动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡相关因素研究进展

<正>细胞凋亡是不同于细胞坏死的一种死亡形式,是受基因控制的细胞主动性“自杀”过程.它的主要特征是,内源性核酸内切酶被激活,导致DNA在核小体间断裂,同时发生了基因的转录和蛋白质合成.射线、化学药物等刺激因素都可激发细胞凋亡.细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统成熟以及维持正常组织和器官的细胞数目恒定与生长平衡,乃至机体衰老诸方面均起着重要作用.而动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)中也发现了细胞凋亡,且以血管平滑肌细胞(Vascular SmoothMuscle Cell.VSMC)和巨噬细胞为主,血管壁中膜层的平滑肌细胞(Smooth Muscle Cell.SMC)向内膜迁移及过度增殖是AS和再狭窄共同的病理特征.增殖了的VSMC,有些摄取脂质,转变为泡沫细胞,有些合成胶原等细胞外间质,参与AS损伤向脂质损伤、纤维斑块的转变.阻止或减弱平滑肌细胞过度增殖一直是人们设法解决的难题.近年来,随着有关细胞凋亡的研究在基础和临床领域的广泛展开,也促进了As中细胞凋亡的研究.同时,使得对As病理发展有了新认识.As     

血管平滑肌细胞凋亡对动脉粥样硬化作用的研究进展

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)是血管壁中的主要细胞类型,其凋亡参与了动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生和发展.在早期AS中,VSMCs凋亡可作为新生内膜增生和管腔狭窄的代偿机制,然而这一过程又会加速AS斑块破裂,造成严重的心血管疾病并发症....     

三七总皂甙对血管平滑肌细胞凋亡及C-myc基因表达的影响

目的观察PNS对体外培养的VSMC凋亡及C-myc基因表达的影响。方法体外培养兔胸主动脉血管平滑肌细胞,在培养基中加入不同浓度的PNS,采用流式细胞仪检测和电镜观察细胞凋亡率,细胞免疫组化方法检测C-myc蛋白。结果PNS组细胞凋亡率明显增加,电镜下呈典型细胞凋亡形态学改变。该组C-myc蛋白的表达也增加。结论PNS可诱导VSMC的凋亡,促进C-myc基因的表达可能是其作用环节。     

动脉粥样硬化与细胞凋亡

越来越多的证据表明 ,动脉粥样硬化 (Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏ ｓｉｓ ,ＡＳ)的发生发展与细胞凋亡间有密切关系。Ｂｅｎｎｅｔｔ等[1] 将人的正常冠状动脉 ,主动脉及有ＡＳ的冠状动脉的血管平滑肌细胞分离培养 ,以电镜下的凋亡小体和凝胶电泳中典型的阶梯状图谱为特点计算发生调亡的细胞数量 ,发现正常动脉平滑肌细胞 (ＶａｓｃｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓ ｃｌｅＣｅｌｌ,ＶＳＭＣ)仅在清除血清生长因子后才发生凋亡 ,而ＡＳ斑块中的ＶＳＭＣ即使在高浓度血清存在状态下也发生凋亡 ,其凋亡的发生率在去除血清后进一步升高。Ｉｎｓｅｒ等[…     

辛伐他汀诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡及对凋亡相关基因表达的影响

目的 :观察辛伐他汀诱导大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡及可能参与其中的凋亡相关基因。方法 :贴块法体外培养 VSMC,以透射电子显微镜技术、流式细仪 PI/Annexin 双重染色等鉴定细胞凋亡 ;Western印迹杂交法检测 Bax、Bcl- 2蛋白表达及 caspase- 3的激活情况。结果 :加入 30μmol/L辛伐他汀 2 4 h后电镜显示细胞呈典型的凋亡形态 ,PI/Annexin 染色流式细胞仪检测凋亡细胞占 (35 .5± 5 .8) %显著多于对照组 (15 .1± 5 .0 ) %(P<0 .0 5 ) ;辛伐他汀不改变 Bcl- 2蛋白的表达 ,而使 Bax蛋白表达增高并激活 caspase- 3。结论 :辛伐他汀能诱导VSMC产生凋亡 ,并与 Bax表达增高及 caspase- 3的激活有关     

顺铂对肝癌细胞凋亡中wtp53,C—myc基因表达的影响

目的 研究顺铂对抑癌基因ｗｔｐ５３及癌基因Ｃ－ｍｙｃ在肝癌细胞凋亡过程中表达的影响。方法 用抑癌药顺铂诱导凋亡,通过细胞形态学检查,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳证明调亡发生,采用原位杂交技术检测ｗｔｐ５３,Ｃ－ｍｙｃ基因在人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１凋亡过程中的表达。结果 ｗｔｐ５３基因在顺铂作用后１ｈ开始表达,６ｈ达到高峰,１２ｈ则明显下降。Ｃ－ｍｙｃ基因在顺铂作用后表达逐渐增强,１２ｈ达到高峰。结论     

