CLEC12B在肝癌中的表达及其临床意义

目的:研究CLEC12B在肝癌组织中的表达,探索其在肝癌发生发展及预后中的作用。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)下载肝癌数据集,获得CLEC12B基因表达谱和临床资料。比较CLEC12B在肝癌和癌旁组织中的表达差异;分析CLEC12B在肝癌组织中的表达与临床病理学参数和疾病预后的相关性;利用基因富集化分析预测CLEC12B影响肝癌发生发展的机制。结果:与癌旁组织相比,CLEC12B在肝癌组织中呈低表达。CLEC12B表达状态是影响肝癌患者预后的独立因素,高表达患者总体生存期优于低表达患者。CLEC12B高表达富集到DNA修复,低表达则富集到炎症反应等基因集。结论:CLEC12B可能通过炎症及DNA修复等影响肝癌发生发展及预后。     

GLI1基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌组织中Hedgehog信号通路成员GLI1 mRNA的表达情况及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测25例胰腺癌组织及其相应近癌旁组织、癌旁正常组织GLI1 mRNA的表达,并分析胰腺癌组织中GLI1 mRNA表达与肿瘤大小、分化程度及转移的关系。结果GLI1 mRNA在胰腺癌组织、近癌旁组织及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为68．0％（17／25）、24．0％（6／25）、0;胰腺癌组织GLI1 mRNA阳性表达率显著高于近癌旁组织及癌旁正常组织（均P〈0．01）;GLI1 mRNA阳性表达率与肿瘤分化程度相关（P=O．014）,与肿瘤大小、有无淋巴结及远处转移无关（P〉0．05）。结论GLI1 mRNA在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,且其表达率与肿瘤分化程度相关。检测GLI1表达有助于胰腺癌的诊断,可能作为判断胰腺癌恶性程度及预后的指标。     

Sonic Hedgehog信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌中表达与意义

目的:探讨Sonic Hedgehog(SHH)信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义?方法:用RT-PCR方法检测10例HCC组织及相应癌旁组织和肝癌细胞系HepG2?Huh7中Shh?Smo mRNA的表达?采用免疫组化方法检测30例肝癌组织及10例正常肝组织中Shh?Smo蛋白的表达?结果:RT-PCR结果显示HCC组织中Shh?Smo mRNA的表达率显著高于癌旁组织(P < 0.05);Shh?Smo mRNA在Huh7中的表达强度高于HepG2,但两者间无显著性差异(P > 0.05)?免疫组化结果显示Shh?Smo蛋白在HCC组织中阳性率分别为63.3%(19/30)?76.7%(23/30);Smo蛋白的表达与肿瘤大小相关(P < 0.05)?Shh?Smo蛋白在正常肝组织中均无表达?结论:Shh和Smo在肝癌中高表达,表明SHH信号通路可能参与肝癌的发生,为肝癌防治提供新的依据?     

细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝细胞癌中的表达

目的研究细胞周期蛋白B1和存活素蛋白在不同分化程度肝癌细胞中的表达情况及与临床因素之间的关系,以探讨两者在肝细胞癌发病机制中的作用。方法选取我院病理科手术切除肝细胞肝癌存档蜡块46例,另取正常肝组织13例作为对照,以免疫组化法染色,测定细胞周期蛋白B1和存活素蛋白的表达情况,并结合患者的临床资料,运用统计学分析数据。结果细胞周期蛋白B1及存活素蛋白均在正常肝组织无表达,均在肝癌组织中有明显表达（P〈0.01）,并随着肝癌细胞分化程度的降低,表达逐渐增强（P〈0.01）,在低分化肝癌组织中的表达最强。均与肝内转移与否及3年生存率有关（P〈0.05）。两者的阳性表达呈显著正相关（r=0.476,P〈0.001）。结论细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝癌细胞中,均随肝癌分化程度的降低表达增强,且两者的表达呈正相关。     

Galectin-1在膀胱癌细胞中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的检测膀胱癌细胞中半乳糖凝聚素1(Gal-1)的表达是否异常,并通过慢病毒干扰技术敲除膀胱癌细胞中Gal-1的表达后,检测肿瘤细胞的增殖能力与迁移能力有无改变。方法用荧光实时定量聚合酶链锁反应(q RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)技术分别检测膀胱癌细胞与正常膀胱上皮细胞相比,Gal-1的表达在m RNA水平以及蛋白水平有无区别。再利用RNA干扰慢病毒敲除膀胱癌细胞内Gal-1的表达后,通过WST-1试剂盒以及transwell迁移实验检测膀胱癌细胞的增殖和迁移能力有无发生改变。最后再应用Western Blot技术检测敲除Gal-1的表达后AKT、P38、JNK三条通路的激活水平有无发生改变。结果膀胱癌细胞内的Gal-1的表达水平与正常膀胱上皮细胞相比,无论在m RNA水平还是在蛋白水平均明显上调。敲除Gal-1的表达后肿瘤细胞的增殖能力未发生明显改变,但迁移能力明显下调。敲除Gal-1的表达后,AKT信号通路的磷酸化水平明显下降。结论 Gal-1在膀胱癌细胞中表达明显上调,并且与膀胱癌细胞的迁移能力密切相关。Gal-1可能通过改变AKT信号通路的激活水平从而调控了膀胱癌细胞的迁移能力。     

