益糖康对高糖诱导人肾小管上皮HK-2细胞上皮间质转化的影响

目的:探讨益糖康是否通过抑制肾小管上皮细胞发生上皮-间质转化(EMT)进而减轻糖尿病对肾脏的早期损伤.方法:40只SD雄性大鼠随机分成生理盐水组(1mL/100g)、益糖康组(2.10g/100g)、二甲双胍组(9.11g/100g)、二甲双胍+益糖康组(4.55g/100g二甲双胍+1.05g/100g益糖康煎剂),...     

川芎嗪对高糖作用下人晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪注射液对高糖作用下人晶状体上皮细胞(HLEs)凋亡的影响。方法体外培养HLE-B_3,将传代的细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+川芎嗪组,分别用含5.5 mmol/L葡萄糖、25 mmol/L葡萄糖、25 mmol/L葡萄糖+0.2μg/mL川芎嗪的培养基培养48 h。TUNEL染色法检测3组HLEs的凋亡率,Western blot法检测3组促凋亡蛋白Caspase-3及抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果高糖组HLEs凋亡率高于正常对照组及高糖+川芎嗪组(P0.05),高糖+川芎嗪组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,高糖组Caspase-3表达升高(P0.05),高糖+川芎嗪组表达无明显变化(P0.05);与正常对照组比较,高糖组Bcl-2表达降低(P0.05),高糖+川芎嗪组差异无统计学意义(P0.05)。结论川芎嗪可抑制高糖作用下HLEs凋亡的发生。     

三七总皂苷对人肺泡上皮细胞间质转化的抑制作用

该研究探讨了三七总皂苷对TGF-β1诱导的A549人肺泡上皮细胞间质转化和细胞外基质分解能力的影响。首先应用MTT法检测三七总皂苷对A549细胞增殖的影响,在12.5~200 mg·L^-1,未发现三七总皂苷对A549细胞增殖有显著性的影响。接着将A549细胞分组。除正常组外,其余各组细胞应用5 μg·L^-1TGF-β1刺激,其中TGF-β1组正常培养,其他刺激组分别用50,100,200 mg·L^-1三七总皂苷干预。收集细胞和上清,先后采用圆形度值评估细胞的形态变化,免疫组化法检测特异性蛋白的表达以及酶联免疫吸附法检测MMP-9和TIMP-1的水平。TGF-β1刺激后,与正常组比较,细胞的形态发生变化,圆形度值显著减少(P<0.01);上皮特征性蛋白E-cad表达显著减少(P<0.05)而间质特征性蛋白α-SMA和FN的表达显著增加(P<0.05)。与TGF-β1组比较,三七总皂苷干预能显著增加圆形度值、降低α-SMA和FN的表达(P<0.05,P<0.01),但对E-cad的表达没有明显的影响。另外,TGF-β1刺激后,细胞分泌MMP-9的能力显著增强(P<0.05),而TIMP-1的分泌量未见显著变化。与TGF-β1组比较,三七总皂苷增加MMP-9的分泌量(P<0.05),减少TIMP-1的分泌量(P<0.05,P<0.01)。上述结果表明三七总皂苷能抑制肺泡上皮细胞的间质转化,促进细胞外基质分解,具有治疗肺纤维化的应用前景。     

