,高脂饮食后,生长相关癌基因α、Fractalkine和单核细胞趋化因子1的表达均有明显升高,但Fractalkine的表达较局限,单核细胞趋化因子1和生长相关癌基因α在整个血管壁都存在,但以内膜较高。单纯巨细胞病毒感染组与高脂饮食组相似,可诱导单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α和Fractalkine的表达,但不同的是Fractalkine的表达广泛存在。而高脂饮食 巨细胞病毒感染组单核细胞趋化因子1、生长相关癌基因α和Fractalkine表达的升高更为明显,尤其是斑块部位。结论巨细胞病毒感染后通过调节趋化因子表达水平的改变,从而促进炎症细胞的迁移,促进动脉粥样硬化的发生。     

慢性间歇低氧对小鼠糖代谢及肝脏JNK/Akt表达的影响

目的:探讨间歇低氧对小鼠糖代谢的影响以及相关信号通路的变化。方法:将30只C57/BL6J小鼠随机分为间歇空气组(对照组)和间歇低氧组,每天给予8 h的间歇空气或间歇低氧处理。造模7周后检测小鼠空腹血糖及餐后血糖,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测空腹胰岛素,并行经腹腔葡萄糖耐量试验评估糖耐量。采用蛋白质印迹(Western blotting)技术检测小鼠肝脏中c-Jun氨基末端激酶(JNK)以及胰岛素信号通路中关键激酶蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平的变化。结果:间歇低氧组小鼠空腹血糖显著高于对照组(P<0.01),而Akt磷酸化水平显著低于对照组(46.93±4.25比66.92±11.49,P<0.01)。结论:间歇低氧可导致小鼠糖代谢异常,胰岛素敏感性下降,肝脏中炎症信号通路被激活,JNK磷酸化水平显著升高,胰岛素信号转导受到抑制,通路中重要激酶Akt磷酸化水平显著降低,JNK的激活可能在间歇低氧所致的糖代谢异常中起重要作用。     

载脂蛋白E基因敲除小鼠在动脉粥样硬化研究中的应用

动脉粥样硬化是一种炎性疾病,多由血脂异常引起,是心血管疾病的主要病理基础。1992年,载脂蛋白E基因敲除小鼠的问世,由于其在正常饮食下能够形成更接近于人类动脉粥样硬化模型的病理特点,成为研究动脉粥样硬化的理想模型。两者的结合,便于人们进一步了解动脉粥样硬化的病理机制,也为研究中药、西药药效及其作用机制提供了保障,现就载脂蛋白E基因敲除小鼠在动脉粥样硬化研究中的应用做一综述。     

甘草酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠脂质代谢及动脉粥样硬化斑块的影响

目的探讨甘草酸对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠血脂代谢及动脉粥样硬化(As)斑块的影响及可能机制。方法雌性Apo E-/-小鼠18只,随机分为对照组和甘草酸组,高脂喂养12周中,甘草酸组给予甘草酸[100 mg/(kg·d)]灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃,每4周监测小鼠体重并采取小鼠禁食后眼球后静脉血,酶法测量血脂、血糖水平及血清中对氧磷酶1(PON1)活性,小鼠安乐死后取主动脉窦部作冰冻切片油红O染色、胸腹主动脉段作剖面分析脂质斑块面积。实时荧光PCR检测肝组织中基因表达水平,Western blot检测肝组织中相关蛋白的表达水平。结果高脂喂养中小鼠体重增加、血脂紊乱加重。与对照组比较,甘草酸组小鼠体重增幅、血浆甘油三酯及血糖水平均无显著差异,但血清总胆固醇水平显著降低(P0.05);与对照组比较,甘草酸降低主动脉窦及主动脉胸腹部斑块面积可达22%及21%(P0.01和P0.05)。实时荧光PCR结果显示甘草酸能显著上调肝脏脂质转运相关的B族Ⅰ型清道夫受体(SRBⅠ)及ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA水平;其次,甘草酸可促进小鼠肝脏抗氧化酶PON1表达而升高血清中PON1活性(P0.01),并显著提高肝细胞内甲硫氨酸亚砜还原酶A(Msr A)的表达水平显示其抗氧化能力。结论甘草酸能有效阻抑Apo E-/-小鼠As的发展,其机制可能涉及对肝脏胆固醇代谢调节及抗氧化功能的改善。     

有氧运动对高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的观察有氧运动训练对高同型半胱氨酸血症(HHcy)小鼠血浆同型半胱氨酸水平(Hcy)的影响,探讨有氧运动是否能够延缓HHcy致动脉粥样硬化。方法 6周龄雌性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为三组:对照组、HHcy组和HHcy+有氧运动组。饮用水中加入Hcy制作HHcy模型。HHcy+有氧运动组在1周适应性训练后进行8周跑台训练(0°,15 m/min,60 min/d,每周训练5天)。采用酶法检测血浆Hcy和血脂水平。主动脉根部切片,油红O染色,计算动脉粥样硬化斑块面积。结果 HHcy组血浆Hcy水平与对照组相比明显增高(20.88±5.79μmol/L比7.80±1.10μmol/L,P=0.001),HHcy+有氧运动组血浆Hcy水平较HHcy组明显下降(14.01±2.30μmol/L比20.88±5.79μmol/L,P=0.016)。三组之间体重增长、饮水量及血浆总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯水平无显著性差异。与对照组相比,HHcy组动脉粥样硬化斑块面积[(9.24±9.02)×10-4 mm2比(15.55±4.64)×10-4 mm2,P=0.034]及斑块负荷(12.20%±12.09%比19.86%±6.30%,P=0.047)明显增加,HHcy+有氧运动组较HHcy组斑块面积[(15.55±4.64)×10-4mm2比(8.62±7.55)×10-4mm2,P=0.024]及斑块负荷(19.86%±6.30%比10.62%±9.06%,P=0.021)明显降低。结论有氧运动可以降低HHcyApoE-/-小鼠血浆Hcy水平,延缓动脉粥样硬化进展,该作用独立于血脂水平的改变。