新疆家犬体内存在细粒棘球绦虫G1（羊）株和G6（骆驼）株的分子证据

目的收集家犬体内的细粒棘球绦虫成虫以建立新疆棘球蚴病的分子流行病学资料. 方法对家犬体内成虫细胞色素c氧化酶Ⅰ基因序列进行测定以确定其亚株型. 结果所有感染犬体内成虫的基因型为G1型.特别是1条家犬体内发现存在细粒棘球绦虫G1（羊）株和G6（骆驼）株混合感染的情况. 结论在新疆阻断羊犬和羊骆驼循环圈是预防棘球蚴病的重要措施.作为终末宿主的家犬与人类的感染密切相关,对感染犬的管理应该加强.     

新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段95抗原基因克隆及序列分析

目的研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获得Eg95目的基因,将其克隆至pUCm-T载体、测序并进行序列分析。结果从3个不同发育阶段的新疆株细粒棘球绦虫cDNA文库中均克隆出Eg95基因,其基因片段长度为402bp,同源性比对分析(BLAST)结果表明,所克隆的新疆株Eg95基因与GenBank中的Eg95基因序列一致。结论Eg95基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段均有表达,其基因序列无差异。     

细粒棘球绦虫成虫的单克隆抗体制备

为建立抗细粒棘球绦虫成虫的单克隆抗体细胞株，采用经口感染狗肠壁上寄生的成虫制备抗原免疫BALB／c小鼠脾细胞与骨髓瘤sp2／0进行细胞融合。结果显示经筛选克隆后建立了一株分泌抗成虫单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为2G5E8F4E4。腹水的抗体效价为1：12800。初步建立了分泌抗细粒棘球绦虫成虫的单克隆抗体杂交瘤细胞株。     

基于GenBank数据库的不同基因型细粒棘球绦虫系统进化分析

目的　分析GenBank数据库中公布的细粒棘球绦虫各基因型细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（Cox1）基因序列,探索细粒棘球绦虫各基因型在全球不同地区的遗传变异及分化情况。方法　收集GenBank数据库中公布的不同基因型细粒棘球绦虫Cox1基因序列,排除同一地区内相同基因序列,寻找收集的基因序列间的变异位点并构建进化树,观察不同地区细粒棘球绦虫各基因型的地域聚集性及原始基因序列。结果　通过对Cox1基因序列变异位点统计,发现细粒棘球绦虫Cox1基因突变类型以颠换为主,G1、G6、G7基因型在其分布的各地区均有相同Cox1基因序列,基因序列相对应的GenBank登录号分别为KY766891、MH300971、MH301007。系统进化分析发现G10基因型存在明显地域聚集性。结论　细粒棘球绦虫G1、G6、G7基因型存在原始Cox1基因序列;G10基因型进化树中出现地域聚集性,存在生殖隔离趋势。     

细粒棘球绦虫基因库的构建

细粒棘球绦虫DNA经Sau3AI部分水解,并用电洗脱方法从琼脂糖凝胶中回收15-23kb大小的片段。得到的片段与λ噬菌体置换载体EMBL3 DNA重组,采用体外包装系统构建了细粒棘球绦虫的基因库,获得了1.2×10~6个重组子。通过与探针的分子杂交,从库中分离到6个细粒棘球绦虫γDNA基因的阳性克隆。     

小鼠细粒棘球蚴不育囊的超微结构观察

用透射电镜观察了小鼠细粒棘球蚴不育囊的超微结构。其囊壁由角皮层和生发膜构成,角度层含有纤维基质和不规则形颗粒,生发膜又可分皮层区和细胞区。在皮层区基部见到线粒体,微毛间见到“吞饮泡”样质膜凹陷;在细胞区主要有皮层细胞、肌细胞、含糖原细胞等,在有的含糖原细胞中还见到“核仁管系统。”     