桑白皮提取物桦木酸对TGF-β1诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化的抑制作用

目的探讨桑白皮提取物桦木酸对生长转化因子(TGF-β1)诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化的抑制作用及其可能机制。方法以HPAEpiC细胞为研究对象,采用0.5 ng·mL^-1 TGF-β1诱导的上皮间质转化模型进行实验。设置空白对照组、模型组、桦木酸给药组。MTT法检测桦木酸对HPAEpiC细胞存活率的影响;Real-time PCR分析桦木酸对诱导后的HPAEpiC细胞内miR-200b-5p、miR-200c-5p表达水平及上皮间质转化标志物(Coll、E-cad、α-SMA mRNA)表达水平的影响。酶联免疫吸附法(ELISA)检测桦木酸对诱导后HPAEpiC细胞内羟脯氨酸(HYP)分泌水平的影响。结果桦木酸对HPAEpiC细胞增殖活性呈单向抑制趋势,且增殖抑制率与药物浓度呈依赖关系。与模型组比较,桦木酸可有效抑制诱导后细胞内miR-200b-5p(P<0.05)、miR-200c-5p(P<0.01,P<0.05)表达,同时降低细胞内ColⅠ(P<0.01)、α-SMA mRNA(P<0.05)表达,促进E-cadherin mRNA表达(P<0.01,P<0.05),降低细胞内HYP含量(P<0.01,P<0.05)。结论桑白皮提取物桦木酸对TGF-β1诱导的人肺泡上皮细胞HPAEpiC上皮间质转化有一定的抑制作用,为特发性肺纤维化潜在的治疗药物,其可能的作用机制为抑制miR-200b-5p、miR-200c-5p表达;下调ColⅠ和α-SMA mRNA,上调E-cad mRNA。     

地黄对人肺泡上皮细胞间质转化的抑制作用

目的:探讨地黄(环烯醚萜类苷、低聚糖和多糖提取物按照一定比例形成的组合物)对人肺泡上皮细胞间质转化的影响和机制。方法:MTT法分析地黄对A549细胞增殖的影响。TGF-β1诱导A549肺泡上皮细胞的间质转化并进行不同剂量的地黄干预;圆形度定量法和免疫细胞化学法分析细胞形态和细胞E-cad、FN、Collagen-I和α-SMA蛋白的表达;双抗体夹心酶联免疫吸附法检测细胞分泌MMP-9和TIMP-1水平。结果:地黄对A549细胞增殖的抑制作用随着剂量的增加而增强,200μg/ml剂量显著抑制细胞增殖(P0.01)。与正常组比较,TGF-β1组圆形度和E-cad表达显著降低,α-SMA、FN和Collagen-I表达显著升高,MMP-9和TIMP-1分泌量显著增加(P0.01)。与TGF-β1组比较,50μg/ml、100μg/ml组的圆形度和E-cad表达显著升高,α-SMA表达显著降低;地黄对FN、Collagen-I的表达和MMP-9分泌量没有显著的影响;25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml组TIMP-1分泌量显著增加。结论:地黄能有效抑制A549人肺泡上皮细胞的上皮间质转化,作用机制涉及TGF-β1信号转导通路,尚有抑制MMP-9降解细胞外基质的作用。     

天冬多糖逆转缺氧诱导的上皮间质转换抑制人肝癌细胞迁移

目的:探讨天冬多糖(ASP)逆转缺氧(1%氧)诱导的上皮间质转化(EMT)抑制人肝癌细胞迁移,揭示ASP抗肝癌作用的可能机制。方法:人肝癌细胞SK-Hep1和Hep-3B分为常氧组,缺氧组,缺氧+ASP(2. 5 mg/m L)组,缺氧+ASP(5 mg/m L)组,缺氧+ASP(10 mg/m L)组。用CCK8法和创伤愈合实验分别检测各组人肝癌细胞的增殖和迁移;观察各组人肝癌细胞的形态学变化; Western blot法检测各组人肝癌细胞EMT相关蛋白表达的变化。结果:CCK8实验结果表明ASP在缺氧培养24 h和48 h均可明显地抑制人肝癌细胞的增殖(P 0. 05)。划痕实验结果表明,缺氧组的人肝癌细胞较常氧组迁移能力明显增强(P 0. 05),加入ASP后可明显的抑制缺氧诱导的人肝癌细胞的迁移,且具有明显的剂量依赖性(P 0. 05)。细胞形态学观察发现,缺氧组较常氧组人肝癌细胞形态变长,呈间质型,加入不同浓度ASP后形态变圆,呈上皮型; Western blot法检测发现,与常氧组相比,缺氧组人肝癌细胞E钙黏素表达下调,N钙黏素和波形蛋白表达上调,加入不同浓度ASP后,E钙黏素表达开始上调,N钙黏素和波形蛋白表达开始下调。结论:ASP可明显的抑制缺氧诱导的人肝癌细胞迁移,其机制可能是通过逆转缺氧诱导的EMT实现的。     

