日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备抗ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。用ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

日本血吸虫31／32kD循环免疫复合物的检测及其在疾病诊断？…

检测血吸虫循环免疫复合物（ＣＴＣ）有助于提高疾病的检出率，利用抗血吸虫单克隆抗体Ｈ２２６和碱性磷酸酶标记的羊抗人ＩｇＧ（Ｆｅ）作双抗体夹心ＥＬＩＳＡ，检测日本血吸虫患者血清中ＣＩＣ，其阳性检了率为９２．２％，其中，ＥＰＧ（１００的病人检出率为９０．０％，ＥＰＧ）１００的病人阳性检出率为９５．５％，由于羊抗人ＩｇＧＦｃ段能与ＣＩＣ中人ＩｇＧ的Ｆｃ段特异性结合，因此不仅省去常规分离ＣＩＣ的步骤，而且有     

血吸虫循环免疫复合物解离后抗原及抗体的免疫反应性研究

将血吸虫循环免疫复合物（ＣＩＣ）用新方法解离后，特异性测定其上的抗原（Ａｇ）及抗体（Ａｂ），并以可溶性血吸虫卵抗原（ＳＥＡ）、多克隆、单克隆抗体（Ｐｃａｂ、ＭｂＡｂ）用间接法对比测定感染者血清中循环抗原（ＣＡｇ）及循环抗体（ＣＡｂ）通过１０２例日本血吸虫病人及４５名健康人ＣＩＣ解离后和血清的特异性对比测定结果表明，ＣＩＣ解离后的Ａｇ及Ａｂ水平（ＯＤ均值）测定，显示满意的特异性和敏感性，与用抗ＳＥＡ－和抗ＣＣＡ－ＭｃＡｂ测定ＣＡｇ水平（ＯＤ均值）相比较，具有优于或相似的检测效果，采用抗ＳＥＡ－ＰｃＡｂ和ＳＥＡ测定血谱中的ＣＡｇ及ＣＡｂ水平（ＯＤ均值）时，均取得很好效果，且其ＣＡｇ水平均显著地高于用２种ＭｃＡｂ检测ＣＡｇ的水平。上述制剂测定ＣＩＣ解离后及血清中的Ａｇ、Ａｂ及ＣＡｇ、ＣＡｂ，可起着互补诊断的效果。本项研究结果可为今后选用适宜的血吸虫病血清学诊断的检测途径，提供重要的参考依据。     

日本本血吸虫患者尿液中32kD循环抗原的免疫生物学特征

目的研究日本血吸虫感染者尿液中特异性的诊断抗原，以尿液为样本诊断日本血吸虫病。方法用IgG的亲和层析柱分离和纯化抗日本血吸虫循环抗原抗体并用生物素标记分离纯化的IgG抗体；Western blot检测日本血吸虫虫卵可溶性抗原和日本血吸虫感染者尿液中存在的日本血吸虫主要的循环抗原分子。结果日本血吸虫患者尿液中存在日本血吸虫的特异性循环抗原，Western blot显示其尿液中主要循环抗原分子与虫卵可溶性32kD抗原分子相同。结论日本血吸虫感染者尿液中的32kD循环抗原分子可能来自日本血吸虫虫卵可溶性抗原，可作为血吸虫感染的诊断。     

抗日本血吸虫循环抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

为检测日本血吸虫宿主循环抗原提供有价值的McAb,用小鼠骨髓瘤细胞SP2/O株与日本血吸虫循环抗原免疫的BALB/C小鼠脾细胞进行融合,融合率90.20%。经用ELISA和IFA检测,总阳性率34.13%。经多次筛选和克隆化后,获得2株分泌McAb的细胞株:G-A12和H-E9。它们均属IgG2a亚类。Western blot结果表明G-A 12所针对的靶抗原为sjCAg31KD,H-E9为SjAW 31 KD。IFA检测发现H-E9主要定位于成虫表膜;G-A12主要定位于成虫肠道。这2株杂交瘤细胞在体外培养下稳定地分泌特异性抗体迄今已达6个月。     

日本血吸虫感染家兔血中循环抗原生理波动性研究

目的观察日本血吸虫。类循环抗原（ＣＡｇｓ）早晚间血中浓度变化情况。方法９只家兔分为感染组和对照组，于感染后的２１ｗｋｄ３早晚间分别果血，分高血清．并用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ—ＦＬＩＳＡ）分别检测三类ＣＡｇｓ．结果三类ＣＡｇｓ水平在一天内无显著性变化。结论ＣＡｇｓ的检测结果在一天之内不受采血时间的影响．     

外周和门脉血中日本血吸虫循环抗原的检测

该研究通过小鼠和家兔门脉血和外周血以及人的脾血和外周血检测循环抗原的比较研究表明，门脉血和脾血的抗原水平显著高于外周血。提示由源抗原经过宿主的肝脏处理和各种免疫应答的作用，使抗原发生变化。因此，决不能靠检测某种单一抗原组分来判断千差万别的感染现象。     

单克隆抗体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原

目的反映日本血吸虫病活动性感染程度,探讨建立定量测定循环抗原的方法。方法筛选和制备单克隆抗体,将其进行优化组合,建立双抗体夹心ELISA,计算标准曲线,测试检测能力,检测样本。结果获6个抗日本血吸虫单克隆抗体,经优化组合试验,选择其中3个抗日本血吸虫虫卵TCA可溶性抗原和成虫TCA可溶性抗原进行搭配,用于检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原效果较理想。检测慢性血吸虫病118例,阳性61例,阳性率51．7％;急性患者30例,全部阳性;正常人187例,5例阳性,特异性97．3％。单盲法检测一批血清,结果也较满意。法论定量检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原,对提示活动性感染的程度和疫苗保护作用的评估具有一定的应用价值。     

