乙醇对小鼠胚胎体外发育影响的研究

用含不同浓度乙醇的 Whitten氏培养液对小鼠 2细胞、4细胞、8细胞和桑椹期胚胎分别进行体外培养 ,研究乙醇对小鼠不同发育时期胚胎体外发育的影响。首先利用含 0 .0 1%、0 .5 %、1.0 %、1.5 %、2 .0 %、3.0 %、5 .0 %、10 .0 %乙醇的 Whitten氏培养液对 2细胞胚胎进行培养 ,观察研究小鼠 2细胞胚胎对培养液中乙醇浓度的耐受极限。然后再用含 1%和 3%乙醇的 Whit-ten氏培养液分别对小鼠 2细胞、4细胞、8细胞和桑椹期胚胎进行培养。结果 :含低浓度乙醇 (1%以下 )的培养液对外细胞胚胎和桑椹胚的囊胚形成有促进作用 ,而在 2细胞和 4细胞胚胎…     

乙醇对小鼠胚胎体外发育影响的研究

用含不同浓度乙醇的Whitten氏培养液对小鼠2细胞、4细胞、8细胞和桑葚期胚胎分别进行体外培养，研究乙醇对小鼠不同发育时期胚胎体外发育的影响。首先利用含0、0．1％、0．5％、1．0％、1．5％、2．0％、3．0％、5．0％、10．0％乙醇的Whitten氏培养液对2细胞胚胎进行培养，观察研究小鼠2细胞胚胎对培养液中乙醇浓度的耐受极限。然后再用含1％和3％乙醇的Whitten氏培养液分别对小鼠2细胞、4细胞、8细胞和桑葚期胚胎进行培养。结果：含低浓度乙醇（1％以下）的培养液对8细胞胚胎和桑葚胚的囊胚形成有促进作用，而在2细胞和4细胞胚胎中则影响不明显。含高浓度乙醇（≥3％）的培养液则对各期胚胎有不同程度的抑制作用，但随着胚胎发育其对乙醇的耐受力将逐渐增强。     

外源性核苷酸对小鼠非酒精性肝损伤保护作用初探

目的 初步探讨外源性5'-核苷酸对小鼠非酒精性肝损伤的保护作用。方法 将75只雌性ICR小鼠根据体质量分为5组:模型对照组、低剂量核苷酸组、中剂量核苷酸组、高剂量核苷酸组和空白对照组。经口给予外源性5'-核苷酸(40、160、640 mg/kg),实验持续30 d。于实验第30天将各组动物隔夜禁食16 h,模型对照组及各剂量组动物经口一次性给予1% 四氯化碳致急性肝损伤模型,空白对照组给玉米油,受试组继续给予受试样品,次日处死动物,测定血清转氨酶并取肝脏做病理。结果 受试物组小鼠血清转氨酶活性低于模型对照组,同时肝细胞坏死程度减轻,各种类型病理变化的总评分低于模型组。结论 外源性5'-核苷酸对小鼠非酒精性肝损伤具有潜在保护作用。     

苯对小鼠胚胎发育的毒性作用研究

目的探讨苯对小鼠胚胎体内发育的毒性。方法随机选择健康性成熟的昆明种小鼠,雌雄合笼产生孕鼠,孕鼠被随机分成5组（溶剂对照组、高、中、低剂量苯染毒组和环磷酰胺染毒组）,每组8只,分别在小鼠妊娠第6-15天用25（低剂量）、100（中剂量）、400 mg/kg.d（高剂量）的苯进行灌胃染毒,每天一次,同时设植物油溶剂对照和环磷酰胺（10 mg/kg体重）阳性对照。观察孕鼠的体重增长情况;于妊娠第18天处死孕鼠取出胚胎,观察胚胎的生长发育状况、死胎和吸收胎鼠数及畸形发生情况。结果与植物油对照组比较,中、高剂量苯染毒可降低孕鼠体重的增长率（P〈0.05）,高剂量苯染毒孕鼠能使胚胎吸收和死亡发生率增加（P〈0.05）,并可抑制胎盘和胎仔生长发育,中、高剂量苯染毒导致胎鼠畸形发生率增加（P〈0.05）,但对孕鼠和胎仔的毒作用影响均弱于环磷酰胺的毒性作用（P〈0.05）。结论苯在体内对小鼠胚胎具有发育毒作用和致畸形作用。     