柚皮素基于TGF-β2介导对白内障晶状体病理性上皮间充质转化的作用研究

目的 探讨白内障的发病机制是否与人晶状体上皮细胞系B3(HLE-B3)的病理性上皮间充质转化(EMT)有关,并评价柚皮素基于转化生长因子-β2(TGF-β2)介导对白内障晶状体病理性EMT的作用及机制。方法 常规培养HLE-B3细胞,筛选TGF-β2和柚皮素的最佳浓度后,TGF-β2处理HLE-B3细胞诱导EMT,建立白内障体外模型。随机将细胞分为对照组(CG)、TGF-β2组(TGF-β2)、柚皮素组(Nar)、柚皮素+TGF-β2组(Nar+TGF-β2)培养48 h,采用跨孔迁移实验检测细胞侵袭能力,伤口愈合实验测定HLE-B3的迁移能力,细胞计数法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)法测定细胞增殖能力。Western Blot和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测EMT相关标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)的表达水平。结果 (1)细胞活性与增殖：与CG组比较,Nar组和Nar+TGF-β2组细胞活性较低(t_Nar=16.404,t     

急性高眼压对兔晶状体上皮细胞的影响

目的观察急性高眼压状态下兔晶状体上皮细胞凋亡,Bcl-2、PCNA表达的动态变化,以证实凋亡是青光眼性白内障的早期表现。方法36只健康无眼疾成年灰兔随机分为A、B、C、D4组,每组18只眼。将每组再随机分入对照组、50 mm Hg组、80 mm Hg组,保证每只兔两只眼不在同一组。对照组做玻璃体穿刺,不灌注。50 mm Hg组、80 mm Hg组玻璃体穿刺后灌注乳酸钠林格注射液,调整灌注高度控制相应眼压。A、B、C、D组动物分别在灌注3、6、9、12I小时后处死并摘除眼球,取晶状体前囊膜制作晶状体上皮细胞铺片,进行TUNEL染色,Bcl-2、PCNA免疫组化染色。结果1.对照组极少见凋亡细胞,随眼压升高、灌注时间的延长,晶状体上皮细胞出现凋亡并且数量增加(P<0.01)。2.BCL-2蛋白在对照组中有少量表达,高眼压状态下表达随时间延长、眼压增高而增加、染色增强。与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。3.PCNA阳性染色位于晶状体赤道部,中央区无阳性细胞。对照组与实验组无统计学差异(P>0.05)。结论在急性高眼压状态下,晶状体上皮细胞开始出现凋亡并随眼压程度、高眼压持续时间的延长而增加。认为凋亡也是青光眼性白内障起始的细胞学基础。     

南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响

目的：结合体内外实验研究南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的作用及分子机制。方法：取对数生长期HepG2细胞,除对照组外,分别给予南蛇藤提取物10、20、40、80、160 μg?mL^-1培养,采用Western Blotting法检测上皮间质转化（EMT）相关蛋白的表达水平;斑马鱼胚胎,于受精后48 h开始给药,正常组给予E3缓冲液,DMSO组为含1%DMSO的E3缓冲液,南蛇藤组各药物浓度分别为10、20、40、80、160 μg?mL^-1;给药24 h后,以Western Blotting法检测mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果：与对照组相比,南蛇藤提取物各浓度组明显增加E-cadherin的表达量,降低vimentin和mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结论：南蛇藤提取物能在一定程度上逆转人肝癌细胞EMT,其分子机制可能与mTOR 信号通路相关,mTOR可作为临床治疗肝癌的新靶点。     

茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞影响的研究

目的 探讨茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞形态及生长情况的影响. 方法 取第2代对数生长期的大鼠晶状体上皮细胞,给予不同浓度的葡萄糖、茶多酚进行培育24小时,观察高糖条件下及茶多酚干预后大鼠晶状体上皮细胞形态的变化,MTT法检测0.1μM、0.3μM浓度的茶多酚对高糖培养的大鼠晶状体上皮细胞生长情况的影响.结果 在高葡萄糖浓度的培养条件下,大鼠晶状体上皮细胞死亡率增加.生长受到抑制.而用茶多酚干预的高糖条件的大鼠晶状体上皮细胞则较好的保持了上皮细胞的形态,细胞死亡较少,生长良好.大鼠晶状体上皮细胞的存活率和抑制率两两比较差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度的茶多酚两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 茶多酚对高糖损伤的晶状体上皮细胞具有保护作用.     

