PDGF介导的ERK1/2信号转导通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)是否通过对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径的调节进而促进矽肺纤维化的形成与发展.方法 采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO<,2>)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4w组和8w组)、矽肺模型组(4w组和8w组).采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养.HE...     

TGF-β1/ERK5信号通路对大鼠矽肺纤维化的影响

[背景]矽肺发病机制尚不清楚,探讨矽肺纤维化的机制可以为矽肺纤维化的治疗提供指标.[目的]探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)/细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路在肺纤维化中的作用.[方法]选取SPF级Wistar健康雄性大鼠21只随机分为对照组、模型组和干预组,每组7只.模型组和干预组采用一次性非暴露气管染尘...     

姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1表达影响

目的 探讨姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响及意义.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、生理氯化钠溶液组、矽肺模型组、姜黄素组和溶剂对照组.后3组均一次性气管内给予质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液1 ml,生理氯化钠溶液组一次性气管内注入等体积的生理氯化钠溶液.染尘第2天,姜黄素组给予质量浓度为20 g/L姜黄素300 mg·kg-1·d-1(0.5％羧甲基纤维素钠溶解),溶剂对照组给予质量分数为0.5％羧甲基纤维素钠15ml·kg-·d-1.于第29天处死动物,采用免疫组织化学、免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肺组织AQP-1及mRNA表达.结果 矽肺模型组、溶剂对照组肺组织中AQP-1表达较正常对照组和生理氯化钠溶液组减低(P＜0.05),姜黄素组肺组织AQP-1表达较矽肺模型组增强(P＜0.05).结论 姜黄素可使大鼠矽肺模型肺组织中AQP-1表达增强,提示姜黄素可能通过影响AQP-1的表达,在矽肺的发病过程中具有一定的保护作用.     

铅对大鼠行为功能及海马CA1区ERK2活力的影响

目的探讨铅染毒对大鼠空间学习记忆损害的机制。方法将刚出生1天的Wistar仔鼠87只随机分为对照组和低、中、高剂量铅染毒组,分别为21,21,22,23只。各组母鼠通过饮水分别饲以0,0.22,0.67,2.00 mg/ml的醋酸铅水溶液;出生后第2l天起,各组仔鼠则直接饮用与相应母鼠相同浓度的醋酸铅水溶液。于第1,20,40,60,80天各取3只仔鼠海马组织,采用Western Blots方法,以磷酸化抗体检测细胞外信号调节激酶2(ERK2)活力;剩余仔鼠在第80天开始进行水迷宫实验。结果铅染毒仔鼠的定位航行能力和空间搜索能力明显下降,并呈剂量—效应关系;对照组仔鼠海马CA1区ERK2活力随着仔鼠增长其活力明显升高,但到出生后第60天时则达到最高,到第80天略有下降;低剂量组则在第20天时活力明显升高,而在随后的60天里活力明显下降;中、高剂量组酶活力则一直维持在较低水平。以各组第1天的ERK2活力为100,则对照组和低、中、高剂量铅染毒组在第80天时ERK2活力分别为151.3±12.1,129.3±9.1,101.0±8.1,103.0±13.5(中、高剂量组与对照组比较,P<0.01)。结论铅染毒可以扰乱不同发育期大鼠海马CA1区ERK2的活力变化,这很可能是大鼠铅染毒导致空间学习记忆损害的分子机制。     

