儿童原发性肾病综合征肾脏C-myc表达的意义

目的观察C-myc在儿童原发性肾病综合征不同肾脏病理的表达以及与肾病理损害的相关性，说明C-myc再表达在儿童原发性肾病综合征的作用。方法采用免疫组化法分析C-myc在30例原发性肾病综合征不同病理的表达，并与肾病理积分作相关性分析。结果（1）所有肾病理切片均存在不同程度C-myc阳性显色，正常对照组无阳性表达。肾小球区主要在足细胞表达，个别内皮细胞有表达；肾小管区表达较为强烈，主要部位在近端肾小管，远端肾小管表达较少，集合管及肾小管间质、血管部位未见阳性表达。（2）不同肾脏病理类型间C-myc表达在足细胞和远端肾小管部位差异不明显，近端肾小管的表达FSGS与MsPGN、MCD比较均明显减少（P＜0．05）。（3）C-myc表达与肾小球和肾小管病理积分均呈负相关（P＜0．05）。结论C-myc再表达参与了儿童原发性肾病综合征的病理发生，可能与损伤上皮细胞的增殖与再生有关。     

婴儿肝病综合征患儿外周血有核细胞Toll样受体的表达

目的:探讨婴儿肝病综合征患儿外周血有核细胞Toll样受体(TLR s)的表达。方法:婴儿肝病综合征患儿25例,正常对照组12例。采用RT-PCR法检测外周血有核细胞TLR 4、TLR 2 mRNA的变化,采用ELISA法检测血清TNFα、IL-6水平,同时检测内毒素水平,并分析TLR 4、TLR 2 mRNA水平与血清总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)的关系。结果:婴儿肝病综合征患儿TLR 4、TLR 2 mRNA的表达及TNFα、IL-6水平明显高于正常对照组,差异有极显著性意义(P<0.01)。两组内毒素水平无明显差异(P>0.05)。TLR 4、TLR 2 mRNA的表达与血清TB、DB无相关关系(P>0.05)。结论:婴儿肝病综合征患儿体内TLR s的表达增强,提示TLR s在婴儿肝病综合征发病机理中起作用。     

Toll样受体2和4在输卵管慢性炎症组织中的表达

目的:探讨Toll样受体2和4(TLR2、TLR4)在输卵管组织中的表达及与输卵管慢性炎症病变的关系。方法:选择2011年1～3月在嘉兴市妇幼保健院手术切除输卵管的病例45例,经过患者知情同意后开展本研究。将临床获得的标本分3组:输卵管正常组(10例)、轻度病变组(18例)和重度病变组(17例)。用免疫组化和定量PCR检测TLR2、TLR4在输卵管组织中的表达。结果:TLR2和TLR4在各组输卵管上皮细胞的胞浆和胞膜均有表达。在轻度病变组中,TLR2蛋白及mRNA表达均高于正常组(P均<0.05)和重度病变组(P均<0.01);TLR4蛋白表达高于重度病变组(P<0.05),与正常组表达无差异,TLR4 mRNA表达高于正常组和重度病变组(P均<0.01)。TLR2、TLR4、TLR2 mRNA和TLR4 mRNA每种物质在重度病变组表达与正常组相比,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:输卵管组织表达TLR2、TLR4,并在慢性炎症轻度病变时表达上调,随着炎症加重致输卵管发生严重病变时表达下降,推测其可能参与输卵管炎症病变的发生发展。     

创伤性脑损伤后小鼠肠道Toll样受体4的表达

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在创伤性脑损伤后肠道的表达变化。方法:将小鼠随机分为对照组和脑损伤后4 h、24 h和7 d组,每组5只。观察小鼠脑损伤后肠黏膜组织的改变,用免疫组化技术观察TLR4蛋白表达,实时RNA检测肠道TLR4mRNA表达。结果:小鼠创伤后4 h肠黏膜出现病理改变,并逐渐加重。TLR4蛋白阳性细胞伤后4 h升高,24 h达到高峰,7 d下降。TLR4mRNA水平伤后4 h升高,24 h达到高峰,7 d下降。结论:小鼠创伤性脑损伤后,可引起肠道TLR4表达增高。     

