阿米巴滋养体双染色永久性标本制作的改进

1　配制与方法1 .1　染色液的配制　①哈氏苏木精染色液的配制[1] ;②改良的复红染色液的配制 :伊红 1 ｇ ,双蒸水 1 0 0ｍｌ,冰醋酸 0 .0 5ｍｌ。1 .2　染色方法①涂片固定 :用直径 7.5ｃｍ的平皿装好30ｍｌ肖氏固定液 (Ｓｃｈａｕｄｉｎｎ)置于酒精灯加热的石棉网上 40℃～ 43℃ ,用竹签将含有较多的Ｅｈ滋养体新鲜粪便从左到右涂置于盖玻片呈粪膜 ,置于加热的Ｓｃｈａｕｄｉｎｎ中 5ｍｉｎ。②脱汞、脱碘 :用 3个平皿分别装好70 %的酒精 30ｍｌ,第二个平皿加碘液至浓茶水样。用盖玻片镊子将固定液中的标本取出先置于 70 %酒精中去除多余…     

快速染色液在血液常规涂片检查中的应用

目前,各医院在血液涂片检查中所用的染色多为瑞氏染色液,此方法染色效果较好,但也存在着染色时间较长而不适合工作量大的实验室进行常规检查。为此,我们用快速染色液进行了1万例以上的末稍血液片染色,结果证明快速染色对于细胞的胞核及胞浆染色均良好,胞核结构及胞浆颗粒着色清晰,染色速度快等优点。具体操作情况如下。1　试剂配制及操作方法快速染色液的配制:①第1液:水溶性伊红1ｇ,Ｎａ2ＨＰＯ45ｇ,(或Ｎａ2ＨＰＯ412Ｈ2Ｏ)126ｇ,ＫＨ2ＰＯ465ｇ,苯酚20ｇ,蒸馏水加至500ｍｌ溶解后过滤备用。②第2液:美兰(亚早基兰)08ｇ,天青Ｉ05ｇ,Ｎａ2…     

幽门螺杆菌染色改良

我院病理科在幽门螺杆菌 (ＨＰ)检验实践中 ,借鉴文献〔1～ 2〕配制了硼砂美兰 (ＢＲＭＢ)染液 ,并与传统的硝酸银 (Ｗ -Ｓ)染液进行染色比较。现报道如下。一、材料和方法1.材料 :选自我院各种胃炎的胃粘膜蜡块标本 30 0个。2 .方法 :将各个蜡块标本制成厚为 4μｍ的切片 2张 ,经二甲苯、酒精脱蜡后 ,再分别进行ＢＲＭＢ和Ｗ -Ｓ染色。ＢＲＭＢ染色法 :染色液的配制 ,取美兰 1ｇ加蒸馏水 10 0ｍｌ和硼砂 0 .8ｇ ,搅拌均匀直至溶解。将脱蜡洁净的切片浸入染液 30秒 ,取出 ,流水快速冲洗约 1分钟 ,切片风干、树胶封片。Ｗ -Ｓ染色法先配制酸…     

不同复染剂对肺结核痰厚涂片结果评价

有文献记载抗酸染色可用孔雀绿染色法[1] ,检验抗酸杆菌。为此 ,我们分别用美兰和孔雀绿做复染剂 ,对痰涂片的结果进行了分析和比较 ,其方法介绍如下。1标本来源和涂片方法1.1　标本来源　门诊治疗的肺结核病人痰标本 10 5份。1.2　涂片方法　每份标本同时涂两张片 ,一次性取 0 .2ｍｌ干酪性和脓性血痰 ,反复分别涂两张 2 0ｍｍ× 2 5ｍｍ卵圆形痰片 ,每片涂 0 .1ｍｌ痰量为宜 ,尽量涂匀 ,减少标本间差异 ,自然干凉后 ,火焰固定 ,染色。2　试剂配制和染色方法2 .1　试剂配制2 .1.1　美兰染色法[2 ] 　 (1)染色剂— 5 %石碳酸复红液 :取碱性…     

结核杆菌冷染色法与加温染色法比较观察

自 1996年以来我们建立了一种结核杆菌的冷染色[1] ,同时与加温染色法进行了比较 ,经 18986份痰标本直接涂片 ,676份痰浓缩涂片及 396份痰培养阳性的菌体涂片进行了两方法比较 ,结果如下。1　材料与方法1.1　标本来源18986份痰标本 ,686份痰浓缩标本 ,396份痰培养阳性标本均来源于住院及门诊病人标本。1.2　方法萋 -尼氏染色液的配制有多种多样 ,我们采用下列方法配制而成 :石炭酸复红 :称取碱性复红 3.0ｇ溶解于 10ｍｌ 95 %乙醇中 ,然后加入 5 %石炭酸水溶液90ｍｌ;酸酒精溶液 :浓盐酸 3ｍｌ缓缓加入 97ｍｌ的 95 %乙醇中 ;美蓝对比染色液…     

