熊猴和恒河猴接种乙型肝炎病毒的实验研究

黑猩猩是目前唯一公认的对乙型肝炎病毒(HBV)敏感并能产生类似人类乙型肝炎病变的动物。对于数量较大,饲养管理较方便,价格较低廉的称猴能否感染HBV,国内外学者进行过某些探索,但仔家报道不一。已有报道称猴属中的恒河猴、红面猴、     

人乙型肝炎病毒红面猴实验感染模型初报

选用无自然感染人乙型肝炎病毒(HBV)的红面猴(Macaca speciosa)4只,其中2只经实验感染人HBV后,作了血清学检测:SGPT(改良赖氏法)、HBV标志物“两对半”(RPHA法、FLISA法、SPRIA法)、HBV-DNA(斑点分子杂交法)、乙肝病毒粒子(电镜观察)。并取肝组织活检,进行光、电镜动态病理学观察,以及组织化学、免疫组化和原位杂交等法检测肝细胞内的HBsAg、HBcAg和HBV-DNA。2只猴血清均检出SGPT、HBsAg、抗-HBc、抗HBs、HBV-DNA和Dane粒子阳性,其中HBsAg阳性持续时间为52和53周。2只猴肝组织均出现由急性肝炎发展为慢迁肝的病变,与乙肝病人的病变相同,在肝细胞内检出HBV标志物。接种后28周的阳性血清传代给对照组中的1只健康红面猴,可惜该猴死于中毒痢,观察期仅8天,7天内血清HBV标记物及SGPT均呈阳性。     

人乙型肝炎病毒在树鼩中传代感染的研究

用人乙型肝炎病毒(HHBV·)感染树鼩(Tree shrews)后,取其HBsAg及(或)HBeAg阳性的树齣血清传代感染另一批树鼩;18只树鼩分四批感染至第四代,经检测发现17只树鼩血清或肝细胞中HBV标志物阳性(94.4%);血清转氨酶(SGPT)升高,肝组织有不同程度的炎症变化。此结果表明HHBV能够在树鼩间连续传代复制,为人乙型肝炎病毒感染树鼩动物模型的建立提供又一佐证。     

灰旱獭感染HBV的传代研究

目的 研究灰旱獭感染HBV的传代实验。方法 对人工饲养两个月后的健康、HBV本底阴性的灰旱獭，接种含HBV—DNA的人血清，接种后1—4周(每周)，2—8个月(每月)查HBV—M—ELISA法，HBV—DNA—PCR—ELISA，AU／AST检测同步取肝组织做病理检查。用产生应答的阳性血清同法依次进行第二代、第三伏实验。结果 第一、二代血清和肝组织炎症反应均为阳性，第三代血清无应答，但肝组织呈现炎症反应。结论 初步证实灰旱对HBV攻毒、传代成功。     

乙型肝炎病毒标志物与HBV-DNA检出率的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒标志物（HBV－M）常见模式与HBV－DNA检出率的关系。方法：采用地高辛标记探针斑点杂交法检测200例HBV－M常见模式血清中HBV－DNA。结果：41份HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性（大三阳）标本中检了HBV－DNA阳性38例（HBV－DNSA阳性率为92．6％）;52例HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性（小三阳）标本中检出HBV－DNA阳性9例（阳性率17．3％）;30例HBV－M全阴性标本中检出HBV－DNA阳性2例（阳性率6．7％）;20例仅HBsAb阳性的标本,其HBV－DNA全部阴性。结论：BHeAg阳性与HBV－DNA关系极为密切,其HBV复制最活跃,传染性最强。无论何种原因产生HBsAb,都能有效地清了HBV;只有HBsAb是保护性抗体,能有效地清除HBV或抑制HBV复制。即使HBV－M全阴性人群中,仍可能有病毒复制,一般都应接种乙肝疫苗。     

小柴胡片抗乙型肝炎病毒的初步实验研究

东汉名医张仲景所创的“小柴胡汤”方剂 ,自古以来就用以治疗肝病。现代医学研究证明小柴胡制剂具有免疫调节、抗炎、抗纤维化及保护肝细胞等作用。临床实践还观察到血清 HBe Ag转换现象 ,提示小柴胡还有抗 HBV的作用 ,学者们认为小柴胡可能是通过诱生干扰素、增加抗体产生、作用于枯否氏细胞等 ,达到抑制 HBV复制的目的。研究已证实小柴胡中的柴胡、甘草、黄芩在体外有抗病毒作用 ,但有关其抗HBV的研究 ,目前报道罕见。为探讨小柴胡的直接抗 HBV作用 ,我们以转染有 HBV全基因组的肝癌细胞系 2 .2 .15细胞为实验模型 (美国西奈山医…     

孕早期绒毛细胞原位杂交监测人巨细胞病毒宫内感染的价值

用地高辛标记人巨细胞病毒 (HCMV) DNA探针 ,对 10 5例孕早期妇女 (其中有异常妊娠史者 4 5例 )绒毛细胞进行原位杂交 (ISH)。结果发现 :正常组与异常妊娠史组 ISH阳性率分别为 2 5 .0 0 %及 4 8.89% ,P<0 .0 5。与 PCR法相比 ,该方法敏感度 5 5 .0 0 % ,特异度 76 .92 % ,符合率 6 8.5 7% ,且可进行病毒核酸定位及半定量。提示 :用地高辛标记探针进行绒毛细胞原位杂交 ,监测 HCMV宫内感染是可行的 ,为进一步探讨 HCMV感染引起不良妊娠的机理提供了一条新途径 ,并为胎儿取舍提供更确切的科学依据 ,减少低质儿的出生     

熊猴实验感染人HBV的血清学研究

本文对七只熊猴实验感染人HBV的血清学进行了研究,采用了4种方法,检测血清中HBV标志物和生化学指标。结果表明RPHA、ELISA、SPRIA及斑点杂交法,分别在猴血清中检出HBsAg、抗-HBC和HBV-DNA,生化学指标也呈现持续的异常升高,这些结果除了证实动物实验感染模型的成功外,也对熊猴血清中HBV标志物的检测方法和敏感性提供了参考依据。     

实验感染恒河猴建立庚型肝炎动物模型的研究

用庚型肝炎病毒(HGV)人工感染恒河猴建立庚型肝炎动物模型在我国尚属首例。该实验用了5只恒河猴(2其感染．1只传代．2只对照)。本实验采用：逆转录PCR法、间接ELISA法、酶速率法、肝组织光镜动态病理方法作为检测手段。其结果是：研究的2只猴都出现HGV-RNA、HGV-IgG阳性，持续时间50周以上。感染第10周肝组织出现急、慢性病毒性肝炎病变．并与人庚型肝炎病变基本相同，而血清转氨酶(ALT)变化不明显。用感染后第7周猴子的阳性血清传代感染另一只猴：用同样的检测方法、内容，其结果与供血清猴的变化特征相同。实践证明．实验感染恒河猴建立庚型肝炎动物模型的研究首次获得成功。     

中医药治疗慢性乙型肝炎中对清除HBV感染复制指标的研究近况

本文综述了中医药在消除和抑制HBV复制方面的疗效及其在实验研究方面所取得的进展。     

孕早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的诊断方法学研究

目的　探讨诊断孕早期HCMV宫内活动性感染的实验方法及其价值。方法　留取 68例有异常妊娠史的早孕妇女绒毛组织 ,分为两份 ,一份提取总RNA ,采用RT PCR检测其中的HCMVmRNA ,一部分制成冰冻切片 ,分别采用原位杂交技术 (ISH)检测HCMVmRNA ,免疫组织化学法检测HCMV早期抗原。结果　采用RT PCR检测到的孕早期绒毛组织HCMVmRNA阳性率为 39 7% ;ISH阳性率为 2 3 5 % ;免疫组化检测HCMV早期抗原阳性率2 2 1 %。RT PCR检出率明显高于ISH(P <0 0 5) ,而ISH与免疫组化的阳性率无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　测定绒毛组织中的HCMVmRNA、早期抗原是HCMV宫内活动性感染的客观指标。RT PCR的敏感性最高 ,但ISH与免疫组化可同时作定位、定量观察 ,可操作性强 ,因而有较大的临床推广应用价值     

HBV体外感染人胎肝细胞的鉴定方法研究

目的通过HBV体外感染22周龄原代培养人胎肝细胞,比较常用检测指标的敏感性和特异性.方法利用HBV阳性血清感染体外培养的原代人胎肝细胞.应用ELISA法检测培养上清中的HBsAg和HBeAg,免疫组化法检测细胞核中的HBcAg,荧光定量PCR法检测上清和细胞中HBV DNA,巢式PCR法检测细胞中cccDNA.结果胎肝细胞核中的HBcAg于感染后第2天出现阳性,培养上清和细胞中HBVDNA定量自第4天起检出,上清中HBsAg和HBeAg于第5～6天出现阳性;细胞中HBV cccDNA自第8～9天出现阳性.结论HBV在原代培养人22周龄的胎肝细胞中能够稳定复制和表达,各种检测指标的灵敏性和特异性不一,免疫组化法检测细胞核中的HBcAg敏感性好,特异性可.     

人巨细胞病毒与妊娠期感染

孕妇感染人巨细胞病毒后，可导致宫内传播，引发早产、流产、胎儿畸形等不良妊娠结局，存活会留有听力缺陷，智力发育障碍等后遗症，严重影响人口出生质量。本对人巨细胞病毒妊娠期感染的发病情况、诊断及防治进行简要综述。     

人巨细胞病毒活动性感染的分析

目的：调查人类巨细胞病毒（HCMV）活动性感染人群的分布及流行病学特征，为预防和诊治HCMV活动性感染提供证据。方法：用ELISA法测定血清中HCMV活动性感染的特异性抗体HCMV-IgM，并对HCMV-IgM检测人群进行分析。结果：90例健康人群血清HCMV活动性感染率为0，5315例孕妇血清HCMV-IgM检测中有303例为阳性，HCMV活动性感染率平均为5.70%,但孕妇HCMV活动性感染率有逐年下降趋势；51例不明原因的黄疸患者，16例器官移植患者、3例发热待查患者，HCMV活动性感染率分别为3.92%，12.5%。结论：移植患者、孕妇、不明原因的黄疸患者易受HCMV活动性感染，临床上应将其作为高危人群常规筛查HCMV-IgM。     

人巨细胞病毒动物模型的建立

采用HCMV-AD180株实验感染昆明系和BALB/c系小鼠，攻毒后感染急性期BALB/c系小鼠的死亡率（28.57%）高于昆明系小鼠（5.26%）。两种不同品系小鼠的临床症状和HCMV导致的病理损害脑钙化无明显差异。