原发性肝癌全基因组杂合性缺失的研究

目的 研究肝癌全基因组等位基因杂合性缺失（ＬＯＨ）及其临床意义。方法 采用３８２对微卫星标志,对６５例肝癌２２条常染色体等位基因ＬＯＨ进行检测。结果 全组平均杂合子６８．１％。ＬＯＨ〉３０％的有１ｑ、３ｑ、４ｑ、８ｐ、１３ｑ、１６ｑ和１７ｐ。ＨＢｓＡｇ阳性者Ｄ４Ｓ２９６４ ＬＯＨ（６６％）较ＨＢｓＡｇ阴性者（３０％）高（Ｐ〈０．０５）;Ｄ３Ｓ３６８１和Ｄ１７Ｓ９３８ ＬＯＨ者术后复发率（９１％、８     

中国人D＿13S＿31位点多态性及与肝豆状核变性的连锁关系

Ｄ１３Ｓ３１标记位于Ｄ１３ｑ１４．３，其Ｔａｑ１内切酶切点的等位片段在中国人群中与白种人相同，且等位片段频率差异不明显。通过对７５名中国人正常个体分析，该标记的多态性等位片段频率结果如下：４．６ｋｂ片段的频率为５４％、６．７ｋｂ片段的频率为４６％、４．６ｋｂ／６．７ｋｂ杂合子频率为５３％。通过对１２个肝豆状核变性家系连锁分析，我们证实Ｄ１３Ｓ３１标记位点与肝豆状核变性基因位点存在紧密连锁关系５．１９）。在１２个肝豆状核变性家系４４名同胞中，检出４名症状前患者，１４名杂合子及３名正常纯合子。其结果表明，Ｄ１３Ｓ３１／Ｔａｑ１可用于肝豆状核变性的症状前诊断和杂合子检测。．ＴｈｅＷｉｌｓｏｎ＇ｓｄｉｓ－ｅａｓｅｇｅｎｅｉｓａｐｕｔａｔｉｖｅｃｏｐｐｅｒｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇＰ－ｔｙｐｅＡＴＰａｓｅｓｉｍｉｌａｒｔｏｔｈｅＭｅｎｋｅｓｇｅｎｅ．Ｎａ－ｔｕｒｅＧｅｎｅｔ，１９９３，６４：１３     

中国人胰岛素依赖型糖尿病与HLA－DQ基因的相关性研究

本研究采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＳＳＯＰＨ）方法（ＤＱＡｌ，共用９个探针，ＤＯＢ１，共１０个探针），对北京地区汉族４９例胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）患者及４８名健康对照者ＨＬＡ－ＤＯＢｌ基因和２７例ＩＤＤＭ患者及２９名对照者ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因的研究提示：（１）ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因的Ａ４等位基因（ＲＲ＝１１．７，Ｐｃ＜０．０２）与ＩＤＤＭ易感性呈显著正相关。（２）ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因的ＤＯＢ１＊０６０１（ＤＱＷ１．１２）等位基因与ＩＤＤＭ抵抗性相关（ＲＲ＝０．０３，Ｐｃ＜０．００２）。（３）ＨＬＡ－ＤＱ６５７天门冬氨酸［ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（＋）纯合子基因型与ＩＤＤＭ易感性降低有关，而ＨＬＡ－ＤＱβ５７非天门冬氨酸［ＨＬＡ－ＤＱＢ５７Ａｓｐ（－）］纯合子基因型与ＩＤＤＭ易感性增强有关，说明ＨＬＡ－ＤＱβ链第５７位氨基酸在决定ＩＤＤＭ易感性方面的重要作用。同其它人种相比，ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（－）纯合子基因型频率在中国人群中的减少及ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（＋）纯合子基因型频率在中国人群中的增多可能同中国人群ＩＤＤＭ发病率低有关。     

