大鼠胸主动脉平滑肌细胞的培养与鉴定

目的探讨以简便、高效的方法获取血管平滑肌细胞,为相关研究提供实验材料。方法采用组织贴块法进行原代培养,胰酶消化法传代,并应用相差显微镜和平滑肌肌动蛋白对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果90%的组织块接种存活,培养5代的平滑肌细胞纯度达98%以上。镜下可见培养细胞呈典型的“峰-谷状”样生长,免疫组化染色显示胞浆内平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论本法简便、可靠,短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞,可作为研究心血管疾病良好的体外模型。     

阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠主动脉平滑肌NADPH氧化酶的影响

目的探讨心肌梗死后大鼠主动脉平滑肌NADPH氧化酶的变化及阿托伐他汀的干预作用。方法取雄性SD大鼠,通过是否结扎左前降支分为手术组和假手术组,手术组大鼠于术后第二天随机给予阿托伐他汀[10mg/(kg.d)](心梗干预组)或等体积生理盐水(心梗组)灌胃共5周,第6周处死大鼠取胸主动脉平滑肌,采用WST-1法及RT-PCR法分别测定平滑肌超氧阴离子(O2-)浓度及Nox1 mRNA和Nox4 mRNA表达,并探讨其相关性。结果心梗组O2-浓度、Nox1 mRNA及Nox4 mRNA表达高于假手术组(P<0.01)和心梗干预组(P<0.05)。O2-浓度分别与Nox1 mRNA及Nox4 mRNA表达呈正相关(r=0.53,P<0.05;r=0.56,P<0.05)。结论心梗后大鼠平滑肌NADPH氧化酶系统被激活,阿托伐他汀通过降低Nox1 mRNA及Nox4 mRNA表达而减少O2-产生。     

阿托伐他汀对小鼠实验性动脉粥样硬化病变形成的抑制作用

目的观察阿托伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷(apoE-/-)小鼠实验性动脉粥样硬化(AS)病变形成及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨阿托伐他汀抑制AS病变形成的可能机制。方法将apoE-/-小鼠随机分为3组:阿托伐他汀高、低剂量组、模型组(等量生理盐水),每组8只,给药第8周后全部处死。酶法检测血清脂质含量;比色法检测氧化指标一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(TAC)及丙二醛(MDA);病理图像分析法测定主动脉AS斑块面积及其与管腔面积的比值;免疫组织化学染色方法测定主动脉壁VCAM-1表达。结果阿托伐他汀高、低剂量组与模型组apoE-/-小鼠比较显示:(1)阿托伐他汀(高、低剂量)可以显著降低总胆固醇、甘油三酯水平(P<0.01),升高高密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.01);(2)明显增加血浆NO及TAC(P<0.01),减少MDA的生成(P<0.01);(3)阿托伐他汀可减少斑块面积与管腔面积比值(P<0.01);(4)阿托伐他汀可下调VCAM-1的表达(P<0.01)。结论阿托伐他汀可能通过调节apoE-/-小鼠血脂代谢、增强其抗氧化能力及下调主动脉壁VCAM-1表达,抑制apoE-/-小鼠AS病变形成的发展。     

