成骨生长肽的合成及药效学的实验研究

作者利用固相法合成了成骨生长肽 (ＯＧＰ)。并在体外观察了ＯＧＰ在低剂量范围对原代成骨细胞的促增殖作用 ,以及成骨活性标志蛋白ＡＫＰ的表达水平[1] 。在ＳＤ大鼠体内观察了ＯＧＰ对低钙饮食造成的骨质疏松的药效作用。现报道如下。一、材料和方法1 材料 :(1)试剂 :所有Ｂｏｃ 氨基酸、Ｂｏｃ Ｇｌｙ ＰＡＭ树脂购自美国ＡＢＩ公司 ;Ｅ ＭＥＭ培养基、胰蛋白酶 ＥＤＴＡ(依地酸 ) [0 .5 % (ｗ/ｖ)胰蛋白酶 ,5 .3ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ 4Ｎａ]为ＧＩＢＣＯＢＲＬ公司产品 ;Ⅱ型胶原酶为日本和光纯药工业株式会社产品 ;ＭＴＴ为Ｆｌｕｋａ…     

人骨形成蛋白与肿瘤细胞凋亡

骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)最初因其具有诱导骨形成的作用而得名。随着研究的不断深入 ,人们发现它还是一个多功能因子 ,在胚胎发生和发育、组织与细胞的分化和增殖等方面起重要作用。Ｗｏｚｎｅｙ[1] 于 1988年首次报道了人ＢＭＰ 1、ＢＭＰ 2Ａ、ＢＭＰ 2Ｂ和ＢＭＰ 3的ｃＤＮＡ克隆及表达 ,以后相继有 16种不同的人骨形成蛋白ｃＤＮＡ得到克隆。目前国内也已克隆了多种ＢＭＰ亚型的ｃＤＮＡ ,在ＢＭＰ家族中 ,具有较强功能活性者为ＢＭＰ 2、ＢＭＰ 4和ＢＭＰ 7。1　ＢＭＰ的结构特征和理化性质…     

骨不连与骨形成蛋白

研究骨不连发生的原理及骨不连与骨诱导因子的关系是抗击有不连发生机理的重要课题。方法：将兔桡骨中段告成ｃｍ的缺损，Ａ组术后即放入ＢＭＰ，Ｂ组术后４周放入ＢＭＰ，Ｃ组为在Ａ组术后８周放入ＢＭＰ。结果：发现ＢＭＰ植入８周时形成骨小梁。Ｂ组和Ｃ组，骨缺损修复仍然取得满意的效果。     

人子宫内膜癌单克隆抗体的制备及鉴定

1　实验资料人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ来自中国典型培养物保藏中心 .培养基及牛血清购自Ｇｉｂｃｏ公司 ;ＨＲＰ酶标抗体及ＡＢＣ试剂盒购自Ｚｙｍｅｄ公司 ;ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购自中国医学科学院实验动物中心 .把人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ与Ｆｒｅｕｎｄ佐剂混合后免疫 8ｗｋ龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 .加强免疫 4次 .用聚乙二醇 (Ｍｒ 4 0 0 0 ,Ｍｅｒｅｋ) ,按常规方法将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ2 / 0 Ａｇ8.6 35细胞融合 .杂交瘤细胞培养于 10 0ｍＬ·Ｌ-1牛血清 ＨＡＴ ＲＰＭＩ选择性培养基 .采用酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)…     

单磷酰脂质A预处理对内毒素血症小鼠的保护作用观察

单磷酰脂质Ａ(ＭｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｌｉｐｉｄＡ ,ＭＰＬＡ)预处理能诱导内毒素耐受性 ,提高机体对内毒素的耐受力 ,从而预防内毒素血症的发生、发展 ,降低脓毒症休克的发生率和死亡率。本实验旨在探讨ＭＰＬＡ对内毒素血症的预防性保护作用及其可能的机制。1　材料和方法1.1　主要试剂　　单磷酰脂质Ａ[Ｅ .ＣｏｌｉＦ 5 83 (Ｒｄｍｕｔａｎｔ)Ｓｉｇｍａ] ;ＬＰＳ (Ｅ .ＣｏｌｉＬｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＯ111∶Ｂ4,Ｓｉｇｍａ) ;ＭＤＡ测定试剂盒ＴＮＦα测定试剂盒均为北京邦定生物医学公司产品。1 .2　实验方法　…     