葡萄糖激酶基因多态性与中国人非胰岛素依赖型糖尿病相关性研究

目的：探讨葡萄糖激酶基因与中国北方汉族人非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）的关系。方法：以葡萄糖激酶基因３’端微卫星多态性为遗传标志，用多聚酶链反应（ＰＣＲ），检测各等位基因在１４５例非糖尿病对照组和１０５例ＮＩＤＤＭ病人组中的分布频率的差异。结果：共发现３个等位基因（大小为１９５ｂｐ、１９７ｂｐ、１９９ｂｐ，分别命名为Ａ，Ｂ，Ｃ）和６种基因型（ＡＡ，ＢＢ，ＣＣ，ＡＢ，ＡＣ，ＢＣ）。等位基因Ａ、Ｂ、Ｃ在非糖尿病组的频率分别为５３．４％、２５．２％和２１．４％；在ＮＩＤＤＭ组中分别为６０．０％、１７．１％、２２．９％。基因型ＡＡ、ＢＢ、ＣＣ、ＡＢ、ＡＣ、ＢＣ在非糖尿病对照组为２８．３％、６．２％、２．１％、２４．８％、２５．５％、１３．１％；在ＮＩＤＤＭ组为３６．２％、１．９％、３．８％、２０．０％、２７．６％、１０．５％。糖尿病组中Ｂ等位基因频率明显低于非糖尿病对照组（１７．１％ｖｓ２５．２％，Ｐ＝０．０３），两组的各基因型频率差异无显著性。带有Ｂ等位基因（Ｂ＋）的ＮＩＤＤＭ患者与不带有此等位基因患者（Ｂ－）的体重指数（ＢＭＩ）差异无显著性，而Ｂ－的ＮＩＤＤＭ患者诊断年龄比Ｂ＋者小（５１岁ｖｓ５６岁，Ｐ＝０     

肝豆状核变性基因连锁图谱的研究

为寻找适于中国人Ｗｉｌｓｏｎ氏病（ＷＤ）基因连锁分析的遗传标记及制定ＷＤ基因所在区域的遗传图谱，我们应用Ｄ１３ｑ１４－２１区域４个ＤＮＡ标记对７５名无亲缘关系个体及９个ＷＤ家系成品进行连锁分析。结果发现４个ＤＮＡ标记中３个标记等位片段与白种人相同而杂合率相异，其中２个ＤＮＡ标记Ｄ１３Ｓ３１，Ｐ１２３Ｍ１．８与ＷＤ基因存在紧密连锁关系。其遗传顺序为：着丝点－Ｒｂ－Ｄ１３Ｓ３１－ＷＮＤ。     

原发性肝癌中 HBV X、S、Pre-S、C 基因片段整合与 ras、myc 癌基因表达的关系

用地高辛标记的ＨＢＶ基因组探针检测了６６例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中ＨＢＶ的存在状态，从中筛选出３２例仅有ＨＢＶＤＮＡ整合的ＨＣＣ作为研究对象，进一步检测了ＨＢＶＸ基因、Ｓ基因、Ｐｒｅ－Ｓ、Ｃ基因ＤＮＡ片段的整合情况，并探讨了ＨＢＶ４种基因亚片段整合与ｒａｓ、ｍｙｃ癌基因表达的关系。结果显示，ＨＢＶＸ、Ｓ、Ｐｒｅ－Ｓ和Ｃ基因片段的整合率分别为８７．５％（２８／３２）、６２．５％（２０／３２）、６２．５％（２０／３２）和２５．０％（８／３２）。ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ在ＨＣＣ中的表达率分别为５０．０％（２０／４０）、８１．２％（２６／３２）。通过对ＨＣＣ中４种ＨＢＶ基因片段整合与ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ表达之间关系的研究，显示ｐ６２ｍｙｃ的表达与ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－Ｓ基因整合关系密切，ｐ２１ｒａｓ的表达则主要与ＨＢＶＸ基因整合有关（Ｐ＜０．０５）。提示ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－ＳＤＮＡ片段在宿主细胞染色体上的整合可能直接或通过其蛋白启动ｍｙｃ和（或）ｒａｓ癌基因的表达。     

云南省布依族人群EsD，PGM_1，GLOI，EAP，ADA和AK_1的分布调

采用ＥｓＤ一ｐＧＭ１一ＧＬｏＩ同步电泳分型法以及ＥＡｐ一ＡＤＡ一ＡＫ１同步电泳分型法对云南省罗平县布依族人红细胞ＥｓＤ，ＰＧＭ１，ＧＬｏＩ，ＥＡＰ，ＡＤＡ和ＡＫ１作了分型调查，计算出这６种红细胞同功酶的基因频率分别是：ＥｓＤ１．０．６３ｌ４，ＰＧＭ１１０．６９０７（ＰＧＭ６１０．０２５４），ＧＬＯ１０．１６９５，ＥＡｐＡ０．２９６６，ＡＤＡ１０．９５３４，ＡＫ１１．００００；根据这６种同功酶的表型频率计算出ＤＰ值分别为ＥｓＤ０．６０５９，ＰＧＭ１０．６ｌ０６，ＧＬＯ０．４４４２，ＥＡｐＡ０．５７３３，ＡＤＡ０．１６５８，ＡＫ１０，累积Ｄｐ值０．９６９６；累积父权排除率为５３．４６％。     