葡萄籽原花青素联合阿托伐他汀治疗老年颈动脉粥样硬化患者的观察

目的 观察葡萄籽原花青素和阿托伐他汀联合应用对老年患者颈动脉粥样硬化的疗效. 方法 将存在颈动脉粥样硬化斑块的老年高脂血症患者122例,随机分为单药组63例,给予阿托伐他汀20 mg/d;联合用药组59例,给予阿托伐他汀l0mg/d和葡萄多酚胶囊400mg/d.治疗前及治疗后3、6、12个月测定患者平均最大颈动脉内中膜厚度(MMCIMT)、斑块积分、斑块性质及血脂和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的变化. 结果 治疗3个月后,单药组和联合用药组患者与治疗前比较血清总胆固醇(TC)[(4.9±1.0)比(6.5±0.7)mmol/L、(4.7±0.6)比(6.3±0.6)mmol/L]、三酰甘油(TG)[(2.3±0.5)比(2.9±0.4)mmol/L、(2.2±0.7)比(3.0±0.4) mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) [(3.3±0.9)比(4.2±0.7)mmol/L、(3.1±0.6)比(4.0±0.6)mmol/L]降低(均P＜0.01),且随着治疗时间的延长进一步降低.联合用药组患者治疗3个月后高密度脂蛋白胆固醇(H DL-C)水平较治疗前升高20.2％ (P＜0.05).治疗后两组患者血清hs-CRP水平均下降(均P＜0.05).单药组治疗3个月MMCIMT较治疗前减小1.3％(P＞0.05),治疗6个月减小3.4％ (P＞0.05),12个月减小5.1％(P＜0.05).联合用药组治疗3个月后MMCIMT较治疗前减小2.0％(P＞0.05),6个月减小5.3％(P＜0.05),12个月减小8.6％(P＜0.01).12个月组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).单药组治疗3个月斑块积分较治疗前减小6.8％(P＞0.05),治疗6个月减小14.5％ (P＞0.05),12个月减小19.2％(P＜0.05);联合用药组患者治疗3个月斑块积分减少13.1％(P＞0.05),且随着治疗时间的延长,斑块积分进一步降低(6个月下降28.0％,P＜0.05;12个月下降45.0％,P＜0.01).治疗6个月(P＜0.05),两组12个月联合治疗组斑块积分降低更明显(P＜0.01);联合用药组较单药组斑块总数和不稳定斑块数减少更明显. 结论 葡萄籽原花青素与阿托伐他汀联合应用,可加强抗动脉粥样硬化治疗的效果.     

过氧化氢对大鼠主动脉平滑肌细胞骨桥蛋白基因表达的影响

目的观察不同浓度的过氧化氢(H2O2)对培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)骨桥蛋白(OPN)基因表达的影响。方法用含10%小牛血清的DMEM培养液体外培养大鼠主动脉VSMC,随机分为对照组,H2O2不同浓度(10,50,100μmol/L)干预组,应用逆转录聚合酶链反应及Western blot技术结合吸光度扫描分析,观察H2O2对VSMC的OPN表达的影响。结果不同浓度H2O2均明显刺激VSMC的OPN mRNA和蛋白的表达,且具有剂量依赖性促进作用。结论H2O2能在基因水平上刺激VSMC的OPN的表达。     

阿托伐他汀对兔主动脉粥样硬化斑块和脂肪酸结合蛋白的抑制作用

目的观察阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化斑块和血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)的作用机制。方法 16只新西兰大白兔给予高TC饲料饲养8周后,随机分为高TC组(继续饲以高TC饲料4周)和阿托伐他汀组(在饲以高TC饲料的基础上给予阿托伐他汀2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)4周),每组8只。另选8只普通饲料饲养12周的新西兰大白兔作为对照组。分析观察前、8和12周兔血脂和AFABP水平的变化;12周末处死兔,取主动脉进行病理学检查;RT-PCR测定主动脉AFABP mRNA的表达。结果与高TC组比较,阿托伐他汀组兔12周时血清TC、LDL-C、AFABP水平和AFABP mRNA表达均明显降低(P0.01)。对照组、高TC组、阿托伐他汀组斑块/内膜面积比分别为0、(75.80±8.21)%和(46.11±3.56)%,差异显著(P0.01);内膜厚度分别为(4.12±0.29)μm、(74.18±10.25)μm和(39.45±5.68)μm;内膜/中膜比分别为0.05±0.01、0.85±0.31和0.48±0.23,差异显著(P0.01)。结论阿托伐他汀具有抗动脉粥样硬化作用,其降低兔血清AFABP水平及主动脉AFABP mRNA的表达可能是其作用机制之一。     