旋毛虫肌蚴可溶性抗原与日本血吸虫病患者血清的交叉反应

应用ＥＬＩＢ技术观察旋毛虫肌蚴抗原（ＴｓＭＬＳＡ）与６种寄生虫病人血清的交叉反应，结果表明：ＴｓＭＬＳＡ中３１～１００ＫＤａ，内的蛋白大部分被急性血吸虫颊人血清所识别，而慢性血吸虫病人血清仅识别其中的４４／４５，５１／５３，６２／６４及１００ＫＤａ蛋白，小于６０ＫＤａ者可与丝虫病，钩虫病，蛔虫病和肝吸虫病人血清呈不同程度的交叉反应，以前三者为最明显，４５ＫＤａ蛋白可被部分正常人血清识别，提示，旋毛     

Detection of a circulating SJ 70 antigen in human schistosomiasis japonica using a monoclonal antibody

A double antibody enzyme-linked immunosorbent assay (sandwich ELISA) was used for detection of a circulating antigen from human Schistosoma japonicum infections. This assay involves the use of poly clonal rabbit anti-schistosoma japonicum soluble egg antigen (SEA) antiserum to bind circulating antigen and a monoclonal antibody (MCAb-H4) to identify and quantify this antigen. Sera from 108 S. japonicum infected patients (acute and chronic) were tested. Sera from 93 of 95 (98%) patients with chronic infection were positive for this antigen; sera from 12 of 13 patients (93%) with acute infections were also positive. Antigen was not detectable in control human sera. Sera from 35 chronic schistosomiasis patients were collected between 6 and 12 months after paraziquantel treatment. Circulating antigen was not detectable in the sera from 33 of these patients (94%) and was dramatically reduced in the other two patients.     

KLH与SEA皮试法现场诊断日本血吸虫病效果的比较

应用ＫＬＨ和ＳＥＡ皮试法（ｉｎｔｒａｄｅｒｍｉｎａｌ ｔｅｓｔ，ＩＤＴ）在血吸虫病疫区对加藤法烘检确诊的３２例阳性人群和３１例阴性人群作平行检测。结果显示：ＫＬＨ和ＳＥＡ－ＩＤＴ二法与烘检阳性符合率分别为９０％和１００％，划无显著性（Ｐ〉０．０５）；ＫＬＨ和ＳＥＡ－ＩＤＴ与烘检阴性符合率为７１．９％和２５％，差异有高度显著性（Ｐ〈０．０１），在３１例烘检阴性人群中，两ＩＤＴ检出均为阳性者９例，ＳＥ     

IgM特异性激活补体Clq类循环免疫复合物的检测

目的：建立检测IgM特异性激活Clq类循环免疫复合物（IgG/Clq-TCIC）的捕捉法ELISA。方法：以羊IgM抗人Clq为包被抗体，HRP－羊抗人IgM为检测抗体，采用捕捉法ELISA检测IgM/Clq-TCIC,并通过阻断试验、替代试验、重复性试验进行方法学论证。结果：最佳包被浓度为15μg/ml，标本稀释度为1：75，酶标抗体浓度为1：800。结论：本法敏感度高、特异性强、重复性好，对研究经典途径激活补体类循环免疫复合物具有重要意义。     

健康人群及试验貂血清循环免疫复合物对衰老的影响初探

采用改良的聚乙二醇(PEG)沉淀法对202例健康老年(≥60岁)、中年(40—60岁)、青年(≤22岁)人群及90例老龄(≥18月)、青龄(≤4月)试验貂血清循环免疫复合物(CIC)进行检测,并对其CIC水平和CIC增高率加以比较。从而探讨CIC与机体衰老的影响,结果:老、中年人群CIC水平(0.0534±0.021,0.0508±0.025)和CIC增高率(39.62%,35%)均明显高于青年(0.0316±0.011,3.67%)(P<0.01,P<0.001),以老年为最高,而老、中年之间未见显著性差异(P>0.05,P>0.20);老龄试验貂CIC水平和CIC增高率(0.218±0.139,22.2%)亦均高于青龄(0.106±0.104,4.44%)(P<0.01,P<0.02)。结论:CIC值随年龄增加而升高,但到一定程度即升高缓慢或相对稳定,健康老年人及老龄动物血清CIC明显增高。提示:人体的衰老从40岁以后就已经开始,CIC可能是机体重要的衰老因子之一,如能采取有效的方法体内清除CIC,将为抗衰老提供又一新的途径。     

IgG subclasses in the serum and circulating immune complexes in patients with Kawasaki disease

IgG subclass levels in sera of 17 patients with Kawasaki disease were determined and a significant increase of IgG 1 (P less than 0.001) and IgG 3 (P less than 0.001) was found in the patients compared with 22 age-matched healthy children, while IgG 2 and IgG 4 were normal or slightly decreased. IgG immune complexes were measured by SPA-ELISA combined with PEG precipitations, and 8 out of 17 patients (47.1%) were found to have CIC values above the normal control range (geometric mean +2 SD). IgG subclass composition in CIC was analysed. The subclasses in CIC were predominantly in IgG 1 and IgG 3. Because the antibody responses to different antigens have IgG subclass restriction. These results suggest that the change of serum and CIC IgG subclasses in Kawasaki disease may be related to the pathogenesis of the disease.