食管癌BRCA1和β-tubulin Ⅲ mRNA表达与紫杉类耐药性的临床研究

  目的  检测食管癌组织BRCA1、β-tubulin Ⅲ mRNA的表达,探讨与紫杉类耐药性的关系。  方法  收集36例晚期食管癌组织标本,采用RTq-PCR方法检测组织中BRCA1、β-tubulin Ⅲ mRNA表达,分析二者与紫杉类药物耐药性的关系。  结果  BRCA1相对于内参基因β-actin的中位值为6.27;β-tubulin Ⅲ相对于内参基因β-actin的中位值为4.44。以中位值作为cutoff值,36例标本根据cutoff值分为低表达组和高表达组。BRCA1高表达组的有效率66.7%（12/18）稍高于低表达组55.6%（10/18）,但二者差异无统计学意义（P=0.733）。β-tubulin Ⅲ低表达组的有效率83.3%（15/18）显著高于高表达组38.9%（7/18）,差异有统计学意义（P=0.015）。  结论  BRCA1 mRNA表达水平与紫杉类药物敏感性差异无统计学意义。β-tubulin Ⅲ mRNA表达水平与紫杉类药物敏感性之间存在相关性。提示β-tubulin Ⅲ可以作为紫杉烷类药物在晚期食管癌中疗效的预测因子。      

恶性胸腹水中肿瘤细胞BRCA1和β-tubulin Ⅲ的表达与多西紫杉醇药物敏感性的关系

目的:疗效相关分子生物标记的探索是实现个体化治疗的关键所在。由于肿瘤原发灶与转移灶肿瘤细胞在分子水平的显著差异及转移性恶性肿瘤的难治性,本研究旨在探索肿瘤特殊转移灶即恶性胸/腹水中肿瘤细胞的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达水平与多西紫杉醇(TXT)药物敏感性的关系。方法:前瞻性地收集41例进展期肿瘤的恶性胸水/腹水,分离肿瘤细胞后ATP-TCA方法检测TXT敏感性;实时荧光定量RT-PCR检测的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达。结果:在非小细胞肺癌(NSCLC)组(P=0.008)和胃癌组(P=0.032)的恶性胸/腹腔积液中肿瘤细胞的BRCA1 mRNA表达与TXT体外药物敏感正相关。β-tubulinⅢmRNA表达仅在NSCLC患者的恶性胸腔积液中肿瘤细胞与TXT药物敏感负相关(P=0.022)。联合检测BRCA1和β-tubulinⅢ对于TXT药物敏感性的预测没有交互作用(P>0.05)。结论:在NSCLC和/或胃癌患者的恶性胸/腹腔积液中,BRCA1和β-tubulinⅢ表达与TXT敏感性相关且前者可能比后者更有意义。对于伴有恶性积液的进展期NSCLC和/或胃癌患者,恶性积液有可能成为一合适的标本进行分子生物标记的检测。     

恶性胸腹水中肿瘤细胞BRCA1和β-tubulin Ⅲ的表达与多西紫杉醇药物敏感性的关系

目的：疗效相关分子生物标记的探索是实现个体化治疗的关键所在。由于肿瘤原发灶与转移灶肿瘤细胞在分子水平的显著差异及转移性恶性肿瘤的难治性,本研究旨在探索肿瘤特殊转移灶即恶性胸/腹水中肿瘤细胞的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达水平与多西紫杉醇（TXT）药物敏感性的关系。方法：前瞻性地收集41例进展期肿瘤的恶性胸水/腹水,分离肿瘤细胞后ATP-TCA方法检测TXT敏感性;实时荧光定量RT-PCR检测的BRCA1和β-tubulinⅢmRNA表达。结果：在非小细胞肺癌（NSCLC）组（P=0.008）和胃癌组（P=0.032）的恶性胸/腹腔积液中肿瘤细胞的BRCA1 mRNA表达与TXT体外药物敏感正相关。β-tubulinⅢmRNA表达仅在NSCLC患者的恶性胸腔积液中肿瘤细胞与TXT药物敏感负相关（P=0.022）。联合检测BRCA1和β-tubulinⅢ对于TXT药物敏感性的预测没有交互作用（P〉0.05）。结论：在NSCLC和/或胃癌患者的恶性胸/腹腔积液中,BRCA1和β-tubulinⅢ表达与TXT敏感性相关且前者可能比后者更有意义。对于伴有恶性积液的进展期NSCLC和/或胃癌患者,恶性积液有可能成为一合适的标本进行分子生物标记的检测。     