降压药对小鼠胚胎与发育毒性影响的比较研究

目的:研究并比较五类降压药利尿剂氢氯噻嗪、β-受体阻滞剂比索洛尔、ACEI卡托普利、ARB缬沙坦和钙拮抗剂非洛地平对小鼠胚胎与发育毒性的影响。方法:清洁级健康ICR小鼠180只(6⁸周龄),随机分为氢氯噻嗪组、比索洛尔组、卡托普利组、缬沙坦组、非洛地平组和阴性对照组,每组雌、雄各15只,所有动物自交配前65 d开始给药或水直至处死,观察药物的胚胎与发育毒性表现。结果:非洛地平胚泡着床后至出生前死亡数高于阴性对照组、比索洛尔组、卡托普利组与缬沙坦组。卡托普利组出生0 d仔鼠体重、出生4 d仔鼠体重和每只仔鼠体重增重均高于阴性对照组,比索洛尔组、非洛地平组、氢氯噻嗪组与缬沙坦组出生0 d仔鼠体重均低于卡托普利组,比索洛尔组、氢氯噻嗪组与缬沙坦组出生4 d仔鼠体重均低于卡托普利组;比索洛尔组和缬沙坦组仔鼠体重增重均低于卡托普利组。卡托普利、比索洛尔与氢氯噻嗪有致畸作用,表现为卷尾和(或)身材短小。结论:ARB缬沙坦未见明显胚胎与发育毒性,而利尿剂氢氯噻嗪、β-受体阻滞剂比索洛尔、ACEI卡托普利和钙拮抗剂非洛地平均有一定的胚胎与发育毒性,但是表现各异。     

KM小鼠生长,发育的观察

观察ＫＭ小鼠的生长、发育和饲料摄入变化情况。结果是：幼鼠在离乳后４周左右为快速生长期，并且要求较高的营养素；离乳后第５￣１２周，小鼠生长进入缓慢阶段；离乳１３周后生长发育较为稳定，在这个阶段，小鼠的摄食量大幅减少。结果表明，ＫＭ小鼠在不同生长发育阶段有不同的营养需求。     

c-fos原癌基因在小鼠内耳发育中作用的研究

目的探讨原癌基因c-fos在昆明种小白鼠内耳发育中的作用.方法运用免疫组化(LSAB法)对原癌基因c-fos蛋白产物在昆明种小白鼠内耳发育中的表达进行研究.结果本研究发现在胚胎发育的第15天至第17天,c-fos蛋白产物在耳蜗的感觉上皮、支持细胞、血管纹、前庭膜、螺旋神经节神经元及前庭感觉器官椭圆囊斑及球囊斑的上皮有阳性表达,而于此期间内耳上皮正处于分化发 育阶段,螺旋神经节也处于分化发育阶段.结论c-fos参与了小鼠内耳的发育过程,在此期间其对内耳上皮的发育主要起促进分化作用.c-fos在内耳毛细胞再生中的作用有待于进一步深入研究.     