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

FHIT在原发性肝细胞癌中的表达及其与细胞凋亡及增殖的关系

目的:通过检测原发性肝癌组织中FHIT蛋白的表达及观察细胞凋亡、增殖状况,探讨原发性肝癌中FHIT蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和图像分析技术检测50例肝癌及相应的癌旁组织和30例正常肝组织中的FHIT蛋白和Ki-67抗原,采用TUNEL法和图像分析技术检测上述组织中的细胞凋亡状况....     

胃癌患者血浆miR-216a表达及其对胃癌细胞恶性生物学行为的调控作用

目的观察胃癌患者血浆miR-216a的表达及其对胃癌细胞恶性生物学行为的调控作用。方法选择2016年3月—2018年12月攀枝花学院附属医院普外科诊治的胃癌患者38例(胃癌组)和同期于医院体检健康志愿者50例(健康组)作为研究对象,采集2组人员血浆后检测miR-216a的表达水平。培养胃癌细胞株SGC-7901,分为转染miR-216a模拟物的miR-216a组、转染阴性对照模拟物的NC组,检测细胞增殖活力、增殖基因及增殖信号通路的表达水平。结果胃癌组血浆miR-216a的表达水平明显低于健康组(t/P=1 1.703/0.000)。转染模拟物后6、12、18、24 h,miR-216a组的细胞增殖活力值明显低于NC组(t/P=2.812/0.023、2.419/0.042、2.625/0.030、2.890/0.020);转染模拟物后24 h,miR-216a组胃癌细胞中CyclinD1、Ki-67、Bcl-2、Gli-1、c-myc的mRNA表达水平及PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK1/2的蛋白表达水平均明显低于NC组(t/P=3.829/0.005、5.475/0.001、3.950/0.004、7.354/0.000、4.503/0.002、5.333/0.001、3.196/0.013、5.547/0.001、5.963/0.001、4.353/0.002)。结论胃癌患者血浆miR-216a的表达缺失,增加miR-216a表达能够抑制胃癌细胞的增殖。     

CBLN1基因在肝癌中的表达情况及其对DCC通路调控作用的研究

目的探讨CBLN1基因与肝癌转移的关系,阐明肝癌患者中CBLN1基因表达差异对DCC通路的调控作用。方法采用RT-PCR法检测2017年1月～2018年12月于本院住院的41对肝癌患者术后肝癌和癌旁组织中CBLN1基因的表达水平;通过Western-blot方法检测CBLN1蛋白在肝癌中的表达情况。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默肝癌PLC/PRF/5细胞株中CBLN1基因的表达,并观察对PLC/PRF/5细胞增殖、迁移的影响;采用在Huh-7细胞株中是否过表达CBLN1质粒方法,观察对Huh-7细胞DCC表达及细胞增殖、迁移的影响。结果在41对收集的肝癌和癌旁组织中,30对肝癌样本中CBLN1表达显著增高(P0.05)。在转染siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3质粒的细胞中CBLN1表达被沉默[2],使得PLC/PRF/5细胞的迁移受到了抑制;在CBLN1过表达的Huh-7细胞株中DCC表达显著降低(P0.05),而转染CBLN1质粒48 h后Huh-7细胞株的迁移能力明显提升。结论抑制CBLN1基因表达肝癌细胞的生长受到抑制,过表达CBLN1基因可能促进了肝癌细胞的迁移,抑制了肝癌细胞DCC的表达,提示CBLN1与肝癌转移有关,其调控肝癌转移与DCC信号通路相关,并为提供潜在的临床诊断与药物治疗的新靶点。     

高迁移率族蛋白B1在肝癌细胞中的表达及其临床意义

目的比较不同转移能力人肝癌细胞和人正常肝细胞中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein box1,HMGB1)mRNA和蛋白表达的差异,以探索HMGB1在原发性肝癌生长和转移中的临床意义。方法应用PCR法检测高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2和人正常肝细胞LO2 HMGB1mRNA的表达,Western blot法检测高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2和人正常肝细胞LO2 HMGB1蛋白的表达。结果高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2的HMGB1mRNA和蛋白均较正常肝细胞LO2的表达明显升高(P<0.05);而且,高转移人肝癌细胞LM3较低转移人肝癌细胞HEPG2 HMGB1mRNA和蛋白的表达也明显升高(P<0.05)。结论 HMGB1在高转移人肝癌细胞LM3中较在低转移人肝癌细胞HEPG2和正常肝细胞LO2中高表达,提示HMGB1可能与原发性肝癌的生长和转移有关。     

Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌模型过程中的动态表达

目的探讨C57BL／6J小鼠诱癌过程中Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo在各阶段的动态表达。方法将95只正常C57BL／6J雄性小鼠随机分为诱癌组50只（化学诱癌处理）和对照组45只（正常喂养）,定期获取小鼠肝组织标本行免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR法和蛋白质印迹法检测。结果免疫组织化学提示,诱癌组Shh、Ptch和Smo蛋白分别在第6周、第8周和第10周出现弱阳性,均在第16周出现中度阳性,第20周出现强阳性表达,而正常对照组中未检测出三者的表达。RT—PCR法提示,诱癌组小鼠肝组织中ShhmRNA、PtchmRNA和SmomRNA的表达量持续升高,第20周时j者的表达水平均达到最高（ShhmRNA15．986±1．784,PtchmRNA11．272±0．295,SmomRNA10．185±0．716）,明显高于同期正常对照组（P〈0．05）。蛋白质印迹法提示,诱癌组Shh、Ptch和Smo蛋白分别从第6周、第8周和第10周起出现弱表达,到第20周时显著增强,而正常对照组中未检测出3种蛋白的表达。结论Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo伴随着小鼠诱发肝癌时间的延长其表达量逐步升高,认为Hedgehog信号通路与小鼠肝癌的发生、发展密切相关。     

FKBP1B在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 明确FK506结合蛋白1B(FK506 binding proteins 1B,FKBP1B)在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌细胞的增殖和迁移能力的影响及机制。方法 利用商业化的乳腺癌组织芯片进行免疫组织化学检测FKBP1B的表达,共包含乳腺癌组织及乳腺癌旁组织的石蜡标本72例,并分为癌旁组织3例,肿瘤组织69例。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中FKBP1B的表达情况。在MCF-7细胞中过表达FKBP1B后,分别用CCK-8和Transwell检测FKBP1B对细胞增殖和迁移能力的影响。并用Western blot法检测FKBP1B对热休克蛋白90α(Hsp90α)的表达和分泌的影响。结果 FKBP1B在乳腺癌肿瘤组织中的含量显著高于正常组织,且FKBP1B的表达与TNM分期之间具有显著相关性。RT-PCR和Western blot法表明,FKBP1B在MDA-MB-231中的含量显著高于MCF-7。过表达FKBP1B后,MCF-7的细胞增殖和迁移能力较对照组明显增强。FKBP1B的表达与Hsp90α的分泌呈正相关,过表达FKBP1B能够促进Hsp90α的分泌。结论 FKBP1B在乳腺癌中表达增高且与疾病恶性进展相关,过表达FKBP1B能够促进Hsp90α的分泌以及乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其可作为乳腺癌诊断和治疗的新的潜在分子靶点。     

PAQR4在肝细胞癌中的表达及其对HepG2细胞生物学特性的影响

目的 探究PAQR4在肝细胞癌(HCC)中的表达、预后及其对HepG2细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响.方法 利用TCGA数据库中HCC的数据分析PAQR4 mRNA在HCC组织中的表达及对患者的预后意义.构建pcD-NA3.1-PAQR4实验组与pcDNA3.1-vector对照组的HepG2细胞株.采用CCK-8...     

生物靶向分子在肝细胞癌治疗中的作用

肝细胞癌是世界上最常见的、具有复杂分子发病机制的恶性肿瘤之一。目前研究认为,在肝癌发生过程中,早期主要由病毒感染、毒素（如酒精、黄曲霉素等）或代谢等因素引起肝脏机能发生一系列异常变化,以及单个或多个癌基因或肿瘤抑制基因突变造成。但这些都与重要的细胞信号通路改变密切相关。研究发现,关键信号通路的开发,对于肿瘤的治疗前景具有重要意义。目前为止,人们致力于通过对肿瘤作用机理及分子作用机制的研究,来研发相关的肿瘤靶向药物,而且主要瞄准这些通路在肝癌发生过程中的作用、变化特征及异常变化所导致的结果等方面。目前,多靶点、多抑制剂药物的开发已成为肿瘤药物研发的趋势,这对延长晚期患者的生存时间,开创了肝癌靶向治疗的新时代。本文对一些与肝癌相关的信号通路及相关的靶向治疗药物做一述评。还就已经完成的和正在进行的肝癌分子靶向治疗新药物做一概述,以供基础与临床研究参阅与借鉴。     