不同类型干扰素对Toll样受体在Huh7细胞中表达的影响

目的 探讨不同类型干扰素对肝细胞Toll样受体(toll like receptor,TLR)3、4、7、9表达的影响.方法 感染丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV) JFH-1病毒的Huh7细胞分别加入干扰素α(interferon,IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1处理24h,以实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析Toll样受体3、4、7、9以及HCV复制水平的变化.结果 各干扰素均能抑制HCV的复制(t分别为-45.699、-68.165、-70.994、-67.111,均有P＜0.001).方差分析显示各干扰素处理组间TLR3、TLR4、TLR7及TLR9的相对表达量差异有统计学意义(F分别为125.901、263.537、163.289、31.774,均有P＜0.001),进一步两两比较可知,IFN-α、IFN-β能上调TLR3(t分别为21.312、25.420,均有P＜0.001)、TLR7(t分别为26.456、24.289,均有P＜0.001)的表达,同时下调TLR9的表达,而对TLR4的表达没有影响;IFN-γ可上调TLR4、TLR7的表达,对TLR3和TLR9的表达没有影响;IFN-λ1可上调TLR3、TLR7、TLR9的表达水平,但对TLR4的表达没有影响.结论 不同干扰素对肝细胞不同Toll样受体表达的作用不同,反映出不同干扰素具有不同的抗病毒作用机制.     

高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的本实验旨在探讨高糖对。肾小管上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在糖尿病。肾病中的意义。方法体外培养。肾小管上皮细胞（NRK-52E），分成LG组（给予5mmol／L葡萄糖的DMEM培养）和HG组（给予25mmol／L葡萄糖的DMEM培养），不同时间收集细胞，采用细胞免疫化学、Rt—PCR、WesternBlot检测TLR4蛋白和mRNA表达情况，同时取细胞培养上清液用Elisa法检测IL-6、TNF-α水平。结果在高糖刺激6hTLR4mRNA出现表达明显增高，维持较高表达至274h，而48h后表达有所下降（P〈0．05）。HG组培养24hTLR4蛋白升高，48hTLR4蛋白表达进一步升高，与LG组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。HG组NRK-52E上清液IL-6、TNF一仅的表达较LG组明显升高（P〈O．05），并与TLR4蛋白呈正相关（r=0．799，0.820）。结论高糖可能通过上调NRK-52E的TLR4的表达，导致TNF-α、IL-6等炎性因子表达升高，TLR4参与了糖尿病肾病的进展。     

双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道黏膜Toll样受体表达的影响

目的:研究双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型中肠道组织Toll样受体(TLR)2、4、9表达的影响。方法:出生24 h内Sprague-Dewley新生鼠随机分为对照组、实验组、治疗组,每组12只。对照组由母鼠喂养,实验组采取人工喂养+缺氧冷刺激进行造模,治疗组采用人工喂养+缺氧冷刺激并添加喂养双歧杆菌处理(2次/日,1×108cfu/次)。每日定时称体重做记录,在实验第3天处死新生鼠。用HE染色病理切片观察新生鼠肠道病理变化,RT-PCR方法检测肠道黏膜TLR2、TLR4、TLR9的mRNA表达量。结果:3组小鼠体重比较均具有统计学意义,对照组体重增长高于实验组及治疗组,治疗组体重增长高于实验组(P<0.05);实验组病理评分高于对照组及治疗组,治疗组高于对照组(P<0.05);TLR4 mRNA相对表达量实验组高于对照组及治疗组(P<0.05),治疗组的TLR2 mRNA、TLR9 mRNA相对表达量均高于实验组,TLR4 mRNA相对表达量低于实验组,这两组的3种受体mRNA相对表达量比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论:双歧杆菌可减轻新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道组织病理变化,作用机制可能与双歧杆菌能降低肠道黏膜的TLR4表达及增加TLR2、TLR9表达有关。     