阿托伐他汀与阿托伐他汀加力平脂治疗高脂血症疗效比较和安全性观察

动物实验和临床资料都证明血中胆固醇及甘油三酯 (ＴＧ)的增高与动脉粥样硬化的发生有一定关系 ,低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)与极密度脂蛋白(ＶＬＤＬ)具有致动脉粥样硬化作用 ,高密度脂蛋白(ＨＤＬ)则能抑制或逆转动脉粥样硬化。笔者从门诊患者中选取 82例高脂血症患者 ,随机分为 3组对比观察大、小剂量阿托伐他汀与阿托伐他汀加力平脂治疗高脂血症的疗效和安全性1　 对象与方法1 .1 　 对象所有对象均为空腹血清ＴＧ≥ 2 .2ｍｍｏｌ/Ｌ ,总胆固醇 (ＴＣ)≥ 6 .2 4ｍｍｏｌ/Ｌ ,除外脂蛋白异常、高脂血症的继发原因、糖尿病、肾功能不正常、肾病…     

西罗莫司联用阿托伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶的影响

目的探讨西罗莫司和阿托伐他汀联合使用对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法取大鼠血管平滑肌细胞进行实验,分为空白组、DMSO组、西罗莫司组(100nmol/L)、阿托伐他汀组(3μmol/L)和联合组(西罗莫司100nmol/L加阿托伐他汀3μmol/L)。实验各组细胞给予相应药物干预2h后,加入三丁基过氧化氢诱导氧化应激损伤,24h后检测各项指标。结果与空白组比较,DMSO组、西罗莫司组、阿托伐他汀组和联合组细胞增殖率明显下降(P<0.01)。与空白组和DMSO组比较,阿托伐他汀组和联合组超氧化物歧化酶水平明显上升和丙二醛水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。与空白组、DMSO组、西罗莫司组比较,阿托伐他汀组和联合组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01);联合组iNOS mRNA和蛋白表达较阿托伐他汀组明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论在氧化应激状态下,西罗莫司和阿托伐他汀均能抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖和抗氧化损伤,维持NOS系统平衡,联合应用的效果优于单独应用。     

阿托伐他汀对心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑的抑制作用

目的　探讨阿托伐他汀对去甲肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠细胞外基质重塑的影响及其可能的机制。方法　雄性SD大鼠随机分为三组 :(1)对照组 ,(2 )去甲肾上腺素组 [1 0 6mg/ (kg·d)× 15d],(3)去甲肾上腺素 阿托伐他汀组 [5 0mg/ (kg·d)× 15d]。去甲肾上腺素ip ,2次 /d ,15d ,建立心肌肥厚模型。应用超声心动图及病理学方法评价整体心肌肥厚及组织胶原表达。用逆转录-聚合酶链反应法 (RT PCR)及免疫组化检测细胞外基质调节因子 -基质金属蛋白酶 (MMP - 9)及其生理性抑制剂 (TIMP 1)和转化生长因子 β1(TGF - β1)mRNA和蛋白表达。结果　去甲肾上腺素组大鼠发生左心室肥厚及纤维化 ,胶原含量及MMP 9、TIMP 1和TGF - β1蛋白、mRNA表达显著高于健康对照组 (P <0 0 1)。阿托伐他汀能减少心肌中总体胶原及Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成及MMP 9、TGF - β1表达 (P <0 0 1)。结论　MMP 9、TIMP 1和TGF - β1与心肌肥厚大鼠的细胞外基质重塑有关。阿托伐他汀能有效防治心肌纤维化及细胞外基质重塑 ,这一效应与其降低心肌中高表达的MMP 9和TGF - β1有关。     