ERCC1、BRCA1在非小细胞肺癌的表达与顺铂耐药的研究进展

顺铂广泛应用于非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer,NSCLC）的化疗,但耐药性的产生严重影响其疗效。顺铂耐药的机制尚不十分清楚。目前普遍认为错配切除修复蛋白1（excision repair croess completion gene1,ERCC1）及乳腺癌易感基因1（breast cancer susceptibility gene1,BRCA1）的表达与顺铂耐药性相关。抑制ERCC1及BRCA1的表达可克服顺铂耐药性,提高治疗效果。     

ERCC1、BAG-1 及 BRCA1 基因在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨ERCC1、BAG-1和BRCA1基因mRNA在接受以铂类为基础辅助化疗的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者中的表达情况及其与预后的关系。方法 85例NSCLC患者中74例给予以铂类为基础的术后辅助化疗,采集全组患者的肿瘤组织和其中34例患者的癌旁组织,应用半定量RT-PCR法,检测其ERCC1、BAG-1和BRCA1基因mRNA的表达情况,回顾性分析患者的临床病理资料,探讨3个基因的表达与患者总生存期（OS）之间的关系。结果 ①ERCC1、BAG-1阴性表达的患者OS显著长于阳性表达的患者（P均=0.001）。ERCC1、BAG-1阴性表达的患者接受铂类化疗的疗效显著优于阳性表达的患者（P=0.002、P=0.001）。②BRCA1阴性表达的患者OS长于阳性表达的患者,但差异无统计学意义（P=0.057）。③多因素分析显示ERCC1、BAG-1可作为NSCLC患者接受铂类化疗的预后指标（P=0.027、P=0.022）。结论 检测ERCC1和BAG-1的表达可作为指导NSCLC患者术后接受铂类化疗及预后评估的指标。     

Shugoshin1在非小细胞肺癌多西紫杉醇耐药中的作用

目的:探讨Shugoshin1在非小细胞肺癌A549细胞对多西紫杉醇耐药中的作用。方法:用Western-blot及RT-PCR检测Sgo1在非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞株A549/Taxotere及亲本A549中的表达差异。通过构建Sgo1的si-RNA质粒和过表达质粒经慢病毒包装分别转染A549/Taxotere及亲本A549细胞,利用Western-blot及RT-qPCR鉴定其干预效果。MTT比色法比较下调及上调Sgo1的表达后细胞对化疗药物多西紫杉醇敏感性的影响。结果:在非小细胞肺癌多西紫杉醇耐药细胞株中,Sgo1的表达明显高于其亲本细胞株A549。通过外源性筛选和鉴定,经慢病毒包装载体,成功构建了Sgo1表达上调和下调的细胞株;MTT试验发现:抑制Sgo1的表达能显著增加A549/Taxotere对多西紫杉醇的敏感性,而外源性上调Sgo1的表达能明显降低A549对多西紫杉醇的敏感性。结论:Sgo1的表达与非小细胞肺癌细胞株A549紫杉醇耐药性密切相关。     

非小细胞肺癌ERCC1基因和β-tubulinⅢ基因的研究进展

非小细胞肺癌(normal cell lung cancer,NSCLC)的发病率和死亡率近年明显增高,在新诊断的患者中,有65%已不能行手术治疗,因此化学治疗(化疗)是治疗非小细胞肺癌的主要手段。但是由于耐药的存在,化疗疗效有效率有限,治疗的有效率仅为20%-40%。近年来随着肿瘤分子生物学的发展,已发现ERCC1、β-tubulinⅢ等基因的表达水平和化疗药物疗效及预后密切相关,并有可能成为预测疗效进行个体化治疗的重要指标。根据基因表达水平及药物敏感情况选择个体化的化疗方案是肿瘤学研究和临床肿瘤化疗的趋势。     

β-tubulinⅢ在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌的发病率在常见肿瘤中占首位,非小细胞肺癌已占到肺癌80%左右,且发病率仍在增长。绝大部分患者确诊非小细胞肺癌时已失去手术治疗的最佳时机,因此化疗是治疗晚期非小细胞肺癌的主要手段。经验性化疗方案或不规范的化疗易导致患者耐药性的产生,以至化疗客观有效率低。随着新型抗肿瘤药物问世及分子生物学/基因遗传学的快速发展,已发现β-tubulinⅢ基因的表达水平与非小细胞肺癌化疗及预后密切相关,将可能成为指导个体化治疗、预测预后的重要生物标志物。根据β-tubulinⅢ基因表达水平、药物敏感情况及以β-tubulinⅢ为介导调控其上下游基因等针对个体化的基因治疗、生物免疫治疗、靶向治疗将是肿瘤学研究和临床肿瘤药物治疗的趋势。     