游泳运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中MEK/ERK1磷酸化水平的影响

目的 探究慢性和急性游泳运动对肥胖诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)和细胞外信号调节激酶(ERK1)磷酸化水平的影响。方法 100只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组(10只,普通饲料喂养)和高脂组(90只,高脂饲料喂养)。喂养8周后,从高脂组中筛选出体重上游1/3大鼠(30只)并随机分为3组:高脂安静组、高脂慢性运动组和高脂急性运动组,每组10只,高脂饲料再喂养8周,并根据运动方案进行运动干预;对照组继续喂食普通饲料8周。运动干预后,取内脏脂肪组织,Western Blot方法检测MEK和ERK1的磷酸化水平。结果 慢性运动干预显著降低了胰岛素抵抗大鼠的体重、内脏脂肪质量和脂体比(P<0.01),急性运动对大鼠体重、内脏脂肪质量和脂体比影响无统计学意义。两种运动干预均显著改善了机体胰岛素敏感性(P<0.05),降低了脂肪组织MEK和ERK1的磷酸化水平(P<0.01)。结论 运动改善肥胖诱导的胰岛素抵抗可能与抑制脂肪组织中MEK和ERK1的磷酸化有关。     

AcSDKP经由PDGF介导的细胞外信号调节激酶1/2的调节通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养。HE染色观察肺组织形态学变化,Western blot法检测肺组织、肺成纤维组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白的表达以及肺组织PDGF及其受体蛋白的表达。与对照比较,矽肺大鼠肺内PDGF及其受体蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白以及磷酸化-ERK1/2蛋白表达均增强,而AcSDKP治疗组则见上述蛋白表达减弱;在培养的肺成纤维细胞,PDGF能够刺激其Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,同时上调磷酸化-ERK1/2蛋白的表达,而AcSDKP则显示出与PD98059(细胞外信号调节激酶通路特异性抑制剂)相同的作用,即能够抑制PDGF刺激成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达和上调磷酸化-ERK1/2蛋白表达...     

慢性染铅对海马CA1区LTP及ERK2活性影响

目的　探讨慢性染铅对海马CA1区LTP及ERK2活性的影响。方法　用同心圆电极刺激海马的Schaffer侧支 ,于CA1区用细胞外玻璃电极记录单脉冲刺激引起的群峰电位 (PS) ,观察对照组和染铅组大鼠于高频刺激后PS幅值的变化 ;同时利用WesternBlots方法检测海马CA1区ERK2的活性。结果　HFS前记录的对照组和染铅组的PS幅值无显著性差异 ;HFS后染铅组的PS平均幅值与对照组相比下降了 79% (P <0 0 1) ;染铅组CA1区的ERK2的活性比对照组下降了 2 4 1% (P <0 0 1)。结论　慢性染铅可抑制CA1-LTP的形成 ,同时这种抑制与铅对ERK2活性抑制密切相关     

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马ERK1/2表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶1及2(ERK1/2)表达的影响。方法健康2月龄孕Wistar大鼠28只,按体重随机分成对照组、甲状腺功能减退组[按饮水中含丙基硫尿嘧啶(PTU)剂量分为5mg/L组和15mg/L组]和碘缺乏组,每组7只。分别于出生后第7、14、21、28和42天每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,用组织病理切片和免疫组化染色观察分析海马的ERK1/2表达。结果在出生后14、21、28和42天时,海马CA1和CA3区的ERK1/2表达在PTU5mg/L组、PTU15mg/L组和碘缺乏组显著低于对照组(P0.05)。DG区的ERK1/2表达与对照组相比差异无显著性。出生后7天时,各组间ERK1/2表达差异无显著性。结论碘缺乏和甲状腺功能减退可降低海马CA1和CA3区的ERK1/2表达。     

缺氧缺血新生大鼠海马ERK的变化及GM1的影响

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性(HI)脑损伤后脑细胞凋亡的情况,进一步研究HI脑损伤后海马细胞外信号调节激酶(ERK)的变化,探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对HI新生大鼠的脑保护作用。方法:选择新生7日龄Sprague-Dawley大鼠108只,随机分为3组:缺氧缺血组(HI组,36只),假手术对照组(Control组,36只),缺氧缺血+神经节苷脂组(GM1组,36只)。采用结扎右侧颈总动脉并吸入低氧混合气体制备HIBD模型,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测大脑海马CA1区p-ERK的表达。结果:新生大鼠HI后脑细胞存在凋亡,GM1治疗能减少细胞凋亡。HI组、Control组和GM1组凋亡细胞数分别为(8.41±1.27)、(39.25±2.02)和(11.10±1.79),HI组阳性细胞数明显高于Control组和GMl组(P<0.05),GM1组与Control组比较阳性细胞数无明显差异(P>0.05)。HI组和GMl组p-ERK表达皆为阳性,两组比较HI组表达更强(P<0.05),Control组未见有p-ERK表达。结论:GM1可减少HI脑损伤后脑细胞凋亡,影响p-ERK表达,对缺氧缺血(HI)新生大鼠的脑具有保护作用。     

VEGF/ERK通路在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的作用及机制探讨

[目的]探讨VEGF/ERK信号转导通路在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤中的分子机制. [方法]采用非开颅血管内穿线法制备大鼠SAH模型,将动物随机分为control组、sham组及SAH组.术后24 h取材行颅底解剖学检查,HE染色观察大脑中动脉(MCA)形态学改变,原位杂交法检测MCA VEGFmRNA的表达,免疫蛋白印记法检测大脑动脉VEGF,p-ERK1/2蛋白表达,TUNEL法检测MCA内皮细胞凋亡. [结果]SAH 24 h MCA出现严重的血管痉挛;VEGFmRNA阳性信号明显增强,VEGF、p-ERK1/2蛋白显著升高 (P<0.05,ANOVA),MCA内皮细胞TUNEL显色阳性.SAH 24 h VEGF与p-ERK1/2 白表达呈正相关(r=0.722,P<0.01). [结论]VEGF通过激活ERK途径,促进SAH后脑动脉内皮细胞凋亡,参与SAH后早期脑损伤的病理进程.     

p-ERK1/2在急性髓系白血病的表达及意义

目的检测磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)在急性髓系白血病(AML)中的表达,分析其与外周血白细胞数的相关性,探讨p-ERK1/2在AML发生、发展和治疗中的意义。方法选取同期收治的AML初治组患者26例(其中治疗后完全缓解者20例,未缓解者6例)、复发组患者20例、正常对照组20例骨髓细胞为研究对象,应用流式细胞仪检测p-ERK1/2的表达。结果 AML初治组及复发组p-ERK1/2的表达水平均显著高于对照组及完全缓解组(P<0.01),而完全缓解组与对照组p-ERK1/2的表达水平无显著差异(P>0.05),相关性分析表明白细胞数与p-ERK1/2的表达密切相关(P<0.01)。结论 p-ERK1/2的表达在AML发生、发展中有重要意义。     

姜黄素对大鼠肺间质纤维化影响的机制研究

目的 研究姜黄素对大鼠肺间质纤维化的治疗作用及其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠80只,随机分为对照组、模型组、泼尼松组和姜黄素组,每组20只.除正常对照组外,其余各组大鼠气管内一次性注入博来霉素诱导肺纤维化.造模后第15天起,姜黄素组和泼尼松组分别给予姜黄素（300 mg/kg）和泼尼松（5 mg/kg）每日灌胃一次,其余两组每日给予1%羧甲基纤维素钠（10 ml/kg）灌胃一次.各组动物分别于造模后第21、28、42及56天随机处死5只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量,免疫组化法测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板源性生长因子（PDGF）的表达.结果 姜黄素组肺纤维化程度,肺组织HYP含量在第42和56天显著低于同期模型组[42 d：1.28±0.61 vs 2.28±0.39,P〈0.01;（1.73±0.22）mg/g vs（2.50±0.37）mg/g,P〈0.01;56 d：1.00±0.59 vs 1.73±0.36,P〈0.05;（1.57±0.36）mg/g vs（2.20±0.42）mg/g,P〈0.01],第42天姜黄素组HYP含量显著低于同期泼尼松组（P〈0.05）,肺组织TGF-β1、PDGF蛋白表达于造模后第28、42及56天显著低于模型组（28d：TGF-β1：3642.05±839.31 vs 5067.35±738.39,P〈0.05;PDGF：2957.55±739.16 vs 4457.75±568.39,P〈0.05;42 d：TGF-β1：2689.73±529.22 vs 4089.50±619.37,P〈0.01;PDGF：2834.46±567.16 vs 3239.52±628.26,P〈0.01;56 d：TGF-β1：1968.57±408.36 vs 2968.20±498.42,P〈0.01;PDGF：1083.36±381.35 vs 2019.40±412.36,P〈0.01）,第42、56天显著低于泼尼松组（42 d,TGF-β1：3529.07±981.35,PDGF：2618.34±813.34;56 d,TGF-β1：2530.83±439.37,PDGF：1738.35±536.62,P均〈0.05）,其中第56天时与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素于预能有效减轻肺纤维化程度,可能机制为姜黄素抑制了TGF-β1、PDGF蛋白在肺组织的表达.     

ERK1/2通路在AcSDKP抑制PDGF诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖和胶原合成中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)1/2通路在N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖和胶原合成中的作用.方法 取新生Wistar大鼠20只,获得原代及传代培养的肺成纤维细胞.实验分为:(1)对照组(含体积分数为0.4%的胎牛血清的DMEM组);(2)PDGF组;(3)PD98059+PDGF组(25 μmol/L PD98059+10 ng/ml PDGF);(4)AcSDKP+PDGF组(1x10-8mol/L AcSDKP+10 ng/ml PDGF).采用噻唑蓝(MTT)法检测肺成纤维细胞的代谢活力,免疫细胞化学法、Western blot法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的改变;采用Western blot法检测ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白表达的改变.结果 与对照组相比,PDGF组大鼠肺成纤维细胞代谢活力增强,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增强,磷酸化-ERK1/2蛋白表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05).AcSDKP+PDGF组细胞代谢活力明显低于PDGF组,免疫细胞化学法检测结果 显示,AcSDKP+PDGF组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达分别为PDGF组的69.3%和67.2%.Western blot法检测结果 显示,AcSDKP+PDGF组细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达分别为PDGF组的92.4%和78.0%,磷酸化-ERK1/2蛋白表达为PDGF组的83.5%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ERK1/2通路在AcSDKP抑制PDGF诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖和胶原合成中发挥了重要作用.     

铝对大鼠海马ERK蛋白及mRNA表达影响

目的研究慢性铝中毒对大鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）蛋白及mRNA表达水平的变化，探讨铝中毒对学习记忆机制的影响。方法选择断乳后Wistar大鼠，用不同浓度AlCl3的水饲养3个月。测量大鼠海马长时程增强（LTP），用改良的Takai法测定丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）活性的变化。蛋白印迹（Western blotting）方法检测ERK1／2的蛋白含量，RT-PCR方法检测ERK2的mRNA表达。结果（1）各染铝组MAPK活性降低且与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；（2）ERK1／2蛋白表达的比较：①ERK2在大鼠海马中的蛋白含量高于ERK1；②染铝组ERK1／2非磷酸水平与对照组比较均有所下降（P〈0．05），但染铝组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；③染铝组ERK1／2磷酸化水平与对照组的比较均有下降（P〈0．05），染铝组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）染铝组ERK2的mRNA表达与对照组比较明显降低，但染铝组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论慢性铝中毒不仅影响大鼠海马中ERK2的mRNA表达水平，同时也影响ERK1／2的蛋白表达水平的降低，造成有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）活性的下降，损害LTP的形成，从而影响学习记忆功能下降。     

氟伐他汀对肺纤维化大鼠ERK信号通路的影响

目的观察ERK酶在博莱霉素致肺纤维化大鼠模型中的表达及活化，以及氟伐他汀对肺纤维化大鼠ERK信号通路的影响。方法60只Wistar大鼠分成给药组、模型组和对照组，每组20只，于第7，14，28和42天每组处死5只，采用HE染色和Masson染色观察组织形态学的变化，采用免疫组化和免疫印迹Western blot蛋白定量的方法分析TGF—β1、ERK1/2，p-ERK在肺组织中的表达。结果模型组大鼠肺组织中的TGF—β1、ERK1／2，p-ERK的表达明显高于同期对照组，各时间段中以第7天表达最强。给药组的表达低于同期模型组，以第7和14天明显。结论氟伐他汀能在一定程度上阻止大鼠肺纤维化的发生和发展，其机制同抑制ERK1/2的表达及活性有关。     

姜黄素对大鼠肺间质纤维化影响的机制研究

Objective To observe the possible mechanism and inhibitory effects of curcumin on pulmonary fibrosis induced bleomycin in rats at the fibrosing stage. Methods 80 male Sprague-Dawley rats were random divided into 4 groups (20 rats in each group). Rats in the fibrosis model group, the prednisone group and the curcumin group were induced by instilled bleomycin through tracheal, rats in the control group with same volume normal saline. Since the 15th day after bleomycin administration, the curcumin group and prednisone group were given curcumin (300 mg/kg) or prednisone (5mg/kg) per day by intragastric administration, respectively. The normal control group and the model group were given 1% sodium carboxymethyl cellulose ( 10ml/kg). Six rats of each group were random sacrificed on the 21st, 28th, 42nd and 56th days after bleomycin administration. The histological changes of the pulmonary were evaluated by H. E and Masson dyeing. The expressions of transforming growth factor-β1 (TGF-β1), platelet-derived growth factor (PDGF) and hydroxyproline in the tissue of pulmonary were assessed by immunohistochemistry and digestion method. Results Pulmonary fibrosis and hydroxyproline level in the curcumin group were obviously reduced as compared with the model group on the 42nd and 56th day[42 d:1. 28 ±0. 61 vs 2. 28 ±0. 39,P <0. 01 ;(1.73 ±0. 22)mg/g vs (2.50 ±0. 37) mg/g, P <0.01;56 d:1.00 ±0.59 vs 1.73 ±0.36, P< 0. 05; ( 1.57 ± 0. 36) mg/g vs (2. 20 ± 0. 42) mg/g, P < 0. 01 ], and it was also lower than that in prednisone group on the 42nd day( P < 0. 05 ). The expression of TGF-β1 and PDGF in the curcumin group were obviously lower than that in the model group on the 28th, 42nd and 56th day[28 d:TGF-β1 :3642. 05 ±839. 31 vs 5067. 35 ±738. 39, P <0. 05 ;PDGF:2957. 55 ±739. 16 vs 4457. 75 ±568. 39, P <0. 05;42 d: TGF-β1: 2689. 73 ± 529.22 vs 4089. 50 ± 619. 37, P < 0. 01; PDGF: 2834. 46 ± 567. 16 vs 3239. 52 ±628. 26, P <0. 01 ;56 d:TGF-β1: 1968.57 ±408. 36 vs 2968.20 ±498.42, P <0. 01 ;PDGF: 1083.36 ±381.35 vs 2019. 40 ±412. 36, P <0. 01 ], which was lower than that in prednisone group on the 42nd and 56th day (42 d,TGF-β1 :3529. 07 ±981.35,PDGF:2618. 34 ±813. 34;56 d,TGF-β1 :2530. 83 ±439. 37,PDGF: 1738. 35 ±536. 62, Pall <0. 05 ) , and it had no obvious difference compared with control group on the 56th day ( P > 0. 05 ). Conclusion Curcumin could alleviate bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats at the fibrosing stage by inhibiting the expressions of TGF-β1 and PDGF.     

TGF-β1对皮肤成纤维细胞的P—ERK表达的影响

目的 探讨TGF-β1刺激后对皮肤成纤维细胞中磷酸化ERK表达的影响及相互关系.方法 以原代培养人正常皮肤成纤维细胞为研究对象.细胞分2组：浓度组：10 ng/ml、5 ng/ml、1.0 ng/ml、0 ng/ml.时间组：给予10 ng/ml的TGF-β1刺激不同时间,分别在0、15、30、60、120 min的时间点提取蛋白.采用Western blotting法检测成纤维细胞中磷酸化ERK蛋白的表达变化.结果 浓度组及时间组p-ERK蛋白表达与对照组相比均有差异（P〈0.05）,随着TGF-β1剂量增加和作用时间延长,其磷酸化ERK蛋白表达水平逐渐增强,在TGF-β1 5 ng/ml时p-ERK水平达作用最强,在作用60 min时p-ERK达高峰.结论 随着TGF-β1浓度增加及作用时间延长,大剂量TGF-β1时可上调体外培养成纤维细胞内的ERK信号蛋白活性.TGF-β1诱导的成纤维细胞的p-ERK水平增高可能是依赖ERK通路激活的,但ERK通路与TGF-β/Smad通路存在交互作用的机制,目前还无定论.     

SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c-sis表达影响的体外研究

目的　探讨SiO2 对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c sis表达的影响以期进一步了解原癌基因c sis在矽肺发病中的作用。方法　采用支气管肺泡灌洗方法获得肺泡巨噬细胞 (alveolarmacrophage ,AM)。体外予SiO2 对AM进行不同时间的处理 ,利用RT PCR方法检测c sismRNA表达 ,结果用计算机自动分析系统进行定量分析。结果　AM中c sis在SiO2 处理后存在高表达 ,处理时间不同其表达量也不同 ,3 0min即有表达 ,1h表达达高峰 ,以后随处理时间的延长表达量逐渐下降 ,各时间点结果与不加SiO2 处理的同期对照组相比差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论　SiO2 可诱导AM原癌基因c sis出现高表达 ,提示原癌基因c sis可能参与矽肺纤维化早期的形成。     

实验性矽肺早期病变中肺泡Ⅱ型细胞增生的病理学意义

目的 探讨肺泡Ⅱ型细胞增生在矽肺纤维化中的意义。方法 建立大鼠实验性矽肺早期病变模型,光镜和电镜观察其肺内病变及肺泡Ⅱ型细胞增生;用免疫组织化学、原位杂交、免疫电镜、原位杂交与免疫组织化学双标技术检测其肺泡Ⅱ型细胞内转化生长因子β（TGFβ1）和血小板源性生长因子－B（PDGF－B）的基因表达。结果 （1）大鼠矽肺模型主要形态学改变：灶性间质性炎症,细胞结节和轻度纤维组织增生,肺泡Ⅱ型细胞明显增生。（2）实验组大鼠增生的 肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1mRNA呈弱阳性,未见TGFβ1蛋白、PDGF－BmRNA和蛋白表达。结论 肺泡Ⅱ型细胞增生是矽肺早期的病变之一;增生的肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1和PDGF－B基因表达上调,在矽肺纤维化的早期病变中可能起重要作用。     

实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子动态变化

目的检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平。方法将SPF级成年雄性SD大鼠随机分为染尘组和对照组,每组42只。模型组采用非气管暴露法一次性注入1 m L二氧化硅悬液(100 mg/m L)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量灭菌生理盐水。分别在染尘第1天、1周、2周、3周、6周、9周和12周各处死6只大鼠,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素18(IL-18)、白介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)及IFN-γ/IL-4的表达水平。结果染尘组TNF-α表达量均高于对照组(P0.05);染尘组IFN-γ在染尘第1天~2周表达量高于对照组(P0.05);染尘组IL-18表达量均高于对照组,差异无统计学意义;染尘组IL-4在染尘第1周表达量低于对照组(P0.05),第9周及12周高于对照组(P0.05);染尘组IL-10在染尘第6~9周表达量高于对照组(P0.05);染尘组Th1/Th2比值随染尘时间增长而降低,染尘组Th1/Th2在染尘第1天~2周比值高于对照组(P0.05)。结论在矽肺的发生发展过程中细胞因子发生变化:Th1型细胞因子持续高表达,Th2型细胞因子表达量先降低后升高。