CREB-药物依赖性和某些CNS疾病药物治疗的潜在新靶标

cAMP反应元件结合蛋白（CREB）药物依赖性产生研究方面已经取得了有意义的进展,特别是阿片类药物依赖性的产生以及产生的CREB机制方面,为研究药物依赖性的产生及防治提供了新思路。已知G蛋白-cAMP-CREB途径是躯体依赖和精神依赖共同的受体后机制,是阿片类药物依赖性产生的主要途径之一,CREB通过影响基因表达而影响药物依赖性产生。此外,CREB还促进长时程记忆和可能参与抑郁症发病机制。CREB可能成为某些中枢神经疾病药物治疗的新靶标。     

高功率微波辐射后大鼠海马组织中突触后致密物-95及cAMP反应元件结合蛋白的变化

目的 观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马组织中突触后致密物(PSD)-95及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的变化。方法 采用10、30和100 mW/cm² HPM照射75只Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1、7、14和28 d活杀取海马组织,采用免疫组化、凝胶阻滞实验和图像分析等技术,观察海马神经元中PSD-95及CREB的变化。结果 HPM辐射后大鼠海马神经元胞浆中PSD-95的表达有不同程度的增加;10 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,于辐射后1 d达高峰,28 d基本恢复正常;100 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,MOD于1 d达高峰,IOD于7 d达高峰,28 d基本恢复至正常水平;30 mW/cm²组于辐射后3 d内,海马组织CREB与DNA的结合能力进行性降低。结论 HPM辐射后大鼠海马PSD-95表达增加,CREB与DNA结合能力减弱,参与了HPM辐射后海马组织损伤及海马神经元突触可塑性改变的病理生理过程。     

微波辐射对大鼠睾丸组织pCREB、CREM及CBP蛋白表达的影响

目的 探讨微波辐射对睾丸组织磷酸化环磷酸腺苷(cAMP)-反应元件结合蛋白(pCREB)、cAMP反应元件调节因子(CREM)及CREB结合蛋白(CBP)表达的影响及其意义.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=5)和辐射组(n=25).辐射组接受30mW/cm2微波辐射5min,分别于辐射后6h,1、3、7、14d处死5只大鼠.对照组不接受辐射,于ld时活杀.采用免疫组织化学及Western blotting检测睾丸组织pCREB、CREM及CBP蛋白表达的变化.结果 pCREB、CREM和CBP均主要表达于睾丸生精小管精子细胞核.微波辐射后6h～14d(pCREB在1d时除外),pCREB和CBP蛋白表达明显下调(P＜0.05或P＜0.01),辐射后6h～7d CREM表达亦明显下调(P＜0.05或P＜0.01).结论 pCREB、CREM及CBP表达下调在微波辐射致生精细胞损伤中可能发挥重要作用.     

迷走神经电刺激对大脑中动脉阻断/再灌注大鼠脑损伤及脑组织中p-CREB表达的影响

目的 研究迷走神经电刺激(VNS)对大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)/再灌注大鼠脑损伤的影响及其机制.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,随机分为两组:MCAO/再灌注组(MCAO组,n=12)大鼠仅行MCAO/再灌注,MCAO/再灌注+VNS组(MCAO+VNS组,n=12)大鼠在接受MCAO/再灌注的同时行右侧颈部迷走神经电刺激.两组大鼠均在再灌注24h后采用Zea Longa评分法行神经功能评分,通过TTC实验检测脑梗死区体积,TUNEL法检测脑损伤区细胞凋亡情况,Western blotting检测脑损伤区组织中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)的表达,免疫组化染色检测脑损伤区细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 与MCAO组相比,MCAO+VNS组大鼠神经功能改善(P<0.01),脑梗死体积减少(P<0.01),脑组织细胞凋亡减少(P<0.01);MCAO+VNS组大鼠脑梗死区组织中p-CREB蛋白表达(P<0.01)和Bcl-2的阳性细胞数量增加(P<0.01),Bax阳性细胞数量减少(P<0.01),但CREB蛋白表达量无明显差异(P>0.05).结论 VNS可显著改善MCAO/再灌注大鼠神经功能,降低脑梗死体积,其机制可能与提高p-CREB蛋白表达有关.     

p38 MAPK信号途径在高糖诱导的大鼠肾系膜细胞中激活的意义

目的 探讨高糖状态下肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号途径与其下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREBI)、转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞外基质表达的关系. 方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予低糖和/或甘露醇、高糖和/或SB203580(p38 MAPK特异性抑制剂)干预.采用免疫细胞化学法观察p38 MAPK蛋白的表达情况;Westernblotting检测p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白(p-p38 MAPK、p-CREB1)的表达;RT-PCR榆测TGF-N和FN mRNA的表达;放免法测定细胞上清液中层黏连接蛋白(LN)和Ⅳ型胶原的含量. 结果 与低糖组、低糖+甘露醇组相比,高糖刺激可使p38 MAPK蛋白发生核转移,p-p38 MAPK、p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增强,LN和Ⅳ型胶原含量增加.SB203580能明显抑制p38 MAPK蛋白的核转移,降低p38 MAPK和CREB1的磷酸化,并抑制TGF-β1和FN mRNA表达,使LN和Ⅳ型胶原的分泌减少. 结论 高糖状态激活p38 MAPK信号途径参与了高糖诱导的肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌.     