新疆北部骆驼源细粒棘球绦虫发育和形态特征

目的：研究新疆北部双峰驼细粒棘球绦虫的发育与形态特征。方法：用棘球蚴原头节感染家犬,观察成虫在犬体内的发育。对３５ｄ成虫进行形态学的观察和描述。结果：用原头节感染的６只家犬,在感染后３５ｄ和４５ｄ用槟榔碱驱虫,每只犬驱出成虫１４７８０至１３５９００条。３５ｄ的成虫中有１０％虫体已含有厚壳虫卵,表明有感染性。７７％的成熟体节位于虫体末端,最多体节数为３。虫体总长２．５±０．７ｍｍ,成虫平均顶突钩数３２．７±１．２,外形光滑。平均睾丸数３２．４±３．９,分布于整个成熟体节,在卵黄腺后排成一排。卵巢明显较长,有不明显的分叶,卵黄腺长形并掩盖梅氏腺。结论：新疆北部双峰驼细粒棘球绦虫在形态学上与北非骆驼株细粒棘球绦虫相似,可能是分布在我国的细粒棘球绦虫骆驼株。但与骆驼株亦有不同之处,应进一步鉴定。     

新疆细粒棘球蚴95基因的克隆及同源性分析

目的　分析新疆地区细粒棘球蚴 95 (EG95 )基因结构特点。　方法　从新疆地区细粒棘球蚴原头节中提取基因组 DNA,以细粒棘球蚴原头节 DNA为模板进行 PCR扩增 ,获得 EG95基因 ,将其克隆至 p UCm- T载体 ,利用 DNAman软件及 Gene Bank/BL AST功能测序并对其进行基因全序列分析。　结果　测序显示新疆株 EG95 (EG95 - XJ)基因片段为 1191bp。 BL AST比对分析表明 EG95 - XJ基因与新西兰株 EG95基因家族成员同源性达 86 %～ 97% ,所有的碱基差异均发生于内含子区域。　结论　中国新疆地区的 EG95基因为 EG95基因家族成员之一 ,但其序列与新西兰株 EG95基因之间存在一定的差异。     

新疆北部双峰驼细粒棘球蚴感染调查

目的：确定我国双峰驼中细粒球蚴的感染状况和寄生特征。方法：在屠宰场检查来自新疆北部各地骆驼体内的感染情况。测量棘球蚴囊的大小，检查内容物的性质并镜检有无原头节。结果：在３７５只骆驼中检出细粒棘球蚴感染者１８５只，感染率４９．３％。主要寄生在肝和肺，肝内较多，肝∶肺＝１∶０．６４。育囊携带率３４．８％，育囊率３９．２％， 囊指数７．５３。棘球蚴囊位于肝表面，单个存在，囊壁较薄，内无子囊。育囊平均直径在肝为５．６±２．５６ｃｍ，在肺为４．８±２．０３ｃｍ，钙化率高，单纯携带钙化病灶的骆驼占感染骆驼的６４．３％。结论：新疆北部双峰驼细粒棘球蚴的感染率很高。其寄生特征与本地区牛、羊中的细粒棘球蚴有明显区别，与非洲单峰驼亦有不同，应进一步深入研究。     

新疆包虫病流行病学基线的调查研究——Ⅱ.家犬和绵羊中细粒棘球绦虫感染

在新疆十二个代表性地区于进行人群血清学调查的同时,用剖检法调查家犬细粒棘球绦虫成虫感染率,用屠宰场调查法检查绵羊细粒棘球蚴感染水平。调查结果表明,在新疆各地的家犬和绵羊中都有细粒棘球绦虫的感染存在。 家犬成虫感染率以西部和中部天山牧区为最高(巴音布鲁克71.43％;特克斯69.57％)。塔里木盆地荒漠农业区最低(巴楚10.60％;且未6.90％)。 绵羊包虫病亦以天山牧区最高(80％以上),塔里木盆地绿洲和荒漠农业区最低(喀什市14.1％;巴楚12.18％;且未3.25％)。绵羊患病率随年龄的增长而上升,最高可达90％以上。南疆的喀什、和田地区绵羊患病率低而家犬成虫感染率高,可能是由于牛的包虫病患病率高造成的。在包囊发生部位上,天山牧区西、北天山区域以肝包虫占主要地位,肺包虫比例最低。中部天山区域肺包虫比例略有上升。南天山牧区肺包虫的比例较高。而塔里木南缘与东昆仑山和阿尔金山有牧业连系的且未县,绵羊肺包羊竟占85.71％。作者认为对脏器的趋性不同可能反映了不同虫株的生物学特征。讨论了流行程度的划分问题。建议应以人群血清学调查结果为主,结合家犬和绵羊的感染水平进行划分为宜。提出了划分不同程度地方性流行区的参考标准。     