非小细胞肺癌组织Survivin和P-gp表达与紫杉醇及苦参碱疗效相关性分析

目的:探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)Survivin、P-糖蛋白(P-gp)表达与以紫杉醇为主的化疗疗效之间的关系,并进一步研究苦参碱对化疗疗效的影响。方法:应用免疫组化的方法,检测120例NSCLC患者肿瘤组织中Survivin、P-gp表达水平,分为双阳、单阳和双阴表达组。每组随机分为含紫杉醇化疗组(A组)和化疗联合苦参碱组(B组),分别以χ2检验和Kaplan-Meier方法分析有效率和生存时间的差异。结果:在120例患者中,Survivin、P-gp的表达率分别为52.5%(63/120)和35.0(42/120)%,仅Survivin的表达与病理类型相关,P=0.026。在A组中,双阳性组、单阳性组、双阴性组RR分别为23.1%(3/13)、57.7%(15/26)和71.4%(15/21),PFS分别为1.86、3.34和4.32个月,OS分别为7.43、10.91和11.37个月。3个表达组RR、PFS和OS的差异均有统计学意义,P值分别为0.021、0.009和0.006。组间比较,联合苦参碱后RR在各个表达组均有上升趋势,特别是双阳性组RR上升,但差异无统计学意义,P=0.072,χ2=3.232。仅单阳性组在联合苦参碱后PFS有延长,P=0.030。结论:Survivin、P-gp表达水平可有效预测NSCLC含紫杉醇化疗的疗效,且联合苦参碱可提高化疗有效率,延长PFS。     

Survivin蛋白在早期非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

背景与目的:Survivin作为凋亡蛋白抑制家族成员,在多种肿瘤组织中出现高表达.本实验研究Survivin蛋白在早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其预后意义.方法:用免疫组化染色方法检测213例NSCLC的肿瘤组织中Survivin蛋白的表达,并采用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果:NSCLC组织中免疫组化染色Survivin阳性细胞百分率＞lO%者193例(90.6%);Survivin蛋白低表达(≤75%)170例,高表达(＞75%)43例.Survivin蛋白在细胞核与细胞浆内均有表达.多因素Cox比例风险模型显示Survivin蛋白表达无预后意义(P＞0.05).肿瘤直径≤3 cm的肺小腺癌组生存曲线提示Survivin蛋白低表达组与高表达组比较具有生存优势,但两者之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:早期NSCLC中Survivin蛋白表达的预后意义尚不明确.     

ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌中的表达及预后意义

目的:探讨DNA修复基因家族成员ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及预后意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术对32例肺癌及16例癌旁组织中ERCC1、RRM1和BRCA1基因的mRNA进行定量检测。用非参数检验、相关分析、Kap lan-M e ier生存曲线和COX多因素回归分析进行统计分析。结果:NSCLC中ERCC1、RRM1和BRCA1在癌组织内表达量显著高于癌旁组织,且在癌内表达具有正相关性;RRM1在肺鳞癌中高于腺癌,但在不同分期中表达无差异;ERCC1和BRCA1在不同病理类型和分期中表达均无差异;RRM1和BRCA1高表达组的生存期明显长于低表达组;COX多因素回归分析示RRM1表达是影响本组患者预后的独立因素。结论:NSCLC中,ERCC1、RRM1和BRCA1在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,RRM1和BRCA1高表达组的生存期长于低表达组。RRM1和BRCA1可作为判断预后的一种指标。     