乙型肝炎病毒x蛋白对细胞周期的影响

目的　研究乙型肝炎病毒ｘ（ Ｈ Ｂｘ） 蛋白对细胞周期影响,探讨 Ｈ Ｂｘ 蛋白致细胞周期紊乱的分子机理。方法　构建 Ｈ Ｂｘ 基因真核表达载体ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４ Ｘ,电转染入 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞（ Ｘ 细胞） ,以ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４空载体为对照（ Ｘ０ 细胞） ,潮霉素选择培养,克隆扩增转染细胞,经无血清培养同步化后,流式细胞仪检测细胞周期变化;细胞组化和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测增殖细胞核抗原（ Ｐ Ｃ Ｎ Ａ） 和ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ 表达变化。结果　流式细胞仪检测示对照 Ｘ０ 细胞７０ ％ 进入 Ｇ０ Ｇ１ 期,而转 Ｘ 细胞仅５６ ％ 进入 Ｇ０ Ｇ１ 期,与含血清培养的亲本细胞 Ｈｅｐ Ｇ２ 几乎相同。ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ Ｄ 表达在 Ｘ０ 细胞阳性率为（８６ ±８） ％ , Ｘ 细胞为（１６ ±６） ％ 。 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 表达在 Ｘ０ 细胞阳性率为（９ ±５） ％ , Ｘ 细胞为（８６ ±３） ％ 。结论　 Ｈ Ｂｘ 有推进细胞周期作用,并使细胞生长对血清依赖减少。 Ｈ Ｂｘ 可抑制细胞周期抑制蛋白ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ 表达,同时增强细胞 Ｄ Ｎ Ａ 合成。     

检测外周血T淋巴细胞亚群对肺癌,肺结核诊断价值的探讨

应用ＡＰＡＡＰ桥联酶标法检测肺癌２２例，肺结核３０例和正常人１６例的Ｔ淋巴细胞亚亚群。结果；肺癌组ＣＤ＾＋３为（４９．９±１３．３）％，ＣＤ＾＋４为（２２．４±６．３％），ＣＤ＾＝８为（２７．２±８．０）％，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８为０．９９±０．２。     

Ⅰ型糖尿病HLA－DRB1等位基因分析

应用ＰＣＲ／ＳＳＰ基因分型方法鉴定ＨＬＡ－ＤＲＢ１与北京地区胰岛素依赖型糖尿病的关系。证明ＩＤＤＭ的ＤＲ９频率较对照人群明显升高（３０．３％ｖｓ１７．９２％，ｘ２＝６．９７，Ｐ＜０．０１）；而ＤＲ３在ＩＤＤＭ中虽有升高，但无统计学意义（７．０％ｖｓ２．３６％　ｘ２＝３．１９，Ｐ＞０．０５）；糖尿病患者ＤＲ２频率明显降低（７．４％ｖｓ１９．８％，ｘ２＝９．６７，Ｐ＜０．０１）。上述结果表明ＤＲ９、ＤＲ３与ＩＤＤＭ易感呈正相关，而ＤＲ２与ＩＤＤＭ抗性相关。     

中国人群HLA－DR_4等位基因结构及其与类风湿关节炎相关性研究

对１３０名正常人及９５例类风湿关节炎（ＲＡ）病人ＨＬＡ－ＤＲ４基因分析结果显示，该基因与ＲＡ易感性显著相关（Ｐ＜０．００５），中国人群中至少存在８种ＤＲ４亚型，其中Ｄｗ１５（ＤＲＢ１０４０５）频率最高，占ＤＲ４阳性正常人的４８％，也是与ＲＡ易感性相关的主要亚型（ＲＲ＝３．１，Ｐ＜０．００５）。对ＤＲ４基因第二个外显子第三高变区分析结果显示，与ＲＡ易感性呈正相关的５种亚型均具有共同的Ｒ／ＫＲＡＡ序列特征，占病人ＤＲ４阳性群体的９２％，而正常人为５６％（Ｘ２＝１０．２９，Ｐ＜０．００５）。而３种与ＲＡ易感性呈负相关的ＤＲ４亚型均不具有上述序列特征。     

