软肝煎药物血清对肝星状细胞免疫保护作用的研究

目的:探讨软肝煎药物血清对肝星状细胞(HSC)的免疫保护作用.方法:先采用不同两种种族的动物血清培养人肝星状细胞株(Lx-1),研究不同种族的血清对同一细胞的免疫损伤作用,然后再采用对Lx-1细胞株损伤小的血清组与软肝煎药物血清组进行比较来研究对肝星状细胞的免疫保护作用.结果:在测定LDH活性中,小牛血清组与大鼠血清组比较,各组浓度均有非常显著性差异(P＜0.01).药物血清组与大鼠血清组比较,各组浓度均有非常显著性差异(P＜0.01).药物血清组5%与10%比较无显著性差异(P＞0.05),浓度5%、10%两组与浓度20%比较有非常显著性差异(P＜0.01).结论:软肝煎药物血清对肝星状细胞有很好的免疫保护作用;培养细胞最好使用与培养细胞同一种族的血清.     

清肝降浊颗粒治疗非酒精性脂肪性肝病大鼠 脂质沉积的作用机制研究

目的探讨清肝降浊颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏的保护作用及其机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、清肝降浊颗粒高、中和低剂量组(800、400和200 mg/kg),用高脂饲料喂养12周制备非酒精性脂肪性肝病模型,造模同时灌胃给药,每日1次。给药周期结束,检测血清TNF-α、IL-6、ADPN、Lep质量浓度及肝组织中FFA和TG摩尔浓度。结果造模成功后,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、Lep、肝组织中FFA和TG质量浓度明显升高;血清脂联素质量浓度明显降低,与正常对照组比较,均为P <0.01。在给予清肝降浊颗粒颗粒药物干预后,与模型组比较,清肝降浊颗粒高、中、低3个剂量组均可显著降低肝组织匀浆中TG摩尔浓度及升高血清中脂联素质量浓度(P <0.01或P <0.05);清肝降浊颗粒高、中2个剂量组均可显著降低肝组织匀浆中FFA摩尔浓度及血清中TNF-α、Lep质量浓度(P <0.01或P <0.05);清肝降浊颗粒高剂量组可显著降低血清中IL-6质量浓度(P <0.05)。结论清肝降浊颗粒改善非酒精性脂肪性肝病的作用机制,与降低血清TNF-α、IL-6、Lep质量浓度、肝组织FFA摩尔浓度,升高血清脂联素质量浓度相关。     

灵芪蠲肝胶囊对大鼠肝星状细胞增殖及TIMP-1表达的影响

目的 观察不同浓度的灵芪蠲肝胶囊含药血清对血小板衍化生长因子(PDGF)诱导的大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)增殖和组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白量表达的影响,探讨其可能的抗肝纤维化机制。方法 灵芪蠲肝胶囊高、中、低剂量组按含药血清浓度200 mL·L-1分别作用于10 ng·mL-1 PDGF刺激的HSC-T6,24 h、48 h、72 h后,用CCK-8法测定各组HSC-T6的吸光度值,透射电镜观察各组细胞超微结构的变化,免疫印迹法检测24 h时各组细胞中TIMP-1蛋白量的表达。结果 灵芪蠲肝胶囊含药血清可明显抑制HSC-T6的增殖,各组药物在各时间点对HSC-T6的抑制作用随血清中药物浓度增加呈逐渐增强趋势;同时各药物血清组HSC-T6中TIMP-1蛋白表达量均明显减少(均P < 0.01)。结论 (1)灵芪蠲肝胶囊可以抑制PDGF诱导的HSC-T6增殖,且作用具有剂量依赖性;(2)灵芪蠲肝胶囊能降低TIMP-1在活化的HSC-T6中的表达,从而减少其对基质金属蛋白酶(MMPs)的抑制,实现抗肝纤维化作用。     

枳术宽中胶囊治疗功能性消化不良临床分析

目的观察枳术宽中胶囊治疗功能性消化不良(FD)的临床疗效。方法将83例FD患者根据不同症状表现分为餐后不适综合征(PDS)、上腹痛综合征(EPS)2个亚型组,根据中医证候进行辨证分为肝胃不和、脾胃气虚、脾胃湿热3个证候组,全部83例患者均给予枳术宽中胶囊治疗。疗程4周,比较治疗前后临床疗效及血清胃动素(MTL)水平变化情况。结果 PDS组有效率87.5%,高于EPS组(71.4%,P0.05);治疗后PDS组及EPS组血清MTL浓度均升高(P0.05),PDS组血清MTL浓度高于EPS组(P0.05)。肝胃不和组有效率94.3%,高于脾胃气虚组(62.5%,P0.05);治疗后肝胃不和组及脾胃气虚组血清MTL浓度均升高(P0.05),肝胃不和组血清MTL浓度高于脾胃气虚组(P0.05)。治疗期间发生不良反应13例次,未影响治疗。结论枳术宽中胶囊对FD的近期治疗有良好疗效,尤适合于PDS患者及证属肝胃不和型患者。     