运动对大鼠海马长时程增强效应及其相关因子的影响

目的:探讨运动对大鼠海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)效应及其相关因子的影响。方法:28只成年雄性Wistar大鼠,随机分为对照组与运动组,每组14只。运动组采用4周自愿跑轮运动为体力运动模型。脑立体定位-神经电生理法检测海马齿状回LTP;高效液相-电化学法测定海马5-羟色胺(5-HT)含量;实时荧光定量PCR测定海马5-HT1A受体、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达。结果:运动组海马齿状回LTP较对照组明显提高(P<0.05),运动组海马5-HT含量(P<0.01)、5-HT1A受体mRNA(P<0.01)、CREB和BDNF mRNA表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。结论:运动可能通过对5-HT—5-HT1A受体—cAMP—CREB—BDNF—LTP通路元件的上调机制,发挥增强海马LTP的作用。     

抗甲状腺药物对突眼性甲状腺肿治疗的毒性反应和预后

在接受抗甲状腺药物(ATD)治疗的突眼性甲状腺肿615例患者中,215例(34.9％)发生毒性反应。包括颗粒细胞缺乏症1％,皮肤反应12.5％,白细胞减少6％,肝功能损害4.5％,水肿3.4％和胃肠反应2.9％。甲硫咪唑(MMI)引起毒性反应的发生率显著高于甲基疏氧嘧啶(MTU)(p<0.001)。本组患者的5年缓解率为56.2％,疗程1年的患者缓解率显著高于6个月者(p<0.05)。ATD复治患者的缓解率66.7％(12/18)。同时对ATD引起的颗粒细胞缺乏症和皮肤反应的处理以及影响复发的因素作了讨论。     

血浆(1→3)-β-D-葡聚糖动态检测在深部真菌感染的诊断和药物疗效评价中的价值

 目的 探讨血浆(1→3)-β-D-葡聚糖动态检测在深部真菌感染的诊断和药物疗效评价中的价值.方法 应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒定量检测血浆(1→3)-β-D-葡聚糖的含量.并与真菌培养法相比较.结果 当54例患者血浆(1→3)-β-D-葡聚糖水平均大于或等于50 pg/ml时,即G试验均为阳性时,真菌培养法25例阳性,阳性率为46.3%;54例中30例血浆(1→3)-β-D-葡聚糖水平逐渐下降,14例逐渐升高.结论 血浆(1→3)-β-D-葡聚糖检测在诊断深部真菌感染方面明显优于真菌培养法,是有效评价抗真菌药物疗效的指标.     

高压氧对坐骨神经部分损伤小鼠模型背根神经节和脊髓中潜在转化生长因子结合蛋白-1的影响CSCD

神经病理性疼痛是周围、中枢神经系统损伤后出现的疼痛异常,临床常见的如带状疱疹神经痛、三叉神经痛、舌咽神经痛、幻肢痛、痛性糖尿病周围神经病变等,发病率较高（1％～17％）,治疗非常困难[1].有研究发现高压氧治疗能起到脑保护作用[2],且促进神经再生[3],在一些慢性疼痛状态下能减轻疼痛[4].转化生长因子-β（transforming growth factor,TGF-β）家族在中枢神经系统起到神经营养和神经保护的作用,以无活性的复合物形式存在.潜在转化生长因子结合蛋白-1（latent transforming growth factor binding protein,LTBP-1）是TGF-βs靶向与激活的重要调控物质,而LTBP-1在神经系统的表达分布及其作用机制尚不明确.因此,本研究建立小鼠坐骨神经部分损伤（spared nerve injury,SNI）[5]模型,给予高压氧（hyperbaric oxygen,HBO）干预后,观察LTBP-1在背根神经节与脊髓的表达,以探索LTBP-1在神经病理性疼痛中所起的作用.     

高压氧治疗对急性脑梗死患者血清C反应蛋白和白细胞介素-6含量的影响及疗效观察

目的 观察高压氧(HBO)治疗对急性脑梗死患者血清C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)的影响及其治疗效果.方法 经患者知情同意,并签署知情同意书后,将83例急性脑梗死患者按完全随机法分为对照组(43例)和HBO组(40例),另取40名健康体检者作为正常对照(正常组).对照组给予必要的脱水、阿托伐他汀、阿司匹林、奥扎格雷、胞二磷胆碱等常规治疗;HBO组在行常规治疗的同时加用HBO治疗1个疗程.治疗前后行血清CRP、IL-6含量检测及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)及生活能力Barthel指数(BI)评分,CRP、IL-6分别采用免疫比浊法和ELISA检测,梗死后6个月随访时再次行BI评分.结果 治疗前2组患者血清CRP和IL-6含量差异无统计学意义(P＞0.05),NIHSS评分分别为23.4 ±5.28、24.8 ±4.92,BI评分分别为30.7±10.14、31.1±11.45,差异均无统计学意义(P＞0.05);治疗后2组CRP和IL-6含量较治疗前均明显降低(P＜0.05),NIHSS评分分别为16.30±5.57、12.70±5.92,较治疗前均明显下降(P＜0.05),BI评分分别为44.20±12.18、52.40±13.36,较治疗前均明显升高(P＜0.05);与对照组比较,HBO组CRP和IL-6含量降低及NIHSS评分下降、BI评分升高均更为明显(P＜0.05);6个月后随访时2组BI评分分别为76.30±18.49、85.40±19.27,与治疗后比较均有明显升高(P＜0.05),HBO组较对照组升高更为明显(P＜0.05).结论 HBO治疗可显著降低急性脑梗死患者血清CRP和IL-6含量,减轻脑组织炎性反应,促进神经功能的恢复,从而提高临床疗效.