中国人遗传性脊髓小脑型共济失调患者三核苷酸突变频率的分布

目的评价ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３ＣＡＧ三核苷酸扩增突变（ＣＡＧ）ｎ在中国人遗传性脊髓小脑型共济失调（ＳＣＡ）患者的分布频率。方法应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和变性聚丙烯胺凝胶电泳技术，检测分析了５０名中国人常染色体显性遗传ＳＣＡ家系（其中患者７９例）的ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ。结果在５０个ＳＣＡ家系中，１个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ１（ＣＡＧ）ｎ突变，３个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ２（ＣＡＧ）ｎ突变，２４个ＳＣＡ家系有ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变，阳性率分别为２．０％、６．０％、４８．０％。２例ＳＣＡ１患者ＣＡＧ三核苷酸重复数为５３和６２次，而正常人为１２～３６次。７例ＳＣＡ２患者ＣＡＧ三核苷酸重复数４３～４７次，而正常人为２２～３０次。４２例ＭＪＤ／ＳＣＡ３患者ＣＡＧ三核苷酸重复数６３～７８次，而正常人为１５～３８次。另有２２个ＳＣＡ家系２８例患者，ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变检测在正常范围内。结论中国ＳＣＡ主要为ＭＪＤ／ＳＣＡ３型，属于非葡萄牙型ＭＪＤ；而ＳＣＡ１型、ＳＣＡ２型少见。     

用P~(68SR2.0)标记多态性对Wilson病的早期诊断及杂合子检测

本研究结合临床铜生化检测结果，应用分子生物学技术对６个Ｗｉｌｓｏｎ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ（ＷＤ）家系进行检测，在１３名同胞中共检出２名ＷＤ症状前患者，６名杂合子及１名正常人，另４名无检测意义。其结果表明，来自视网膜母细胞瘤易感基因（Ｒｂ）的标记探针Ｐ６８ＲＳ２．０标记有助于ＷＤ的基因筛选，但不是唯一的诊断依据。     

鼻咽癌患者血清中EB病毒四种特异性IgG抗体的测定

用间接免疫荧光法检测了２４例鼻咽癌患者与１１９例正常人血清中ＥＢ病毒４种特异性ＩｇＧ抗体，结果表明，正常人血清中ＥＢ病毒衣壳抗原（ＷＣＡ）的抗体效价为１：１６０以下，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：１６０～１：５１２０，抗体阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）的抗体效价为１：８０以下，而鼻咽患者血清抗体价为１：８０～１：２５６０，阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）的抗体效价为ｌ：１０，阳性率只有１３．３％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：２０～１：１２８０，阳性率为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒抗原（ＭＡ）的抗体效价为１：１０～１：４０，阳性率为７１％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为１：１０～１：３２０，阳性率为１００％．以上４种抗体中．ＶＣＡ、ＥＢＮＡ和ＥＡ抗体的效价和分布在正常人与鼻咽癌患者之间有明显差异（Ｐ＜姜勇男，男，３１岁，讲师．延吉市局子街２１号（１３３０００）０．０ｌ），ＥＡ抗体的阳性率也比正常人明显升高（Ｐ＜０．０ｌ），ＭＡ抗体的效价和阳性率与正常人相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

一个新的染色体8q24.1带特异性微卫星DNA的筛选和分析

运用人类高分辨染色体显微切割，ＰＣＲ和微克隆技术构建８ｑ２４．１带特异性ｐＵＣ１９文库，筛选出一个含ＣＡ重复的新的多态微卫星ＤＮＡ（（ＣＡ）ｎ）经ＰＣＲ检测人鼠杂种细胞板，证实其来源于人８类染色体，在正常人群检出１１个等位片段，杂合度为０．８４；在１１个家系中进行连锁分析。结果显示，此多态标记与三个已知的位于８ｑ２３－２４．１区域的微卫星ＤＮＡ（Ｄ８Ｓ８５，Ｄ８Ｓ１９９，Ｄ８Ｓ２８１）紧密连锁，其     