理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响

目的:探讨理冲汤加减联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化(EMT)的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测理冲汤加减及5-FU单独和联合使用对HepG2细胞生长影响;应用中效原理进行统计分析,确定联合用药时的药物效应-合用指数的关系,判定药物间的相互作用,确定后续实验给药浓度及时间;划痕实验检测理冲汤加减联合5-FU对HepG2细胞迁移能力的影响;细胞侵袭实验(transwell小室)检测理冲汤加减联合5-FU对HepG2细胞侵袭能力的影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测理冲汤加减联合5-FU作用HepG2细胞24 h后对EMT相关基因上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),神经型钙黏蛋白(N-cadherin),锌指转录因子(Snail,Twist) mRNA表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测理冲汤加减联合5-FU作用HepG2细胞24 h后EMT相关蛋白E-cadherin,N-cadherin,Snail,波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:MTT比色法结果显示,随着药物浓度增加,理冲汤加减,5-FU单药或联合用药对HepG2细胞生长的抑制效应也增加;应用中效原理进行统计分析显示,两药在低剂量合用24 h后对HepG2细胞可以产生较好的协同效应,故选用理冲汤加减,5-FU作用HepG2细胞24 h的25%抑制浓度(IC25)即800 mg·L-1理冲汤加减,3. 125 mg·L-15-FU;设空白组,5-FU组,理冲汤加减+5-FU组,理冲汤加减组进行后续实验;划痕和侵袭实验显示,理冲汤加减,5-FU单独及联合均能抑制HepG2细胞迁移侵袭能力(P 0. 05,P 0. 01),与5-FU组比较,理冲汤加减+5-FU组抑制能力更强(P 0. 05,P 0. 01)。与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin mRNA表达上调,N-cadherin,Snail,Twist mRNA表达下调(P 0. 05,P 0. 01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin mRNA表达上调,N-cadherin,Snail,Twist mRNA表达下调(P 0. 05,P 0. 01)。与空白组比较,5-FU组,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin蛋白表达下调(P 0. 05,P 0. 01);与5-FU组比较,5-FU+理冲汤加减组E-cadherin的表达上调,N-cadherin,Snail,Vimentin蛋白表达下调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:理冲汤加减方与5-FU在低剂量合用24 h后对HepG2细胞可以产生较好的协同效应,并且能明显抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力,上调肝癌细胞内EMT相关标志物E-cadherin的表达,下调N-cadherin,Snail,Vimentin,Twist的表达,据此推测,抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力及EMT相关mRNA的表达,从而增强化疗药物的疗效,可能是理冲汤加减方联合5-FU协同作用的机制之一。     

槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:研究槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞(VECs)的保护作用。方法:实验分对照组,损伤组和槲皮素保护组。用含10 mg/ml葡萄糖、20％胎牛血清的DMEM培养基离体培养 VECs。MTT比色法测细胞存活数量,荧光分光光度法测细胞释放一氧化氮(NO)量及细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成量,分光光度法测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量。结果:10~(-2)、10~(-3)、10~(-4)、10~(-5)mg/ml槲皮素可促进高糖损伤的VECs增殖,10~(-2)、10~(-3) mg/ml槲皮素,可抑制高糖损伤的VECs释放LDH,减少MDA生成量,促进其释放NO。结论:槲皮素对高糖损伤VECs有保护作用。     