非小细胞肺癌survivin表达与紫杉醇耐药的关系及苦参碱逆转耐药的研究

 【摘要】　目的　探讨凋亡抑制蛋白survivin在晚期非小细胞肺癌（NSCLC）中表达及与紫杉醇（PTX）化疗疗效的关系，并初步研究苦参碱对PTX化疗耐药的逆转作用。方法　应用免疫组化方法，对120例接受PTX化疗的NSCLC患者survivin 表达水平进行检测，按表达情况分组，比较不同组间的疗效和生存时间。结果　survivin蛋白在NSCLC患者阳性表达率为58.8 %。在survivin蛋白阳性表达组中，加用苦参碱组有效率提高，生存时间延长，差异有统计学意义（P＜0.05），而survivin蛋白阴性表达组中，加用苦参碱组有效率未明显提高，生存时间无明显延长。组间比较，加用苦参碱后，survivin蛋白表达不影响患者有效率和生存时间（P＞0.05）。结论　survivin蛋白表达情况同PTX化疗的疗效相关，有可能成为预测肿瘤细胞对PTX耐药的分子指标。通过前瞻性研究发现苦参碱可能通过作用于survivin蛋白，促进PTX引起的细胞凋亡，从而逆转部分肿瘤细胞由于survivin蛋白阳性表达产成的耐药性。     

Akt及Survivin表达在非小细胞肺癌中的临床意义

摘 要：［目的］ 探讨Akt及Survivin表达在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义。 ［方法］ 采用qRT-PCR技术及Western blot法检测55例NSCLC原发灶、癌旁及正常组织中Akt及Survivin的表达。［结果］ qRT-PCR和Western blot均显示Akt及Survivin在NSCLC原发灶中的表达明显高于癌旁及正常组织（P均<0.05）;qRT-PCR显示在术后1年内发生远处转移的患者组织中的表达明显高于其在没有发生远处转移的组织中的表达（P=0.0297）,在有淋巴结转移的NSCLC原发灶中的表达明显高于无淋巴结转移者（P=0.0137）。Akt及Survivin在分级为Ⅱ/Ⅲ级的NSCLC中的表达均明显高于在Ⅰ级患者中表达（P=0.0487,P=0.0467）,但Akt及Survivin的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、分化程度及分期都没有明显关系（P>0.05）。两种方法检测均显示Akt与Survivin的表达成正相关(r=0.5545,P<0.05;r=0.6144,P<0.05 )。［结论］ Akt和Survivin相互关联,可能协同促进NSCLC的发生发展及侵袭转移。     

非小细胞肺癌EGFR突变与ERCC1和BRCA1表达相关性的研究

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC) EGFR突变与ERCC1、BRCA1表达的相关性.方法:收集符合入组条件的NSCLC患者151例,应用RT-PCR方法检测EGFR突变,采用免疫组化DAB法检测ERCC1、BRCA1蛋白表达,应用Fisher精确检验对EGFR突变状态与ERCC1、BRCA1的表达进行相关性分析.结果:151例患者中,EGFR突变37例,ERCC1低、中、高表达率分别为43.2％ (16/37)、54.1％(20/37)和2.7％(1/37),EGFR突变与ERCC1表达有相关性,P=0.009;BRCA1低、中、高表达率分别为43.2％(16/37)、48.6％0(18/37)和8.1％(3/37),EGFR突变与BRCA1表达无相关性,P=0.323.结论:NSCLC EGFR突变与ERCC1蛋白表达有相关性,与BRCA1蛋白表达无相关性.     

SPHK1在调节小细胞肺癌多药耐药中的作用

背景与目的小细胞肺癌约占全部肺癌的15%,化疗是其主要的治疗方法之一,虽然早期对一线化疗方案敏感,但极易出现多药耐药而导致治疗失败。前期基因芯片发现SPHK1与小细胞肺癌的耐药性相关,本研究进一步探讨SPHK1在小细胞肺癌多药耐药中的作用。方法首先通过QRT-PCR和Western blot从基因和蛋白水平检测化疗敏感细胞株H69及多药耐药细胞株H69AR中SPHK1的差异表达;转染siRNA下调H69AR细胞中的SPHK1的表达,通过CCK8检测细胞对各种化疗药物（ADM, DDP, VP-16）的敏感性变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化。同时收集小细胞肺癌化疗前组织和血液标本,将其分为化疗敏感组和耐药组,QRT-PCR检测小细胞肺癌患者血液标本中SPHK1的表达,免疫组化法检测小细胞肺癌患者组织标本中SPHK1的表达,分析SPHK1与小细胞肺癌患者预后相关性。结果 SPHK1在耐药细胞H69AR中的表达明显高于H69,下调H69AR中SPHK1的表达能够增加细胞对化疗药物的敏感性,促进细胞的凋亡,细胞周期发生G0/G1期阻滞,SPHK1在小细胞肺癌耐药患者中的表达较敏感患者明显增加,SPHK1的表达与患者的性别、年龄无关,与疾病的分期、对化疗的敏感性及生存时间密切相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 SPHK1参与调节小细胞肺癌多药耐药,SPHK1可作为评估小细胞肺癌化疗敏感性及临床预后的潜在靶基因。     

凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与Caspase-3、Bcl一2蛋白表达的关系

目的:探讨Survivin基因的表达在肺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3、Bcl-2蛋白表达的相互关系。方法:对13例正常支气管粘膜上皮、11列不典型增生、54例肺癌及12例淋巴结转移癌石蜡切片组织,应用原位分子杂交法检测Survivin mRNA的表达;用免疫组化S-P法检测Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达。结果:肺癌、淋巴结转移癌中Survivin mRNA阳性率分别为74.07%及91.67%,显著高于正常支气管粘膜上皮及不典型增生中的阳性率7.69%及27.27%(P均<0.01);低分化、中分化肺癌中阳性率96%、75%较高分化30.76%显著升高(P<0.01,P<0.05)。TNM分期Ⅲ期病例中,Survivin mRNA表达阳性率92.31%高于Ⅰ Ⅱ期病例的57.14%(P<0.01)。Survivin mRNA表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关(P<0.01),与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.01)。结论:Survivin基因在非小细胞肺癌中表达上调,提示其通过抑制细胞凋亡,在肺癌癌变发生、发展中起重要作用,可能成为肺癌基因治疗的新靶点;Survivin基因通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡,其阳性表达亦预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后;Survivin基因与凋亡抑制基因bcl-2的共同表达可能在肺癌中起协同作用。     

BRCA1:一种新的非小细胞肺癌放化疗疗效的预测基因

非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。放化疗是其治疗的主要方法 ,研究和确定临床上NSCLC放化疗敏感性预测和诊断的靶向分子和指标将有利于NSCLC患者的个体化治疗,以获得最佳治疗效果。本文就BRCA1作为NSCLC放化疗疗效的重要指标的研究现状做一综述,以期为临床NSCLC患者个体化放化疗提供参考。     

耐药基因相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的肿瘤的多药耐药是肺癌化疗失败和导致患者死亡的重要原因之一。本研究的目的是探讨P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)在肺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色链亲和素生物素过氧化物酶法(streptavidin-biotin immunoperoxidase,SP)检测98例非小细胞肺癌组织中5种耐药蛋白的表达。结果Pgp、MRP、LRP、TopoⅡ、GSTπ的阳性表达率分别为27.6%、11.2%、75.5%、50.0%和64.3%。LRP、TopoⅡ在鳞癌、腺癌、腺鳞癌间的表达有显著性差异(P<0.05)。5种耐药蛋白的表达与临床分期无明显关系(P>0.05)。47例接受化疗的非小细胞肺癌患者中,Pgp、LRP、GSTπ的表达与化疗疗效有密切关系(P<0.05)。结论肺癌的耐药由多种耐药蛋白介导,联合检测肺癌组织中耐药蛋白的表达有助于选择合理的化疗方案及判断化疗疗效。     

ERCC1 、BRCA1在非小细胞肺癌的表达与顺铂耐药的研究进展

顺铂广泛应用于非小细胞癌(non-small cell lung cancer,NSCIC)的化疗,但耐药性的产生严重影响其疗效.顺铂耐药的机制尚不十分清楚.目前普遍认为错配切除修复蛋白1(excision repair cross completion gene 1,ERCC1)及乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)的表达与顺铂耐药性相关.抑制ERCC1及BRCA1的表达可克服顺铂耐药性,提高治疗效果.     

Survivin与XIAP mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性

[目的]研究survivin基因表达与非小细胞肺癌（NSCLC）生物学行为及与XIAP表达的关系。[方法]采用RT—PCR技术检测49例NSCLC患者癌组织及相应的癌旁正常肺组织中survivin和XIAPmRNA的表达水平。[结果]49例NSCLC组织中smwivin与XIAP mRNA的阳性表达率分别为79．6％（39／49）和57．1％（28／49）,在癌旁正常肺组织中的阳性表达率分别为12．2％（6／49）和14.3％（7／49）．差异均有统计学意义（P〈0．01）。NSCLC组织中survivin和XIAP mRNA表达与肿瘤的病理组织类型、细胞分化程度、临床分期及淋巴结转移均无相关性（P〉0．05）。NSCLC组织中survivin与XIAP mRNA表达呈正相关（P=0．021）。[结论]Survivin与XIAP在抑制NSCLC细胞凋亡过程中可能起协同作用,以促进肿瘤发生发展。