骨形态发生蛋白在骨形成与修复中的作用

在脊椎动物骨形态发生蛋白 (ＢＭＰ)的重要作用之一是诱导软骨、骨和骨骼的支持组织形成。实际上 ,ＢＭＰ是骨组织形成和修复的一个重要调节因子。 1988年Ｗｏｚｎｅｙ利用重组ＤＮＡ技术克隆得到了ＢＭＰ 1、ＢＭＰ 2和ＢＭＰ 3的ｃＤＮＡ。到目前为止 ,已发现了ＢＭＰ 1～ＢＭＰ 13,并已获得相应的ｃＤＮＡ。除ＢＭＰ 1以外 ,其余均是ＴＧＦ β超家族成员。它们均是机体分泌的信号分子[1 ] 。通过ＢＭＰ的研究 ,有可能发展一种对骨骼疾病治疗的新方法。1　ＢＭＰ与骨诱导在体内ＢＭＰ的活性标志是诱导形成新骨[2 ] 。为确定一种ＢＭＰ的诱…     

类风湿关节炎病人血浆中P物质和肿瘤坏死因子水平测定及其临床意义

本文测定了Ｐ物质 (ＳＰ)和肿瘤坏死因子(ＴＮＦα)在类风湿性关节炎 (ＲＡ)病人血浆中的水平变化 ,以了解ＳＰ和ＴＮＦα 在ＲＡ中的作用。1　资料和方法1 .1一般资料　ＲＡ病人 3 0例 ,男 7例 ,女 2 3例。年龄 1 6～ 5 4岁 ,平均 3 8 2 4岁 ,病程 6个月至 1 0年 ,正常对照组来自我院正常献血者。1 .2方法　ＳＰ测定采用放免分析法。试剂盒来源于北京海科锐生物技术中心。自动计数仪为ＧＡＭＭＡｍａｔｉｃ(美国ＫＡＮＴＲＯＶ)。ＴＮＦα 测定采用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂盒来源于第四军医大学免疫教研室 ,均按试剂盒说明操作。2　结　果2 .1Ｒ…     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒感染与细胞表面HLA—I类抗原表达的关系探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)属嗜肝ＤＮＡ病毒 ,主要侵犯肝脏 ,但目前在肝外组织和细胞中也发现ＨＢＶ的存在 ,特别在外周血单个核细胞 (ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌ,ＰＢＭＣ)中阳性率更高。ＰＢＭＣ为免疫活性细胞群体 ,ＨＢＶ感染ＰＢＭＣ对机体免疫功能的影响尚未阐明。我们就ＰＢＭＣ中ＨＢＶ感染与其表面ＨＬＡ Ｉ类抗原表达的关系进行了研究 ,探讨ＰＢＭＣ中ＨＢＶ感染在乙型肝炎慢性化及向肝癌恶性转化中的作用。一、对象与方法1 .对象 :自 2 0 0 1年 1 1月至 2 0 0 2年 4月在山东大学齐鲁医院消化内…     

骨碱性磷酸酶同工酶在骨质疏松诊断中的应用

为了解骨碱性磷酸同工酶（ＢＡＰ）与老年性骨质疏松症的关系，我们用单光子骨密度仪测定骨密度，诊断了老年性骨质疏松症７５例，并检测了２４０例健康老年人，现报告如下。１材料和方法１．１仪器和试剂：骨密度仪ＳＲ２００由北京地矿研究所生产，美国Ｍｏｎａｒｃｈ２...     

奥曲肽对SGC-7901细胞中Bcl-2和Bax基因的调控作用

我们以前研究发现奥曲肽可诱导人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1细胞凋亡 ,但其作用机制目前国内外未见报道。为此 ,我们就奥曲肽对ＳＧＣ 790 1细胞中Ｂｃｌ 2和Ｂａｘ基因的调控作用进行了研究。1　材料与方法1.1　主要试剂及仪器　　奥曲肽由瑞士Ｓａｎｄｏｚ药厂惠赠 ,人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1由本科培养 ,逆转录试剂盒ＡｓｃｃｅｓｓＲＴ ＰＣＲＳｙｓｔｅｍ (Ａ12 5 0 )购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司 ,ＴｒｉｐｕｒｅＴＭＩｓｏｌａｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔｋｉｔ购自德国宝灵曼公司 ,2 40 0型ＰＣＲ循环仪为美国Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ公司产品 ,…     