UV—C诱导体外平滑肌细胞凋亡的相关信号机理的研究

目的 观察经UV-C照射诱导的体外凋亡动脉中膜平滑肌细胞（SMC）内Ca^2 浓度及actin表达的变化。方法 应用SP免疫组织化学技术和图像分析技术检测凋亡SMC内actin的表达。应用粘附细胞分析及筛选激光细胞仪观察凋亡SMC内Ca^2 的变化。结果 UV-C照射后，SMC出现典型的凋亡形态学和生化指标上的改变，UV-C动态照射10min引起胞浆内Ca^ 浓度的快速升高；并引起照射后不同时期SMC中Ca^2 浓度的持续升高，凋亡SMC内actin表达较正常大大加强。并出现从胞内向核周、从胞内向核内的迁移和再分布。结论 Ca^2 浓度升高和actin表达的改变可能是参与UV-C诱导的SMC凋亡信号传递过程中的重要因素。     

细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡是细胞生命的基本特征之一,在动脉粥样硬化的发生和发展过程中起了重要作用。内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞在动脉粥样硬化的发病过程中均存在凋亡现象,氧自由基、某些生长因子、一氧化氮、内毒素及氧化低密度脂蛋白等可诱导细胞凋亡,这为认识和探讨动脉粥样硬化发生机理及防治提供了理论基础。     

血管平滑肌细胞与动脉粥样硬化关系研究进展

随着对血管平滑肌细胞增殖在动脉粥样硬化中研究的不断深入,逐步意识到细胞凋亡的存在及其相互之间的关系,对动脉粥样硬化的认识亦由从形态结构和生化组成等描述病变,发展为在细胞乃至分子基因水平上的深入研究,发现血管平滑肌细胞的增殖和凋亡在动脉粥样硬化形成过程中起重要作用。     

维生素E对内皮细胞诱发血管平滑肌细胞凋亡的抑制作用

目的：研究维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞（EC）诱发的血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡是否具有抑制作用。方法：以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液（EC－CM）作为实验因素作用于培养的VSMC。彩和透射电子显微镜,免疫组织化学等方法观察维生素E对内皮细胞条件培养液诱发的血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果：电镜可见VSMC凋亡小体。免疫组织化学结果显示,VSMC的P53蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达下调。加维生素E组电镜改变轻微,p53,bcl-2异常表达减轻,结果：维生素E对脂质过氧化损伤的内皮细胞诱发的血管平滑肌细胞凋亡具有抑制作用。,     

益肾通脉汤对兔动脉粥样硬化形成过程中平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨益肾通脉汤对兔动脉粥样硬化(AS)形成过程中血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响.方法:40只健康新西兰雄性大耳白兔,随机分成4组,即模型组(MG),益肾通脉汤组(YSG),阿托伐他汀组(ACG);通过兔耳缘静脉注射牛血清白蛋白及高脂饲料喂养,复制兔动脉粥样硬化模型,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PC-NA)的表达,缺口末端标记法(TUNEL)检测VSMC凋亡情况.结果:与CG组比较,MG组、YSG组、ACG组PCNA和VSMC凋亡均有显著升高(P=0.000);与MG组比较,YSG组、ACG组PCNA和VSMC凋亡表达的阳性细胞率均有显著降低(P=0.000);YSG组和ACG组相比PCNA和VSMC凋亡表达无明显区别(P=0.255,P=0.276).结论:对AS形成过程中VSMC增殖和凋亡进行合理调节可能是益肾通脉汤延缓动脉粥样硬化发生发展的有效途径.     

细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡与许多疾病的发生发展有关,近年又发现它在动脉粥样硬化的产生过程也起重要作用,内皮细胞、平滑肌细胞在动脉粥样硬化的发病过程中均存在凋亡现象,本文旨在从以上两方面综述细胞凋亡与动脉粥样硬化的研究进展。     

动脉粥样硬化与巨噬细胞和血管平滑肌细胞相关因素研究述评

在动脉粥样硬化（AS）的形成过程中，由内皮细胞、巨噬细胞、血管平滑肌细胞及其相关细胞因子构成的复杂的网络中，单核细胞摄入脂质形成泡沫细胞是AS的始动因素，而血管平滑肌细胞增生是动脉粥样硬化的关键。在此，就这两个系统与动脉粥样硬化的关系作一综述。     