基于Pink-1/Parkin信号通路补青颗粒含药血清对高糖诱导人晶状体上皮细胞线粒体自噬的影响

目的:探讨补青颗粒含药血清对高糖诱导的人晶状体上皮(HLE)细胞线粒体自噬的影响。方法:体外培养HLE细胞,空白组将HLE细胞在正常培养液中培养48 h,模型组在空白组培养液中添加30 mmol·L~(-1)葡萄糖,实验组在模型组基础上加入不同含药血清刺激培养48 h。采用CCK-8法检测不同含药血清对高糖诱导的HLE细胞增殖活力的影响;利用免疫荧光技术及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Pink-1,Parkin,p62蛋白表达。结果:CCK-8法结果显示模型组较空白组HLE细胞增殖活力增强(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒高、中、低剂量组细胞增殖活力均降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力明显降低(P0.01);补青颗粒不同剂量组间比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力显著降低(P0.01)。细胞免疫荧光结果显示Pink-1,Parkin,p62蛋白主要在细胞胞浆表达,细胞核内亦有少量表达。Western blot结果显示与空白组比较,模型组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01,P0.05),p62表达降低(P0.01)。结论:补青颗粒对高糖诱导的HLE细胞线粒体自噬相关蛋白的表达有显著影响,线粒体自噬的改变可能是补青颗粒改善白内障发病的机制之一。     

蚕茧、马齿苋对2型糖尿病大鼠糖脂代谢影响的实验研究

目的 探讨蚕茧、马齿苋对实验性2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响.方法 利用链尿佐菌素建立2型糖尿病大鼠动物模型.随机分为糖尿病模型组、蚕茧组、马齿苋组、蚕茧+马齿苋组,另设正常对照组.治疗8周,检测大鼠血糖(Glu)、三酰甘油(TG)、超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量及活性,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 与DM模型组比较,蚕茧+马齿苋联合组血糖降低了53.3%(P<0.01); TG降低了44.1%(P<0.05);HOMA-IR降低了56.1%(P<0.05);SOD、GSH分别升高了25%(P<0.01)和8.4%(P<0.05);MDA降低了53.6%(P<0.05);其余各组间差异无统计学意义.结论 蚕茧和马齿苋联合补充可明显改善糖尿病大鼠糖脂代谢、减轻胰岛素抵抗、并能有效提高其抗氧化能力、减少脂质过氧化产物的生成.     

马齿苋提取物对肝癌细胞HepG-2抑制作用的实验研究

目的观察马齿苋提取物对肝癌HepG-2的抑制作用。方法采用MTT比色法观察马齿苋提取物抑制肝癌HepG-2细胞增殖;采用流式细胞仪检测马齿苋对HepG-2细胞周期分布的影响。结果马齿苋提取物可抑制肝癌HepG-2细胞增殖,其作用具有时间和浓度依赖性;可改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于S期,与对照组比较,细胞凋亡率差异有显著性(P<0.01)。结论马齿苋提取物可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

糖肾康对高糖诱导人肾小管上皮细胞分泌基质金属蛋白酶-9及其抑制剂-1的影响

目的探讨糖肾康防治糖尿病肾病的作用机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）分为空白组、高糖诱导组（30 mmol/L D-葡萄糖）、对照组（30 mmol/L D-葡萄糖＋10%空白血清）和糖肾康低（30 mmol/L D-葡萄糖＋5%糖肾康药物血清）、中（30 mmol/L D-葡萄糖＋10%糖肾康药物血清）、高剂量组（30 mmol/L D-葡萄糖＋20%糖肾康药物血清）。药物干预24、48 h后,ELISA检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其抑制剂-1（TIMP-1）的含量。结果 HK-2经高糖诱导后,MMP-9分泌显著减少,TIMP-1分泌显著增加,与空白组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;经糖肾康干预后,MMP-9含量显著上升,TIMP-1含量显著下降,与高糖诱导组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论糖肾康通过调控高糖诱导人肾HK-2纤维化因子的分泌,达到防治糖尿病肾病的目的。     

内障丸加减方对氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨中药单体与含药血清干预氧化损伤的LECs凋亡作用的异同.从分子生物学水平的变化,阐明内障丸加减方预防或延缓SC发生发展的作用机理.方法 经24小时孵育的SD大鼠晶状体,每组6例,共30例,取囊膜铺片.以TUNEL-AP试剂盒检测LECs的凋亡,光镜下观察凋亡细胞与非凋亡细胞的分布情况,并随机选取10个视野拍摄...     