水飞蓟宾单用及合用肝龙含药血清对HSC的影响及机制研究

目的:研究水飞蓟宾单用及合用肝龙含药血清对大鼠肝星状细胞增殖活性的影响及机制。方法:通过血清药理学方法制备含药血清,采用MTT法检测水飞蓟宾单用及合用肝龙含药血清对肝星状细胞增殖的影响,并用激光共聚焦测定其细胞内钙离子浓度的变化。结果:与单用水飞蓟宾相比,水飞蓟宾合用肝龙含药血清作用肝星状细胞24、48、72 h能够显著抑制肝星状细胞的增殖(P0.01);30%水飞蓟宾联合肝龙(7.5%、15%、30%)含药血清在一定程度上可使细胞内游离Ca~(2+)浓度降低。结论:肝龙能增强水飞蓟宾在体外对肝星状细胞的抑制作用,且其作用机制可能与降低细胞内Ca~(2+)浓度有关。     

加味四逆散对肝星状细胞增殖的实验研究

目的:观察加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖的影响,探讨加味四逆散抗肝纤维化的作用机制。方法:以不同浓度的加味四逆散含药血清作用于体外培养的HSC-T6细胞,分别作用12h、24h、48h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组HSC-T6的增殖。结果:加味四逆散含药血清作用于大鼠HSC-T6后,细胞增殖受到明显抑制,呈时间和浓度依赖性,各浓度组与空白对照组比较差异有极显著性(P<0.01),加味四逆散低、中、高浓度组与鳖甲软肝片组比较,除低、中浓度组作用12h、24h时无差异外(P>0.05),其余各浓度组均优于鳖甲软肝片组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加味四逆散含药血清可明显抑制体外培养HSC-T6的增殖。     

化肝煎对肝细胞和活化肝星状细胞功能的影响

目的探讨化肝煎含药血清对肝细胞和活化肝星状细胞HSC-T6的影响及机制。方法体外构建肝细胞及CCl_4肝细胞损伤模型,加入不同体积浓度的化肝煎含药血清,通过MTS法检测肝细胞存活率;采用MTS法检测化肝煎干预肝星状细胞HSC-T6后的细胞存活率,同时采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测eIF3(eukaryotic initiation factor 3)家族相关因子的表达。结果在1～8%体积浓度范围内化肝煎含药血清对肝细胞无细胞毒性,并可改善CCl_4所致肝细胞存活率下降;当化肝煎含药血清体积浓度为10%、30%、50%和60%时显著抑制活化肝星状细胞的增殖,此外,化肝煎含药血清对eIF3a mRNA及蛋白表达均显著抑制。结论化肝煎含药血清能保护肝细胞,并抑制活化肝星状细胞HSC-T6的增殖,可能跟抑制eIF3a而抗肝纤维化有关。     

抗纤软肝颗粒含药血清对肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化的影响

目的 研究抗纤软肝颗粒含药血清(KXRG)对N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导肝卵圆细胞系WB-F344上皮间质转化的影响。方法 采用MNNG干预WB-F344细胞系制备上皮间质转化(EMT)细胞模型,实验组用高、中、低不同浓度抗纤软肝颗粒含药血清(KXRG)刺激细胞,正常组、模型组加等量大鼠空白血清;采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,Western blot法检测E-cadherin,N-cadherin,Vimentin蛋白的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清中甲胎蛋白(AFP)含量。结果 与正常组比较,模型组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显升高(P <0.05);而E-cadherin蛋白表达水平降低(P <0.05)。与模型组相比,含药血清各组细胞OD值、细胞上清中AFP浓度、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均显著下降(P <0.05),且含药血清浓度越高,上述指标下降越明显;而E-cadherin蛋白表达水平明显上升(P <0.05),且含药血清浓...     

葛根枳椇子栀子胶囊解酒护肝功效研究

目的:观察葛根枳椇子栀子胶囊对血液乙醇浓度,肝组织酒精代谢关键酶、抗氧化酶活性及血清中肝毒性生物标志物含量的影响,探讨其解酒护肝作用机制。方法:采用顶空-气相色谱法(HS-GC)检测大鼠酒后不同时间血液乙醇浓度;检测急性酒精中毒小鼠肝组织中乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量;检测急性酒精性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。结果:葛根枳椇子栀子胶囊低剂量组大鼠酒后30 min、中剂量组酒后60 min、高剂量组酒后30、60、90、120、180 min血液乙醇浓度均显著低于模型组(P0.01或P0.05)。葛根枳椇子栀子胶囊中、高剂量组小鼠肝组织ADH活性显著高于模型组(P0.05),高剂量组肝组织ALDH和SOD活性显著高于模型组(P0.05或P0.01),而MDA含量显著低于模型组(P0.05)。葛根枳椇子栀子胶囊中、高剂量组小鼠血清ALT含量均低于模型组,但差异无统计学意义(P0.05),而血清AST含量显著低于模型组(P0.05)。结论:葛根枳椇子栀子胶囊具有明显的解酒护肝作用,这可能与其增强肝乙醇代谢关键酶及抗氧化酶活性,加速乙醇在体内代谢,减少自由基及脂质过氧化物的产生,保护肝细胞膜完整性相关。     

加味四逆散对HSC-T6增殖影响的实验研究

目的:观察加味四逆散药物血清对瘦素刺激肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的机制。方法:实验动物灌胃加味四逆散煎剂7d,制备各药物含药血清,并将药物血清用培养基配制成5%、10%、20%、40%四个浓度;培养肝星状细胞,取对数生长期细胞,使用噻唑兰(MTT)比色法检测药物血清对100ng/ml的瘦素刺激HSC-T6增殖的影响。结果:结果显示加味四逆散和秋水仙碱药物血清均有抑制肝星状细胞增殖的作用(P<0.05),且在5%～40%的血清浓度范内,两组对抑制HSC-T6细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性的关系,但在10%～40%的血清浓度范围内对HSC-T6细胞增殖抑制率加味四逆散组高于秋水仙碱组(P<0.05)。结论:加味四逆散药物血清具有抑制瘦素刺激HSC-T6增殖的作用。     

虎杖对大鼠酒精性脂肪肝的作用及机制

目的研究虎杖对大鼠酒精性脂肪肝的作用及机制。方法用白酒灌胃建立大鼠酒精性脂肪肝模型,并给予虎杖(2、10、50 g/kg)治疗。干预9周后,测定血清γ-GT、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)含有量,以及肝组织中GSH、肿瘤坏死因子(TNF-α)与层黏连蛋白(LN)水平。结果虎杖治疗组与模型组相比,大鼠血清γ-GT显著下降,PPARγ浓度显著升高;肝组织中GSH含有量升高,TNF-α、LN含有量显著降低。结论虎杖能降低大鼠血清γ-GT含有量,提高PPARγ浓度和肝组织GSH含有量,降低TNF-α与LN含有量,对白酒诱导的酒精性脂肪肝具有保护作用。     

化浊解毒含药血清对大鼠肝星状细胞增殖及细胞因子的影响

目的:观察化浊解毒含药血清对体外培养活化的大鼠肝星状细胞增殖及活性的影响,探讨化浊解毒方治疗肝纤维化的作用机制.方法:不同剂量(分别含有生药30,60,120 g·L-1)的化浊解毒方,按0.01 mL·g-1体重SD大鼠灌胃给药,以制备含药血清;常规培养活化的肝星状细胞( HSC-T6),用不同浓度的含药血清进行干预,用MTT,ELISA,RT-PCR法分别检测肝星状细胞增殖、细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量以及细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA基因的表达.结果:与正常血清组比较,化浊解毒方含药血清各浓度组均呈现出抑制HSC增殖的作用(P＜0.05),且呈剂量和时间依赖性.与正常血清组比较,化浊解毒方含药血清各个浓度组在作用48 h后,细胞上清液中的Ⅰ型胶原的含量均降低(P＜0.05),均能下调细胞中TGF-β1 mRNA的表达(P＜0.05).结论:化浊解毒方之所以能有效的治疗肝纤维化可能与化浊解毒方抑制肝星状细胞的增殖和活性有关.     

姜黄素对乙醇毒性的防护作用

姜黄素(Curcumin)是从姜黄(Curcuma longa)根茎中提取的一种黄色素,也是姜黄的主要成分,常用作食物着色剂及调味品。本次研究了姜黄素对由乙醇引起的肝毒性反应的防护作用。主要观察指标为血清中的AST、ALP的活性,同时测定了血清中总胆固醇、磷脂、游离脂肪酸浓度以及硫代巴比士酸反应底物(TBARS)的浓度。     

复方鳖甲软肝片对乙型肝炎肝硬化患者血清脂联素的影响

目的探讨乙型肝炎肝硬化经复方鳖甲软肝片治疗后血清脂联素浓度的变化。方法选择39例乙型肝炎肝硬化患者,给予复方鳖甲软肝片治疗,用ELISA检测治疗前后患者血清脂联素的浓度。结果治疗后患者血清脂联素的浓度显著降低,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05)。结论复方鳖甲软肝片在抗肝纤维化方面有一定作用,脂联素可作为临床肝纤维化进展的检测指标。     