氨基酸浓度对昆明小鼠胚胎体外发育的影响

目的探讨培养液中氨基酸成分对植入前昆明小白鼠胚胎发育的影响,摸索植入前胚胎体外培养氨基酸的最佳浓度.方法从超排昆明小鼠输卵管中取出的630枚受精卵均分为7组,分别在经添加不同浓度Eagle‘s氨基酸的去牛血清白蛋白KSOM培养液(mKSOM、mKSOM 1/16AA、mKSOM 1/8AA、mKSOM 1/4AA、mKSOM 1/2AA、mKSOM AA、mKSOM 2AA)中培养,对比观察各组胚胎体外发育的过程.用卡方检验分析添加各浓度氨基酸的培养液培养效率的差别,并将8细胞发育率和囊胚发育率分别与相应的氨基酸浓度进行曲线拟合分析.结果与未添加氨基酸组对比,添加氨基酸组胚胎发育率高,8细胞胚和囊胚的形成率与培养液中氨基酸的浓度关系均符合三次模型,在氨基酸为 1/2浓度时8细胞胚和囊胚的形成率均达到最高.结论氨基酸对胚胎的体外发育有促进作用,但含有高浓度氨基酸的培养液培养效果反而有所下降,可能是由于高浓度的氨基酸影响胚胎的代谢和渗透压的改变,且氨基酸分解及胚胎代谢所产生的铵对胚胎有毒性作用.     

胰岛素对不同时期ICR小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究胰岛素对不同时期小鼠胚胎体外发育的影响.方法收集1-细胞、2-细胞、4-细胞及桑椹胚期鼠胚,分别在含0（对照组）、0.005、0.05、0.5、5、10μg/mL胰岛素的KSOM中培养.结果在1-细胞及2-细胞阶段添加系列浓度时,0.005μg/mL及0.05μg/mL胰岛素组不仅提高囊胚率、孵化率,而且提高囊胚细胞数.4-细胞阶段添加系列浓度时0.05μg/ml胰岛素组能够提高囊胚率、孵化率以及囊胚细胞数;而至桑椹胚阶段再添加系列浓度胰岛素时,囊胚率、孵化率以及囊胚细胞数均无统计学意义（P〉0.05）.结论在ICR小鼠胚胎体外培养时适宜的胰岛素浓度为0.05μg/mL;桑椹胚之前添加胰岛素对小鼠胚胎发育是必要的.在一定发育阶段内,随着胚胎的生长对胰岛素的需求也相应增加.     

胰岛素对ICR小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究ICR小鼠胚胎体外培养时,添加胰岛素的作用、浓度及所需阶段．方法用添加不同浓度胰岛素的mKSOM培养基对小鼠胚胎进行体外培养及选择最适浓度对不同阶段鼠胚进行体外培养,观察囊胚发育率和囊胚细胞数的变化．结果所有添加胰岛素的浓度组,囊胚发育率均高于对照组,其中0．005μg／mL和0．05μg／mL浓度组囊胚细胞数显著高于对照组和其他各浓度组．2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加胰岛素囊胚率显著高于对照组和其他实验组．结论在ICR小鼠胚胎体外培养时添加胰岛素能够促进胚胎发育;胰岛素浓度增至μg／mL对在ICR小鼠胚胎无毒性作用;在ICR小鼠胚胎体外培养的适宜胰岛素浓度为0．005μG／mL和0．05μG／mL;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加胰岛素更加重要．     

外源性5'-核苷酸对大鼠急性乙醇中毒的影响

目的:探讨外源性5’-核苷酸对大鼠急性乙醇中毒的影响。方法:将24只雄性SD大鼠随机分成4组:生理盐水组、低剂量核苷酸组、中剂量核苷酸组和高剂量核苷酸组。乙醇染毒前30 min,各组分别用生理盐水、低剂量(0.2 g/kg体重)、中剂量(0.8 g/kg体重)、高剂量(3.2 g/kg体重)核苷酸灌胃,乙醇染毒剂量为3 g/kg体重,染毒后进行旷场实验、转棒实验,检测血清乙醇浓度、血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、白蛋白、总蛋白水平,超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量,检测肝乙醇脱氢酶活性,评价核苷酸对急性乙醇中毒的影响。结果:外源性5’-核苷酸干预能够使大鼠血液乙醇浓度降低,高剂量核苷酸组与生理盐水组相比[(0.56±0.18 g/L)vs.(1.11±0.44 g/L),P<0.05],差异具有统计学意义,低剂量核苷酸组(1.04±0.35 g/L)和中剂量核苷酸组(0.93±0.14 g/L)与生理盐水组相比也较低,但差异无统计学意义;各组肝乙醇脱氢酶活性差异无统计学意义,各组大鼠神经行为学表现、血清生化水平和抗氧化水平差异也无统计学意义。结论:外源性5’-核苷酸干预对大鼠急性乙醇中毒无明显影响。     