地黄多糖对大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞诱导分化作用的研究

目的:探讨地黄多糖体外对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)分化为神经样细胞的诱导作用.方法:以大鼠BMSCs为研究对象,采用流式细胞仪检测BMSCs表面标志,MTT法检测细胞生长曲线,当第3代细胞爬片达到80％以上汇合时,分为对照组、化学方法诱导组(5 mmol·L -1,β-mercap toethanol)、脑源性神经生长因子(10 μg·L-1,BDNF)组和地黄多糖组(200 mg·L-1)进行诱导,6h后应用免疫细胞化学染色法检测各实验组神经元巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,RT-PCR检测nestin,NSE,βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和GFAP mRNA的表达情况.结果:经分离鉴定培养5代以内大鼠BMSCs增殖旺盛、具有较好的细胞活力;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,对照组不表达神经细胞标志物,各诱导组诱导后有特异性神经细胞标志物表达.其中地黄多糖组Nestin,NSE阳性细胞率分别为( 56.74±1.36)％,(73.37±1.27)％,高于化学诱导组(28.21±2.43)％,(2.31±2.72)％和神经生长因子组(31.3±1.61)％,(28.87±1.65)％,(P＜0.05);GFAP阳性细胞率(20.17±1.27)％低于化学诱导组和神经生长因子组,差异具有统计学意义(P＜0.05);化学诱导组Nestin,NSE和GFAP阳性细胞率与生长因子组比较,差异无统计学意义.结论:地黄多糖具有诱导BMSCs向神经样细胞分化的作用,主要向神经元样细胞方向诱导.     

间断高浓度葡萄糖对雪旺细胞的损伤机制及丹参酚酸B的保护作用

目的:研究间断高浓度葡萄糖对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)损伤机制及丹参酚酸B(Sal B)干预作用。方法:原代培养大鼠SCs,将其分为正常组、稳定性高糖组、间断高浓度葡萄糖组、渗透压对照组及间断高浓度葡萄糖加不同浓度Sal B(25,50,100μmol·L-1)处理组。流式细胞仪检测细胞凋亡,DHE探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,JC-1探针检测线粒体膜电位(MMP)变化,ELISA法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量。实时荧光定量PCR检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达;Western blot(蛋白印迹)法检测Bcl-2,Bax,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达。结果:与正常组及稳定性高糖组相比,间断高浓度葡萄糖明显提高了SCs内ROS水平(P<0.01),增加了8-OHd G的生成(P<0.01),降低了MMP(P<0.05,P<0.01),下调SCs内Bcl-2蛋白及mRNA的表达(P<0.01),上调Bax蛋白及mRNA的表达(P<0.01),促进了Caspase-3及PARP的活化(P<0.01),并增加了SCs的凋亡(P<0.01)。不同浓度的Sal B可以降低间断高浓度葡萄糖所导致的SCs内ROS及8-OHd G浓度的增高(P<0.01),提高MMP(P<0.01),上调Bcl-2蛋白及mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),下调Bax蛋白及其mRNA的表达(P<0.01),降低了PARP及caspase-3的活化(P<0.01),抑制了SCs凋亡(P<0.01)。结论:间断高浓度葡萄糖对SCs的损伤作用比稳定性高糖更为明显,Sal B可以抑制间断高浓度葡萄糖所致的SCs损伤。     

参芪扶正注射液诱导成人间质干细胞治疗脑梗塞的实验研究

目的观察参芪扶正注射液(简称参芪液)诱导成人间质干细胞(hMSCs)在脑梗塞大鼠脑内的分化及其对模型大鼠神经功能的影响。方法建立左大脑中动脉梗塞模型大鼠,将在体外扩增的hMSCs经参芪液诱导0．5h后注入模型大鼠脑内。观察hMSCs在大鼠脑内的存活、分化及对模型大鼠神经功能的改变。结果hMSCs移植排斥反应低,可在大鼠脑内存活6周以上;移植前后脑梗塞面积无明显变化;免疫组化表明hMSCs在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型大鼠的肢体运动功能和触觉功能均有改善。结论参芪液可诱导hMSCs在体内分化为神经元,hMSCs有可能成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞。