CXCR4在鼻面部基底细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨CXCR4在鼻面部基底细胞癌、癌组织手术切缘及癌旁正常皮肤组织中的表达及临床意义。方法通过免疫组织化学方法检测60例基底细胞癌组织、手术切缘及30例癌旁正常组织中CXCR4的表达。结果 CXCR4在鼻面部基底细胞癌组织中的阳性表达率为80%（48/60）,在病理学为阴性的手术切缘中的阳性表达率为33%（20/60）,癌旁正常组织中的阳性表达率为10%（3/30）,3组之间有统计学意义（P〈0.05）。CXCR4的表达与肿瘤的病理类型有关,而与年龄、性别及肿瘤的大小无关。结论 CXCR4在鼻面部基底细胞癌中呈高表达,其表达的程度与病理类型有关,并可作为预测肿瘤安全切缘的分子标记物。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的 检测基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor-1,SDF-1）及其受体CXCR4 ( CXC chemokine receptor 4 ) 在喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）中的表达情况,并分析两者与喉鳞癌临床病理特征的关系,探讨SDF-1/CXCR4在喉鳞癌发生发展中的作用。方法　采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学法检测40例喉鳞癌组织和25例癌旁组织中SDF-1和CXCR4的表达情况。结果　①SDF-1、CXCR4 mRNA在喉鳞癌组织中的表达量（0.079±0.018、0.161±0.0 41）,高于在癌旁组织（0.0 21±0 . 0 05、0.035±0.007）中的表达量。SDF-1 mRNA的表达与淋巴结转移有关,CXCR4 mRNA的表达与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关。②免疫组化结果显示,SDF-1和CXCR4蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率分别为52.5%和57.5%,高于对照组的20.0%和28.0%。SDF-1蛋白的表达与肿瘤临床分期和淋巴结转移有关,CXCR4蛋白的表达与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关。结论　SDF-1/CXCR4生物学轴在喉鳞癌的发生发展及转移过程中起促进作用。     

miR-129-5p靶向调节果蝇形态同系物2基因抑制喉鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究

目的　探讨miR-129-5p对喉鳞癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法　运用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time f luorescence quantification polymerase chain reaction，qRT-PCR）法检测人支气管上皮细胞HBE、喉鳞状细胞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p、DIAPH2的表达；将miR-NC组（转染miR-NC）、miR-129-5p组 （转染miR-129-5p mimics）、anti-miR-NC组（转染antimiR-NC）、anti-miR-129-5p组（转染anti-miR-129-5p）、si-NC组（转染si-NC）、si-DIAPH2（果蝇形态同系物2，Drosophila Homologue of Diaphanous2，DIAPH2）组（转染si-DIAPH2）、miR-129-5p+pc DNA组（共转染miR-129-5p和pc DNA）、miR-129-5p+pc DNA-DIAPH2组（共转染miR-129-5p和pc DNA-DIAPH2），用脂质体法转染HN4、TU177细胞；Western blot检测细胞中DIAPH2、细胞周期蛋白依赖激酶1（cyclinD1）、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase-3）、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9（cleaved-caspase-9）的蛋白表达；MTT法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-129-5p与DIAPH2的结合力。结果　与人支气管上皮HBE相比，喉鳞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p 表达均显著降低，DIAPH2表达显著升高（P <0.05）；过表达miR-129-5p、敲减DIAPH2均可显著抑制HN4、TU177细胞增殖、促进凋亡、下调cyclinD1、上调cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9；miR-129-5p可抑制野生型DIAPH2细胞的荧光活性，并负向调控DIAPH2的表达；过表达DIAPH2可逆转miR-129-5p对Hep-2细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论　miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌的增殖，促进凋亡，其机制可能与靶向DIAPH2相关，将可为miR-129-5p靶向治疗喉鳞状细胞癌提供新的依据。     

SDF-1/CXCR4生物轴在喉鳞状细胞癌中的表达和意义

目的:观察喉鳞状细胞癌(LSCC)中基质细胞衍生因子(SDF-1)及其受体融合素即CXCR4的表达情况,研究LSCC中SDF-1与CXCR4表达的相关性,并探讨其在LSCC发生、发展及淋巴结转移过程中的作用和可能机制。方法:应用免疫组织化学法(SP法)检测SDF-1及CXCR4在LSCC组织、癌旁组织、正常喉黏膜及颈部淋巴结中的表达情况,运用Kruskal-Wallis检验、χ2检验、Spearman等级相关等方法进行统计分析。结果:SDF-1及CXCR4在LSCC中的阳性表达率均显著高于癌旁组与正常组(P<0.01);SDF-1及CXCR4的表达与淋巴结转移(P<0.01)、临床分期(P<0.01)和病理分级(P<0.05)有相关性;SDF-1及CXCR4在阳性淋巴结组织中的表达率均高于阴性淋巴结组织(P<0.01);LSCC中SDF-1与CXCR4的表达呈正相关。结论:SDF-1及CX-CR4蛋白在喉癌组织及阳性淋巴结组织中高表达,并与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性,提示二者可能与LSCC的浸润及转移有关,并且在LSCC的发生、发展中有协同作用。     

微小RNA调节声门上型喉癌上皮-间质转化的初步研究

目的 探讨声门上型喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)颈淋巴转移中上皮-间质转化过程相关的小分子RNA(microRNA,miRNA).方法 对12例声门上型喉鳞癌患者(淋巴转移组6例,非淋巴转移组6例)的原发肿瘤组织进行miRNA芯片筛选;对40例声门上型喉鳞癌患者(淋巴转移组20例,非淋巴转移组20例)通过实时定量PCR法验证筛选出的显著差异表达的miRNA;应用生物信息学预测已验证的miRNA的靶基因,根据各基因的功能筛选与上皮-间质转化相关的基因,对应找到可能与声门上型喉鳞癌颈淋巴转移中上皮-间质转化过程相关的miRNA.结果 芯片筛选结果显示10个miRNA在两组间的表达差异有意义,其中在6例转移组中上调的有miR-192、miR-634、miR-223、miR-409、miR-365、miR-143、miR-1224、miR-30d和miR-1249,下调的有miR-494.40例较大样本验证结果与芯片筛选结果相符.通过靶基因预测及功能分析,miR-192、miR-143、miR-409及miR-634可能通过抑制Krüppel样转录因子、E-钙黏蛋白和磷脂酰肌醇3-激酶等靶基因的转录上调上皮-间质转化过程,从而促进声门上型喉鳞癌颈淋巴转移.结论 筛选和验证与声门上型喉鳞癌颈淋巴转移相关的miRNA,miR-192、miR-143、miR-409及miR-634的表达失调可能在声门上型喉鳞癌转移的上皮-间质转化过程中扮演着重要的角色,需要进一步深入研究.     

微小RNA-548c-3p通过靶向调控PCNA基因表达对喉癌细胞增殖及凋亡影响的研究[论著]

目的　探讨微小RNA-548c-3p（miR-548c-3p）对喉癌细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法　用miR-548c-3p mimic、增殖细胞核抗原（PCNA）-siRNA及其阴性对照分别或同时转染喉癌TU686和M4e细胞,用qRT-PCR与Western blot法检测miR-548c-3p和PCNA的表达;MTT法和流式细胞术分别检测转染细胞的增殖和凋亡;双荧光素酶报告基因实验观察miR-548c-3p和PCNA的靶向关系。Western blot法检测PCNA、细胞周期蛋白1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）的表达。结果　miR-548c-3p的表达量在癌旁组织（0.74±0.10）、喉癌组织（1.94±0.16）,TU686细胞（0.35±0.07）和M4e细胞（0.41±0.03）中均呈低表达,而PCNA mRNA和蛋白均呈高表达,差异有统计学意义（P 均＜0.05）。证实PCNA上存在miR-548c-3p的结合位点。上调miR-548c-3p可抑制细胞增殖及CyclinD1、Bcl-2的表达,并可促进细胞凋亡及Bax的表达,差异有统计学意义（P 均＜0.05）;上调miR-548c-3与抑制PCNA对细胞增殖及凋亡的作用相似。pcDNA-PCNA显著减弱miR-548c-3p mimic对细胞增殖和凋亡的作用。结论　miR-548c-3p通过抑制PCNA表达而降低喉癌细胞增殖能力并诱导细胞凋亡。     

长链非编码RNA核富集转录体1促进喉鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)NEAT1对喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞迁移和侵袭的影响,并进一步分析miR-429/锌指E-盒结合同源异形盒1(ZEB1)轴在其中发挥的作用。方法 慢病毒转染建立稳定敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞,通过RT-qPCR检测细胞lncRNA NEAT1表达以验证转染效率,通过Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过Western blot检测细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。通过生物信息学分析miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间的潜在结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。将miR-429抑制剂转染敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞,通过Western blot检测细胞ZEB1表达。进一步检查敲减ZEB1对抑制miR-429的敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移、侵袭和EMT的影响。结果 敲减lncRNA NEAT1降低LSCC细胞lncRNA NEAT1表达,抑制细胞迁移和侵袭并下调细胞N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间存在潜在结合位点,且miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。抑制miR-429逆转了敲减lncRNA NEAT1对LSCC细胞ZEB1表达的抑制作用。此外,敲减ZEB1逆转了抑制miR-429对敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移和侵袭的促进作用及EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达的上调作用。结论 lncRNA NEAT1促进LSCC细胞迁移和侵袭,其机制可能与海绵化miR-429上调ZEB1表达促进LSCC细胞EMT有关。     

趋化因子受体CXCR4和CCR7在喉癌组织中的表达

目的：观察喉癌组织中趋化因子受体CXCR4和CCR7的表达情况,初步了解CXCR4和CCR7与喉癌恶性表现的关系,从而为临床治疗提供理论基础。方法：应用免疫组织化学SP法对实验组30例喉癌组织标本和对照组18例正常喉部黏膜组织标本中的趋化因子受体CXCR4和CCR7的表达进行检测,并应用计算机辅助图像分析仪对表达结果进行图像分析,然后进行统计学分析。结果：①趋化因子受体CXCR4和CCR7蛋白在喉癌组织中呈强阳性表达,且CXCR4和CCR7蛋白表达水平显著高于对照组（P〈0．01）;②癌细胞分化程度高的癌组织趋化因子受体CXCR4和CCR7蛋白表达水平显著低于分化程度低的癌组织（P〈0．05）,CXCR4和CCR7蛋白表达水平在Ⅲ～Ⅳ期较Ⅰ～Ⅱ期明显升高（P〈0．01）,淋巴结转移组较无淋巴结转移组均明显升高（P〈0．01）。结论：趋化因子受体CXCR4和CCR7在喉癌组织中的高表达,其表达水平与喉癌的病理分化程度、临床分期及颈部淋巴结转移有关。     

微小RNA通过SIRT1调控小鼠耳蜗老化HEI-OC1细胞凋亡的研究

目的 构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1(house ear institute-organ of Corti 1)老化模型,探索微小RNA-96(miR-96)可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法 CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测p53、p38、caspase-3蛋白表达。q RT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1蛋白表达。miR-96模拟物转染HEI-OC1细胞,qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1、caspase-3蛋白表达。结果 HEI-OC1细胞在15 mg/ml D-半乳糖条件下培养72 h后,凋亡较对照组显著增加（P<0.01）,且p53、p38(P<0.05)及caspase-3(P<0.0001)蛋白表达明显增加。老化组miR-96与SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显减低（P<0.05）。miR-96过表达后,SIRT1 mRNA及蛋白较对照组表达升高,caspas...     

miR-30c对鼻咽癌CNE-1细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 观察miR-30c对鼻咽癌CNE-1细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法 过表达miR-30c质粒载体转染CNE-1细胞,同时设立空质粒载体转染阴性对照组和无处理的空白对照组。荧光定量PCR检测miR-30c表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果 鼻咽癌组织中miR-30c的表达量为0.23±0.05,显著低于癌旁非肿瘤鼻咽组织的0.37±0.08（P <0.01）。过表达miR-30c组表达量（0.46±0.12）显著高于空白对照组（0.17±0.03）和阴性对照组（0.18±0.04）（P 均<0.01）。在24、48、72小时过表达miR-30c组OD值显著低于空白对照组和阴性对照组（P 均<0.01）。过表达miR-30c组G1期细胞比例（90.36±10.23）% 显著高于空白对照组（74.46±9.14）%和阴性对照组（75.25±9.23）%（P <0.01）。过表达miR-30c组凋亡细胞比例（31.06±5.12）%显著高于空白对照组（3.18±0.72）%和阴性对照组（3.56±0.78）%（P <0.01）。结论 过表达miR-30可以现在抑制鼻咽癌细胞增殖、细胞周期以及诱导细胞凋亡。     

Management of cancer of the base of tongue

The management of base of tongue cancer has evolved steadily over time. Organ preservation with primary radiation therapy has produced excellent oncologic and functional outcomes. Concomitant chemotherapy has become important in patients with locoregionally advanced disease. Planned neck dissection after organ preservation therapy continues to be an integral step for regional control. This article reports the results of a literature review of base of tongue cancer emphasizing a multidisciplinary approach to obtain optimal results in terms of cure and quality of life.     

耳廓开放性外伤的治疗方法探析

目的 探讨耳廓开放性外伤的治疗方法。方法 23耳耳廓开放性外伤经彻底清创，肝素生理盐水冲洗伤口后，对位缝合。术后用抗生素抗感染、丹参扩张血管、罂粟碱改善微循环。结果 23耳中2耳失访，18耳完全成活，1耳部分成活，2耳完全坏死。结论 耳廓撕裂伤、断伤、带有皮蒂的耳廓离断伤，由于断端双侧血管丰富，经对位缝合后容易成活。但耳廓完全离断伤由于缺乏血供，经对位缝合后不易成活，可采用去皮血管植入包埋法，带肌蒂皮瓣移植法或尝试显微外科技术施行血管吻合，以提高耳廓完全离断伤的成活率。