兔胚胎-胎仔发育毒性试验中环磷酰胺给药方式的探讨

目的探讨环磷酰胺不同给药途径、给药剂量对妊娠家兔胚胎及胎仔的影响,以确定诱导胎兔畸形最佳的给药方式。方法孕兔分为生理盐水对照C组、静脉注射Y1组(15 mg/kg)、皮下注射低剂量Y2组(20 mg/kg)和皮下注射高剂量Y3组(30 mg/kg),各组均在GD10~13(受孕当天为GD0)分别按相应途径给药。GD28解剖,检查黄体数、着床数、连胎子宫重、吸收胎率;取胎仔,检查胎仔性别、身长、尾长、活胎数、死胎数,并按要求进行外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形的检查。结果环磷酰胺静脉注射组及皮下注射低剂量组孕兔胎仔均出现了畸形,两组外观畸形率分别为30.77%和95.65%,骨骼畸形率分别为7.69%和73.91%,内脏畸形率分别为20.51%和47.83%。皮下注射高剂量组吸收胎发生率为100%。结论孕兔在GD10~13皮下注射环磷酰胺20 mg/kg可用作家兔胚胎-胎仔毒性发育试验的阳性给药方法。该方法给药周期短,操作方便,吸收胎少,胎仔畸形率高,可为同行选择合适的兔胚胎-胎仔发育毒性阳性模型提供依据。     

阿拉瑞林对顺铂所致大鼠卵巢毒性的保护作用

目的: 探讨阿拉瑞林对顺铂造成大鼠卵巢毒性的保护性作用.方法: 选用清洁级、12wk雌性Wistar大鼠 40只,体质量(245 6±15 8)g.随机分为A,B,C,D4组.A组给予顺铂 2mg/kg,ip,共 10d;B组先给阿拉瑞林 5μgsc10d后顺铂 2mg/kg,ip;C组给予阿拉瑞林5μgsc, 1次 /d,共 20d;D组为正常对照组.给药前后分别称体质量,实验结束后经心脏采血,测血清雌二醇 (E2 )、卵泡刺激素 (FSH)水平,摘除子宫及双侧卵巢,分别称湿质量并在光镜下进行形态学和病理学观察,进行各级卵泡记数.结果: A组与D组比较,体质量明显减轻 (P<0 0001 ),子宫质量明显下降 (P< 0 0001 ),各级卵泡数目明显减少 (P<0 0001 ),且伴有间质细胞或颗粒细胞的坏死、玻璃样变及纤维化;FSH水平明显升高(P<0 0001 ),而E2 水平明显下降 (P<0 0001 );B组原始卵泡数量明显多于A组 (P<0 0001),且未见间质细胞或颗粒细胞的坏死.结论: 阿拉瑞林对顺铂引起的大鼠卵巢毒性具有保护作用.     