细胞学涂片硼酸-美蓝快速染色法

硼酸 美蓝 (Ｂｏｒｉｃａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ ｂｌｕｅＢＡＭＢ)染色 ,由王德尚等〔1〕 首先应用于徒手切片快速简易染色 ,继后 ,黄彩儿〔2〕用于石蜡切片幽门螺杆菌染色 ,均取得满意效果。作者将ＢＡＭＢ染色法应用于细胞学涂片染色也取得良好效果。现报道如下。1　材料和方法1.1　材料　取自宁海县第一医院和广州妇婴医院的子宫颈拭子取样涂片5 0 0例 ,每例涂片 2张 ,分别作ＢＡＭＢ染色和ＨＥ染色进行对照 ,其中阳性片5例1 .2　方法　ＢＡＭＢ染色液配制 :10 0ｍｌ蒸馏水加美蓝和硼酸各 1ｇ。涂片按常规固定后 ,置于ＢＡＭＢ染色液中约3…     

阴道涂片检测滴虫染色方法的改进

滴虫性阴道炎为妇科常见病。检查滴虫多采用盐水涂片和培养法 ,前者检出率不高 ,后者阳性率虽高但操作复杂。本文采用碘苏木素伊红涂片染色法 ,操作简便 ,阳性率较高。适用于快速大量的检查。1　临床资料1.1　对象 :2 87例阴道分泌物标本来源于已婚妇女进行防癌普查。年龄 2 3岁～ 5 8岁。分别作盐水涂片法、巴氏染色法、碘苏木素伊红染色法检查滴虫。1.2　碘苏木素伊红染色液的配制 :先将苏木素 2 g溶于 95 %乙醇 2 0 0 ml,溶解后加入碘 0 .5 g,另将伊红 y0 .1g,硫酸铝钾10 g溶于蒸馏水 2 0 0 ml,溶解后缓缓加入冰醋酸 4ml,然后将碘苏木素…     

疏松结缔组织切片制作方法的改良

制作疏松结缔组织切片难度较大 ,组织块易酥脆、收缩 ,不易切片。笔者经过反复摸索 ,用ＡＳＡＦ液取代常用固定液 ,用乙醇 -正丁醇混合脱水剂取代乙醇 ,克服了上述不足 ,现将方法介绍如下 :ＡＳＡＦ液的配制 :取水杨酸 10ｇ溶于 85ｍｌ、95 %乙醇中 ,再加入纯醋酸 5ｍｌ、40 %甲醛 10ｍｌ,混匀即可。混合脱水剂的配制 :取无水乙醇及 10 0 %正丁醇等量混合备用。取新西兰兔一只 ,耳静脉注射空气处死 ,取皮下疏松结缔组织 ,立即固定于ＡＳＡＦ液中 ,1～ 2ｈ后取出 ,直接放入 95 %酒精Ⅰ、Ⅱ脱水各 1ｈ ,然后放入混合脱水剂Ⅰ、Ⅱ各 1ｈ。二甲…     

骨组织石蜡包埋后脱钙不理想快速补充脱钙法

在工作中常会碰到有的骨组织脱钙至包埋后 ,在修蜡块时 ,发现有的骨组织部分脱钙不理想 ,无法将蜡块的组织面修平 ,而且会损坏切片刀。因此必须再次进行脱钙。1　材料与方法1 1　材料　脱钙液氯化钠 10ｇ溶于 10 0ｍｌ蒸馏水中 ,再加甲酸 ( 95 % ) 10ｍｌ和盐酸 ( 3 7% ) 10ｍｌ混合均匀。1 2　方法　我们把脱钙不理想或组织中有钙化的块组织暴露出来 ,将组织面朝下浸放在脱钙液中 ,脱钙时间一般 3小时 ,针刺无阻挡时说明脱钙已彻底。取出水洗后即可切出完整的切片 ,对染色没有影响。染色时 ,在脱蜡后入饱和碳酸锂水溶液 2分钟 ,再染苏木素 …     