CPV·McAb的制备及其在诊断、治疗和疫苗免疫中的应用

将用ＣＰＶ免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与ＳＰＶ２／０细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＨＩ法筛选，有限稀释法克隆三次，得到６株分泌抗ＣＰＶＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株，其中４株分泌ＩｇＧ１，２株分泌ＩｇＭ。将杂交瘤细胞注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠诱生腹水，摸索出了大量生产腹水的最佳实验条件。采用ＣＰＶ　ＭｃＡｂ研制触ＣＰＶ快速诊断试剂盒，检测４７份病犬粪样，在３０ｍｉｎ即可肉眼判定结果，与ＨＡ法和常规ＥＬＩＳＡ相比，具有简便、快速、特异之优点。应用ＣＰＶＭｃＡｂ治疗ＣＰＶ发病犬２８７只，治愈率高达９７．２１％，显著高于其他疗法的治疗效果，治疗机理除对体内病毒的中和作用外，有可能促进机体的主动免疫反应。在对４６只幼犬进行ＣＰＶ疫苗免疫时，使用ＣＰＶＭｃＡｂ的２３只，其免疫成功率为１００％，而未使用ＣＰＶＭｃＡｂ的２３只对照犬，其免疫成功率仅为７８．３％，表明ＣＰＶ　ＭｃＡｂ在疫苗免疫中可起积极作用。     

甲亢患者骨密度及骨代谢变化的研究

为了研究甲亢患骨密度及骨代谢指标的变化,我们测定了３０例甲亢患及２９例健康对照股骨近端（Ｎｅｃｋ,Ｔｒｏｃｈ,Ｗａｒｄ三角）的骨密度（ＢＭＤ）,血钙（Ｃａ）,磷（Ｐ）,甲状旁腺激素（ＰＴＨ０,骨钙素（ＢＧＰ）,尿Ⅰ型胶原肽／肌ｒｏｓｓｌａｐｓ／Ｃｒ）浓度。结果表明甲亢患ＢＭＤ较对照组降低;血Ｃａ,Ｐ和ＰＴＨ与对照组无差别。笔认为,甲亢患骨密度减低,其骨吸收大于骨形成。     

一种国产免疫蛋白补体试剂盒的评价

目的：降低免疫球蛋白,补体检测成本,寻找合格的国产试剂,方法：将奥博公司ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ,Ｃ３,Ｃ４试剂盒与Ｂｅｃｋｍａｎ公司原装进口试剂盒进行比较,所用仪器为Ｂｅｃｋｍａｎ公司Ａｒｒａｙ Ｓｙｓｔｅｍ,检测原理为速率散射比浊法。结果：奥搏公司生产的ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ,Ｃ３,Ｃ４试剂可用Ｂｅｃｋｍａｎdisplay structure     

均相酶法测定高密度脂蛋白（HDL—C）的方法评价

流行病学研究已确认ＨＤＬ -Ｃ浓度与冠心病 (ＣＨＤ)之间存在明确的关系 ,即ＨＤＬ -Ｃ浓度越低 ,则ＣＨＤ危险度越高。目前临床上测定ＨＤＬ -Ｃ方法主要有 3类 :超速离心法、电泳法、沉淀法 ,其中以沉淀法为临床常规使用。德国ＢＭ公司研究开发的均相酶法ＨＤＬ -Ｃ试剂盒 ,无需沉淀分离 ,可直接测定血清中的ＨＤＬ-Ｃ ,方法简便 ,易于自动化。材料与方法1　材料1 .1　仪器　德国ＢＭ公司ＳＵＰＥＲＺ 81 8全自动生化分析仪。1 .2　试剂ＨＤＬ -Ｃ(均相酶法 )试剂盒 ,ＢＭ公司产品。甘油三酯试剂盒为ＢＭ公司产品。ＨＤＬ -Ｃ(磷钨酸镁沉…     

糖尿病患者骨质疏松与糖尿病肾病的关系研究

为探讨糖尿病患者骨密度、骨质疏松与糖尿病之间的关系 ,我们观察了 96例糖尿病患者的骨密度(ＢＭＤ)与 2 4小时尿白蛋白排泄率及肾功能的变化 ,还就其病程、空腹血糖 (ＦＢＧ )、糖化血红蛋白(ＨｂＡ1ｃ)、血肌酐 (Ｃｒ)、尿素氮 (Ｂｕｎ)、血钙 (Ｃａ)、血磷 (Ｐ)、血碱性磷酸酶 (ＡＫＰ)、体重指数 (ＢＭｌ)等因素之间的关系进行比较 ,以探明肾脏损害与骨密度(ＢＭＤ)、骨质疏松 (ＯＰ)之间的关系。1　对象与方法1 1　研究对象 :根据 1997年美国ＡＤＡ公布的糖尿病诊断标准 (ＦＢＧ≥ 7ｍｍＯＬ/Ｌ ,餐后 2小时ＢＧ≥11 1ｍｍＯＬ/Ｌ)确…     