支气管哮喘合并感染性肺炎患儿中性粒细胞CD64及Toll样受体的表达及临床意义

目的研究支气管哮喘合并感染性肺炎患儿外周血中性粒细胞CD64及Toll样受体(TLRs)表达的变化及作用机制。方法选取2015年1月-2018年12月天津市北辰区中医医院儿科支气管哮喘合并感染性肺炎患儿118例(感染组),并根据病原体种类,将感染组分为细菌性肺炎组(56例)、病毒性肺炎组(24例)、支原体肺炎组(20例)及衣原体肺炎组(18例);同期选取儿科支气管哮喘非感染性肺炎患儿30例(非感染组)以及健康体检儿童30例(健康组)。入院次日清晨或体检当天采空腹外周静脉血,应用流式细胞术检测外周血中性粒细胞CD64及Toll样受体TLR2、TLR4、TLR7及TLR9水平,电化学发光法检测降钙素原(PCT),并对中性粒细胞CD64指数与TLR2、TLR4、TLR7及TLR9水平进行相关性分析。结果 3组中性粒细胞CD64指数及PCT比较差异有统计学意义(P<0. 05),感染组(4. 82±1. 55,5. 19±5. 34)>非感染组(2. 46±0. 99,0. 35±0. 13)>健康组(0. 99±0. 29,0. 23±0. 09);感染组中,细菌性肺炎组CD64指数及PCT水平高于病毒性肺炎组、支原体肺炎组及衣原体肺炎组,病毒性肺炎组CD64指数高于支原体肺炎组及衣原体肺炎组(P<0. 05); 3组中性粒细胞TLR2、TLR4、TLR7及TLR9表达差异有统计学意义(P<0. 05),感染组TLRs水平高于非感染组及健康组,非感染组TLRs水平高于健康组;CD64指数与TLR2、TLR4、TLR7呈正相关(r=0. 421、0. 355、0. 458,均P<0. 05)。结论感染性肺炎与儿童支气管哮喘发病密切相关,感染时中性粒细胞CD64及TLR2、TLR4、TLR7及TLR9表达增加,TLRs固有免疫调节在感染性肺炎患儿支气管哮喘发病机制中有着重要作用。     

Toll样受体4在子痫前期中的表达和意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在子痫前期发病机制中的作用。方法选取20例轻度子痫前期(MP)和20例重度子痫前期(SP),15例正常妊娠患者(NP)作为研究对象。用RT-PCR方法检测TLR4mRNA在外周血单核细胞(PBMC)中的表达。免疫组化法检测TLR4蛋白在子痫前期患者胎盘中的表达。用ELISA方法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。结果 TLR4mRNA和蛋白在SP患者中表达水平高于MP组,MP组高于NP组,差异有统计学意义(P=0.000)。血清中TNF-α水平,SP组高于MP组,MP组高于NP组,差异有统计学意义(P=0.000)。在PE患者中,TNF-α的表达与TLR4mRNA和蛋白均呈正相关关系(P=0.000)。结论 TLR4的高表达可能是子痫前期发病机制的启动因素。两者可能通过介导TNF-α表达的上升而参与子痫前期的病理生理变化和促进疾病的进展。     

孕早期妇女外周血白细胞Toll样受体表达的研究

目的探讨Toll样受体(Tolllikereceptor,TLR)在人孕早期母胎免疫耐受中的作用。方法应用流式细胞术对28例非妊娠妇女,29例孕早期正常妊娠妇女,25例孕早期妊娠低孕酮妇女,16例孕早期妊娠低孕酮经过黄体酮治疗妇女,15例孕早期自然流产妇女的外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞TLR2、TLR4检测进行分析。结果妊娠对照组单核细胞TLR2与TLR4的表达(20.37%±14.37%;52.58%±13.65%)显著高于自然流产组(11.25%±13.69%;31.91%±20.03%)(P0.05),却低于非妊娠对照组(29.99%±16.98%;60.69%±8.68%)(P0.05);妊娠对照组淋巴细胞、粒细胞TLR2表达(1.83%±0.83%;2.64%±1.34%)低于自然流产组(3.60%±2.37%;5.55%±3.99%)(P0.05),TLR4无明显差异(P0.05),与非妊娠对照组相比,淋巴细胞、粒细胞TLR2、TLR4的表达均无显著性差异(P0.05)。低孕酮妊娠组与妊娠对照组、黄体酮组相比,单核、淋巴、粒细胞TLR2、TLR4表达均无显著性差异。结论孕早期妇女外周血先天性免疫相关受体TLR2、TLR4表达的改变可能与妊娠免疫耐受有关。     