降肝脂对脂肪肝模型大鼠血液指标的影响

目的观察降肝脂对高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血液指标的影响。方法采用高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型,实验分为正常组、模型组和降肝脂高、中、低剂量组,以东宝肝泰为阳性组,以高、中、低剂量降肝脂和东宝肝泰进行干预,12周末取血测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的血浆浓度。结果与模型组相比,用药各组大鼠血清中TC、TG、LDL-C和LDL-C含量均明显降低(P0.05或P0.01)。结论降肝脂可明显降低高脂饲料所致脂肪肝模型大鼠血脂含量。     

加味四逆散含药血清对HSC凋亡影响的实验研究

目的:观察加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)凋亡的影响。方法:以不同浓度的加味四逆散含药血清作用于体外培养的HSC-T6细胞,分别作用12h、24h、48h后,采用流式细胞仪和TUNEL法检测加味四逆散对HSC-T6凋亡的影响。结果:(1)流式细胞仪分析结果显示:加味四逆散各浓度组、复方鳖甲软肝片组与HSC作用12h、24h、48h后,细胞凋亡与空白对照组比较均有差异(P<0.05);与鳖甲软肝片组比较,除加味四逆散低浓度组作用12h时细胞凋亡无差异外(P>0.05),其余各浓度组细胞凋亡均优于鳖甲软肝片组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)TUNEL检测表明:加味四逆散各浓度药物血清作用48h后,细胞凋亡率与空白对照组及鳖甲软肝片组药物血清比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:加味四逆散含药血清可显著促进HSC-T6凋亡,且以高剂量和作用48h最为明显。     

山芝麻对肝纤维化大鼠血清学指标的影响

目的 探讨山芝麻水提物(Helicteres angustifolia)对肝纤维化大鼠血清学指标的影响.方法 采用四氯化碳(CCl4)灌胃诱导大鼠肝纤维化模型,6周末检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的含量.结果 山芝麻各剂量组均可明显提高SOD活性,显著降低肝纤维化大鼠血清MDA、HyP、HA和TIMP-1含量(P<0.01或P<0.01),且随着药物浓度的增加,其作用逐渐增强,呈现量效反应关系.结论 山芝麻具有抗大鼠肝纤维化的作用.     

黄连解毒汤及其组成生药对胆固醇酯合成的抑制作用

血清胆固醇浓度的升高,将增加患者冠状动脉疾病的危险。近年来,中药用作降脂的药物受到广泛重视。曾报道黄连解毒汤(OGT)能降低血清胆固醇的浓度,降低大鼠肝中极低密度脂蛋白的浓度。已知肝脏脂酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)的活性在保持胆固醇的稳态方面起主导作用,是决定血清胆固醇浓度高低的因素之一。本实验用HepG2细胞探讨了OGT对脂质代谢的直接药理作用,尤其是胆固醇代谢与ACAT活性的关系。     

鸡骨草胶囊对大鼠肝纤维化的保护作用研究

目的:探讨鸡骨草胶囊对肝纤维化大鼠的影响,为临床适应症提供实验依据。方法:采用40%CCl₄(v/v)皮下注射法建立大鼠肝纤维化模型,用不同浓度的鸡骨草胶囊混悬液灌胃干预。结果:鸡骨草胶囊可改善造模大鼠的肝功能,使肝纤维化大鼠降低的血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)值升高;可改善肝纤维化大鼠的血清抗氧化指标,血清中超氧化物岐化酶(SOD)含量增加,丙二醛(MDA)含量降低;并可减轻肝脏组织病理损伤程度,使肝纤维化大鼠病理学评分值降低。结论:鸡骨草胶囊对大鼠实验性肝纤维化具有明显保护作用,能明显减轻肝纤维化程度。     

高脂血症的病因病机及其证治

高脂血症是指血清中胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)和 (或 )低密度脂蛋白 (LDL)过高和 (或 )血清高密度脂蛋白 (HDL)过低的一种全身脂代谢异常。在正常情况下 ,当进食的食物中胆固醇含量增高、肠道吸收增加时 ,血脂浓度即增高 ,肝内合成则受抑制 ;反之 ,能量摄入减少时 ,肝内合成加速 ,故血脂能维持平衡。当肝脏代谢异常或患肠管疾病时 ,人体便不能正常地调节脂类代谢 ,此时如仍进食高脂食物 ,必将导致血脂浓度持续增高 ,脂类代谢异常。