重组质粒pGEX-6P-1/Sj-FABPc的构建及在大肠杆菌中的表达

目的构建基因工程菌株,获得重组蛋白Sj-FABPc(日本血吸虫脂肪酸结合蛋白).方法用PCR法从日本血吸虫cDNA文库中扩增Sj-FABPc基因片段,再将该片段重组于pGEMT中并进行DNA测序鉴定,经酶切后将目的片段构建成重组质粒pGEX-6P-1/Sj-FABPc,转化于大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达.用Glutathione SepharoseTM 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionTM Protease酶对融合蛋白进行分离,获得纯化的14kDa Sj-FABPc.SDSPAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定.结果获得pGEX-6P-1/Sj-FABPc菌株,分离纯化出14kDa Sj-FABPc,表达量为10.52mg/L.Western blot显示,表达蛋白能被日本血吸虫免疫兔血清识别.结论重组蛋白Sj-FABPc可高效表达并有良好的抗原性.     

刚地弓形虫RH株GRA6分子基因克隆与序列分析

目的　克隆刚地弓形虫 RH株致密颗粒抗原 (Dense granule antigen,GRA6 )分子基因 ,为研究使用重组的GRA6分子作为抗原进行弓形虫病诊断奠定基础。　方法　根据己知的 GRA6序列合成一对引物 ,抽提弓形虫速殖子m RNA,以速殖子 m RNA为模板 ,通过反转录 PCR(RT- PCR)扩增出 GRA6的 c DNA条带。目的基因 DNA条带被克隆到质粒 p UC19中形成重组质粒。对重组质粒 DNA进行纯化 ,并对目的基因片段进行核苷酸序列分析。　结果　通过RT- PCR从 m RNA中扩增出一条分子量约 70 0 bp的 DNA条带。核苷酸序列分析表明 ,GRA6分子基因的开放的阅读框全长为 6 93bp,编码 2 30个氨基酸分子 ,与已报道的 RH株 GRA6分子具有 10 0 %的同源性。　结论　本研究获得了刚地弓形虫 RH株的 GRA6分子基因 ,为今后应用此分子作为抗原诊断弓形虫病奠定了基础     

A COMPARISON OF SINGLE AND MULTIPLE INTRAVENOUS INFUSIONS OF 3-AMINO-1-HYDROXYPROPYLIDENE-1, 1-BISPHOSPHONATE (APD) IN THE TREATMENT OF HYPERCALCEMIA OF MALIGNANCY

Abstract Following rehydration with intravenous saline, 27 patients with hypercalcemia of malignancy were treated with a total of 32 courses of 3-amino-1-hydroxypropylidene-1, 1-biphosphonate (APD) given by slow intravenous infusion. Twelve treatments consisted of daily infusions of APD for between two and six days whereas single-dose APD was used in 20 treatments. Mean albumin-adjusted serum calcium fell to the upper end of the reference range at seven days from the start of treatment, both in multiple-dose and in single-dose treatment groups. No relationship between total dose of APD and hypocalcemic response was observed. However, second treatments with APD following recurrence of hypercalcemia in five patients were significantly less effective than the original therapy, suggesting that resistance to APD may develop. Multiple-dose and single-dose intravenous APD treatments appear to be equally effective in the acute management of hypercalcemia of malignancy.     

低碘饮食喂养大鼠脑心肝琥珀酸脱氢酶活性的组织化学研究

本文采用组织化学方法(Nitro BT 显示法)对缺碘大鼠脑、心、肝琥珀酸脱氢酶活性进行了观察,并分别与对照组进行了对比。结果发现缺碘大鼠脑、心、肝琥珀酸脱氢酶活性均较对照组明显降低,提示碘缺乏影响了细胞生物氧化即能量代谢过程。     

微粒包裹型幽门螺杆菌疫苗口服诱导小鼠粘膜免疫应答的研究

幽门螺杆菌（Helocobacter pylori,Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌,为分析Hp超声上清经微粒包裹后对小鼠的口服免疫效果,采用ELISA法检测血清、唾液、肠粘液的抗体改变情况,ELISPOT法分析派伊尔氏结（PP结）抗原特异性抗体形成细胞（ASC）的数量增减。发现微粒包裹型Hp疫苗免疫后可诱导较高的唾液sIgA水平和肠道sIgA反应,PP结抗原特异性抗体形成细胞（ASC）数量与肠道sIgA水平密切相关。