微小病变性肾病与局灶节段性肾小球硬化的分子生物学研究进展

微小病变肾病（MCD）和局灶节段性肾小球硬化（FSGS）为儿童期原发性肾病综合征（NS）的2种最常见病理学类型。目前仍采用肾穿刺活检术对MCD及FSGS进行鉴别诊断。研究表明,许多生物因子在MCD及FSGS的发生及发展中起着重要作用,并存在成为MCD或FSGS生物标志物的潜力。本文聚焦膜抗原CD80、脂质过氧化物、骨桥蛋白（OPN）、血管内皮生长因子受体（VEGFR）-2、半乳糖凝集素（galectin）、胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）、转化生长因子（TGF）-β1、微小核糖核酸（miRNA）及成纤维细胞特异蛋白（FSP）-1等生物因子在MCD和FSGS鉴别诊断中的研究进展,旨在提升临床对这2种原发性NS病理学类型的发病机制及诊疗的认识。     

肾病综合征患者血清肽谱的差异性研究

目的比较肾病综合征患者与正常人的血清肽谱，寻找差异表达的血清肽谱。方法将研究对象分成试验组和对照组。试验组为49例肾病综合征患者，包括17例系膜增生患者、12例微小病变患者、10例膜性肾病患者和10例局灶硬化患者；对照组为10例健康志愿者。采用ClinProt磁珠浓缩和基质辅助激光解吸电离法分析两组研究对象血清肽谱的差异。结果系膜增生组VS对照组筛选出5个差异表达的多肽（15．28±7．61，P〈0．01）。微小病变组VS对照组筛选出7个差异表达的多肽（2．16±1．59，P〈0．01）。膜性肾病组vs对照组筛选出6个差异表达的多肽（35．48±13．71，P〈0．01）。局灶硬化组VS对照组筛选出5个差异表达的多肽（18．06±8．07，P〈0．05）。以P〈0．05为差异有统计学意义。采用遗传算法对样本进行分类并建立诊断预测模型，对区分系膜增生组、微小病变组、膜性肾病组、局灶硬化组与对照组的交叉验证能力分别为96．18％、100％、98．53％、94．12％，而识别率均为100％。结论应用蛋白质组学建立了肾病综合征患者的血清肽谱模型，为人们更好地了解肾病综合征的发病机制提供了新的思路。     

TLR4在肾移植急性排斥反应中的预测作用

目的:研究血液中Toll样受体4(TLR4)的含量在大鼠肾移植后发生急性排斥反应中的预测作用。方法:建立大鼠原位肾移植模型。利用流式细胞技术动态监测大鼠血液及移植肾组织中TLR4的含量,以酶联免疫法检测大鼠血液中IL-2的含量。以组织病理学作为急性排斥反应的诊断标准,研究其表达与急性排斥反应的关系。对检测结果进行统计分析。结果:在术后1 d、2 d、3 d、5 d、7 d异基因移植组大鼠移植肾均有急性排斥反应发生,异基因移植组血液中IL-2和TLR4水平明显高于同基因移植组及健康对照组大鼠体内相应指标的水平。在造模后1 d大鼠血液中TLR4含量即开始升高。同时异基因移植组大鼠移植肾组织中的TLR4含量也明显高于同基因移植组及健康对照组。结论:TLR4参与了肾移植术后急性排斥反应的发生,可作为肾移植术后预测急性排斥反应发生的一个敏感指标。     

吗替麦考酚酯、小剂量激素、拉米夫定联合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎

目的 探讨吗替麦考酚酯、小剂量激素、拉米夫定联合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎的疗效.方法 回顾性总结病理确诊的49例乙型肝炎病毒相关性肾炎患者采用吗替麦考酚酯(≥12岁0.75 g,2次/d,＜12岁0.4 g/m2,2次/d)、拉米夫定(≥12岁100 mg/d,＜12岁3 mg/kg,2次/d)、小剂量激素[泼尼松0.5 mg/(kg·d)]的治疗方案.结果 49例患者中,完全缓解率71.4％(35/49),总有效率81.6％ (40/49),血清中的乙型肝炎病毒DNA平均值从5.43×104拷贝/ml降为＜ 1000拷贝/ml占85.7％(42/49).膜性肾病(MN)完全缓解率为88.0％(22/25),部分缓解率为8.0％(2/25),无效率为4.0％(1/25);系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)完全缓解率为44.4％(4/9),无效率为55.6％( 5/9);膜增殖性肾小球肾炎(MPGN)完全缓解率为70.0％(7/10),部分缓解率为30.0％(3/10);局灶节段肾小球硬化(FSGS)完全缓解率为40.0％(2/5),无效率为60.0％( 3/5).不同病理类型疗效比较差异有统计学意义(P＜0.05).不良反应轻微.结论 吗替麦考酚酯、小剂量激素、拉米夫定联合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎安全有效,其疗效与病理类型有关,MN治疗反应最好,MPGN、MsPGN次之,FSGS较差.     

186例成人IgA肾病临床病理分析

目的研究成人IgA肾病(IgAN)的临床、病理特点及相关性. 方法将我科于1996年8月～2003年12月收治的原发性成人IgAN186例按照年龄分成2组,根据各年龄组的临床及其组织学特点进行临床与病理分型的分析. 结果 186例成人IgAN临床表现以无症状性尿检异常最常见,占122例(65.6%),其次是慢性肾炎和肾病综合征,分别占28例(15.1%)和25例(13.4%).老年组肾病综合征和急性肾功能衰竭的发生率高于青壮年组.病理类型以局灶节段硬化性肾小球肾炎最常见,占67例(36%),其次是系膜增生性肾小球肾炎、轻微病变肾小球肾炎,分别为47例(25.3%)和35例(18.8%). 结论成人IgAN的临床病理表现多样化并且有一定特点.临床表现以无症状性尿检异常最常见,病理类型以局灶节段性肾小球病变最常见.     

环磷酰胺治疗儿童激素耐药性肾病综合征的临床观察

目的了解大剂量环磷酰胺冲击治疗激素耐药型肾病综合征(SRNS)儿童的临床特点、病理、治疗及随访情况。方法对该院2006年6月—2011年6月进行环磷酰胺(CTX)冲击治疗的20例SRNS患儿病例资料进行回顾性分析。结果①本组完全缓解13例(65%),部分缓解2例(10%),总有效率75%;②CTX冲击治疗SRNS患儿有效组与无效组间性别、24h尿蛋白定量、血清白蛋白、血清胆固醇、肌酐水平均无差异(P>0.05),而无效组发病年龄较有效组小(P<0.05);③SRNS患儿单纯型缓解率高于肾炎型(P<0.05);④SRNS病理改变以MCN、MsPGN、FSGS为主,MCN及MsPGN缓解率较高。⑤毒副作用:本组11例(55%)未见明显CTX毒副作用,8例(40%)副作用是呕吐反应,其次为白细胞减少1例(5%)。远期副作用因随访时间短未评估。结论 CTX冲击治疗SRNS患儿总有效率为75%;可能多种因素共同影响治疗效果。     

宫内炎症对仔鼠脑组织TLR4表达的影响

目的:探讨胎鼠及新生大鼠脑中TLR4及细胞因子TNF-α在宫内感染后脑损伤中的作用。方法:取孕龄17、18天(足月为22.5天)的SD大鼠,每次350μg/kg、连续2天腹腔注射,构建宫内感染大鼠模型(LPS组);对照组孕鼠腹腔注射同剂量的生理盐水(NS组)。观察胎盘和脑组织的病理改变。分别留取孕20、21天及生后1、3、7、14天(P1、P3、P7、P14)的新生大鼠脑标本,检测细胞因子TNF-α、TLR4的表达情况。结果:LPS组新生大鼠脑组织HE染色可见细胞水肿,组织疏松,细胞数减少。蛋白表达结果显示LPS组TLR4明显升高,较NS组差异有统计学意义,F=71.148,P=0.001;LPS组TNF-α较NS组差异有统计学意义,F=16.863,P=0.015。LPS组TLR4、TNF-αmRNA在G20、G21、P1、P3、P7的表达比NS组明显升高,差异有统计学意义(P0.05),而在P14两组差异无统计学意义(P0.05)。结论:宫内LPS感染后TLR4信号途径被激活,诱导炎性因子大量释放,最终导致脑损伤的发生。