阿托伐他汀联用依折麦布对新西兰兔动脉粥样硬化的影响

目的探讨阿托伐他汀联用依折麦布对新西兰白兔动脉粥样硬化的影响。方法将32只雄性新西兰白兔随机分为4组:对照组、模型组、阿托伐他汀干预组和联合药物干预组,每组8只,分别给予普通饲料、高胆固醇饲料、高胆固醇饲料+阿托伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1)、高胆固醇饲料+阿托伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1)+依折麦布1l mg·kg~(-1)·d~(-1)处理。12周后,酶法检测血清甘油三酯、胆固醇、HDL-C和LDL-C;HE染色观察动脉和肝脏病理形态学改变;高效液相色谱法检测动脉壁胆固醇含量;Western blot检测肝脏pcsk9和动脉壁CD36蛋白表达。结果与模型组比较,阿托伐他汀干预组和联合药物干预组甘油三酯、胆固醇、LDL-C明显下降(P<0.05,p<0.01);与阿托伐他汀干预组比较,联合药物干预组血清胆固醇和LDL-C水平明显下降(P<0.05),pcsk9和动脉壁CD36蛋白表达明显下降(P<0.05),但在动脉壁内膜病变减轻程度上,两组无明显差异。结论阿托伐他汀与依折麦布联用可能通过影响CD36和pcsk9表达,发挥更好地调脂、消斑、改善动脉壁和肝脏功能的作用。     

氯化锂通过上调焦磷酸水平抑制血管平滑肌细胞钙化

目的探讨氯化锂对血管平滑肌细胞钙化的影响及其可能的作用机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞,用钙化培养基(无机磷浓度为3 mmol/L)建立平滑肌细胞钙化模型。药物处理组用氯化锂(10 mmol/L)预处理细胞4 h后加入3 mmol/L的无机磷,继续培养细胞数天后用茜素红染色检测细胞钙盐沉积水平,同时应用焦磷酸偶联酶反应底物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)消耗法,酶标仪(OD340)检测细胞外焦磷酸的分泌;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测细胞中ankh基因的表达;采用慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞的方法,建立对照细胞组和ankh敲低的实验细胞组,并观察其对细胞钙化的影响。结果高磷细胞组钙化检测值为(65.00±2.11)ng/g,较对照细胞组(12.39±0.38)ng/g钙化水平明显升高(P<0.01)。氯化锂预处理细胞的钙化检测值为(24.92±1.87)ng/g,与高磷对照组(60.94±4.51)ng/g比较能显著抑制高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化(P<0.01);氯化锂预处理明显上调细胞外液中焦磷酸的含量,基础条件下预处理组为(51.70±7.26)×10^-3 mmol/g,对照组为(28.71±2.55)×10^-3mmol/g(P<0.01);高磷刺激下预处理组为(34.35±4.27)×10^-3mmol/g,对照组为(20.89±4.93)×10^-3mmol/g(P<0.05),同时氯化锂预处理显著升高细胞ankh表达水平(P<0.01);而敲低ankh使无机磷诱导的血管平滑肌细胞钙化程度显著加重,敲低ankh细胞钙化检测值为(71.73±2.45)ng/g,对照组为(56.19±3.59)ng/g(P<0.01)。结论氯化锂通过上调平滑肌ANKH的表达,升高细胞外液中的焦磷酸水平,抑制高磷诱导下血管平滑肌细胞的钙化。     

血管平滑肌细胞表型的成骨转换与血管钙化

血管钙化是血管壁中钙盐沉积的过程,导致血管硬化和失去弹性。它通常发生在中老年人,尤其是患有动脉粥样硬化、高血压、糖尿病和慢性肾脏疾病等疾病患者。血管钙化是一个主动的过程,其中平滑肌细胞的成骨转换是重要事件之一。这些细胞在钙化过程中释放钙离子,导致钙盐的沉积,形成钙化斑块。血管钙化受多种因素调节,包括高磷、高钙水平及氧化应激、机械应力等。此外,中医药研究在减轻血管钙化方面显示出潜力,例如灵芝孢子粉和其衍生物,三七、黄芩素、根皮素、雷公藤甲素等。这些研究为进一步理解和干预血管钙化提供了重要的证据,并揭示了一些潜在的抑制因子,可以作为未来治疗血管钙化的研究方向。     