外源性甲状腺素对胎儿酒精效果大鼠脑发育中脑源性神经营养因子水平的影响

[目的]观察外源性甲状腺素对胎儿酒精效果对大鼠大脑和小脑发育中脑源性神经营养因子（BDNF）的影响．[方法]选择SD孕鼠,分为酒精组、正常对照组、酒精＋T4组．于分娩6h后与其子分开,麻醉后心脏采血,测定血中酒精和甲状腺素水平．3个组新生子鼠分别于生后0,7,14,21,28d（P0,P7,P14,P21,P28）时麻醉处死,采用免疫组织化学染色法观察在大脑皮质中BDNF-阳性神经细胞和小脑皮层中BDNF-阳性浦肯野细胞的分布及形态,另部分小脑组织采用免疫电子显微镜方法观察P14时BDNF．阳性浦肯野细胞的微细结构．[结果]酒精组、酒精＋T4组母鼠血液中酒精水平明显高于正常对照组（P〈0．05）;酒精＋T4组母鼠血液中甲状腺素含量高于酒精组（P〈0．05）．P7时酒精＋T4组在大脑皮质中BDNF-阳性神经细胞的形态和分布类似于正常对照组,即可观察到长而明显突起的成熟的BDNF-阳性神经细胞,但酒精组中始终未出现．酒精＋T4组子鼠P14时出现分布及形态与正常对照组类似的基本单层排列的成熟的BDNF-阳性的浦肯野细胞,但酒精组子鼠始终未出现．P28时酒精组子鼠小脑中BDNF-阳性的浦肯野细胞数较正常对照组和酒精＋T4组比较有明显减少,P14时酒精组中仅能观察到不完整的细胞器,酒精＋T4组中BDNF邛日性的浦肯野细胞的形态与正常对照组类似,能观察到由平行的颗粒粗面内质网组成的尼斯尔氏体及细胞核周围分布的高尔基体等完整的细胞器．[结论]给予孕期滥用酒精的母鼠外源性甲状腺素能促进其后代大脑皮质和小脑皮层中BDNF的合成,改善胎儿酒精效果所导致的脑发育障碍．     

槲皮素拮抗大气细颗粒物PM2.5对大鼠胚胎毒性的体外研究

目的：探讨槲皮素对大气细颗粒物（fine particulate matter,PM2.5）发育毒性的拮抗作用及可能机制。方法：于2015年12月至2016年3月以大气采样器将北京市某地区采暖期PM2.5收集在石英滤膜上,超声震动后将洗脱液过滤,冷冻干燥后得到PM2.5样品。采用体外全胚胎培养模型,将胎龄9.5 d的SD大鼠胚胎以50 mg/L PM2.5染毒,然后用不同剂量（0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L）的槲皮素干预,培养48 h后对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。染毒结束后,剥离卵黄囊,制备胚胎单细胞悬液,通过流式细胞仪检测细胞线粒体内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的生成情况。结果：PM2.5染毒后,大鼠体外胚胎的卵黄囊直径、头长、颅臀长和体节数明显减少,各组织器官形态学评分明显降低,细胞线粒体内ROS水平显著升高。槲皮素干预后,对PM2.5致胚胎生长发育阻滞有明显改善作用,可使胚胎卵黄囊直径、颅臀长、头长增大,体节数增多,卵黄囊血管分化情况得到改善,并对PM2.5所致的尿囊、体屈、心脏、后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉、腮弓、上颌突、前肢芽及后肢芽分化抑制均有不同程度的改善,细胞内线粒体ROS含量也显著降低。1.0 μmol/L槲皮素干预效果最佳,其他3个剂量组的槲皮素干预也有一定的保护作用,但效果均不及1.0 μmol/L剂量组。结论：适量补充槲皮素对PM2.5致胚胎发育毒性有拮抗作用,清除线粒体内ROS可能是其机制之一。     

干细胞在发育毒性体外模型建立中的应用研究进展

干细胞是一种原始细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能。目前,由于环境和药物等外在因素的影响,畸形新生儿的比例逐年升高,建立准确、便捷、高效的发育毒性体外模型来评价预测各种化合物的发育毒性是亟待解决的难点问题。应用各类干细胞预测外在因素对机体的发育毒性,其优势远大于其他检测毒性方法。本文就近年来基于干细胞建立发育毒性体外模型的研究进行综述。     