清除法直接测定HDL-C的特异性评价

由于血清中异常脂蛋白和胆红素的干扰 ,一般方法不能准确测定高密度脂蛋白胆固醇 (ＨＤＬ -Ｃ) ,清除法 (Ｃｌｅａｒ ａｎｃｅｍｅｔｈｏｄ) [1] 是一种快速、有效的特异性测定方法。现就清除法的特异性报道如下。1　材料与方法1 1　仪器 :Ｈｉｔａｃｈｉ70 6 0型生化分析仪。1 2　试剂1 2 1　Ｒａｎｄｏｘ公司生产的清除法直接测定ＨＤＬ -Ｃ试剂盒。1 2 2　北京中拓世诊公司提供的酶法测定甘油三酯 (ＴＧ)试剂盒。1 2 3　Ｒａｎｄｏｘ公司生产的比色法测定总胆红素 (ＴＢＩＬ)试剂盒。1 2 4　ＴＧ校准血清 ,北京中拓世诊公司提供 :Ｔ…     

上海地区正常人定量骨超声测定

为探索骨密度及骨强度的无创性检测的新技术,以利早期诊断骨质疏松症或筛选骨质疏松症的高危人群,为此,我们对上海地区正常人定量骨超声测定进行了初步观察。一、对象与方法1对象:选自我院正常体检者,男368人,年龄20～79岁,女1250人,年龄20～79岁。均排除严重内外科疾病,无长期使用影响骨代谢药物,女性人群排除因子宫及附件手术造成的提前绝经及性激素水平改变的个体。按10岁为1个年龄组,男女各分为6组。2仪器:使用英国ＭｃＣｕｅ公司的产品ＣＵＢＡＣｌｉｎｉｃａｌ定量骨超声测定仪,测定跟骨的骨骼强度,其测定结果以2种指标表示:(1)宽频超…     

肢体运动对早产儿骨矿物质含量的影响

目的 探讨肢体运动对早产儿骨的质含量（骨矿含量）的影响及临床意义。方法 用单光子吸收法（ＳＰＡ）测定１２例（运动组）早产儿运动４周前后桡骨骨矿含量值,同期检测血清钙（Ｃａ）、磷（Ｐ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、骨钙素（ＢＧＰ）及甲状旁腺素（ＰＴＨ）水平,并与１１例（对照组）早产儿进行比较。结果 研究结束时运动组骨线密度（ＢＭＣ）、骨面密度（ＢＭＤ）值明显大于对照组水平（Ｐ均〈０．０１）。研究期间运动组     

珊瑚人工骨复合骨形成骨白修复狗下颌骨缺损

应用珊瑚人工骨（ＣＡＢ）／有形成蛋白（ＢＭＰ）材料修复１０只狗下颌骨缺损，观察４～２６周，分别于术后第４，８，１４，２０，２６周处死动物（每次１组，每组２只）取材作Ｘ线拍片和组织切片，结果表明ＣＡＢ是ＢＭＰ又一主好载体，ＣＡＢ／ＢＭＰ复合材料是一种较为理想的骨缺损修复材料。     

979例儿童骨碱性磷酸酶检测分析

本文对我市979例门诊儿童骨碱性磷酸酶(ＢＡＬＰ)进行检测,为小儿佝偻病诊断提供了有价值的手段。1　对象与方法11　检测对象　1998年4月～1999年4月随机对我市0～9岁979例门诊儿童分为三组,第一组0～6个月206例,第二组6个月～2岁284例,第三组2～9岁489例进行全血抽样检测ＢＡＬＰ。12　方法　采用手指末梢全血30μｌ,选用北京化阳生物医学技术公司生产的小儿佝偻病诊断用ＢＡＬＰ试剂盒,按试剂盒说明书操作,根据其测定原理,血清中ＢＡＬＰ催化底物5溴4氯3吲哚基磷酸盐(ＢＣＩＰ)水解,使氯化硝四氨唑蓝还原显色,根据呈现于反应膜上颜色深浅…