人端粒酶催化亚单位和c—myc蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的：探讨人端粒酶催化亚单位（human telomerase catalytic subunit,hTERT）和c—myc蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学技术检测71例慢性胃炎和胃癌中hTERT和c—myc蛋白的表达,其中慢性胃炎伴萎缩者18例,伴肠化生者16例,伴中、重度不典型增生者16例,胃癌21例。结果：hTERT和c—myc蛋白的表达率在胃癌组织中均高于不典型增生、肠化生和萎缩性胃炎组织（P〈0．05）;在不典型增生组织中均显著高于肠化生、萎缩性胃炎组织（P〈0．05）;在肠化生组织中均显著高于萎缩性胃炎组织（P〈0．05）。hTERT蛋白表达率在c—myc蛋白阳性患者中显著高于c—myc蛋白阴性患者（P〈0．01）。结论：hTERT与c—myc蛋白在胃癌发生发展过程中,均可能发挥重要作用,对胃癌的发生、发展起促进作用,c—myc表达增加可能是胃黏膜上皮细胞端粒酶激活的重要机制之一。     

PokemonmRNA在乳腺癌中的表达及与c—myc相关性分析

目的：探讨人乳腺癌中原癌基因c—myc和PokemonmRNA在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌发生、转移的相关性。方法：收集浸润性导管癌组织、痛旁乳腺组织、正常乳腺组织各45、20和20例,用原位杂交法检测PokemonmRNA表达,并用免疫组织化学法检测浸润件导管癌c—myc表达,并进行统计分析。结果：乳腺癌细胞质PokemonmRNA的表达率为71．2％（37／45）,显著高于癌旁正常乳腺组织40％（8／20）、乳腺增生组织25％（5／20）,三者有显著性差异（P〈0．05）,细胞质c—myc阳性率分别为86．67％、60．0％、50．0％,三者有显著性差异（P〈0．05）。细胞质PokemonmRNA表达与乳腺癌淋巴结转移、组织学分级相关（P〈0．05）。细胞质c—myc表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关（P〈0．05）。45例乳腺癌细胞质PokemonmRNA与c—myc表达呈正相关（1=0．585,P〈0．05）。结论-PokemonmRNA的表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,c—myc的过度表达可能与乳腺癌Pokemon基因转录激活有关。     

反义c-myc寡核苷酸对hTERT蛋白表达抑制作用的研究

目的 探讨脂质体LipfectAMINE^TM（LR）介导的反义c—myc寡核苷酸（ASODN）对乳腺癌MCF-7细胞hTERT蛋白表达的抑制作用。方法 应用免疫细胞化学ABC法检测转染反义、正义及未转染细胞巾hTERT蛋白的表达情况。结果 免疫细胞化学显示转染反义、正义与未转染细胞的hTERT蛋白表达分别为23％、96％、99％（P〈0．01），表明转染反义c—myc的MCF-7细胞hTERT蛋白表达明显降低。结论 反义c—myc寡核苷酸可以抑制hTERT蛋白的表达。     

Ezrin在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义

目的：探讨Ezrin在乳腺浸润性导管癌（IDC）和乳腺纤维腺瘤、腺病中的表达情况，并分析Ezrin表达与IDC患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、分化、淋巴结转移以及ER、PR、C—erbB-2、MMP-2、MMP-9、E—cadherin等的表达情况之间的相互关系。方法：构建乳腺病变的组织芯片，其中包括IDC101例，乳腺纤维腺瘤29例，腺病8例；采用EnVsion两步法进行Ezrin、ER、PR、c—erbB-2、MMP-2、MMP-9、E—cadherin免疫组化标记；统计分析乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、分化、淋巴结转移等情况；分析Ezrin与各临床病理特征以及相应标记间的关系。结果：在91．89％（34／37）乳腺纤维腺瘤和腺病中，Ezrin表达于导管管腔内缘；而在75．25％（76／101）IDC中，却示细胞质内弥漫着色，无一例管腔内缘着色。在IDC组织中，Ezrin表达与肿瘤大小（r=0．277，P=0．005）、TNM分期（r=0．334，P=0．001）、淋巴结转移（r=0．323，P=0．001）、间质细胞内MMP-9（r=0．246，P=0．013）表达呈正相关。而与年龄、分化程度以及癌细胞内ER、PR、C—erbB-2、MMP-2、MMP-9、E—cadherin的表达和间质细胞内MMP-2表达无显著相关性。结论：Ezrin蛋白在乳腺良性病变和癌组织内的定位有明显差异，可有助于良恶性病变的鉴别诊断；Ezrin的表达水平增高提示癌组织具有更高的浸润侵袭能力和淋巴结转移风险。     

胰岛素样生长因子Ⅰ型受体在乳腺癌中的表达及其临床意义

[目的]探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF—IR）在乳腺癌中的表达及其临床意义。[方法]免疫组化方法检测20例正常乳腺组织、20例乳腺良性肿瘤和86例乳腺恶性肿瘤组织中IGF—IR的表达。[结果]①乳腺恶性肿瘤IGF—IR的阳性率及强阳性率明显高于乳腺良性肿瘤（x^2=10．512，P=0．001；X^2=23．591，P=0．000），高于正常乳腺组织（x^2=29．341，P〈0．05）；②IGF—IR在伴淋巴结转移的乳腺癌中表达明显高于无淋巴结转移的乳腺癌（X^2=3．950，P=0．047）；③IGF—IR表达与患者年龄、绝经情况、肿瘤大小、ER和PR表达情况、临床分期、病理类型无明显相关性。[结论]IGF．IR在乳腺癌的发生发展过程中发挥着重要作用，有可能成为临床诊断和判断预后的一个重要指标。     

MTA1表达与乳腺癌浸润转移的关系

[目的]探讨转移相关基因1（metastasis assiciated gene 1,MTA1）在乳腺癌浸润与转移中作用。[方法]用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术联合Zvmed^TM免疫组化方法分别检测55例乳腺癌、癌旁组织中MTA1mRNA和蛋白表达情况。[结果]MTA1 mRNA在乳腺癌中阳性表达率为52．7％（29／55）．在癌旁乳腺组织的阳性率23．6％（13／55）：两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。MTA1蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为49．1％（27／55）,在癌旁乳腺组织中阳性表达率为16．4％（9／55）：两者比较有统计学差异（P〈0．01）。MTA1在乳腺癌组织中的阳性检出率与临床分期、淋巴结转移数目（〉4）、病理分级和C-erbB-2阳性相关（P〈0．05）,与年龄、ER、PR无明显关系（P〉0．05）。[结论]MTA1对乳腺癌浸润、转移可能有促进作用。有可能成为预测乳腺癌浸润与转移的参考指标。     

潜伏膜蛋白1 对鼻咽癌细胞CNE1 中端粒酶的 激活作用及相关调控机制

 目的　探讨LMP1 对鼻咽癌上皮样细胞系CNE1 (nasopharyngeal carcinoma epithelioid cell lines , CNE ) 中端粒酶活性的影响及相关调控机制。方法　分别采用SP 法、RT2PCR 法和PCR2ELISA 法检测鼻 咽癌细胞CNE1 、CNE1GL (转染了目的基因质粒PAT2GFP2LMP1 的CNE1 细胞株) 和CNE22Z 中LMP1 、 NF2κB、c2myc 和hTERT 的表达、hTERT mRNA 水平和端粒酶活性。结果　(1) CNE1GL 与CNE1 细胞相 比,LMP1 、NF2κB、c2myc、hTERT 的表达水平均高于CNE1 细胞中各指标的表达,差异有统计学意义( P < 0. 01) 。CNE22Z和CNE1GL 、CNE1 相比,细胞中各指标的表达水平均最高( P < 0. 01 或P < 0. 05) 。 CNE1GL 细胞中,LMP1 与NF2κB、NF2κB 与c2myc 及LMP1 与c2myc 的表达之间均呈显著正相关( P < 0. 01或P < 0. 05) 。(2) hTERT mRNA 水平在CNE1GL 细胞明显高于CNE1 细胞,差异有统计学意义( P < 0. 01) ;在三种细胞中,CNE22Z细胞中hTERT mRNA 水平最高( P < 0. 01) 。(3) CNE1GL 细胞中的端粒酶 活性明显高于CNE1 细胞,差异有统计学意义( P < 0. 05) ;CNE1GL 细胞中的端粒酶活性略低于CNE22Z 细胞( P > 0. 05) ;CNE22Z细胞中的端粒酶活性明显高于CNE1 细胞( P < 0. 01) 。结论　在CNE1GL 细胞 中,LMP1 通过激活hTERT 转录而激活端粒酶。此调控过程可能和NF2κB 激活,NF2κB 进而上调c2myc 表达水平,c2myc 提高hTERT 转录水平有关。LMP1 激活端粒酶可能是鼻咽癌癌变过程中的重要事件。     

散发性乳腺浸润性导管癌中BROA1表达及临床意义

目的：研究散发性乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma,IDC）（breast cancer 1 BRCA1）基因的表达及其与其临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化sP三步法检泖167例乳腺浸润性导管癌,53例乳腺腺病患者的石蜡标本BRCA1的表达。从病理科的档案提取患者的年龄,肿物大小,淋巴结转移情况,ER,PR,Her-2表达结果,分析BRCA1的表达和患者的年龄,肿物大小,淋巴结转移情况及ER,PR,Her－2表达的关系。结果：BRCA1蛋白在IDC组织表达率56．7％（38／67）,癌旁组织表达率80．0％（36／45）,乳腺腺病组织表达率92．5％（49,53）。阳性细胞定位除细胞核外,也见于胞浆。IDC癌组织与癌旁组织、乳腺腺病组织比较,BRCA1阳性表达率均下降,均有显著性差异（P〈0．05）。BRCAI的表达与淋巴结转移呈负相关（r=-0．137,P〈0．05）,与ER、PR、Her－2的表达均呈负相关（r值分别为－0．439,－0．250,－0．363,P〈0．05）,与年龄、肿物大小无明显相关性（P〉0,05）。结论：BRCA1蛋白可作为估计乳腺癌生物学行为和预后的潜在指标。     

端粒酶hTERT mRNA表达在乳腺癌进展中的意义及其与p53的相关性

目的 探讨端粒酶hTERT mRNA表达在人乳腺癌发生、发展中的意义,观察肿瘤抑制基因p53与hTERT mRNA表达的关系。方法 收集浸润性导管癌标本25例,导管原位癌标本18例,导管上皮不典型增生标本20例,导管上皮单纯性增生标本7例,癌旁正常乳腺组织标本12例。用原位杂交法检测hTERT mRNA表达,并用免疫组化方法检测乳腺导管癌的p53蛋白表达。结果 hTERT mRNA在癌旁正常乳腺组织、乳腺导管单纯性增生中未见表达;在导管不典型增生、导管原位癌、浸润性导管癌中的阳性率分别为25．0％、83．3％和88．0％。导管原位癌、浸润性导管癌组织hTERT mRNA表达明显高于癌旁正常乳腺组织、乳腺导管单纯性增生和导管不典型增生组织（P〈0．05）。hTERT mRNA表达与浸润性导管癌肿块大小及淋巴结转移与否无关（P〉0．05）。43例乳腺导管癌中,hTERT mRNA表达与p53蛋白表达呈正相关（r=0．5540,P〈0．01）。结论 端粒酶hTERT mRNA表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,半定量原位检测hTERT mRNA表达,可为导管上皮不典型增生与导管原位癌的鉴别诊断提供帮助。p53突变可能与乳腺导管癌hTERT基因转 录激活有关。     

乳腺癌中RUNX3、cyclin D1和p27kip1蛋白的表达及其意义

[目的]探讨乳腺癌组织中RUNX3、cyclinD1和p27^kip1基因的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组织化学SP法检测88例乳腺癌、40例乳腺纤维腺瘤、40例乳腺增生病中RUNX3、cyclinD1和p27^kip1的表达。[结果]（1）RUNX3和p27^kip1在乳腺癌中的阳性表达率分别为35．23％和51．14％，明显低于在乳腺纤维腺瘤（85％和82．5％）及乳腺增生病（87．5％和85％）中的表达率（P〈0．05）。乳腺癌中cyclinD1的表达率（63．63％）明显高于良性病变中表达。（2）RUNX3和p27^kip1蛋白表达与乳腺癌的临床分期、淋巴结转移呈负相关。p27^kip1蛋白表达与病理分级呈负相关。cyclinD1蛋白表达与病理分级呈正相关。（3）乳腺癌中RUNX3与p27^kip1蛋白的表达呈正相关性（P〈0．05）．与cyclinD1的表达呈负相关性（P〉0．05）。[结论]RUNX3、cyclinD1和p27^kip1在乳腺癌的发生发展中起重要作用。检测乳腺癌组织中RUNX3、cyclinD1和p27^kip1基因的表达对于评价患者的预后有一定价值。     

hTERT CD 44v6 在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨hTERT 、CD44v6 的表达与大肠癌发生、浸润转移及预后的关系。方法:对大肠腺瘤组织及大肠癌组织进行免疫组织化学染色,分析hTERT 及CD44v6 在大肠癌中表达的相关性。结果:hTERT 及CD44v6 在大肠癌组织中的阳性表达率分别为70.73% 、53.66% ,明显高于大肠腺瘤组织中的10.53% 、10.53%（P<0.01）;hTERT 及CD44v6 在有淋巴结转移的大肠癌患者的阳性表达率分别为93.33% 、86.67% ,明显高于无淋巴转移患者的阳性表达率53.85% 、38.46%（P<0.01）;hTERT 及CD44v6 在TNMⅢ、Ⅳ期大肠癌患者的阳性表达率分别为94.12% 、82.35% ,明显高于TNMⅠ、Ⅱ期的54.17% 、33.33%（P<0.01）;在生存期<5 年大肠癌中的阳性表达率分别为90.91% 、77.27% ,明显高于生存期≥5 年的47.37% 、26.32%（P<0.01）;hTERT 和CD44v6 在性别、年龄、肿物大小、肿物位置及浸润深度中的阳性表达差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论:hTERT 和CD44v6 在大肠癌组织中具有高表达,特别是在有淋巴结转移、TNMⅢ、Ⅳ期和生存期<5 年组中有较高表达,说明两者可能在大肠癌的发生、浸润转移过程中起着重要作用,并且与大肠癌患者的预后有关;联合检测hTERT 和CD44v6 可以作为大肠癌浸润转移的判断和预后评估的参考指标。      

c-myc、HIF-1α和VEGF在高海拔地区乳腺癌的表达及临床意义

目的探讨高海拔地区乳腺癌及乳腺良性病变中c-myc、HIF-1α、VEGF的表达与转移及预后的关系。方法应用免疫组化Elivision plus法,测定60例乳腺癌和20例乳腺良性病变中c-myc、HIF-1α、VEGF的表达。结果60例乳腺癌组织中c-myc、HIF-1α、VEGF阳性表达率分别为55.0%、51.7%、63.3%,与乳腺良性病变比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。c-myc的阳性表达与年龄、淋巴结转移有关（P〈0.05）。HIF-1α、VEGF的阳性表达与组织学分级、临床分期及淋巴结转移有关（P〈0.05）。HIF-1α、VEGF的表达呈正相关（r=0.371;P〈0.01）,与c-myc蛋白表达呈正相关（r=0.332;P〈0.01）,c-myc、VEGF的表达呈正相关（r=0.369;P〈0.01）。结论c-myc、HIF-1α、VEGF在乳腺癌中的高表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关。c-myc、HIF-1α、VEGF在促进乳腺癌淋巴结转移中可能起协同作用,联合检测乳腺癌中c-myc、HIF-1α、VEGF的表达,有利于更好地评估乳腺癌的生物学行为,提高对患者预后判断的准确性,指导个体化治疗。     

乳腺间质CD34和平滑肌肌动蛋白免疫组化检测在乳腺癌诊断中应用

目的 :评价免疫组化检测乳腺间质纤维细胞CD34和平滑肌肌动蛋白 (SMA)表达在乳腺癌诊断中价值。方法 :6 7例乳腺活检组织进行CD34和SMA免疫组化检测 ,其中乳腺癌 4 2例 ,乳腺良性病变 2 5例。观察各类乳腺病变间质的CD34和SMA表达状况 ,并分析CD34和SMA表达的相关性。结果 :2 5例良性病变中CD34表达 10 0 % (2 5 / 2 5 ) ,SMA表达 4 8% (12 / 2 5 )。 34例浸润性乳腺癌 (不包括 8例单纯导管内癌 )CD34全部缺乏表达 (0 /34) ,SMA表达 10 0 % (34/ 34)。CD34和SMA表达在乳腺浸润性癌和乳腺良性病变中表达的差异均具有显著性 (P<0 .0 1和P <0 .0 1)。导管内癌 (单纯导管内癌 8例和伴有浸润性癌的导管内癌成分 13例 )导管周围间质的纤维细胞CD34和SMA表达不均一 ,呈现为不同程度丢失CD34表达和获得SMA表达 ,并且CD34和SMA的表达呈负相关 (r= 0 .931,P <0 .0 1)。结论 :本研究结果表明乳腺间质纤维细胞CD34表达缺乏是浸润性乳腺癌间质改变的一项敏感指标。导管内癌管周间质的纤维细胞CD34和SMA表达不均一体现了从原位癌向浸润性癌发展的过程 ,因此 ,导管内癌管周间质丢失CD34 纤维细胞同时出现SMA 肌纤维母细胞反应可能是癌细胞向间质浸润的前兆。     