Shh 蛋白及其下游转录因子 Gli-1 在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的观察非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer,NSCI．C）及癌旁组织中Shh和Gli-1蛋白的表达,探讨Shh和Gli-1异常表达与NSCLC之间的关系。方法应用免疫组织化学技术检测NSCLC及癌旁组织中Shh和Gli-1蛋白的表达。结果Shh和Gli-1在癌旁组织中低表达,但在NSCLC中表达明显增强。Shh、Gli-1蛋白的表达与癌组织分化程度和淋巴结转移密切相关,分化程度低、淋巴结转移阳性者,表达增强明显。但与组织学分型无关。结论Shh和Gli-1蛋白的异常表明Hedgehog信号通路可能参与了NSCLC的发生、发展过程。     

MicroRNA-93在宫颈癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响

目的  探讨microRNA-93（miR-93）在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法  收集2014年1月-2014年7月中南大学湘雅医院有完整病历资料的41例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中miR-93表达水平;采用脂质体转染法将miR-93模拟片段（mimic）转染入宫颈癌Hela细胞,恢复细胞内miR-93表达;活细胞计数试剂盒（CCK-8）和流式细胞术检测miR-93对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot检测Hela细胞中上皮生长因子受体（EGFR）及其下游蛋白的表达量变化。结果  41例宫颈癌患者肿瘤组织中miR-93表达量（0.048±0.013）低于癌旁组织（0.113±0.025）,差异有统计学意义（P =0.026）;转染miR-93模拟片段后,宫颈癌Hela细胞中miR-93表达恢复;与对照组和空白组比较,实验组宫颈癌细胞增殖能力下降（P =0.004）,早期凋亡比例增加（P =0.032）,侵袭（P =0.003）和迁移能力下降（P =0.003）;过表达miR-93的Hela细胞EGFR及下游的p-AKT表达下降（P =0.005）,而总AKT蛋白无明显变化（P =0.372）。结论  miR-93在宫颈癌组织中的表达量下降,恢复其在宫颈癌细胞中的表达能够明显抑制其细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制部分与miR-93抑制宫颈癌细胞EGFR/AKT信号通路活性有关。

     

EDAG-1基因真核表达载体的构建及其对细胞恶性生物学行为的影响

目的 构建胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)基因真核表达载体 pcDNA3.1(+)-EDAG-1,并检测其对细胞的恶性生物学行为的影响.方法 应用逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR) 法从白血病细胞株YAC-1中扩增到EDAG-1基因片段,构建重组真核表达载体 pcDNA3.1 (+)-EDAG-1.利用克隆 P...     

Hedgehog信号通路在鳞状细胞癌中的研究进展

Hedgehog(Hh)信号通路对哺乳动物的器官发育、维持成熟组织内环境稳定、慢性炎症的组织修复、癌症的发生等发挥重要作用[1]。有研究[2]证实,与Hh信号通路有关的肿瘤有胃癌、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、髓母细胞癌、基底细胞癌、子宫颈癌、鳞状细胞癌(SCC)等,该途径的异常和任何分子的突变均与这些肿瘤的发生、发展、转移有关。现就Hh信号通路与SCC的关系作一综述。     

SHH信号通路在骨髓增生异常综合征中的表达及SMO抑制剂对MUTZ-1细胞的作用研究

目的探讨Sonic Hedgehog(SHH)信号通路相关基因在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达及Smoothened(SMO)抑制剂Jervine对MUTZ-1细胞的作用。方法选取2016年6月—2018年3月于新疆医科大学第一附属医院血液病中心经骨髓细胞形态学、染色体R显带分析、荧光原位杂交、流式细胞术检查确诊的53例MDS患者。依据国际预后积分系统(IPSS)对患者预后分组,低危组2例,中危1组16例,中危2组21例,高危组14例。将低危组和中危1组归为相对低危组,中危2组和高危组归为相对高危组。选取同期该院25例缺铁性贫血患者作为正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测3组患者的SHH、Patched-1、SMO和Gli-1 mRNA相对表达量;终浓度0μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L Jervine作用于MUTZ-1细胞,孵育24 h;CCK-8法检测Jervine 0μmol/L组、Jervine 1μmol/L组、Jervine 5μmol/L组、Jervine 10μmol/L组MUTZ-1细胞的增殖率;Ann...