肉桂氨茴酸对血管平滑肌细胞生长及周期蛋白P21和P53表达的影响

目的探讨肉桂氨茴酸对血管平滑肌细胞(VSMC)生长及周期蛋白P21和P53表达的影响。方法以培养的兔主动脉VSMC株为模型,应用活细胞计数进行细胞增殖和迁移检测,计算半数抑制浓度(IC50)。采用流式细胞仪分析肉桂氨菌酸作用24h后VSMC周期的变化和细胞凋亡率,以western印迹法检测细胞周期蛋白P21和P53的表达。结果20%的胎牛血清条件下,肉桂氨茴酸显著抑制VSMC的增殖和迁移,在9．6～305．8/μmol/L范围内,随剂量增加其抑制率增加。IC-(50)为75．6/μmol/L。IC-(50)的肉桂氨茴酸作用VSMC 24h后,G1期细胞数占24%,显著低于作用前的51%(P＜0．01),形成明显的亚二倍体峰,细胞凋亡率为36．7%。经IC_(50)的肉桂氨茴酸作用VSMC 24h后出现明显的P21和P53条带,而空白对照组无表达。结论肉桂氨茴酸浓度依赖性抑制VSMC的生长,其抑制作用主要通过细胞凋亡的方式。肉桂氨茴酸抑制VSMC增殖与细胞周期蛋白P21和P53的表达有关。     

平滑肌细胞凋亡对血管球囊损伤后内膜增殖的影响

目的：探讨血管球囊损伤后内膜增殖的机制。方法：采用电镜、末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学技术检测球囊损伤后血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）凋亡及新生内膜面积的变化。结果：球囊损伤后血管壁增生,球囊损伤后第３天,血管中层出现凋亡的平滑肌细胞（ＳＭＣ）;损伤后第７天,新生内膜形成内膜面积的变化。结果：球囊损伤后血管壁增生,球囊损伤后第３天,血管中层出现凋亡     

心肌缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响及其 …

目的：研究缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响,探讨心肌细胞凋亡的分子机制。方法：采用结扎冠脉左前降支（ＬＡＤ）法制作大鼠心肌缺血模型,运用ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳技术鉴定基因组ＤＮＡ的断裂情况;使用ＮｏｒｔｈｅｒＢｌｏｔ检测缺血心肌细胞ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ及ｂｃｌ－２的表达活性,结果：ａ．缺血能够诱导左室心肌细胞凋亡,ｂ．缺血明显上调ｐ５３基因的转录;ｃ．缺血的左室心肌细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ     

动脉粥样硬化与巨噬细胞和血管平滑肌细胞相关因素研究述评

在动脉粥样硬化(AS)的形成过程中,由内皮细胞、巨噬细胞、血管平滑肌细胞及其相关细胞因子构成的复杂的网络中,单核细胞摄入脂质形成泡沫细胞是AS的始动因素,而血管平滑肌细胞增生是动脉粥样硬化的关键。在此,就这两个系统与动脉粥样硬化的关系作一综述。     

硫化氢联合阿托伐他汀钙对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 观察硫化氢联合阿托伐他汀钙对血管平滑肌细胞凋亡的影响.方法 培养兔血管平滑肌细胞（VSMCs）3～8代,分为对照组、硫化氢组、阿托伐他汀钙组以及硫化氢联合阿托伐他汀钙组（简称联合干预组）,共4组,分别给予相应干预,TUNEL法检测VSMCs的凋亡情况.结果 VSMCs凋亡率：与对照组相比,硫化氢组、阿托伐他汀钙组以及联合干预组VSMCs的凋亡率均增加（P＜0.01）;与硫化氢组相比,联合干预组VSMCs凋亡率增加（P＜0.01）,阿托伐他汀钙组VSMCs凋亡率减少（P＜0.01）.结论 硫化氢、阿托伐他汀钙以及两者联合均可促进VSMCs的凋亡,其中以两者联合效果最为明显,硫化氢的作用强于阿托伐他汀钙.     

CD73对动脉粥样硬化中血管平滑肌细胞的作用

 目的  探讨CD73对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)表达及迁移能力的影响,并分析其与动脉粥样硬化发生发展的关系。方法  原代培养人脐带动脉平滑肌细胞 (human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),利用RNA干扰技术抑制细胞中CD73的表达,以未转染组和阴性转染组为对照。实时荧光定量PCR和ELISA方法检测细胞表达及分泌MCP-1和IL-8 的水平。实时荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞表达MMP-1的情况。利用划痕实验观察CD73干扰对细胞迁移能力的影响。结果  成功培养原代HUASMC,并且CD73 siRNA转染可显著降低细胞内CD73表达水平。干扰HUASMC的CD73表达后,细胞表达和分泌MCP-1及IL-8的能力升高,细胞内MMP-1的表达升高,而细胞的迁移能力下降。结论  干扰CD73表达可以使HUASMC的MCP-1、IL-8及MMP-1表达升高;干扰CD73表达可降低HUASMC的迁移,提示CD73在动脉粥样硬化的发生发展过程中发挥重要的生物学作用。