大黄素自身抑制血管平滑肌细胞迁移和增殖

目的探讨大黄素对血管平滑肌细胞迁移和增殖的作用以及大黄素在血管平滑肌细胞中是否存在代谢过程。方法采用Transwell迁移系统和MTT法观察大黄素对血管平滑肌细胞迁移和增殖的影响。结果大黄素能显著抑制平滑肌细胞迁移,5μg/mL大黄素抑制率为83·3%;大黄素呈浓度和时间依赖性抑制平滑肌细胞增殖。然而,血管平滑肌细胞作用24h后,上清液中的大黄素浓度并无显著降低;细胞色素p450氧化酶诱导剂或者抑制剂没有改变大黄素的细胞毒性作用或者细胞内活性氧水平。大黄素的主要代谢酶(细胞色素p450氧化酶)基因表达水平没有显著的上调。结论大黄素能够抑制血管平滑肌细胞的迁移和增殖,并且不被平滑肌细胞代谢,可能作为药物涂层支架的药物。     

β-磷酸甘油诱导体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化

目的:研究β磷酸甘油对体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化作用。方法:采用组织块培养法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞。细胞分为钙化组和正常组。钙化组加入10mmol/Lβ磷酸甘油,0.1μmol/L胰岛素及50μg/L维生素C（钙化培养基）诱导细胞钙化,继续培养14d。茜素红S染色观察钙结节计数并测定细胞钙沉积含量。采用四唑盐比色法（MTT）测量细胞增殖。结果:钙化组钙结节计数为（7.4±3.8）%,较正常组（4.3±1.9）%显著增加（P<0.05）;细胞钙沉积含量为（5.4±0.4）mmol/g蛋白,较正常组（1.2±0.5）mmol/g蛋白显著增加（P<0.05）。MTT检测细胞增殖,钙化组细胞增殖为0.071±0.011,较正常组0.040±0.009明显增加（P<0.01）。结论:β磷酸甘油能诱导体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化,钙化能促进平滑肌细胞的增殖。     

胰岛素对离体动脉平滑肌细胞钙化的影响

目的 :动脉钙化是糖尿病患者血管疾病的主要病理改变之一 ,其原因不明。由于糖尿病的主要病理生理改变是机体组织细胞中胰岛素绝对或者相对缺乏 ,本研究试图探讨动脉平滑肌细胞在钙化过程中胰岛素的影响 ,以分析其在动脉钙化中的可能作用。方法 :建立牛离体动脉钙化的模型 ,培养钙化血管细胞 ,在培养环境中加入胰岛素 ,观察细胞钙沉积量的变化 ,同时分析钙化过程中细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素 （OC）分泌的变化情况。结果 :胰岛素为 10 -8mol/L环境中 ,钙化血管平滑肌细胞的钙沉积与对照细胞相比差别不显著 ,但是胰岛素环境中的细胞钙化过程比较平缓。胰岛素组血管平滑肌细胞钙化过程中碱性磷酸酶活性在各个时间均显著低于对照组 （P <0 .0 1）。钙化细胞的OC分泌在胰岛素环境中有所降低 ,尤其在钙化中期更加明显 ,在第 4、6、8d胰岛素组的OC水平分别比对照水平降低了 4 8.7%、5 5 .1%和 2 7.7%。结论 :10 -8mol/L的胰岛素对动脉血管平滑肌的钙盐沉积影响不明显 ,但是能够显著降低钙化过程中碱性磷酸酶活性和OC分泌量 ,反映出胰岛素对血管平滑肌细胞的钙化过程有保护作用。     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制物-1表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)基质金属蛋白酶(MMP)-9和基质金属蛋白酶抑制物(TIMP)-1表达的影响。方法体外培养人VSMCs,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Westernblot蛋白印迹法检测MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA和蛋白表达。结果人VSMCs在不同浓度Hcy(100、200、500、1000μmol/L)孵育24h后MMP-9mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组,并提示Hcy呈剂量依赖性诱导人VSMCsMMP-9的表达;但对TIMP-1mRNA和蛋白的表达无影响。结论Hcy可呈剂量依赖性诱导人VSMCsMMP-9的mRNA表达,而对TIMP-1mRNA的表达无明显影响,表明Hcy是在转录水平调控MMP-9的基因表达,这一效应可能是Hcy导致动脉粥样硬化的分子机制之一。     