VEGF-C和VEGFR-3对乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响

目的:探讨VEGF-C及VEGFR-3对乳腺癌淋巴结转移的影响。方法:采用免疫组化SP法检测乳腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌中VEGF-C及VEGFR-3的表达状态。结果:10例乳腺病及纤维腺瘤VEGF-C均阴性,也无VEGFR-3阳性淋巴管;48例乳腺癌组织VEGF-C阳性率为70.83%(34/48);淋巴结转移者VEGF-C阳性率为92.59%(25/27),显著高于无转移者(42.86%,9/21)(P<0.01)。VEGFR-3阳性淋巴管条数随VEGF-C强度增强而增多。在淋巴结转移者中,VEGFR-3阳性淋巴管条数(6.03)多于无淋巴结转移者(2.01)(P<0.01)。结论:乳腺癌组织中VEGF-C的表达状态与VEGFR-3阳性淋巴管数量及淋巴结转移关系密切。     

Immunohistochemical study of oncogene product ras p21, c-myc and growth factor EGF in breast carcinomas.

The expression of the oncogene products ras p21, c-myc and the growth factor EGF (epidermal growth factor) was studied immunohistochemically in the tissue of 119 benign and malignant human breasts. In most cases, histologically normal breast tissues and benign lesions were found to be negative or poorly-expressive for reactivity with each antibody. Similar findings were observed in carcinoma in situ. Invading breast carcinomas demonstrated a significantly higher percentage of stained cells than that observed in benign lesions or carcinoma in situ; forty-two of 66 invasive breast carcinomas (63.6%) were highly-expressive for ras p21, thirty-eight (57.6%) for c-myc and twenty (30.3%) for EGF, but overall correlations between each oncogene expression and the clinical stage, tumor size or degree of differentiation were not found. The overall 5-year survival rate was studied in 58 patients with Stage II and III in association with each oncogene or EGF expression. Their survival rate was significantly effected by the EGF expression (0.05 less than p less than 0.1) but not by ras p21 or c-myc expression. Analysis of 36 specimens available with ER (estrogen-receptor) level revealed a significant correlation between the ER status and c-myc or E2 (estradiol) and a significant inverse correlation between ER status and ras p21 or EGF expression (P less than 0.05). The expression of ras p21, EGF and c-myc was not associated with metastatic tumor progression.     

乳腺癌前不同病变中多种生物标志的变化规律及意义

目的探讨多种生物标志在乳腺癌前不同病变中的变化规律及意义。方法免疫组化法检测ER、PR、pS2、p53和c-erbB-2在正常乳腺组织、单纯性增生、不典型增生和早期癌中的表达。结果ER、PR表达与乳腺增生病情程度密切相关(r=0.446,P<0.0001;r=0.363,P<0.0001),阳性表达率在不典型增生组分别为64.4%和73.3%,显著高于正常组(分别为11.5%和15.4%)和单纯增生组(分别为22%和28%)。pS2、p53、c-erbB-2在癌前不同病变中的表达率较低。发现>2个指标的共表达在不典型增生组为68.9%,显著高于正常组(3.8%,P<0.01)和单纯增生组(14%,P<0.01)。结论ER、PR是促进乳腺增生发展和癌变的重要影响因子,临近癌变存在显著增高的多生物指标共表达。     

乳腺肿瘤癌基因c—erbB—2,c—myc的表达及其临床意义

应用免疫组织化学方法，研究６１例乳腺良、恶性病变ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｃ－ｍｙｃ的癌基因的表达情况。４６例乳腺癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｃ－ｍｙｃ阳性率分别为５０％（２３／４６）和４５．７％（２１／４６）１５例乳腺良性病变中阳性率分别为６．７％（１／１５）和５３．５％（８／１５）。