尿溶菌酶测定对流行性出血热临床意义的探讨

1　材料一般分光光度计 ( 72 1型即可 ) ;普通水浴箱 ;普通离心机 ;1%的染色小球菌 (一般细菌室均可制备 ) ;溶菌酶标准品 (上海禽蛋二厂生产 ) ;酸乳化剂 ,称取 10ｇ非离子表面活性剂溶于 50 0ｍｌ蒸馏水中 ,取此液 10ｍｌ加 0 .6ＮＨＣｌ至 2 0 0ｍｌ即可。2　方法研究对象 ,临床确诊的 2 0 0例ＥＨＦ患者 ,50例重感、上呼吸道感染等发热病人 ,ＥＨＦ之诊断标准按西安会议制订有关内容。原理 ,溶菌酶是一种低分子蛋白 ,分子量约 1450 0 ,由 12 9个氨基酸组成 ,其等电点为ｐＨ11,这种碱性等电点能与细菌牢固结合 ,并通过水解细菌细胞壁中的…     

钩虫陈旧标本头部染色法

钩虫头部的结构 ,尤其是口囊结构、头部以及钩齿是鉴别本虫种的重要依据之一。以往的卡红、苏木素染色效果不理想 ,陈旧的标本较难看清 ,我们试用卡拉唑黑染料 (此法过去文献未见报道 ) ,对过去收集的虫体进行染色制片 ,效果不错。1　染色液的配制　　甲液 :95 %酒精 1 70ｍｌ,甲醇 1 60ｍｌ,冰醋酸 2 0ｍｌ,石碳酸2 0ｍｌ,磷泪酸 1 2ｍｌ,用蒸馏水配成 1 0 0 0ｍｌ。乙液 :卡拉唑黑Ｅ(ｃｈｌｏｒａｇｏｌＢｌａｃｋＥ) 5ｇ。先把染粉放入乳钵中研磨数分钟 ,加入少量甲液后再研磨数分钟 ,直至光滑糊状 ,再加入较多的甲液 ,研匀后静置 0 .5ｍ…     

胃黏膜切片制作中的包埋技术

为胃镜下取得的胃肠黏膜组织制作一张质量高的石蜡切片 ,组织的包埋也是一个关键。现就有关包埋法进行探讨。1　材料与方法　　经胃镜取得黏膜组织后 ,按切片ＨＥ标本的常规制作过程中 ,需注意以下几点。1.1　固定与标记　将组织标本放到滤纸小片上 ,立即置于 10 %甲醛混合固定液中 (40 %甲醛 10ｍｌ加蒸馏水 90ｍｌ与 95 %酒精 2 0ｍｌ)。如送检组织太小 ,为避免脱水后标本不容易看清 ,可用伊红酒精液滴 1～ 2滴作为着色标记。1.2　脱水与透明　用 95 %酒精两道 ,次日用纯酒精两道脱水 ,各 35～4 0ｍｉｎ。用二甲苯两道透明各 10ｍｉｎ。1.…     

保存10余年的隐孢子虫卵囊粪渣涂片染色技术探讨

隐孢子虫是机会致病原虫也是一种重要的腹泻病原 ,近些年逐渐引起人门的注意。隐孢子虫病的诊断目前主要是从粪便中查到卵囊来确诊。理想的制片对学生认识及掌握隐孢子虫的形态有很大的帮助 ,为解决目前教学中标本来源的困难 ,作者对 10年前科研所保存下来的粪渣进行了涂片及染色的研究。1　材料与方法1.1　阳性粪便的来源　 1990年我室在山东邹县农村进行隐孢子虫感染调查时取得的阳性粪便 ,于室温下一直存放在青霉素小瓶内用10 %福尔马林固定。1.2　染色液的配制 (改良抗酸染色法 )第 1液　石炭酸复红染色液 :95 %酒精 2 0ｍｌ,石炭酸 8ｍ…     

米非司酮配伍利凡诺在瘢痕子炽引产中的应用

脑垂体分远侧部、中间部和神经部。为了能在同一张切片上清楚地观察到远侧部的嗜酸性细胞、嗜碱性细胞、嫌色细胞及神经部的赫令体。我们通过多次试验 ,发现一种能将以上四种细胞同量显示出来的染色方法 ,现介绍如下。1　方法1.1　组织固定　取猫脑垂体用Ｂｏｕｉｎ液固定 2 4小时。1.2　试剂配制　Ａ液 :用前配制。高锰酸钾 1ｇ、蒸馏水 2 0 0ｍｌ,搅拌溶解后加浓硫酸 2ｍｌ。Ｂ液 :碱性品红 1ｇ ,6 0 %酒精2 0 0ｍｌ、浓盐酸 2ｍｌ、三聚乙醛 2ｍｌ,室温放置 2～ 3天后过滤滤 ,4℃储存。Ｃ液 :天青石蓝 0 .5 ｇ、硫酸铁铵 5 ｇ、蒸馏水 10…     