血管平滑肌细胞内质网应激与血管钙化的研究进展

血管钙化是指羟基磷灰石沉积于血管壁,由多因素参与及调控,类似于骨、软骨形成的主动生物学过程。内质网应激是机体内适应性调节反应,适当的内质网应激帮助维持内质网稳态,但过度的内质网应激会促进血管钙化的发生与发展。本文综述内质网应激尤其是未折叠蛋白反应在血管钙化中的潜在作用和分子机制,希望为血管钙化的防治提供新的思路。     

阿伦膦酸钠在大鼠动脉钙化中的作用

目的研究阿伦膦酸钠(AL)对在体和离体大鼠动脉钙化的影响。方法4周龄SD雄性大鼠18只随机分为AL组、钙化组和正常组,前2组分别给予皮下注射华法林15mg.100g-1.12h-1,4d;维生素D3300000U.kg-1.24h-1,3d,以制备大鼠动脉钙化。AL组在钙化模型制备之前4d给予AL1mg.kg-1.24h-1皮下注射。细胞分为AL10-9、10-7和10-5mol/L组,钙化组和正常组。结果AL组大鼠主动脉vonKossa染色黑色深染结构减少。AL治疗的各组茜素红S染色发现钙结节计数较钙化组减少[(6.8±2.7,6.2±4.2,5.3±2.4)%比(7.4±3.8)%],细胞钙沉积含量减少[(5.2±1.2,4.8±1.7,3.5±1.8)%比(5.6±1.6)%],ALP活力和细胞增殖均降低,并呈剂量依赖性。结论AL能抑制大鼠动脉钙化。     

丝裂素活化蛋白激酶的激活和转核与大鼠 血管平滑肌细胞增殖关系的研究

目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）激活、转核与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)刺激血管平滑肌细胞（VSMC）增殖间的关系。方法 本实验采用培养大鼠胸主动脉VSMC。用^3H-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入法测定DNA合成,用p43/p44磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定MAPK蛋白量,用免疫细胞化学技术观察MAPK活化并转位入细胞核的过程。结果 （1）AngⅡt和PD98059的上述作用都呈剂量依赖性。（2）AngⅡ对MAPK蛋白表达有显著增强作用。此作用同样被PD98059以剂量依赖方式抑制。（3）AngⅡ刺激5min后,MAPK出现在VSMC的细胞浆中,30min时MAPK进入细胞核,3h后MAPK染色从核内消失,上述MAPK转核过程被PD98059抑制。结论 本实验证实人细胞核,3h后MAPK染色从核人消失,上述MAPK转核过程被PD98059抑制。结论 本实验证实AngⅡ能激活培养大鼠主动脉VSMC的MAPK,活化的MAPK从细胞浆转位进入细胞核导致VSMC增殖。     

大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的原代培养和鉴定

目的探讨大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的原代培养方法,了解生长特性,为血管增生性疾病的治疗研究提供试验材料。方法采用组织贴块法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,用倒置相差显微镜观察其生长情况,用免疫组化染色做鉴定,台盼蓝染色进行活力检测。结果85%的组织块接种存活,原代培养后2周左右即可传代,至少可以传8代以上,并且细胞形态、生长特点不发生明显的改变,6代的血管平滑肌细胞纯度达97%以上。台盼蓝染色约有94%以上的细胞为活细胞。镜下培养的血管平滑肌细胞呈典型的"谷峰状"生长,免疫组化染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论正确地利用组织贴块法可以简单、经济、高效地培养出血管平滑肌细胞,为血管增生性疾病的治疗研究提供了理想的细胞模型。