钙结合蛋白-D28K对脑内多巴胺能神经细胞的保护作用

目的研究钙结合蛋白-D28K(CaBP)对脑内多巴胺(DA)能神经细胞的保护作用。方法测定CalbindinD-28k转基因小鼠黑质致密部、腹侧被盖区、海马的CaBP和黑质致密部CaBP阳性细胞数,注射1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),建立帕金森病(PD)模型,通过模型鼠游泳、悬挂、移动能力等行为学指标以及黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数来测定过表达CaBP抗MPTP对DA能神经细胞的损伤能力。结果转基因鼠黑质致密部、腹侧被盖区CaBP量显著高于正常鼠,海马、大脑皮层中CaBP量与正常组相比无明显差异。黑质致密部CaBP阳性细胞数显著高于正常小鼠[(140±9.89)个vs(101±7.82)个]。MPTP造模后,转基因鼠黑质致密部TH阳性细胞数和4项行为学变化差异不显著,而正常鼠造模后鼠黑质致密部TH阳性细胞数和4项行为学变化差异显著。结论过表达的CaBP对脑内DA神经细胞具有保护作用。     

四生汤对辐射损伤小鼠的保护作用

目的探讨四生汤对单次60Co辐射小鼠保护作用及其作用机制。方法建立60Co辐射损伤小鼠模型。实验设对照组,60Co模型组,小、中、大剂量四生汤组。60Co照射后不同时间采血进行血常规、血清总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）检测;2周后处死小鼠计算脾脏系数、胸腺系数,检测骨髓有核细胞数。结果在6Gy60Co辐射下,与模型组相比,四生汤能以剂量依赖方式升高小鼠脾、胸腺系数（P〈0.01）;高剂量的四生汤能显著升高外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板含量及骨髓有核细胞数（P〈0.01）;并能剂量依赖性地提高T-AOC和SOD活性（P〈0.01）。结论四生汤能减轻辐射对外周血毒性,并能够抑制受辐射小鼠的氧化损伤。     

小鼠脑Willis环的解剖及其对局灶性脑缺血模型的影响

目的:研究小鼠W illis环的解剖结构,为不同种系小鼠局灶性脑缺血模型提供解剖学依据。方法:雄性昆明小鼠和Balb/C小鼠各20只,各随机等分成两组即分别为K1、K2、B1、B2组。K1和B1组经左心室灌注墨汁乳胶液约2m l,去骨取脑,观察颈内动脉及W illis环的结构。K2和B2组采用插线法制作永久性大脑中动脉栓塞(M CAO)模型,术后1h和24h观察并记录小鼠神经功能评分后,取脑并切成2mm厚片,2%TTC染色,运用图像分析系统对梗死体积进行统计分析。结果:昆明小鼠后交通动脉多发育良好,90%有完整的W illis环;而Balb/C小鼠后交通动脉多发育不良或缺失,90%W illis环不完整。昆明小鼠M CAO模型梗死灶仅波及大脑中动脉供血区,24h症状轻,生存率100%;而Balb/C小鼠M CAO模型梗死灶波及大脑中动脉和大脑后动脉供血区,24h症状重,病死率40%。结论:小鼠M CAO模型的梗死灶大小与W illis环的结构密切相关;昆明小鼠与Balb/C小鼠比较,更适宜制作永久性M CAO模型。     

参麦注射液对蒽环类药物心肌毒性的治疗作用

给家免耳静脉注射阿克拉霉素（ACM），病理证实能产生心肌病变，成功地建立了蒽环类药物致心肌损害的动物模型。实验将家兔分为：①正常对照组，注入生理盐水。②治疗组，注入ACM＋参麦注射液。③对照组，注入ACM＋生理盐水。实验第20天测血心肌酶谱（CK、CK－MB、AST、LDH），心肌标本在光镜下进行检查。结果显示：治疗组家兔CK、CK－MB显著低于对照组（t(cK-MB)＝3.155，t(CK)＝244，P＜005～0.01），光镜下心肌病理改变，治疗组显著轻于对照组（P＜0.05～0.01）。实验结果表明参麦注射液能治疗蒽环类药物导致的心肌毒性。