石蜡切片HE染色着色不良的原因及矫正方法

HE染色法是组织学与病理学常用的切片染色方法,在各级医院及组织学实验室中普遍使用,其操作简便,结果稳定,不易褪色。伊红(eosin),又名曙红,呈红色粉末状,易溶于水和酒精,市面上有伊红Y和伊红B两种,常用者为伊红Y。一般采用0·5%~1%的水溶液作为染色液;也可用70%~95%的酒精配成0·1%~1%的酒精伊红溶液。伊红溶液是一种酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。苏木精(hematoxylin),亦名苏木紫或苏木素,用于细胞核的染色。我们虽然每天都在做大量的HE染色以满足诊断需要,但是在常规石蜡切片HE染色的过程中常会出现一些弊病,使…     

一种快速鉴别白色念珠菌培养基的配制及应用

作者配制应用一种快速鉴别白色念珠菌的培养基 ,报告如下。1　材料和方法甲液 :葡萄糖 5 .0ｇ ,蛋白胨 1.2 ｇ,氯化钠 1.0 ｇ ,吐温 - 800 .4ｍｌ,氯霉素 5 0ｍｇ ,加蒸馏水至 2 0 0ｍｌ,加热溶解 ,ｐＨ用0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ盐酸 ,调至 (6 .0± 0 .5 )。乙液 :氯化三苯四氮唑 0 .1ｇ ,琥珀酸钠 0 .2 ｇ ,氯化钠90ｍｇ ,加蒸馏水至 10ｍｌ,加热溶解分装成 1ｍｌ/支备用 ,将甲液 2 0 0ｍｌ,乙液 1.2ｍｌ,115℃高压灭菌 15ｍｉｎ后 ,加入无菌健康人混合血清 12ｍｌ,混匀分装于无菌试管内 ,4℃冰箱保存备用。2　结果标本接种于鉴别培养基中 ,35℃ 8…     

人脑垂体三种细胞包埋及染色方法探讨

脑垂体三种细胞的染色方法很多 ,但染色的结果很难令人满意。在实验中 ,我们认为包埋过程中透明不好以及桔黄色染色较弱是导致失败的主要原因。为此 ,我们对Ｍａｌｌｏｒｙ氏方法进行改进 ,获得令人满意的效果 ,现报告如下 :材料人为新鲜脑垂体 ,沿冠状面切开 ,在Ｈｅｌｌｙ氏液内固定 2 4小时 ,然后进行脱汞处理及常规包埋。透明剂选用水杨酸甲酯 (冬青油 ) ,材料经脱水到10 0 %酒精后直接入冬青油透明 2～ 3小时 ,直至材料块彻底透明为止。以Ｍａｌｌｏｒｙ氏方法为基础 ,每 10 0ｍｌ中加桔黄Ｇ4ｇ ,加大桔黄Ｇ的剂量。此染色液染几次后需…     

吉氏、瑞氏复合染色法的临床应用

此法是利用吉氏染液的着色性能好、瑞氏染液染色时间短的优点而改良的。试剂及方法如下:1、混合染液:瑞氏染色液450ml、吉氏染液40ml、甘油250ml 混合备用。2、氧化美兰液:称取高锰酸钾1g 分数次加入美兰液(美兰1g、水70ml)加温约20分钟使溶液颜色呈略带淡紫红色的兰色即停加温,滤后加1%冰醋酸0.5ml。3、10%伊红水溶液。4、应用染色液:取混合染液500ml、氧化     

介绍一种改进的血片染色法

介绍一种改进的血片染色法济南市铁十四局医院（２５０１０１）梁砚华我院检验科对瑞氏染色液进行了改进，实验证明，此法具有染色时间短、核浆清晰之特点，现介绍如下。一、试剂姬姆萨粉０．５ｇ，美兰伊红染料１．５ｇ，中性甘油３０ｍｌ，甲醇６００ｍｌ。先将姬姆萨粉...     

对革兰染液的一点改进

细菌的涂片染色在分离鉴定中起着很重要的作用,如今大多数医院及防疫部门对细菌涂片均采用四步法的革兰染液,此法缺点较多,染色方法繁琐,染色时间长,脱色程度不易掌握,容易形成假阴性。而经过改进后的革兰染液则没有以上缺点。现介绍如下。1革兰染液的新法配制1.1材料结晶紫、碱性品红、碘化钾、碘片、95%酒精溶液。1.2配制第一液:结晶紫0.25g溶于100ml蒸馏水中。第二液:碱性品红0.3g、碘化钾0.5g、碘片0.2g、95%酒精至100ml,水浴溶解。2染色方法涂片经火焰固定后滴加第一液,使染液覆盖整个菌膜,染色1min后不必水洗再滴加第二液覆盖整个菌膜…