类风湿性关节炎患者T细胞亚群免疫荧光流式细胞分析

目的：探讨Ｔ细胞亚群与类风湿性关节炎（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）的关系及类风湿性关节炎的发生发展变化与细胞免疫功能的关系。方法：采用免疫荧光染色法和流式细胞仪检测５６例ＲＡ患者及４５例正常人外周血ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞数。结果：正常人血浆ＣＤ４＋细胞数（４３．５２±２．１６）％，ＣＤ８＋细胞数（２２．３８±１．９８）％，ＲＡ患者ＣＤ４＋（４５．１８±３．２７）％，ＣＤ８＋（１５．０５±３．１５）％。ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值较正常人高（Ｐ＜０．０５），且ＲＡ患者中活动期与非活动期相比亦有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：本研究提示细胞免疫状态参与了ＲＡ的发病过程；进一步了解其作用机理，对ＲＡ的防治具有重要意义。     

动脉粥样硬化性脑梗死患者载脂蛋白B基因XbaI酶切多态性…

目的：探讨动脉粥样硬化性脑梗死（ＡＣＩ）与载脂蛋白Ｂ基因ＸｂａⅠ酶切多态性的关系。方法：以ａｐｏＢ ｃＤＮＡ片段（ＬＢ１．５）为探针，利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，检测了５６名汉族ＡＣＩ患者和６１名正常对照者的ａｐｏＢ基因ＸｂａⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）等位基因频率。结果：发现８．６ｋｂ（Ｘ＾－）和５．０ｋｂ（Ｘ＾＋）两条杂交片段，Ｘ＾＋等位基因频率在ＡＣＩ（０．１４３）和对照者（０．     

肝癌细胞中 HBV-DNA 片段整合及 N-ras、p~(53) 表达的研究

肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）与ＨＢＶ整合密切相关，为研究ＨＢＶ－ＤＮＡ各片段在ＨＣＣ发生中的作用，用ＨＢＶ全长基因探针通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交分析了１７例ＨＣＣ标本中ＨＢＶ－ＤＮＡ的存在状态，并用ＨＢＶ片段基因探针和Ｎ－ｒａｓ、ｐ５３探针检测了其相应ｍＲＮＡ的转录情况。结果发现，５２．９％ＨＣＣ标本为纯整合型，４７．１％的标本为混合型。１７例ＨＣＣ中，Ｐｒｅｓ、ＨＢｓ、ＨＢｘ、ＨＢｃ转录率分别为４７．１％、５８．８％、７０．５％和４１．２％。９例纯整合型ＨＣＣ中，上述基因转录率分别为１１．１％、４４．４％、５５．６％和１１．１％，其中ＨＢｘ较ＨＢｃ、Ｐｒｅｓ差异有显著性（Ｐ＜０．０５），ＨＣＣ标本Ｎ－ｒａｓ、ｐ５３总转录率分别为８２．３％、６４．７％。提示ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＣＣ细胞内主要以整合于染色体上的方式存在，而且整合片段可作为转录的模板，其蛋白产物可能通过影响Ｎ－ｒａｓ、ｐ５３在细胞调控中的功能促进肿瘤的形成。     

骨髓增生异常综合征ras癌基因产物P21免疫细胞化学的分析

目的 探讨ＭＤＳ患者ｒａｓ－ｐ２１的表达及其急性白血病转化的关系。方法 应用ｒａｓ－ｐ２１单克隆抗体免疫细胞化学的分析法。结果 ２５例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者中有８例这阳性，占３２．０％。其中５例Ｐ２１阳性的ＭＤＳ患者发生急性白血病（ＡＭＬ）转化，中位数存活期为２１个月。１７例Ｐ２１阴性的ＭＤＳ患者者除了３例未治疗，１例ＡＭＬ转化，Ｐ２１转阳性外，其余１３例在１２－６０人内均未发现ＡＭＬ转     

新染色体8q24.1带特异性微卫星DNA的筛选和分析

运用人类高分辨染色体显微切割、ＰＣＲ和微克隆技术构建的８ｑ２４．１带特异性ｐＵＣ１９文库，筛选出一个含ＣＡ重复的新的多态微卫星ＤＮＡ［（ＣＡ）ｎ］。经ＰＣＲ检测人鼠杂种细胞板，证实其来源于人８号染色体；在正常人群中检出１１个等位片段，杂合度为０．８４；在１１个家系中进行连锁分析。结果显示，此多态标记与三个已知的位于８ｑ２３－２４．１区域的微卫星ＤＮＡ（Ｄ８Ｓ８５，Ｄ８Ｓ１９９，Ｄ８Ｓ２８１）紧密连锁，其在８号染色体遗传图谱上的相对位置为：着丝粒－Ｄ８Ｓ８５－新（ＣＡ）ｎ－Ｄ８Ｓ１９９－长臂末端。