庆大霉素对豚鼠耳蜗橄榄束传出神经影响的研究

目的探讨庆大霉素对豚鼠耳蜗橄榄束传出神经的损害。方法采用AchE组织化学染色,全耳蜗铺片观察对照组和庆大霉素组停药后不同时间耳蜗橄榄束传出神经的分布特征,并测量耳蜗橄榄束传出神经纤维的数量。实验前后行畸变产物耳声发射对侧声抑制测试。结果肌注庆大霉素2周后耳蜗AchE终末反应物减少,神经纤维连续性中断,耳声发射对侧声抑制幅度下降,损害随观察时间延长而加重,8周后损害最为严重,耳声发射未引出。结论庆大霉素可对豚鼠内侧橄榄耳蜗束传出神经系统产生不可逆性的损害。     

铅暴露对豚鼠耳蜗毛细胞损害的定量分析

目的研究铅暴露浓度与豚鼠耳蜗毛细胞形态学改变和对听觉系统损害程度的量化关系。方法50只豚鼠分为对照组和实验组。对照组(10只)豚鼠腹腔注射生理盐水1ml,隔日一次。实验组分为两组:高铅组(20只):豚鼠腹腔注射0.25%醋酸铅溶液40mg/kg;低铅组(20只):豚鼠腹腔注射0.25%醋酸铅溶液20mg/kg,分别于停药后7、14、28天采血。断头后行全耳蜗铺片的光学和电镜检查。结果腹腔注射醋酸铅后,血清中铅含量迅速升高。低铅组铅暴露1周后出现外毛细胞损害;高铅组铅暴露2周后外毛细胞损害程度较重,出现细胞变性、减少、结构不清,电镜观察可见毛细胞缺失明显;高铅暴露4周后毛细胞损害呈进行性加重。结论铅暴露对豚鼠耳蜗毛细胞损害明显,表现为纤毛的散乱、倒伏、部分脱落、大片缺失等,其损害程度与铅暴露浓度呈正相关性。     

高胆红素血症对新生豚鼠畸变产物耳声发射的影响

目的通过动态观察高胆红素血症新生豚鼠畸变产物耳声发射（DPOAE）及其对侧抑制现象的变化,探讨高胆红素血症对耳蜗和/或脑干听觉传出通路内侧耳蜗橄榄系统功能的影响。方法 20只新生豚鼠分为实验组和对照组各10只,分别腹腔注射胆红素100μg/g和等量生理盐水。两组于给药前、给药后2、4、6、8小时在对侧耳无声刺激及70dBSPL白噪声刺激两种条件下测试DPOAE,观察两组DPOAE及对侧抑制现象的动态变化。给药后8小时行全耳蜗基底膜铺片定量观察毛细胞损伤情况。结果对照组给药前后DPOAE幅值无变化,对侧抑制现象始终存在。实验组给药后DPOAE幅值逐步下降,给药后2小时起对侧抑制现象消失,其中5只豚鼠在给药后8小时DPOAE幅值及对侧抑制现象呈现不同程度的恢复。两组豚鼠耳蜗基底膜铺片观察毛细胞形态未见异常。结论高胆红素血症早期可能损害耳蜗毛细胞的主动机械活动及耳蜗传出神经系统,此损害部分为可逆性的。DPOAE及其对侧抑制现象是评估胆红素脑病严重程度的有效指标。     

变压器噪声暴露对豚鼠旷场行为及听功能的影响

目的 探讨变压器噪声对豚鼠旷场行为及听功能的影响.方法 取32只健康成年(5～6月龄)豚鼠随机分为实验组和对照组,每组16只.实验组给予录制的变压器噪声(声压级范围40.8～55 dB SPL,频谱范围150～2 000 Hz)连续暴露28天,10小时/天(晚10点到早上8点),对照组在相同条件下饲养,无噪声暴露.在噪声暴露前1天、噪声暴露第28天记录实验组、对照组的旷场行为并对两组豚鼠进行DPOAE、ABR检测后,取耳蜗行常规耳蜗铺片和硝酸银染色,观察耳蜗毛细胞损害情况.结果 噪声暴露28天后,两组豚鼠旷场行为差异无统计学意义(P＞0.05);1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0kHz DPOAE反应幅值差异无统计学意义(P＞0.05).噪声暴露前1天及噪声暴露28天后实验组豚鼠的ABR反应阈分别为31.38±1.78、32.13±2.24 dB SPL,与对照组(分别为31.89±1.03和31.75±1.57 dB SPL)比较差异均无统计学意义(P＞0.05).噪声暴露28天后实验组豚鼠耳蜗外毛细胞形态基本正常,毛细胞缺失率(1.31％±0.52％)与对照组(0.85％±0.23％)比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 声压级范围为40.8～55 dB SPL、频谱范围为150～2 000 Hz的变压器噪声连续暴露28天(10小时/天)对成年豚鼠旷场行为及听功能无明显影响.     

水杨酸钠对豚鼠畸变产物耳声发射的影响

本文以10％水杨酸钠400mg／kg经豚鼠腹腔注射2小时和4天后,进行较系统的畸变产物耳声发射（DPOAE）测试,并以自身为对照,探讨用药前后水杨酸钠对豚鼠DPOAE的影响。结果发现,用药2小时和4天后,水杨酸钠具有对DPOAE相似的影响作用;水杨酸钠在低刺激强度下可明显降低DPOAE的测出率;对各频率DPOAE的幅值和阈值分别有降低和升高的作用,前者降低2～6dB,后者升高3～9dB,均以低频为甚;水杨酸钠对DPOAE的潜伏期和增长率无明显影响。提示水杨酸钠主要影响DPOAE的发生过程,而对发生后的DPOAE特性影响不大。通过对水酸钠对耳蜗机械特性影响的分析,认为该结果符合水杨酸钠主要影响耳蜗及毛细胞生理功能的药理学特点,可能为其可逆性耳毒性的耳蜗机制之一,有助于解释耳蜗性聋和耳鸣的发病机制。     

逆行荧光标记观察猫上橄榄复合体向内耳的投射

目的 探讨猫橄榄耳蜗神经元的分布和向内耳的投射特征.方法 11只成年猫随机分为两组,实验组8只,左侧耳蜗鼓阶内注射1%霍乱毒素B亚单位,右侧耳蜗鼓阶注射5%荧光金,对照组3只,双侧耳蜗均注射生理盐水.动物饲养7 d后处死,脑干连续冰冻切片,免疫荧光处理,荧光显微镜观察被标记的橄榄耳蜗神经元.结果 实验组每只动物被霍乱毒素B亚单位和荧光金标记的橄榄耳蜗神经元平均总数为(3210±168)个,分为外侧橄榄耳蜗神经元[(2298±120)个]和内侧橄榄耳蜗神经元[(913±64)个].根据投射特征可将被标记的神经元分为三种不同类型:只投射到同侧耳蜗的神经元,只投射到对侧耳蜗的神经元,既向同侧又向对侧耳蜗投射的双标记神经元,其中双标记神经元在外侧橄榄耳蜗神经元和内侧橄榄耳蜗神经元中分别占3.9%和15.1%.对照组未观察到被标记的檄榄耳蜗神经元.结论猫的橄榄耳蜗系统中存在三种不同投射特征的神经元,其中双侧投射的神经元在外侧橄榄耳蜗神经元和内侧橄榄耳蜗神经元中均有分布.     

头低位模拟失重状态对豚鼠耳蜗听功能与超微结构的影响

目的探讨头低位模拟失重对豚鼠耳蜗听功能与超微结构的影响。方法 22只豚鼠随机分为实验组16只和对照组6只。实验组采用头低位模拟失重法,身体纵轴与水平线呈-30°,于实验前、失重5天后即刻及脱离失重3天后分别测试豚鼠听性脑干反应(ABR),然后取耳蜗行扫描电镜和透射电镜观察。对照组不作任何处理。结果对照组豚鼠ABR反应阈为23.48±6.04dB SPL,实验组实验前为24.22±4.04,模拟失重5天后即刻ABR反应阈为41.61±7.01dB SPL,与实验前和对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.05);脱离失重3天后实验组ABR反应阈为27.50±3.54dB SPL,与实验前相比差异无显著统计学意义(P>0.05)。扫描电镜观察发现失重5天后即刻豚鼠耳蜗内、外毛细胞散在缺失,纤毛融合、倒伏;透射电镜检查见内、外毛细胞细胞局部空泡形成,脱离失重3天后上述病变均有明显恢复,但未完全恢复正常。结论模拟失重5天即可以导致豚鼠耳蜗听觉功能和超微结构的损伤,脱离失重3天后听功能可以恢复正常,但其超微结构还没有完全恢复正常。     

DPOAE监测一次性大剂量顺铂致豚鼠耳毒性的实验研究

目的观察一次性大剂量顺铂注射后豚鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和内耳形态学的依时性改变,探讨应用耳声发射监测顺铂耳毒性的最佳时机。方法将豚鼠随机分为对照组(A组)及实验组(B、C、D组),每组6只,A组皮下注射生理盐水,B、C、D各组一次性皮下注射顺铂(10mg/kg),分别于给药前及给药后第3(B组)、5(C组)、10(D组)天检测DPOAE,比较给药前、后DPOAE的幅值的变化,并行耳蜗铺片,观察毛细胞缺失率及耳蜗形态学的改变。结果给药后第3天,DPOAE的幅值仅8kHz处有明显改变(P<0.05);给药后第5、10天DPOAE幅值明显降低(P<0.01)。给药后第3、5、10天,耳蜗外毛细胞缺失率分别为4.34%±3.20%、16.14%±9.15%、18.25%±9.04%。在第5、10天后尚可见血管纹充血以及螺旋神经节细胞肿胀缺失。结论顺铂的耳毒性主要作用于耳蜗底回、中回的外毛细胞,用药后第3~5天应用畸变产物耳声发射检查能早期发现其耳毒性损伤。     

庆大霉素对内侧橄榄耳蜗传出神经毒性作用的形态学观察

目的 观察庆大霉素慢性耳中毒前后蒙古沙鼠人侧橄榄耳蜗传出神经的形态改变及其与细胞损害的关系,以探讨ＭＯＣ传出神经在氨基糖甙类抗生素慢性耳中毒中的重要性。方法 采用改良的乙酰胆碱酯酶组化染色和甲苯胺蓝＝苏木素染色法,全耳蜗铺片观察健康对照组和庆大霉素组耳蜗ＭＯＣ传出神经和外毛细胞的分布特征,并测量耳蜗ＭＯＣ传了神经纤维、末梢及ＯＨＣ的数量。结果 停经后３周出现耳蜗ＭＯＣ纤维和末梢损害,损害程度随时间     

纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞修复再生的实验研究

目的观察纯中药制剂对庆大霉素致聋动物和耳蜗毛细胞的修复再生作用。方法选用73只健康青年豚鼠,行听力学检查后,53只动物连续肌肉注射庆大霉素(80mg.kg-1.d-1)24～30天致聋(GM组),其间死亡8只,剩余45只随机分成中药治疗组(25只)和致聋后对照组(20只),中药治疗组给予纯中药制剂"复聪汤Ⅰ号"口服液和"复聪汤Ⅱ号"滴耳液治疗,致聋后对照组同法给予生理盐水。另外20只豚鼠作为正常对照组,每天肌肉注射等量生理盐水。在治疗30、60和90天后对GM组两组动物分别行ABR、DPOAE检测,同时,每一时间点处死6只动物,左侧耳蜗行扫描电镜观察,右侧耳蜗铺片行光镜观察和毛细胞计数。结果实验前所有豚鼠的听功能正常;连续注射庆大霉素30天后,GM组豚鼠ABR反应阈值上升到50～80dB SPL,DPOAE幅值降低,光镜和电镜下表现为耳蜗毛细胞纤毛断碎、倒伏、融合和消失,多处毛细胞表皮板肿胀、突起和疱疹样变性,或毛细胞被完全挤出网状板,基底回和第三回耳蜗毛细胞严重消失;中药治疗30天后,80%的耳聋豚鼠的ABR反应阈恢复到30～50dB SPL,DPOAE幅值明显提高;耳蜗铺片和电镜观察显示耳蜗毛细胞数目有一定恢复,组织结构有修复现象,扫描电镜可见再生毛细胞仅出现少量纤毛,而致聋后对照组未发现此种现象;治疗60天后,耳蜗毛细胞数目明显增多,Corti器的毛细胞区有大量的增殖细胞出现,扫描电镜可见成小束的新生纤毛出现在毛细胞缺失部位,同时支持细胞大量增殖;治疗90天后,再生的静纤毛束已基本形成,尤其是耳蜗基底部位的毛细胞明显增多,听功能基本正常。结论纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞有一定的修复和再生作用。     

Combined effects of acute lead acetate exposure and tone exposure of the guinea pig cochlea

Lead acetate exposure to humans can induce various disorders of the cranial nerves. Although vertigo and sensorineural deafness have been reported in lead workers, the dose effects of lead acetate on the cochlea and eighth cranial nerve are not well documented. We investigated the effects of lead acetate on the male albino Hartley guinea pig cochlea by measuring cochlear microphonics (CM), whole nerve action potential (AP), endocochlear potential (EP) and K⁺ ion concentration of the endolymph. Animals were given lead acetate by intraperitoneal injection as 20 mg/week for 4 consecutive weeks. A total dose < 80 mg did not induce electrophysiological changes in the cochlea. However, the AP output voltage (N₁) decreased if the 80 mg lead acetate treatment was followed by an 80 dB tone exposure at 6 kHz during 24 h. A change was observed in CM and EP but not K⁺ ion concentration in the scala media.     

自身免疫性听神经病动物模型的建立及听性脑干反应和畸变产物耳声发射的变化

目的建立自身免疫性听神经病动物模型，探讨其听性脑干反应（auditory brainstem response ABR）和畸变产物耳声发射（distortion product otoacoustic emission DPOAE）的变化特征。方法选取耳廓反射正常的白色豚鼠250只，分离、电泳与纯化豚鼠螺旋神经节及蜗轴内的耳蜗神经纤维抗原，然后与等量完全弗氏佐剂免疫同种豚鼠，其中正常组10只，对照组10只，试验组50只。观察ABR、DPOAE、血清IgG水平、螺旋神经节和耳蜗核团形态学的改变、听神经抗原蛋白在螺旋神经节和耳蜗神经的表达、听神经纤维超微结构的变化。结果免疫后16只动物（32／100耳）出现听性脑干反应阈提高10～25dB，Ⅰ、Ⅲ波潜伏期延长，到免疫后第3周最为明显，随后有逐渐恢复的趋势，其中Ⅲ波潜伏期到第6周恢复正常；该组豚鼠DPOAE没有变化，动物血清IgG显著性升高，与对照组相比差异有统计学意义（F=10．03，P〈0．05）；均有不同程度的螺旋神经节细胞变性、数目减少，螺旋神经节和小血管周围有淋巴细胞浸润；听神经纤维出现脱髓鞘、髓鞘断裂等现象。豚鼠耳蜗核各亚核团平均细胞密度和细胞平均面积各组差异比较没有统计学意义；听神经蛋白完全分布于耳蜗螺旋神经节和听神经纤维组织。免疫后34只动物（68／100耳）没有出现ABR反应阈升高，血清IgG没有升高，与对照组相比差异没有统计学意义，螺旋神经节、耳蜗核团、听神经纤维超微结构没有变化。结论建立了豚鼠自身免疫性听神经病动物模型，该动物模型的ABR反应阈轻中度提高，Ⅰ、Ⅲ波有自然恢复的趋势。DPOAE没有变化。     

Effects of section of the medial efferent tracts (crossed and uncrossed) on cochlear frequency selectivity

The cochlear innervation of guinea pigs was sectioned midway between the midline and the external side of the cochlear nucleus, in a rostrocaudal direction at the level of the floor of the fourth ventricle, to study the effects of medial efferent pathways on cochlear frequency selectivity estimated with tuning curves of single auditory nerve fibers. Single-unit tuning curves were affected by this type of efferent sectioning. Thus, the ipsi-lateral efferent system seems to be involved, through a tonic action, in the mechanisms responsible for high frequency cochlea selectivity.     

Efferent tracts and cochlear frequency selectivity

The cochlear innervation of guinea pigs was sectioned medially in a rostrocaudal direction at the level of the floor of the fourth ventricle, to study the effects of efferent pathways on cochlear microphonic (CM) suppression, the compound action potential (CAP) masking phenomenon, the input-output CAP function, and cochlear frequency selectivity estimated with tuning curves of single auditory nerve fibers. Sectioning reduced CM suppression without having any effect on absolute CM amplitude; it also reduced CAP masking. The input-output CAP function was not changed at intensities below 75 dB, and the single-unit tuning curves recorded before and after nerve sectioning were unaffected. Thus, the crossed efferent tracts (i.e., mainly the medial system) seems to be involved in the masking function itself, rather than one of the mechanisms responsible for high frequency cochlear selectivity.     

Histochemical evidence that cochlear efferents are carried with the inferior vestibular nerve in guinea pigs.

Histochemical methods were employed to determine the course of the olivocochlear bundle (OCB) within the vestibular nerve of guinea pigs. Following transection of the inferior vestibular nerve, cholinesterase staining in the cochlea was greatly reduced. Transection of the superior vestibular nerve, however, yielded no detectable change in staining. It is concluded that the cochlear efferent innervation in guinea pigs is carried in the inferior vestibular nerve, at the point of entry into the medial bulla.     

豚鼠耳蜗损伤对耳蜗核神经元细胞面积的影响

为了解耳蜗损伤对中枢听觉系统形态和功能的改变及在改变过程中的意义，采用计算机图像处理技术观察５只新生和１３只成年豚鼠损伤耳蜗后不同时间腹侧耳蜗核神经元细胞面积的改变。     

豚鼠外周血单个核细胞与耳蜗组织中糖皮质激素体含量的相关性分析

目的通过分析豚鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与耳蜗组织中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白含量变化,探讨PBMC与耳蜗组织中GR含量的相关性。方法将32只健康白色豚鼠随机分为地塞米松组和对照组,地塞米松组予地塞米松(5mg/ml,10mg/kg/day)腹腔连续注射7天,对照组予等体积的生理盐水腹腔连续注射7天。给药结束后次日取豚鼠PBMC及双侧耳蜗组织,通过实时荧光定量PCR检测豚鼠PBMC和左耳耳蜗组织中GR mRNA表达水平,通过Western blot结果半定量分析豚鼠PBMC和右侧耳蜗组织中GR蛋白的含量,并运用统计学软件SPSS16.0进一步分析豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA及GR蛋白表达量的相关性及短期全身使用地塞米松对其表达量的影响。结果 GR mRNA与GR蛋白在豚鼠PBMC与耳蜗组织中均有表达,地塞米松组PBMC及耳蜗组织中GR mRNA与GR蛋白含量较对照组有明显提高,统计学相关性分析结果提示地塞米松组及对照组的PBMC与耳蜗组织的GR mRNA、GR蛋白表达量存在正相关,结果有统计学意义。结论豚鼠短期全身使用地塞米松可以使PBMC与耳蜗组织中的GR mRNA、GR蛋白含量均同步上调,豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA、GR蛋白的含量变化具有正相关性。PBMC中GR含量可间接反映耳蜗组织的GR表达水平。     

Pathogenesis of widened AP-SP complex in cases of cerebellopontine angle tumors.

Pathogenesis of widened AP-SP complexes often noted in electrocochleograms (ECochGs) in cases of cerebellopontine angle tumors remains unclear. As acoustic neuromas usually originate from the vestibular nerve, some changes in this nerve might be involved in producing the broadened waveform. Effects of lidocaine on the AP-SP complex were investigated in guinea pigs by injecting this compound into the root exit zone of the vestibular nerve, where the cochlear efferent fibers run together. The AP-SP complex in response to clicks and tone bursts was recorded at the bony wall of the scala vestibuli in the basal turn of the cochlea. Inactivation of the efferent cochlear fibers resulted in a marked widening of the waveform, independent of the interstimulus intervals (ISIs). This broad wave was composed of a DC shift which was quite similar to the envelope curve of the acoustic stimuli. Although the effect of activity of the efferent cochlear fibers on negative summating potential (SP) has not been reported in detail, the authors concluded that the broad waveform observed in ECochGs in cases with cerebellopontine angle tumors was caused by enhanced negative SP due to inactivation of efferent cochlear fibers.